用于治疗关节疼痛或运动性降低的囊泡制剂

摘要

本发明涉及用于治疗与胶原结构的润滑作用丧失和/或结构完整性丧失和/或肿胀相关的疼痛和/或运动性降低的囊泡制剂。本发明还涉及一种治疗疼痛如关节疼痛或肌腱炎的方法，所述方法包括局部施用根据本发明的囊泡制剂。

说明书

本发明涉及用于治疗与胶原结构的润滑作用丧失和/或结构完整性丧失和/或肿胀相关 的疼痛和/或运动性降低的囊泡制剂。本发明还涉及一种治疗疼痛如关节疼痛或肌腱炎的方 法，所述方法包括局部施用根据本发明的囊泡制剂。

在健康关节(如膝关节)中，骨并不是直接连接的，而是通过在骨的末端周围形成囊 的结缔组织连接在一起。软骨层(其含有胶原作为主要组织，以及蛋白聚糖和弹性蛋白) 覆盖了关节中骨的末端。在所述囊中的骨之间的区域填充有滑液。存在于每个骨末端的软 骨层的表面上覆盖有磷脂层，所述磷脂层锚定在软骨结构中。每个分子的亲水性头部被定 向到滑膜空间中并且其均是高度水合的，这使得关节能够自由运动而不会感到疼痛或不 适。当在软骨表面上的所述磷脂耗竭后，在健康关节中其是通过在滑液中存在的磷脂补充 的。关节软骨以及其他胶原物质如韧带和肌腱，由结构分子基质和细胞物质组成。一个整 体结构分子是蛋白聚糖，蛋白聚糖是高度水合的，由于所述分子高度硫酸化。这些结构亚 单位的吸湿性质使得软骨和其他胶原物质具有较高的拉伸强度。

在受损关节中，例如由骨关节炎、过度使用、超重等导致的受损关节中，会发生炎症。 炎症级联的一个因素是磷脂酶增加。这些酶分解软骨表面上和滑液中的磷脂，导致脂质裂 解，从而使软骨层之间的保护层降解。这种保护的丧失导致软骨以侵蚀和摩擦的方式进一 步进行性受损，从而导致关节疼痛和/或运动性降低。在骨关节炎(OA)中，例如所述蛋 白聚糖分子(保持结构完整性的关键因素)分解并且成为片段。这种降解减少了关节胶原 组分的水容量，进而导致水含量减少，从而失去了结构支撑。通过这种机制，包括关节软 骨、韧带、关节膜等在内的各种关节结构的结构完整性被破坏，引起各种OA症状，包括 疼痛、运动性降低和肿胀。关节降解通过由被破坏的细胞释放的疼痛介质导致疼痛。结构 完整性的丧失导致细胞的进一步破坏和宏观上的关节降解，这两个因素均增加疼痛介质的 释放。

目前，通过镇痛剂和/或抗炎药的方式控制疼痛。或者，可以定期将透明质酸(一种聚 合物)注射进入滑膜囊，以提供增强的暂时性的关节润滑。然而，该过程本身就是痛苦的， 涉及直接使用大号的针头将所述聚合物直接注射进入关节。该过程必需每月或至多三个月 重复一次，并且仅能够由专门的医师或其他医疗专业人员进行。显然，这对于长期控制关 节疼痛并不够理想。

关节疼痛和/或运动性降低还可能是由于一种被称为lubricin的蛋白降解或缺乏导致的 润滑作用丧失和/或结构完整性丧失和/或肿胀导致，lubricin被认为是一种辅助关节自由运 动的蛋白聚糖，其存在于滑液中。当lubricin被耗竭时，根据本发明使用的囊泡制剂能够提 供润滑并因此缓解疼痛。本发明的制剂能够使得关节运动性增加。

腕管综合征可由手腕上的炎症导致，其对周围的神经造成压力。本发明能够提供手腕 周围肌腱和韧带的润滑，从而使炎症消退并减轻神经上的压力，从而减轻疼痛并增加运动 性。

众所周知，特定的脂质体能够提供润滑膜以减轻炎性损伤的影响。(Sivan,S.等，(2010) Longmuir,26(2),1107-1116)。然而，这些都需要关节内注射以便将所述脂质体递送至损伤 部位。这很可能需要每月进行一次该过程。该过程与上文所述的相同，因此对患者既不方 便又痛苦。所述脂质体为了有效还必需是高水合度、高可压缩性和非常稳定的。缺乏这些 特性中的任何一个特性的囊泡将无法提供适宜的润滑作用，从而克服发炎关节中缺乏的天 然润滑作用。

因此，本发明提供了一种用于治疗动物中与胶原结构的润滑作用丧失以及结构完整性 丧失和/或肿胀相关的疼痛和/或运动性降低的囊泡制剂，所述囊泡制剂包含磷脂和表面活 性剂，通过将所述囊泡制剂局部施用于所述胶原结构周围的皮肤进行所述治疗。所述胶原 结构可以是关节中的软骨或其可以是肌腱或韧带。

用于本发明所述用途的囊泡制剂可能在预防或治疗动物中与胶原结构的润滑作用丧 失和/或结构完整性丧失和/或肿胀相关的关节交锁或关节冻结(即关节不能移动)中是有 用的。

本领域技术人员认识到，润滑作用丧失和/或结构完整性丧失和/或肿胀导致的疼痛与 润滑作用丧失和/或结构完整性丧失和/或肿胀导致的运动性降低可以独立治疗。本发明涉 及疼痛、运动性降低或疼痛与运动性降低的组合的治疗。改善疼痛的程度可能会导致运动 性增加，反之亦然。润滑作用丧失和/或结构完整性丧失和/或肿胀可能会导致运动性丧失， 但不怎么疼痛，或反之亦然。因此，本发明对疼痛和/或运动性降低的治疗是有用的。

用于本发明所述用途的囊泡制剂可以治疗由润滑作用丧失导致的、或由结构完整性丧 失导致的、或由润滑作用丧失和结构完整性丧失的组合导致的疼痛和/或运动性降低。换言 之，可以通过使用所述囊泡制剂解决润滑作用丧失或解决结构完整性丧失来治疗疼痛和/ 或运动性降低。

润滑作用丧失和/或结构完整性丧失和/或肿胀可能是由于关节中软骨表面上的磷脂降 解导致的，或者是由于关节的滑液中的磷脂耗竭导致的。

对于肌腱或韧带而言，润滑作用丧失和/或结构完整性丧失和/或肿胀可能是由于肌腱 或韧带与其移动的表面之间的磷脂耗竭导致的。

在本发明中，通过黏液补充治疗法治疗所述疼痛和/或运动性降低。

本发明提供了包含磷脂和表面活性剂的囊泡制剂，所述囊泡制剂用于治疗关节疼痛和 /或运动性降低。所述关节疼痛和/或运动性降低可能与滑液中的磷脂减少和/或与骨关节炎 或类风湿性关节炎相关。所述关节可以是膝、髋、肩、肘、腕、踝、手、手指、脚趾、足 或其他关节点，例如在椎骨和椎间盘之间的关节点。

本发明还提供了包含磷脂和表面活性剂的囊泡制剂，所述囊泡制剂用于治疗肌腱炎或 治疗腕管综合征。

被治疗的所述动物可以是人、宠物或农业动物。有证据表明在猫和犬中的关节炎可以 根据本发明得到成功的治疗。

当被治疗的所述动物是人时，本发明对年龄为45至85岁、50至80岁、55至75岁或 者60至65岁的那些患者可能是有用的。所述人类患者可以是男性或女性。

在第二个方面，本发明提供了一种治疗与胶原结构的润滑作用丧失和/或结构完整性丧 失和/或肿胀相关的疼痛和/或运动性降低的方法，所述方法包括向所述胶原结构周围的皮 肤局部施用含有磷脂和表面活性剂的囊泡制剂。

本发明还涉及一种治疗骨关节炎、腕管综合征或肌腱炎的方法，所述方法包括向所述 胶原结构周围的皮肤局部施用含有磷脂和表面活性剂的囊泡制剂。

所述第一方面的所有特征均适用于本发明的第二和第三方面，除了在细节上需要做必 要的修正以外。

US专利号6,165,500中描述了一种试剂的应用制备方法，所提供的试剂具有膜样结构， 所述结构由一层或多层两性分子，或一种两性载体物质组成，其特别用于将试剂转运至天 然屏障或通过该天然屏障，例如皮肤和类似材料。这些传递体^TM制剂由一种或多种成分组 成，最常见为基本物质、一种或多种边缘活性物质和试剂的混合物。

US专利申请公开号US 2004/0071767中描述了基于复合物的非甾体抗炎药物 (NSAID)与悬浮于可药用介质中的至少三种两亲成分的复合聚集。

US专利申请公开号US 2004/0105881中描述了展开的表面聚集物可悬浮于适宜的液体 介质中且包含至少三种两性物(两性成分)，其能够提高活性物质转运穿过半渗透屏障， 如皮肤，特别是对于使用该聚集物通过屏障渗透方法在体内进行非侵袭性药物施用。 WO2010/140061描述了使用“空”囊泡制剂治疗深部组织疼痛的用途。WO 2011/022707 描述了使用相同的“空”囊泡治疗与脂肪酸缺乏相关的病症和尤其是与炎症相关的病症。

这些文件均没有公开或教导囊泡制剂在治疗由胶原结构的润滑作用丧失和/或结构完 整性丧失和/或肿胀导致的疼痛和/或运动性降低中的用途。

本申请该章节对参考文献的引用不表示承认其为本申请的现有技术。上文所提及的出 版物的全部内容在此参考并入。

本发明涉及用于治疗与胶原结构的润滑作用丧失和/或结构完整性丧失和/或肿胀相关 的疼痛和/或运动性降低的囊泡制剂，所述囊泡制剂包含磷脂和表面活性剂。 WO2011/022707和WO2010/140061中对囊泡制剂进行了描述并且其贯穿于本申请中。所 述制剂可以是乳膏剂、乳液剂、软膏剂、凝胶剂、溶液剂、喷雾剂、涂剂或成膜溶液。

