L-色氨酸产量提高的重组大肠杆菌及其构建方法与应用

摘要

本发明公开了一种L‑色氨酸产量提高的重组大肠杆菌及其构建方法与应用。本发明是以大肠杆菌CICC 10303作为出发菌株，采用易错PCR和CRISPR‑Cas9基因编辑技术，敲除关键基因trpR解除了色氨酸合成和转运关键酶受到的反馈阻遏调控，敲除预苯脱氢酶编码基因pheA后解除苯丙氨酸合成途径的竞争后，利用基因随机突变试剂盒随机突变L‑色氨酸合成相关基因aroK的启动子序列ParoK，构建得到5株重组菌ECTR1、ECTR2、ECTR3‑1～ECTR3‑3，其中ECTR3‑2使得L‑色氨酸的发酵罐产量得到了显著提高，达到了40g/l，为进一步代谢工程改造大肠杆菌生产L‑色氨酸奠定了基础。