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一种对目标蛋白的稳定性和亲和力同时进行优化的方法

摘要

本申请提供了一种对目标蛋白的稳定性和亲和力进行优化的方法,所述方法包括如下步骤:(1)构建目标蛋白表达基因;(2)将所述目标蛋白表达基因在CHO‑puro‑TR细胞系中表达;(3)将表达目标蛋白表达基因的CHO‑puro‑TR细胞系在第一温度下培养诱导体细胞高频突变以获得含有目标蛋白突变库的细胞;(4)将步骤(3)获得的含有目标蛋白突变库的细胞在第二温度下培养一段时间;(5)对步骤(4)得到的细胞在目标蛋白的配体存在的条件下,在第三温度下孵育一段时间,所述目标蛋白的配体可以被标记物标记;(6)对步骤(5)培养得到的细胞进行流式分选,筛选含有稳定性和亲和力提高的目标蛋白的细胞。

著录项

  • 公开/公告号CN110791470A

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2020-02-14

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 海珂分子(北京)科技有限责任公司;

    申请/专利号CN201910873232.0

  • 发明设计人 杭海英;罗蕊琪;赵云;

    申请日2019-09-17

  • 分类号C12N5/071(20100101);C12N15/01(20060101);C12N9/78(20060101);

  • 代理机构11716 北京君慧知识产权代理事务所(普通合伙);

  • 代理人王宽

  • 地址 100094 北京市海淀区永澄北路2号院1号楼B座三层3008-83号

  • 入库时间 2023-12-17 05:56:34

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2020-03-10

    实质审查的生效 IPC(主分类):C12N5/071 申请日:20190917

    实质审查的生效

  • 2020-02-14

    公开

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