所述囊泡制剂不需要含有任意已知的药物活性剂。所述制剂可以不含有任何已知的公 认的预防或治疗疼痛、运动性降低或炎症的药物活性剂。

本发明还提供了一种治疗由胶原结构的润滑作用丧失和/或结构完整性丧失和/或肿胀 导致的疼痛和/或运动性降低的方法，所述方法包括向需要治疗的患者胶原结构周围的皮肤 局部施用根据本发明的制剂。

本发明包含囊泡制剂，所述囊泡制剂含有一种或多种磷脂和一种或多种有效地用于递 送脂肪酸和/或磷脂的表面活性剂，所述囊泡制剂用于治疗由胶原结构的润滑作用丧失和/ 或结构完整性丧失和/或肿胀导致的疼痛和/或运动性降低。这些囊泡制剂适于局部施用。

本发明的制剂优选地被制成不含任何药物活性剂，即任何非脂质非表面活性剂的药物 活性剂。但是，所述囊泡制剂的结构壁或腔中可能包括活性剂。这些药剂可以包括镇痛剂、 抗炎药、类固醇或治疗性蛋白。

本申请中将药物活性剂定义为具有药理学、代谢或免疫学活性的药剂。

尽管缺乏公认的药物活性剂，但是所述囊泡具有治疗作用，也就是说可以治疗与胶原 结构的润滑作用丧失和/或结构完整性丧失和/或肿胀相关的疼痛和/或运动性降低。不受任 何理论的束缚，申请人相信是所述囊泡成分本身具有这种作用。

在本发明中使用的所述囊泡制剂可以基本上由一种或多种磷脂和一种或多种表面活 性剂和可药用的载体组成。根据本发明使用的所述囊泡制剂可以任选地含有一种或多种下 述成分：助溶剂、螯合剂、缓冲剂、抗氧剂、防腐剂、杀菌剂、软化剂、保湿剂、润滑剂 和增稠剂。

本发明的所述囊泡制剂能够(不希望受理论的束缚)通过多层囊泡、双层囊泡、胶束 或由表面活性剂和脂质(“囊泡”)如大豆磷脂酰胆碱组成的聚集体的独特性质实现其功 能。所述囊泡的独特性来源于在所述制剂中包含特定量的表面活性剂，其改善所述磷脂膜 达到这样的程度，即所得到的囊泡处于持久的脂质结晶状态中，并且由于所述表面活性剂 也赋予了膜稳定性，因此所述囊泡是超水合的、可变形的和稳定的(刚性降低而不会破裂)。 所述表面活性剂可以是非离子的。

所述囊泡制剂形成混悬于适于局部施用的水性缓冲液中的囊泡。所述囊泡是高亲水性 的，并且这种性质与其超可变形性一并是其能够转运通过皮肤并进入组织以润滑胶原结构 的关键。当将本发明的制剂施用于皮肤并使其干燥时，所述囊泡的再水合驱动力结合其可 变形性使得所述囊泡运动至在皮肤渗透性屏障上及其下方具有更高水含量的区域。这驱动 其运动通过皮肤的孔和细胞间隙。脂质与表面活性剂的特定比例推动了囊泡的透皮递送。

一旦其通过皮肤，本发明的所述囊泡(有时称为“变形体”)最终以完整囊泡的形式 存在。由于囊泡具有相对较大的尺寸，它的有效清除不通过皮肤血液微脉管系统(毛细血 管)发生，而是据推测其被间隙液转运至皮肤施用位点以下的其他和/或更深的组织中。使 用标记有标记物分子(特比萘芬)的本发明的囊泡进行的多项临床研究显示，所述囊泡不 进入脉管系统，因为在局部施用后，在局部观察到高浓度的所述标记物分子，其具有最小 限度的系统吸收(处于或低于检测限)。由于所述囊泡具有较高的可变形的性质，因而其 能够由皮肤穿透组织进入滑膜囊或其他含有胶原的结构。这里，所述囊泡在胶原结构表面 变形为薄片状结构，以将磷脂的高亲水性和水合的头基团呈现在胶原结构的表面上，所述 胶原结构位于关节的软骨或肌腱或韧带形式中，在骨的表面上或骨中(当在腕管综合征中 时)。

再次，不希望被理论所束缚，所述润滑作用丧失和/或结构完整性丧失可以通过替代丢 失的膜组分解决。本发明的所述囊泡可能能够通过提供结构支持以阻止润滑、结构或保护 性关节成分或肌腱/韧带相关因子的进一步丧失来修复胶原结构周围的滑膜或保护性膜(如 分别为软骨或肌腱/韧带)。

在本发明中使用的所述囊泡制剂的囊泡是高度水合的并且能够渗穿透进入关节的多 孔性胶原结构。一旦充满细胞外基质，所述囊泡能够提供水合作用并支持所述胶原物质以 修复由例如OA引起的关节完整性丧失。

软骨和其他胶原关节结构结构完整性的修复可以减轻症状如疼痛，而修复边界结构如 滑膜的完整性可以减少渗出和随后产生的关节肿胀。

而且，本发明的所述囊泡可以穿透胶原基质(例如长骨的软骨帽)以便为这种丧失了 其结构完整性的胶原提供纳米支架或纳米支持。

在一个实施方式中，本发明提供了一种药物包装或试剂盒，所述药物包装或试剂盒含 有一种或多种盛有本发明制剂的容器，以及对需要的患者或对象施用所述制剂用于治疗与 润滑作用缺乏相关的疼痛和/或运动性降低的说明书。在各种实施方式中，所述容器包含的 制剂被制成悬浮剂、乳剂、凝胶剂、乳膏剂、乳液剂、喷雾剂、成膜溶液或涂剂。本发明 提供了可用于上述任意方法或用途的包装或试剂盒。

在一个实施方式中，本发明提供了一种用于治疗与胶原结构的润滑作用缺乏相关的疼 痛和/或运动性降低的方法，其中本发明所述囊泡制剂的局部给药持续时间为一周或多周， 例如至少持续五周、六周、七周、八周、九周、十周、十一周或十二周、十六周、二十四 周、四个月、六个月、八个月、十个月、一年、两年或更多年、或无限期。所述制剂可以 每日施用一次、两次、三次或更多次。或者，所述制剂可以隔日、每周两至三次、每周一 次或者根据需要以更低频率施用。

在一个实施方式中，将0.1至10克剂量的本发明制剂施用于患者。所述剂量可以是1 至10克，或1至5克或约1克、2克、3克、4克、5克、6克、7克、8克、9克或10克。 在一些实施方式中，剂量以变形体的总重量计。在一些实施方式中，剂量以变形体中脂质 和表面活性剂的总重量计。可以每日施用所述剂量一次或两次，以治疗与润滑作用丧失和 /或结构完整性丧失和/或肿胀相关的疼痛。根据本发明可以每周施用所述剂量一次、两次、 三次、四次、五次、六次或七次。根据本发明可以每日、隔日、或每周两次或三次施用所 述剂量。

将所述制剂局部施用于患者感到疼痛的胶原结构周围的皮肤上。例如，在所述疼痛是 关节疼痛和所述运动性降低是关节僵硬的情况下，用于膝关节、腕部、肩部、踝部、髋部、 肘部或背部周围的皮肤。或者，在由肌腱炎导致的疼痛的情况下，可以将所述制剂用于胫 骨、大腿、下臂或上臂、背部等的皮肤。可以将所述制剂施用于任意外部皮肤表面。

在一些实施方式中，在药物组合物中的所述脂质是磷脂。在一些实施方式中，所述另 一种磷脂是溶血磷脂。在一些实施方式中，所述表面活性剂是非离子表面活性剂。

在一些实施方式中，本发明的组合物形成囊泡或其他展开的表面聚集物(ESA)，其 中所述囊泡制剂对半渗透性屏障如皮肤的渗透能力增强。囊泡的适应性和可变形性允许囊 泡穿透皮肤到达肌肉和关节本身，但是囊泡的尺寸阻止其渗入血管，进而阻止其向全身递 送。不限于任何作用机制，本发明制剂能形成具有可变性和/或适应性特征的囊泡。囊泡的 适应性或可变形性可以通过测定囊泡穿透有孔屏障的能力确定，其中所述孔的平均孔径比 渗透前的囊泡平均直径小。所述孔径可以比平均囊泡直径小至少50％。

在通常情况下，本文使用的术语以及本文所述的有机化学、药物化学和药理学实验室 规程均为本领域熟知和常用的。除非另有定义，本文使用的所有技术和科学术语一般均与 本领域普通技术人员的通常理解具有相同含义。

本发明可以用于遭受由胶原结构润滑作用缺乏导致的疼痛或运动性降低的任意动物。 例如本发明对人或宠物(例如猫、狗或马)或农业动物的治疗是有用的。

如本申请所使用的，达到特定结果的“足量”、“有效量”或“充分量”指能够有效 产生所需效应的本发明制剂的量，所述效应可选地为治疗效应(即，通过给予治疗有效量)。 可替代的表述，“有效治疗的”量指可使至少一种临床症状缓解、减轻和/或减少的量。能 够被本发明方法治疗的疾病相关的临床症状是本领域技术人员所熟知的。此外，本领域技 术人员理解的治疗效应并不需要是完全的或是治愈的，只要能为对象提供某些益处即可。 例如“足量”或“充分量”可以是有效治疗与胶原结构的润滑作用缺乏相关的疼痛症状的 量。

