一种内切葡聚糖酶表达载体及其构建方法与应用

摘要

本发明涉及生物工程领域，具体涉一种内切葡聚糖酶表达载体及其构建方法与应用。本发明提供一种内切葡聚糖酶表达载体，其筛选基因为大肠杆菌glmS基因，原核宿主细胞为glmS基因缺陷型大肠杆菌，转化E.coliΔglmS后生产的蛋白只有大肠杆菌自身蛋白和内切葡聚糖酶蛋白而不含有抗生素等其它外来蛋白，具有相对的安全性；经过发酵和高温灭活处理，既可以消除大肠杆菌的毒性，又可以保证本酶活性的存在；使得来源于热纤梭菌（C.thermocellum ATCC 27405）的CelD基因实现生物安全性高效表达。本发明所提供的载体构建方法简单，安全性好，成本低，具有较高的表达量，可为饲用内切葡聚糖酶的生物发酵提供批量、低价、高质量的原材料。