基于单链RNA肽连接酶的JAK2基因特定突变检测试剂盒及方法

摘要

本发明提供了一种基于单链RNA肽连接酶的JAK2基因g.[146452_146455delATGA]突变检测试剂盒及方法，是在指数扩增前就直接先对目标突变基因mRNA片段进行捕获富集，然后再对目标基因突变片段进行特异性扩增和检测的。JAK2基因g.[146452_146455delATGA]检测试剂盒主要包括：sRPlaseI连接酶，sRPlaseI连接酶缓冲液，RNase H酶，磁载多肽Ps，短DNA片段P1和P2，引物Pn和Pm，其中sRPlaseI连接酶其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示；检测方法主要包括杂交和RNase H酶消化、sRPlaseI酶连接和磁珠分离、特异性扩增这3部分。本发明提供的检测试剂盒和检测方法，具有特异性强和准确高效、简便经济的特点，可以有效检测出样本中含量低至1%的JAK2基因g.[146452_146455delATGA]突变，可以应用于男性结直肠癌患者肺转移的预测和诊治中。