如本申请所使用的，术语“运动性降低”指与健康关节相比关节的运动性降低，当所 述胶原结构在关节中时。也可以将其称为“关节僵硬”。在施用所述囊泡制剂后，本发明 使得运动性和僵硬改善，以使得由润滑作用丧失和/或结构完整性丧失和/或肿胀累及的关 节易于移动。这样，关节的生理功能得到改善。根据本发明使用的所述囊泡制剂能够预防 关节交锁或关节冻结，如果未对运动性降低进行治疗就可能发生关节交锁或关节冻结。如 本申请所使用的“关节交锁或冻结”，指有问题的关节不能移动或弯曲。当所述胶原结构 是肌腱或韧带时，运动性降低还可能是由与肌腱炎或韧带相关的疼痛或不适导致的，其中 所述疼痛不局限于或与特定关节相关。

如本申请所使用的，由润滑作用丧失导致的疼痛或运动性降低是指与关节中的摩擦相 关的疼痛或运动性降低，所述摩擦是由关节的软骨降解导致的，或者所述摩擦是由肌腱或 韧带的胶原或保护性元件/膜的降解引起的。

如本申请所使用的，术语“结构完整性”指关节软骨、或滑膜、或肌腱或韧带周围的 膜的完整性。本申请中使用的结构完整性丧失指与该术语相关的所述胶原结构已通过例如 一个或多个结构蛋白(如蛋白聚糖)的丧失或降解或者一个或多个膜组分(如磷脂)的丧 失或降解遭到破坏。当指关节时，完整性的丧失可能与软骨的破坏相关，其始于蛋白聚糖 的降解和释放，导致II型胶原的破坏以及软骨基质的完全或部分丧失。由于软骨具有生长 缓慢的性质，降解发生的速度通常更快，导致在受累关节中软骨结构净减少。因此，根据 本发明使用的所述囊泡制剂能够通过提供对软骨基质的支持“捕获”机体的自然愈合过程， 阻止进一步的降解。

在本发明的背景中使用的肿胀指由渗出导致的肿胀(液体渗漏进入关节)，当滑膜的 结构完整性被破坏时可能发生肿胀。关节的液体含量增加使得流体力学压力增加，这进一 步促进了关节的损伤。

如本申请所使用的，术语“治疗”指对象病情的严重程度降低或至少部分改善或缓解 和/或至少一种临床症状达到某种程度的缓解、减轻和/或减少和/或疾病的进展得到抑制或 延缓和/或疾病或病变的发病进程被推迟。术语“治疗”也指对疾病状态的控制。

如本申请所使用的，术语“可药用的”当用于表示本发明所述制剂时表示在给予对象 制剂时不会导致其出现无法接受的刺激。优选地该刺激水平低的足以使得该制剂可以获得 主管机关的批准。

如本申请使用的数值，术语“约”指在某特定数值周围的范围，其包括正常检测实验 预期的误差结果。例如，在某些实施方式中，当术语“约”与特定数值联合使用时指±20 ％，除非有特别说明，其为数值的±1％、±2％、±3％、±4％、±5％、±10％、±15 ％或±20％。

术语“烷基”指直链或支链饱和单价烃基，其中烷基可选地被一个或多个本文所述的 取代基Q所取代。除另有说明外，术语“烷基”还包括直链和支链烷基。在某些实施方式 中，烷基为具有1至20(C_1-20)、1至15(C_1-15)、1至12(C_1-12)、1至10(C_1-10)、或1至6(C_1-6) 个碳原子的直链饱和单价烃基，或具有3至20(C_3-20)、3至15(C_3-15)、3至12(C_3-12)、3至 10(C_3-10)，或3至6(C_3-6)个碳原子的支链饱和单价烃基。如本文所使用的，直链C_1-6和支链 C_3-6烷基也称为“低级烷基”。烷基的例子包括，但不限于，甲基、乙基、丙基(包括所 有同分异构体)、n-丙基、异丙基、丁基(包括所有同分异构体)、n-丁基、异丁基、仲 丁基、t-丁基、戊基(包括所有同分异构体)和己基(包括所有同分异构体)。例如，C_1-6烷基指含有1至6个碳原子的直链饱和单价烃基或含有3至6个碳原子的支链饱和单价烃 基。化学领域的技术人员可以理解，使用本文所述的更长链可能是适宜的，或在分子中仅 一定限度的量是适宜的，从而使所得到分子的性质(例如溶解度)适于使用。因而，仅当 上述更长链的烷基取代基适于提供所需功能时，本领域才可以使用。

术语“芳基”指包含至少一个芳香烃环的单环芳基和/或多环单价芳基。在某些实施方 式中，芳基具有6至20(C_6-20)、6至15(C_6-15)或6至10(C_6-10)个环原子。芳基的例子包括， 但不限于，苯基、萘基、芴基、氮杂卓、蒽基、菲基、芘基、联苯基和三联苯基。芳基也 指双环或三环碳环，其中的一个环是芳环且其他的环可以是饱和的、部分不饱和的或芳香 的，例如，二氢萘基、茚基、茚满基或四氢萘基(tetralinyl)。在某些实施方式中，芳基可 选地被一个或多个本文所述的取代基Q所取代。

术语“杂芳基”指包含至少一个芳环的单环芳基和/或多环芳基，其中至少一个芳环包 含一个或多个杂原子，所述杂原子独立地选自O、S和N。杂芳基的各环可以含有一个或 两个O原子、一个或两个S原子、和/或一至四个N原子，只要各环杂原子总数为四个或 以下且各环含有至少一个碳原子。杂芳基可以与主体结构的任意杂原子或碳原子相连接， 从而产生稳定的化合物。在某些实施方式中，杂芳基有5至20个、5至15个或5至10个 环原子。单环杂芳基的例子包括，但不限于，吡咯基、吡唑基、吡唑啉基、咪唑基、噁唑 基、异噁唑基、噻唑基、噻二唑基、异噻唑基、呋喃基、噻吩基、噁二唑基、吡啶基、吡 嗪基、嘧啶基、哒嗪基和三嗪基。双环杂芳基的例子包括，但不限于，吲哚基、苯并噻唑 基、苯并噁唑基、苯并噻吩基、喹啉基、四氢异喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并吡 喃基、吲嗪基、苯并呋喃基、异苯并呋喃基、色酮基、香豆素基、噌啉基、喹喔啉基、吲 唑基、嘌呤基、吡咯并吡啶基、呋喃并吡啶基、噻吩并吡啶基、二氢异吲哚基和四氢喹啉 基。三环杂芳基的例子包括，但不限于，咔唑基、苯并吲哚基、菲罗啉基、吖啶基、菲啶 基和呫吨基。在某些实施方式中，杂芳基也可选地被一个或多个本文所述的取代基Z所取 代。

本申请使用的术语“烯酰基”指-C(O)-烯基。术语“烯基”指直链或支链单价烃基， 其含有一个或多个碳碳双键，在一个实施方式中为一至五个碳碳双键。烯基可选地被一个 或多个本文所述的取代基Z所取代。本领域普通技术人员知晓，术语“烯基”也包括具有 “cis(顺式)”和“trans(反式)”构型，或替代地“Z式”和“E式”构型的基团。如 本申请所使用的，除另有说明外，术语“烯基”包括直链和支链烯基。例如，C_2-6烯基指 含有2至6个碳原子的直链不饱和单价烃基或含有3至6个碳原子的支链不饱和单价烃基。 在某些实施方式中，烯基为含2至30(C_2-30)、2至24(C_2-24)、2至20(C_2-20)、2至15(C_2-15)、 2至12(C_2-12)、2至10(C_2-10)、或2至6(C_2-6)个碳原子的直链单价烃基，或含3至30(C_3-30)、 3至24(C_3-24)、3至20(C_3-20)、3至15(C_3-15)、3至12(C_3-12)、3至10(C_3-10)、或3至6(C_3-6) 个碳原子的支链单价烃基。烯基的例子包括，但不限于，乙烯基、丙烯-1-基、丙烯-2-基、 烯丙基、丁烯基、和4-甲基丁烯基。在某些实施方式中，烯酰基是单烯酰基，其含有一个 碳-碳双键。在某些实施方式中，烯酰基是二烯酰基，其含有两个碳-碳双键。在某些实施 方式中，烯酰基是多烯酰基，其含有两个以上碳-碳双键。

