猪GADD45a基因的新用途及高表达细胞系的构建和应用

摘要

本发明公开了猪GADD45a基因的新用途及高表达细胞系的构建和应用。根据猪GADD45a基因全长序列和载体pLEX‑MCS，设计并合成含有酶切位点的GADD45a全长的扩增引物；从小猪脂肪组织中扩增得到GADD45a基因全长序列，回收并酶切，与酶切后的pLEX‑MCS连接，构建pLEX‑MCS‑GADD45a慢病毒质粒，单克隆测序鉴定并验证后，采用脂质体转染法将pLEX‑MCS‑GADD45a慢病毒质粒和pSPAX.2及pMD2.G共转染到293T细胞中，获得重组慢病毒；采用步骤2）获得的重组慢病毒转染猪IPEC‑J2细胞，获得高表达猪GADD45a基因的IPEC‑J2细胞系。猪GADD45a基因的新用途，用于调控营养吸收代谢。本发明开拓了猪GADD45a基因的新功能及其在肠道上皮细胞中研究的新方法。