一种DNA上5-羟甲基尿嘧啶的特异性标记方法

摘要

本发明公开了一种DNA上5‑羟甲基尿嘧啶的特异性标记方法，属于分子生物学技术领域。该特异性标记方法利用从铜绿假单胞菌噬菌体M6中分离出的5‑hmU激酶实现γ‑硫代磷酸酯从5‑O‑硫代三磷酸腺苷转移到5‑hmU，产生5‑硫代磷酸甲基尿嘧啶；然后，通过液相色谱‑串联质谱法对产生的5‑硫代磷酸甲基尿嘧啶进行表征，并利用交联化学标记巯基对DNA上的5‑羟甲基尿嘧啶实现特异性标记。本发明的方法有效克服了检测样品需求量大、化学反应条件苛刻、反应效率低等缺点。