术语“杂环基”或“杂环的”指单环非芳香环系和/或至少含有一个非芳香环的多环环 系，其中一个或多个非芳香环原子为杂原子，所述杂原子独立地选自O、S或N，且其余 环原子为碳原子。在某些实施方式中，杂环基或杂环基团含有3至20、3至15、3至10、 3至8、4至7或5至6个环原子。在某些实施方式中，杂环为单环、双环、三环或四环环 系，其可以包括稠合或桥环系统，且其中的氮或硫原子可以任选地被氧化，氮原子可以任 选地被四价化，且某些环可以部分或完全被饱和或芳香化。杂环可以与主体结构的任意杂 原子或碳原子相连接，产生了稳定的化合物。此类杂环基的例子包括，但不限于，吖啶基、 氮杂卓、苯并咪唑基、苯并吲哚基、苯并异噁唑基、苯并异噁嗪基、苯并二环氧乙烷基 (benzodioxanyl)、苯并二乙二酰基、苯并呋喃酮基、苯并呋喃基、苯并萘基呋喃基、苯 并吡喃酮基、苯并吡喃基、苯并四氢呋喃基、苯并四氢噻吩基、苯并噻二唑基、苯并噻唑 基、苯并苯硫基、苯并三唑基、苯并硫代吡喃基、苯并噁嗪基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、 β-咔啉基、咔唑基、色满基、色酮基、噌啉基、香豆素基、十氢异喹啉基、二苯并呋喃基、 二氢苯并异噻嗪基、二氢苯并异噁嗪基、二氢呋喃基、二氢吡喃基、二氧戊环基、二氢吡 嗪基、二氢嘧啶基、二氢吡唑基、二氢嘧啶基、二氢吡咯基、二氧戊环基、1，4-二噻烷基、 呋喃酮基、呋喃基、咪唑烷基、咪唑啉基、咪唑基、咪唑并吡啶基、咪唑并噻唑基、吲唑 基、二氢吲哚基、吲哚嗪基、吲哚基、异苯并四氢呋喃基、异苯并四氢噻吩基、异苯并噻 吩基、异色满基、异香豆素基、异二氢吲哚基、异吲哚基、异喹啉基、异四氢噻唑基、异 噻唑基、异噁唑烷基、异噁唑基、吗啉基、萘啶基、八氢吲哚基、八氢异吲哚基、噁二唑 基、噁唑烷酮基、噁唑烷基、噁唑吡啶基、噁唑基、环氧乙基、萘嵌间二氮杂苯基、啡啶 基、菲罗林基(phenathroinyl)、吩吡嗪基、吩嗪基、吩噻嗪基、酚嗪基、酞嗪基、哌嗪基、 哌啶基、4-哌啶酮基、喋啶基、嘌呤基、吡嗪基、吡唑烷基、吡唑基、哒嗪基、吡啶基、 吡啶并吡啶基、嘧啶基、吡咯烷基、吡咯啉基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、 奎宁环基、四氢呋喃基、四氢呋喃基、四氢异喹啉基、四氢吡喃基、四氢噻吩基、四唑基、 硫代二唑嘧啶基、硫代二唑基、硫代吗啉基、噻唑烷基、噻唑基、噻吩基、三嗪基、三噻 唑基和1，3，5-三噻烷基。在某些实施方式中，杂环可以任选地被一个或多个本申请所述 的取代基Z所取代。术语“卤素”指氟、氯、溴和/或碘。

术语“任选地取代”指基团，包括烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、芳烷基、杂芳 基和杂环基可以被一个或多个取代基Z所取代，在一个实施方式中，具有一个、两个、三 个或四个取代基Z，其中各个Z独立地选自以下组：氰基、卤素、氧、氮、C_1-6烷基、卤 代-C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_3-7环烷基、C_6-14芳基、C_7-14芳烷基、杂芳基、杂环基、 -C(O)R^e、-C(O)OR^e、-C(O)NR^fR^g、-C(NR^e)NR^fR^g、-OR^e、-OC(O)R^e、-OC(O)OR^e、-OC(O)NR^fR^g、 -OC(＝NR^e)NR^fR^g、-OS(O)R^e、-OS(O)₂R^e、-OS(O)NR^fR^g、-OS(O)₂NR^fR^g、-NR^fR^g、-NR^eC(O)R^f、 -NR^eC(O)OR^f、-NR^eC(O)NR^fR^g、-NR^eC(＝NR^h)NR^fR^g、-NR^eS(O)R^f、-NR^eS(O)₂R^f、 -NR^eS(O)NR^fR^g、-NR^eS(O)₂NR^fR^g、-SR^e、-S(O)R^e、-S(O)₂R^e和-S(O)₂NR^fR^g，其中各R^e、 R^f、R^g和R^h独立地为氢、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_3-7环烷基、C_6-14芳基、C_7-14芳 烷基、杂芳基、或杂环基；或R^f和R^g与N原子相连形成杂环。

术语“溶剂化物”指本发明所述化合物或其盐，其通过非共价分子间作用力进一步包 括化学计量或非化学计量的溶剂。当溶剂为水时，溶剂化物为水合物。

依照本申请公开的内容，术语“包括”指包括在内的或开放式的且不排除附加的、未 说明的元素或方法步骤；术语“由……组成”排除未说明的任何元素、步骤或成分；以及 术语“基本由……组成”排除导致本发明基本性质发生实质性改变的任何元素、步骤或成 分。

在某些实施方式中，本文所述的本发明制剂包括至少一种脂质，优选磷脂，至少一种 表面活性剂，优选非离子表面活性剂，其任选地悬浮于可药用的介质中，优选水性溶液， 优选pH范围为3.5至9.0，优选4至7.5。本发明制剂可以任选地含有缓冲剂、抗氧化剂、 防腐剂、杀菌剂、抗菌剂、软化剂、共溶剂、和/或增稠剂。在某些实施方式中，本发明制 剂包括一种以上脂质的混合物，优选一种以上磷脂。在某些实施方式中，本发明制剂基本 由至少一种脂质，优选磷脂、至少一种表面活性剂，优选非离子表面活性剂、可药用的载 体、以及任选地缓冲剂、抗氧化剂、防腐剂、杀菌剂、抗菌剂、软化剂、共溶剂、和/或增 稠剂组成。在某些实施方式中，本发明制剂由至少一种脂质，优选磷脂、至少一种表面活 性剂，优选非离子表面活性剂、可药用的载体、和一种或多种下述物质组成：缓冲剂、抗 氧化剂、防腐剂、杀菌剂、抗菌剂、软化剂、共溶剂、和增稠剂。

从本申请的意义上说，“脂质”是具有脂肪样性质或脂肪类似性质的任意物质。通常 地，其具有一个展开的非极性基团(“链”，X)和总体水溶性、极性亲水部分，“头” 部基团(Y)，其具有式I所示的基本结构式：

X-Y_n(I)

其中n等于或大于零。

n＝0的脂质为非极性脂质，n>1的脂质为极性脂质。在这种意义上理解，所有两性物 质，包括但不限于甘油酯类、甘油磷酸脂类、甘油膦基脂类、甘油膦酰基脂类、硫酸脂类、 鞘脂类、类异戊二烯脂类、甾体激素或甾醇以及含有碳水化合物的脂类一般均可以作为脂 质，包括于本发明中。相关的脂质列表和脂质相关定义参见EP 0 475 160 A1(参见例如p.4， 1.8至p.6，1.3)和U.S.专利号6,165,500(参见例如col.6，1.10至col.7，1.58)，其全部 内容在此参考并入。

在各种实施方式中磷脂可能含有(I)来源于甘油或鞘氨醇的部分，(2)磷酸基和/或 (3)单一有机分子如胆碱。如本申请所使用的磷脂可以是例如式II所示的化合物：

R¹-CH₂-CHR²-CR³H-O-PHO₂-O-R⁴(II)

其中R¹和R²是氢、OH、烷基、脂肪族链、衍生自脂肪酸或脂肪醇的脂肪链：但条件 是R¹和R²不能均为氢、OH或C1-C3烷基；在一些实施方式中，R¹和R²独立地为脂肪链， 大多数通常衍生自脂肪酸或脂肪醇；R³一般为氢。

磷酸酯的OH-基团为羟自由基或氢氧根离子(即，氢氧化物)形式，视基团离子化程 度而定。此外，R⁴可以是质子或短链烷基、被三个短链烷铵基基团取代，如三甲铵基团、 或氨基取代的短链烷基基团，如2-三甲铵乙基基团(胆碱基)或2-二甲铵短烷基基团。

鞘氨醇磷脂为，例如式IIB所示的化合物：

R¹-鞘氨醇-O-PHO₂-O-R⁴(IIB)

其中R¹为通过酰胺键与鞘氨醇中的氮连接的脂肪酸，R⁴的含义见式II项下。

脂质优选式II或IIB所示的物质，其中R¹和/或R²为酰基或烷基、n-羟基酰基或n-羟 基烷基，但也可以是支链的，且在链的几乎任意位点可以连有一个或多个甲基基团；通常， 甲基基团位于链末端附近(异位或反异位)。此外，R¹和R²可以是饱和的或不饱和的(一 元、二元或多元不饱和的)。R³为氢且R⁴为2-三甲铵乙基(后者对应于磷脂酰胆碱的首 基)、2-二甲铵乙基、2-甲基铵乙基或2-氨乙基(对应于磷脂酰乙醇胺的首基)。如果选 择使用天然甘油磷脂，R⁴可以是质子(产生磷酸)、丝氨酸(产生磷脂酰丝氨酸)、甘油 (产生磷脂酰甘油)、肌醇(产生磷脂酰肌醇)或烷基氨基(当是乙胺时产生磷脂酰乙醇 胺)。此外，也可以考虑使用其他任何可形成脂质双层的极性磷酸酯制备本申请所述的制 剂。

磷脂是例如WO2011/022707中所述的式IIC化合物，其中R¹和R²独立地是酰基、烷 基、n-羟基酰基或n-羟基烷基，其最常见地衍生自脂肪酸或脂肪醇，其中R¹和R²还可以 是支链的，且在链的几乎任意位点连有一个或多个甲基基团；通常，甲基基团位于链末端 附近(异位或反异位)。其中R¹和R²不能均为氢、OH或C₁-C₃烷基。此外，R¹和R²可 以是饱和的或不饱和的(一元、二元或多元不饱和的)。R³通常为氢。磷酸酯的OH-基团 为羟自由基或氢氧根离子(即，氢氧化物)形式，视基团离子化程度而定。此外，R可以 是质子或短链烷基、被三个短链烷铵基基团取代，如三甲铵基团、或氨基取代的短链烷基 基团，如2-三甲铵乙基基团(胆碱基)或2-二甲铵短烷基基团。R⁴可以是2-三甲铵乙基(后 者对应于磷脂酰胆碱的首基)、2-二甲铵乙基、2-甲基铵乙基或2-氨乙基(对应于磷脂酰 乙醇胺的首基)。如果选择使用天然甘油磷脂，R⁴还可以是质子(产生磷酸)、丝氨酸(产 生磷脂酰丝氨酸)、甘油(产生磷脂酰甘油)、肌醇(产生磷脂酰肌醇)或烷基氨基(当 是乙胺时产生磷脂酰乙醇胺)。此外，也可以考虑使用其他任何可形成脂质双层的极性磷 酸酯制备本申请所述的制剂。

