一种利用金针菇无菌子实体进行超低温冷冻保存及复苏的方法

摘要

本发明公开了一种利用金针菇无菌子实体进行超低温冷冻保存及复苏的方法，其特征在于包括如下步骤：保存材料的获取：以无菌培养获得的子实体作为保存材料；保存材料的前处理：分别用保护液Ⅰ和保护液Ⅱ处理保存材料；降温保存：将保存材料放入冷冻管，采用0.8～1.2℃/min降温速率降温至‑40℃，然后直接投入液氮中速冻，并在液氮中长期保存；解冻复苏：将保存的冷冻盒取出，迅速将冻存管放入35～37℃水浴中快速解冻；然后室温下用保护液Ⅲ洗涤组织块，最后用灭菌的滤纸吸干组织块上的保护液Ⅲ，将组织块接种于复合PDA平板培养基上恒温培养。本发明获得的保存菌种污染率低、成活率高、不退化且有复壮作用。