表1 列出了根据本发明的一个实施方式的优选的磷脂。

表1：

山嵛酰基(Bechen(o)yl) 瓢儿菜基(Eruca(o)yl) 花生酰基(Arachin(o)yl) 岗窦酰基(Gadolen(o)yl) 花生四烯酰基(Arachindon(o)yl) 油酰基 硬脂酰基 亚油酰基 亚麻酰基 棕榈油酰基 棕榈酰基 肉豆蔻酰基 月桂酰基 己酰基

在本申请的背景下，优选的脂质不带电荷且能够形成稳定的、水合良好的双分子层； 磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺和鞘磷脂是此类脂质中最具代表性的。其均具有表1所示的链， 优选那些能够形成液相双分子层的，其中脂质链处于无序状态。

囊泡脂质双分子层中还可以掺入带有不同负电荷(即，阴离子)的脂质。此类带电脂 质的典型例子为磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇且，其次可选择，磷脂酸(及其烷基酯)或磷脂 酰丝氨酸。本领域普通技术人员能够意识到仅采用带电脂质制备囊泡不如将其与电中性双 分子层成分合用值得推荐。当采用带电脂质时，必须选择缓冲组合物和/或注意pH值，以 确保脂质首部基团获得所需的离子化程度和/或带有相反电荷的药物和脂质分子之间产生 所需的静电作用。此外，当与中性脂质合用时，带电荷的双层脂质成分原则上可以带有表 1中列举的任意链。但是，形成液相脂质双层的链无疑是优选的，因为囊泡的适应性可以 增加脂肪链的流动性，且在液相中脂质间互相混合的能力更强。

脂质的脂肪酸或脂肪醇衍生链通常选自下表所列碱性脂肪链类型：

其他的双键组合或位置也是可能存在的。

此外，适宜的脂肪残基可以进一步支链化，例如，脂肪酸链的异位或反异位或其他接 近链中部的位置可以含有甲基，如在10-R-甲基硬脂酸或结核硬脂酸链中。相对重要的支 链脂肪酸还有类异戊二烯，其中的很多衍生自3，7，11，15-四甲基十六碳-反-2-烯-1-醇， 叶绿素的脂肪醇部分。实例包括5，9，13，17-四甲基十八碳酸且特别是3，7，11，15- 四甲基十六碳(植烷)酸和2，6，10，14-四甲基十五碳(降植烷)酸。海洋生物是4，8， 12-三甲基十九碳酸的良好来源。脂肪残基也可能存在双键和侧链的组合。

可选地，适宜的脂肪残基可以带有一个或多个含氧基团或环状基团，特别是在链的中 部或末端。后者最突出的，脂环族脂肪酸，是那些包括环丙烷(有时为环丙烯)环，但也 可以有环己基和环庚基环，且可以用于本发明的目的。2-(D)-羟基脂肪酸比脂环族脂肪酸 更为常见，其也是神经鞘脂类重要的组成成分。同样感兴趣的有15-羟基-十六酸和17-羟 基-十八酸，以及可以是9-羟基-十八-反-10，反-12-二烯(dimorphecolic)酸和13-羟基-十 八-顺-9，反-11-二烯(coriolic)酸。有争议的目前最常用的药用羟基脂肪酸为蓖麻酸， (D-(-)12-羟基-十八-顺-9-油酸，其包括高达90％蓖麻油，也经常以氢化形式使用。在本公 开内容中，环氧、甲氧基和呋喃型脂肪酸的实用意义有限。

一般而言，不饱和、支链或其他类型的脂肪酸衍生物最好的与本发明的目的一致的修 饰位点位于脂肪酸链的中部或末端部分。顺式不饱和脂肪酸也比反式不饱和脂肪酸更优 选，且含较少双键的脂肪基比含多个双键的脂肪基更优选，这是因为后者的氧化灵敏度。 此外，链对称的脂质一般比链不对称的脂质更适宜。

式II所示的脂质优选为，例如天然的磷脂酰胆碱，习惯上将其称为卵磷脂。其可以从 鸡蛋(富含棕榈酸基，C16:0，和油酸基，C18:1，但也包括硬脂酸基，C18:0，棕榈油酸基， C16:1，亚麻酸基，C18:2，和花生四烯酸基，C20:4(M基))、大豆(富含不饱和C18 链，但也含有某些棕榈酸基和其他成分)、椰子(富含饱和链)、橄榄(富含一元不饱和 链)、藏红花(红花)和向日葵(富含n-6亚麻油酸)、亚麻籽(富含n-3亚麻油酸)中 获得，从鲸脂(富含一元不饱和n-3链)中获得，从樱草花或樱草属植物(富含n-3链) 中获得。优选的，天然磷脂酰乙醇胺(习惯上称为脑磷脂)通常来源于鸡蛋或大豆。优选 的生物来源的鞘磷脂一般通过鸡蛋或脑组织制备。优选的磷脂酰丝氨酸一般也来源于脑组 织，而磷脂酰甘油则优选从细菌中提取，如大肠杆菌或其他如使用磷脂酶D，以天然磷脂 酰胆碱为初始原料，通过转磷脂酰反应制备。优选使用的磷脂酰肌醇可以从商品化的大豆 磷脂或牛肝脏提取物中分离获得。优选的磷脂酸可以从任意上述来源中提取或使用磷脂酶 D通过适宜的磷脂酰胆碱制备。

此外，合成的磷脂酰胆碱(式II中的R⁴对应于2-三甲铵乙基)，R¹和R²为脂肪链， 根据上文的定义其具有12至30个碳原子，优选地具有14至22个碳原子，更优选地具有 16至20个碳原子，条件是必须对链进行选择，以确保获得的ESA包括液态脂质双层。典 型地方法是使用相对较短的饱和链和相对较长的不饱和链。合成的鞘磷脂(式IIB中的R⁴对应于2-三甲铵乙基)，R¹为脂肪链，根据上文的定义其具有10至20个碳原子，优选地 每条完全饱和的链具有10至14个碳原子，每条不饱和链具有16至20个碳原子。

合成的磷脂酰乙醇胺(R⁴为2-氨基乙基)，合成的磷脂酸(R⁴为质子)或其酯(R⁴对应为，例如短链烷基，如甲基或乙基)，合成的磷脂酰丝氨酸(R⁴为L-或D-丝氨酸)， 或合成的磷脂酰(聚)醇，如磷脂酰肌醇、磷脂酰甘油(R⁴为L-或D-甘油)均可优选地 作为脂质，其中R¹和R²为相同或类型和长度上存在适度差异的脂肪残基，特别是上文相 应表格中给出的那些。此外，R¹可以代表烯基，R²代表相同的羟烷基，如十四烷基羟基或 十六烷基羟基，例如，在双十四烷基或双十六碳磷脂酰胆碱或乙醇胺中，R¹可以代表烯基， R²代表羟基酰基，如缩醛磷脂(R⁴为三甲铵乙基)，或R¹可以是酰基，如月桂酰基、肉 豆蔻酰基或棕榈酰基，且R²可以代表羟基，例如，在天然或合成的溶血磷脂酰胆碱或溶血 磷脂酰甘油或溶血磷脂酰乙醇胺中，如1-肉豆蔻酰基或1-棕榈酰溶血磷脂酰胆碱或-磷脂 酰乙醇胺；通常情况下，R³代表氢。

在本发明的内容中，式IIB所示脂质也是一种适宜的脂质。在式IIB中，n＝1，R¹是 烯基。R²是酰胺基。R³是氢和R⁴代表2-三甲胺乙基(胆碱基)。已知的此类脂质熟知的 名称为鞘磷脂。

此外，适宜的脂质有磷脂酰胆碱类似物，如1-月桂酰基-1，3-二羟基丙烷-3-磷酰基胆 碱，甘油一酸酯，如油酸单甘油酯或肉豆蔻酸单甘油酯，脑苷脂，多聚己糖神经酰胺，硫 脑苷脂，神经鞘缩醛磷脂、神经节苷脂或甘油酯，其3位不含有游离的或酯化的磷酰基、 膦酰基或膦基。此类甘油酯的一个例子为带有任意酰基或烯基基团的二酰基甘油酯或1-烯 基-1-羟基-2-酰基甘油酯，其中3-羟基被一个糖基所醚化，例如，半乳糖基如半乳糖单甘油 酯。

还可以通过生物化学的方法由天然或合成前体制备形成带有所需头或链基团特性的 脂质，例如，使用磷脂酶(如磷脂酶A1、A2、B、C和特别是D)、脱氢酶、延伸酶、酰 基转移酶等。

此外，适宜的脂质为含有生物膜中且能够利用非极性有机溶剂如氯仿提取的任意脂 质。除了已提及的脂质以外，此类脂质还包括，例如，甾体激素，如雌二醇或甾醇，如胆 固醇，β-谷甾醇、链甾醇、7-酮-胆固醇或β-胆甾烷醇、脂溶性维生素，如类维生素A、维 生素，如维生素A1或A2、维生素E、维生素K，如维生素K1或K2或维生素D1或D3 等。

溶解性较低的两性成分包括或者优选包括合成脂质，如肉豆蔻酰基、棕榈油酰基、岩 芹醇基、反-6-十八烯酸基、油酰基、反油酰基、顺式或反式异油酰基(vaccenoyl)、亚油 酰基、亚麻酰基、亚油酸基(linolaidyl)、正十八烷基四烯酰基、冈朵基(gondoyl)、二 十烷基烯酰基、二十烷基二烯酰基、二十烷基三烯酰基、花生酰基、顺式或反式二十二烷 基烯酰基、二十二烷基二烯酰基、二十二烷基三烯酰基、二十二烷基四烯酰基、月桂酰基、 十三烷酰基、肉豆蔻酰基、十五烷酰基、棕榈酰基、十七烷酰基、硬脂酰基或十九烷酰基、 甘油磷脂或带有支链的相应衍生物或相应的二烷基或神经鞘脂衍生物、糖脂或其他二酰基 或二烷基脂质。

溶解性更高的两性成分通常衍生自上文列出的溶解性较低的成分，以增加溶解度，其 被以下基团取代和/或复合和/或连接：丁酰基、戊酰基、己酰基、庚酰基、辛酰基、壬酰 基、癸酰基或十一酰基取代基或多个、相互独立的、选定的取代基或其他材料，以改善溶 解度。

其他适宜的脂质为二酰基或二烷基甘油磷酸乙醇胺含氮聚乙氧基烯衍生物，二癸酰基 磷脂酰胆碱或二酰基磷酸寡聚麦芽糖酰胺。

在某些实施方式中，制剂中脂质的量以重量计为约1％至约12％、约1％至约10％、 约1％至约4％、约4％至约7％或约7％至约10％。在特定实施方式中，脂质为磷脂。在 另一个特定实施方式中，磷脂为磷脂酰胆碱。

在某些实施方式中，制剂中的脂质不包括烷基可溶性磷脂。在某些实施方式中，制剂 中的脂质不包括聚烯磷脂酰胆碱。

术语“表面活性剂”具有其通常的含义。相关的表面活性剂列表和与表面活性剂相关定 义参见EP 0 475 160 A1(参见例如，p.6，1.5至p.14.1.17)和U.S.专利号6,165,500(参见 例如，col.7，1.60至col.19，1.64)，其全部内容在此参考并入，参见适当的表面活性剂或 制药手册，如工业表面活性剂手册(Handbook of Industrial Surfactants)或US药典，欧洲 药典。在某些实施方式中，表面活性剂参见U.S.专利申请(公开号2002/0012680A1(公开 日2002年1月31日))中表1-18所述内容，其全部内容在此参考并入。因此下表仅提供 了一个选择，其并不是本专利申请特别常用的或有用的所有，唯一的几类表面活性。本公 开内容中使用的表面活性剂优选为HLB大于12的表面活性剂。列表中包括离子性长链脂 肪酸或长链脂肪醇、长脂肪链铵盐，如烷基-或烯酰基-三甲基-、-二甲基-和-甲基-铵盐、烷 基-或烯酰基-硫酸盐、长脂肪链二甲基氨基氧化物，如烷基-或烯酰基-二甲基-氨基氧化物、 长脂肪链，例如链烷基酰基、二甲基-氨基氧化和特别是十二烷基二甲基-氨基氧化、长脂 肪链，例如烷基-N-甲葡糖酰胺和链烷基酰基-N-甲葡糖酰胺，如MEGA-8、MEGA-9和 MEGA-10，N-长脂肪链-N，N-二甲基甘氨酸，例如N-烷基-N，N-二甲基甘氨酸、3-(长 脂肪链-二甲基铵基)-烷基-磺酸盐，例如3-(酰基二甲铵基)-烷基磺酸盐、磺基琥珀酸盐 的长脂肪链衍生物，如双(2-乙基烷基)磺基琥珀酸盐，长脂肪链磺基甜菜碱，例如酰基- 磺基甜菜碱、长脂肪链甜菜碱，如EMPIGEN BB或ZWITTERGENT-3-16、-3-14、-3-12、 -3-10、或-3-8、或聚乙烯-乙二醇-酰基苯基醚，特别是壬乙烯-乙二醇-辛基-苯基醚、聚乙 烯-长脂肪链-醚，特别是聚乙烯-酰基醚，如壬乙烯-癸基醚、壬乙烯-十二烷基醚或辛乙烯- 十二烷基醚、聚乙烯二醇-异酰基醚，如辛乙烯二醇-异十三烷基醚、聚乙烯二醇-脱水山梨 糖醇-长脂肪链酯，例如聚乙烯二醇-脱水山梨糖醇-酰基酯和特别是聚氧乙烯-单月桂酸酯 (例如，聚山梨醇酯20或吐温20)、聚氧乙烯-脱水山梨糖醇-单油酸酯(例如，聚山梨醇 酯80或吐温80)、聚氧乙烯-脱水山梨糖醇-单月桂酸酯、聚氧乙烯-脱水山梨糖醇-单岩芹 酸酯、聚氧乙烯-脱水山梨糖醇-单反油酸酯、聚氧乙烯-脱水山梨糖醇-肉豆蔻酸酯、聚氧乙 烯-脱水山梨糖醇-棕榈油酸酯、聚氧乙烯-脱水山梨糖醇-岩芹油酸酯(etroselinylate)、聚 羟乙烯-长脂肪链醚，例如聚羟乙烯-酰基醚，如聚羟乙烯-月桂醇醚、聚羟乙烯-肉豆蔻酰基 醚、聚羟乙烯-鲸蜡硬脂酰基、聚羟乙烯-棕榈酰基醚、聚羟乙烯-油酰基醚、聚羟乙烯-棕榈 油酰基醚、聚羟乙烯-亚油醇基、聚羟乙基-4、或6、或8、或10、或12-月桂酰基、肉豆蔻 酰基、棕榈酰基、棕榈油酰基、油酰基或亚油醇醚(linoeyl ethers)(Brij系列)、或相应 的酯、聚羟乙烯基-月桂酸酯、-肉豆蔻酸酯、-棕榈酸酯、-硬脂酸酯或-油酸酯，特别是聚 羟乙烯基-8-硬脂酸酯(Myrj 45)和聚羟乙烯基-8-油酸酯，聚乙氧基化的40(克列莫佛EL)、 脱水山梨糖醇-单长脂肪链，例如烷基化物(Arlacel或Span系列)，特别是山梨糖醇-单月 桂酸酯(Arlacel 20，司盘20)，长脂肪链，例如酰基-N-甲基葡糖酰胺、烷酰基-N-甲基葡 糖酰胺，特别是癸酰基-N-甲葡糖酰胺、十二烷酰基-N-甲葡糖酰胺、长脂肪链硫酸盐，例 如烷基-硫酸盐、烷基硫酸盐，如月桂基-硫酸盐(SDS)、油酰基-硫酸盐；长脂肪链葡糖 硫苷，如烷基葡糖硫苷和特别是庚基-、辛基-和壬基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷；多种碳水化 合物的长脂肪链衍生物，如戊糖、己糖和二糖，特别是烷基-葡萄糖苷和麦芽糖苷，如己基 -、庚基-、辛基-、壬基-和癸基-β-D-吡喃葡萄糖苷或D-吡喃麦芽糖苷；进一步为盐，特别 是胆酸钠盐、脱氧胆酸钠盐、甘氨胆酸钠盐、甘氨脱氧胆酸钠盐、牛磺脱氧胆酸钠盐、牛 磺胆酸钠盐，脂肪酸盐，特别是油酸盐、反油酸盐、亚油酸盐、月桂酸盐或肉豆蔻酸盐， 最常见的是钠盐形式，溶血磷酸酯、n-十八烯-甘油磷脂酸、十八烯-磷酸甘油、十八烯-磷 酸丝氨酸、n-长脂肪链-甘油-磷脂酸，如n-酰基-甘油-磷脂酸，特别是月桂基-甘油-磷脂酸、 油酰-甘油-磷脂酸、n-长脂肪链-磷酸甘油，如n-酰基-磷酸甘油，特别是月桂酰基-、肉豆 蔻酰基-、油酰基-或棕榈酰基-磷酸甘油、n-长脂肪链-磷酰基丝氨酸，如n-酰基-磷酰基丝 氨酸，特别是月桂酰基-、肉豆蔻酰基-、油酰基-或棕榈酰基-磷酰基丝氨酸、n-十四烷基- 甘油-磷脂酸、n-十四烷基-磷酰基甘油、n-十四烷基-磷酰基丝氨酸，相应的-，反油酸酰基 -(elaidoyl-)、反异油酸基-溶血磷脂(vaccenyl-lysophospholipids)，相应的短链磷脂，以 及所有表面活性剂和这样的膜不稳定多肽。通常选择在液体状态的表面活性链或至少在载 体聚集物中可以维持液体链状态。

在某些实施方式中，表面活性剂是非离子表面活性剂。制剂中表面活性剂可以是以重 量计约0.1％至约5.0％、约0.2％至约10％、约1％至约10％、约1％至约7％或约2％至 约5％。在某些实施方式中，非离子表面活性剂选自下组：聚氧乙烯山梨糖(聚山梨糖醇 酯表面活性剂)、聚羟基乙烯硬脂酸酯或聚羟乙烯月桂基醚(Brij表面活性剂)。在特定 实施方式中，表面活性剂是聚氧乙烯-山梨糖醇-单油酸酯(例如，聚山梨糖醇酯80或吐温 80)或吐温20、40或60。在某些实施方式中，所述聚山梨糖醇酯可以具有12至20个碳 原子的任意链。在某些实施方式中，制剂中的聚山梨糖醇酯是液体，其可以含有一个或多 个双键、支链或环状基团。

在某些实施方式中，本发明制剂仅包括一种脂质和一种表面活性剂。在其他实施方式 中，本发明制剂包括一种以上脂质和一种表面活性剂，例如两种、三种、四种或更多种脂 质和一种表面活性剂。在其他实施方式中，本发明制剂仅包括一种脂质和一种以上表面活 性剂，例如两种、三种、四种或更多种表面活性剂和一种脂质。在其他实施方式中，本发 明制剂包括一种以上脂质和一种以上表面活性剂，例如两种、三种、四种或多种脂质以及 两种、三种、四种或多种表面活性剂。

本发明制剂中脂质与表面活性剂比率可以具有一定的范围。该比率可以以摩尔单位表 示(mol脂质/mol表面活性剂)。制剂中脂质与表面活性剂的摩尔比可以为约1∶3至约30∶ 1、为约1∶2至约30∶1、为约1∶1至约30∶1、为约2:1至约20:1、为约5∶1至约30∶ 1、为约10∶1至约30∶1、为约15∶1至约30∶1或为约20∶1至约30∶1。在某些实施 方式中，本发明的制剂中脂质与表面活性剂的摩尔比可以为约1∶2至约10∶1。在某些实 施方式中，比率为约1∶1至约2∶1、为约2∶1至约3∶1、为约3∶1至约4∶1、为约4∶ 1至约5∶1或为约5∶1至约10∶1。在某些实施方式中，摩尔比为约10∶1至约30∶1、 为约10∶1至约20∶1、为约10∶1至约25∶1、以及为约20∶1至约25∶1。在特定实施 方式中，脂质与表面活性剂的比率为约1.0∶1.0、约1.25∶1.0、约1.5/1.0、约1.75/1.0、 约2.0/1.0、约2.5/1.0、约3.0/1.0或约4.0/1.0。本发明制剂含有的下列成分的总量变化如下： 脂质与表面活性剂的组合(TA)。TA的量可以以占全部组合物的重量百分数表示。在一 个实施方式中，TA为约1％至约40％、约5％至约30％、约7.5％至约15％、约6％至约 14％、约8％至约12％、约5％至约10％、约10％至约20％或约20％至约30％。在特定实 施方式中，TA为6％、8％、9％、10％、12％、14％、15％或20％。

本发明制剂中脂质总量和脂质/表面活性剂比率(mol/mol)的选择范围如下表所述：

表2：总量和脂质与表面活性剂的比率

TA(和表面活性剂)(％) 脂质/表面活性剂(mol/mol) 5至10 1.0至1.25 5至10 1.25至1.72 5至10 1.75至2.25 5至10 2.25至3.00 5至10 3.00至4.00 5至10 4.00至8.00 5至10 10.00至13.00 5至10 15.00至20.00 5至10 20.00至22.00 5至10 22.00至25.00 10至20 1.0至1.25 10至20 1.25至1.75 10至20 1.25至1.75 10至20 2.25至3.00 10至20 3.00至4.00 10至20 4.00至8.00 10至20 10.00至13.00 10至20 15.00至20.00 10至20 20.00至22.00 10至20 22.00至25.00

本发明的制剂不包含已在任何国家销售或经监管机关批准的用于治疗红斑痤疮的药 物活性剂。

本发明的制剂可以任选地含有一种或多种下述成分：助溶剂、螯合剂、缓冲剂、抗氧 剂、防腐剂、杀菌剂、软化剂、湿润剂、润滑剂和增稠剂。任选成分的优选量如下所述。

  摩尔(M) 相对w％* 抗氧剂：     主要：     丁基羟基茴香醚，BHA   0.1-8 丁基羟基甲苯，BHT   0.1-4 麝香草酚   0.1-1 焦亚硫酸钠 1-5mM   亚硫酸氢钠 1-5mM   硫脲(MW＝76.12) 1-10mM   单硫代甘油(MW＝108.16) 1-20mM   没食子酸丙酯(MW＝212.2)   0.02-0.2 抗坏血酸(MW＝175.3⁺离子) 1-10mM   抗坏血酸棕榈酯   0.01-1 生育酚-PEG   0.5-5 次要(螯合剂)     EDTA(MW＝292) 1-10mM   EGTA(MW＝380.35) 1-10mM   去铁胺(MW＝656.79) 0.1-5mM   缓冲剂     乙酸盐 30-150mM   磷酸盐 10-50mM   三乙醇胺 30-150mM  

*以总脂质量的百分率计

本发明制剂可以包括缓冲剂以便将水溶液的pH调节在pH 3.5至pH 9、pH 4至pH 7.5 或pH 6至pH 7范围内。缓冲剂的例子包括，但不限于醋酸盐缓冲剂、乳酸盐缓冲剂、磷 酸盐缓冲剂和丙酸盐缓冲剂。

本发明制剂一般在水性基质中配制。制剂可以和或者不和助溶剂一同配制，助溶剂如 低级醇。

通常加入“杀菌剂”或“抗菌剂”以减少药物制剂中的细菌量。一些杀菌剂的例子为 短链醇，包括乙醇和异丙醇、氯丁醇、苯甲醇、氯苯甲醇、二氯苯甲醇、六氯酚；酚化合 物，如甲酚、4-氯-m-甲酚、p-氯-m-二甲酚、双氯酚、六氯酚、吡咯烷酮碘(povidoniodine)； 尼泊金类，特别是烷基尼泊金类，如尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯或尼泊金丁酯、 尼泊金苯甲酯；酸，如山梨酸、苯甲酸及其盐；季铵化合物，如烷铵盐，例如，溴化物， 苯甲烷铵，如氯化或溴化，西曲铵盐，例如，溴化、度米芬盐(phenoalkecinium salts)、 如溴化度米芬、氯化鲸蜡基吡啶及其他盐；此外，汞化合物，如苯汞醋酸盐、苯汞硼酸盐 或苯汞硝酸盐、硫柳汞、氯己定或其葡萄糖酸盐，或任意生物来源的抗生素活性化合物， 或其任意的适宜混合物。

“抗氧化剂”的例子为丁基化的羟基茴香醚(BHA)、丁基化的羟基甲苯(BHT)和二- 叔-丁基苯酚(LY178002、LY256548、HWA-131、BF-389、CI-986、PD-127443、E-51或 19、BI-L-239XX等)、叔丁基对苯二酚(TBHQ)、没食子酸丙酯(PG)、1-O-己基-2， 3，5-三甲基氢醌(HTHQ)；芳香胺(二苯胺、p-烷基硫代-o-茴香胺、乙烯二胺衍生物、 咔唑、四羟基二氢茚酮吲哚)；苯酚类和酚酸(愈创木酚、氢醌、香草醛、没食子酸及其 酯、原儿茶酸、奎宁酸、丁香酸、鞣花酸、水杨酸、去甲二氢愈创木酸(NDGA)、丁香 酚)；生育酚(包括生育酚(α、β、γ、δ)及其衍生物，如酰化生育酚(如，-醋酸盐、月 桂酸盐、肉豆蔻酸盐、棕榈酸盐、油酸盐、亚油酸盐等，或任意其他的适宜生育酚-脂酸)、 生育酚-POE-琥珀酸盐；Trolox及其相应的酰胺和硫代羧胺类似物；抗坏血酸及其盐、异 抗坏血酸、(2或3或6)-o-烷基抗坏血酸、抗坏血酸酯(例如，6-o-月桂酰基、肉豆蔻酰 基、棕榈酰基、油酰基、或亚麻油酰基-L-抗坏血酸等)。还有有用的优选氧化化合物，如 亚硫酸氢钠、偏亚硫酸氧钠、硫脲；螯合剂，如EDTA、GDTA、去铁胺(desferral)；其 他内源性防御系统，例如转铁蛋白、乳铁蛋白、铁蛋白、血浆铜蓝蛋白、结合珠蛋白、血 红素结合蛋白、白蛋白、葡萄糖、泛醇-10；酶抗氧化剂，如超氧化物歧化酶和具有类似活 性的金属复合物，包括过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶和更小的复合分子，如β-胡萝卜 素、胆红素、尿酸；黄酮类(黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、黄烷酮醇(flavanonals)、查酮(chacones)、 花青素)、N-乙酰半胱氨酸、美司钠、谷胱甘肽、硫代组氨酸衍生物、三唑；单宁酸、肉桂 酸、羟基肉桂酸及其酯(香豆酸及其酯、咖啡酸及其酯、阿魏酸、(异)绿原酸、芥子酸)； 香料提取物(例如，提取自丁香、肉桂、鼠尾草、迷迭香、肉豆蔻衣、牛至、多香果、肉 豆蔻)；鼠尾草酸、鼠尾草酚、卡松酸(carsolic)；迷迭香酸、迷迭香二酚、龙胆酸、阿 魏酸；燕麦粉提取物，如燕麦生物碱1和2；硫醚、二硫醚、亚砜、四烷基秋兰姆二硫化 物；植酸、甾体激素衍生物(例如，U74006F)；色氨酸代谢产物(例如，3-羟基犬尿氨 酸、3-羟基邻氨基苯甲酸)、和有机硫族(元素)化物。

“增稠剂”用于增加药物制剂的粘度，可以选自可药用的亲水性聚合物，如部分醚化 的纤维素衍生物，包括羧甲基-、羟乙基-、羟丙基-、羟丙基甲基-、或甲基-纤维素；完全 合成的亲水性聚合物包括聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯、聚(羟乙基)-、聚(羟丙基)-、 聚(羟丙基甲基)甲基丙烯酸酯、聚丙烯腈、甲基烯丙基磺酸、聚乙烯、聚氧乙烯、聚乙 烯乙二醇、聚乙烯乙二醇丙交酯、聚乙烯乙二醇二丙烯酸酯、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、 聚(丙基异丁烯酰胺)、聚(丙烯延胡索酸-共-乙烯乙二醇)、泊洛沙姆、聚天冬酰胺、 (肼交联)透明质酸、硅酮；天然树胶包括海藻酸盐、角叉菜胶、瓜尔胶、明胶、西黄蓍 胶、(酰胺化)果胶、黄原胶、壳聚糖胶原、琼脂糖；及其混合物和进一步的衍生物或共 聚物和/或其他药学上、或至少为生物学上的可接受聚合物。

本发明制剂还可以包括极性脂质介质。本发明制剂可以在水性介质中给药。本发明制 剂形式可以是溶液剂、悬浮剂、乳剂、乳膏剂、乳液剂、软膏剂、凝胶剂、喷雾剂、成膜 溶液或涂剂。

在一些实施方式中，本发明涉及使用如上文所述的囊泡制剂用于制备治疗与脂肪酸缺 乏、脂肪酸代谢、高甘油三酯血症和高胆固醇血症相关的病症的药物组合物。在一些实施 方式中，本发明涉及包含至少一种磷脂和至少一种表面活性剂的囊泡制剂或药物组合物， 其用于治疗与脂肪酸缺乏、脂肪酸代谢、高甘油三酯血症和高胆固醇血症相关的病症，其 中所述制剂或药物组合物被制成皮下、局部或静脉内递送的制剂。所述表面活性剂可以是 非离子的。

尽管不受任何作用机制或任何理论的限制，本发明的制剂可以形成具有适应性、可变 形性或穿透能力特征的囊泡或ESA。WO2010/140061和WO2011/022707已对本发明的囊 泡进行了描述。

实施例

参照下述实施例和附图对本发明进行了描述，其中：

图1显示了实施例2的结果，其中各图如下

a.对照对象，未经治疗。无荧光成分

b.经治疗的对象，其中所述图像被照射以显示出(红色)荧光囊泡，观察到其定位 于软骨表面，并且不存在于周围的组织和滑液中

c.与b)相同的切片，但是将其中的囊泡替换成黑白(灰)成像

d.与b)+c)相同的切片，经过DAPI染色处理以显示细胞核。可以通过细胞浓度鉴 定骨和软骨，滑液仅具有有限的细胞含量；

图2显示了表示图1的切片取自膝关节中的位置的示意图；

图3显示了在治疗3个月后WOMAC僵硬分量评分(针对镇痛剂进行了校正)相对于 基线的平均变化百分率(n＝753，ITT人群)；

图4显示了在治疗3个月后WOMAC功能分量评分(针对镇痛剂进行了校正)相对于 基线的平均变化百分率(n＝943，ITT人群)；

图5显示了在研究CL-033-III-03中在使用制剂X(n＝472)和塞来昔布(n＝233)(ITT 人群)治疗3个月后WOMAC疼痛、功能和僵硬分量评分(针对镇痛剂进行了校正)相对 于基线的平均变化百分率；

图6显示了使用制剂X治疗3周后针对疼痛和僵硬的平均VAS评分；

图7显示了DIO标记的囊泡穿透和填满取自大鼠膝关节中称为韧带结构的胶原物质的 图像；和

图8显示了标记的囊泡填满取自大鼠膝关节的胶原结构的图像。红色轮廓表示骨。

实施例1：示例性制剂

下述供局部使用的示例性制剂可以通过以下程序制备：

1.生产含有所有亲脂性辅料的有机相

通过下述程序生产有机相：将脂质、表面活性剂、任意其他亲脂性辅料在适宜容器中 称重，随后将这些成分进行目测的均向性混合，其外观为澄清溶液。在混合过程中，将有 机相加热，但温度一定不能超过45℃。

2.生产水相

通过下述程序生产水相：将非亲脂性成分和作为溶剂的水在适宜容器中称重，随后将 这些成分混合成澄清溶液。在混合过程中，将温度升高至40℃。

3.将两相组合生产浓缩中间体

在适宜容器中，将均相性有机相和澄清的水相于搅拌条件下组合。在组合前和组合过 程中，两相的温度必须保持在35℃至45℃之间。将获得的中间体在40℃条件下机械均化。 开始均化前，将生产容器中的压力降至-0.08MPa。载体通常在均化10分钟后可达到所需的 平均尺寸。

在浓缩中间体的生产过程中，必须严格控制三个工艺参数：温度、匀质器循环速率和 处理总时间。

4.通过混合浓缩中间体与稀释缓冲液制备最终批量产物。

使用稀释缓冲液稀释浓缩中间体，以获得最终目的浓度。20℃条件下在混合容器中小 心搅拌混合物至均匀。

表8列出了在转移体制剂中表面活性剂和脂质以及其他辅料的量，以其占制剂总量的 百分率表示。

实施例制剂1

制剂1包含鞘磷脂(脑)(47.944mg/g)作为脂质、吐温80(42.05mg/g)作为表面活性剂、乳 酸盐缓冲剂(pH 4)、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫酸 氢钠(.0500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙 醇(30.000mg/g)。

实施例制剂2

制剂2包括鞘磷脂(脑)(53.750mg/g)作为脂质、吐温80(31.250mg/g)作为表面活性剂、 乳酸盐缓冲剂(pH 4)、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(15.000mg/g)。

实施例制剂3

制剂3包括鞘磷脂(脑)(90.561mg/g)作为脂质、吐温80(79.439mg/g)作为表面活性剂、 乳酸盐缓冲剂(pH 4)、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂4

制剂4包括鞘磷脂(脑)(47.944mg/g)作为脂质、吐温80(42.056mg/g)作为表面活性剂、 乳酸盐缓冲剂(pH 5)、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂5

制剂5包括月桂酰基鞘磷脂(50.607mg/g)作为脂质、Brij 98(44.393mg/g)作为表面活性 剂、醋酸盐缓冲剂(pH 5)、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏 亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇 (10.000mg/g)。

实施例制剂6

制剂6包括月桂酰基鞘磷脂(90.561mg/g)作为脂质、Brij 98(79.439mg/g)作为表面活性 剂、醋酸盐缓冲剂(pH 5)、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏 亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、 以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂7

制剂7包括月桂酰基鞘磷脂(49.276mg/g)作为脂质、Brij 98(79.439mg/g)作为表面活性 剂、醋酸盐缓冲剂(pH 6.5)、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏 亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、 以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂8

制剂8包括磷脂酰胆碱和磷脂酰甘油(53.750mg/g)作为脂质、Brij 98(31.250mg/g)作为 表面活性剂、磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、 HTHQ(0.200mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、以及EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂。

实施例制剂9

制剂9包括磷脂酰胆碱和磷脂酰甘油(90.561mg/g)作为脂质、Brij 98(79.439mg/g)作为 表面活性剂、磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、HTHQ (0.200mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇 (30.000mg/g)。

实施例制剂10

制剂10包括磷脂酰胆碱和磷脂酰甘油(41.351mg/g)作为脂质、Brij 98(48.649mg/g)作为 表面活性剂、磷酸盐(pH 4)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、HTHQ (0.200mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇 (30.000mg/g)。

实施例制剂11

制剂11包括磷脂酰胆碱和磷脂酰甘油(47.882mg/g)作为脂质、Brij 98(37.118mg/g)作为 表面活性剂、磷酸盐(pH 4)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、HTHQ (0.200mg/g)作为抗氧化剂、甘油、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂12

制剂12包括磷脂酰胆碱和磷脂酰甘油(95.764mg/g)作为脂质、Brij 98(74.236mg/g)作为 表面活性剂、磷酸盐(pH 4)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、HTHQ (0.200mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇 (30.000mg/g)。

实施例制剂13

制剂13包括磷脂酰胆碱和磷脂酰肌醇(66.676mg/g)作为脂质、司盘20(24.324mg/g)作 为表面活性剂、醋酸盐(pH 5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、HTHQ (0.200mg/g)作为抗氧化剂、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(25.000mg/g)。

实施例制剂14

制剂14包括磷脂酰胆碱和磷脂酰肌醇(62.027mg/g)作为脂质、司盘20(22.973mg/g)作 为表面活性剂、醋酸盐(pH 5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、HTHQ (0.200mg/g)作为抗氧化剂、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂15

制剂15包括磷脂酰胆碱和磷脂酰肌醇(124.054mg/g)作为脂质、司盘20(45.946mg/g)作 为表面活性剂、醋酸盐(pH 5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、HTHQ (0.200mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇 (36.510mg/g)。

实施例制剂16

制剂16包括磷脂酰胆碱和磷脂酰肌醇(62.687mg/g)作为脂质、司盘20(32.313mg/g)作 为表面活性剂、醋酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、 HTHQ(0.200mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂。

实施例制剂17

制剂17包括磷脂酰胆碱和磷脂酸(41.853mg/g)作为脂质、吐温80(43.147mg/g)作为表 面活性剂、磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g) 作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂18

制剂18包括磷脂酰胆碱和磷脂酸(95.764mg/g)作为脂质、吐温80(74.236mg/g)作为表 面活性剂、磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g) 作为抗氧化剂、EDTA(3.000mg/g)、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂19

制剂19包括磷脂酰胆碱和磷脂酸(47.882mg/g)作为脂质、Brij 98和吐温80(37.118mg/g) 作为表面活性剂、磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT (0.200mg/g)作为抗氧化剂、以及EDTA(3.000mg/g)。

实施例制剂20

制剂20包括磷脂酰胆碱和磷脂酸(45.000mg/g)作为脂质、司盘20和吐温80(45.000mg/g) 作为表面活性剂、磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT (0.200mg/g)作为抗氧化剂、以及EDTA(1.000mg/g)。

实施例制剂21

制剂21包括磷脂酰胆碱(31.935mg/g)作为脂质、克列莫佛和司盘20(58.065mg/g)作为 表面活性剂、乳酸盐(pH 5)缓冲剂、硫柳汞(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHA(0.200mg/g)作为 抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(15.000mg/g)。

实施例制剂22

制剂22包括磷脂酰胆碱(42.500mg/g)作为脂质、克列莫佛和吐温80(42.500mg/g)作为 表面活性剂、乳酸盐(pH 6.5)缓冲剂、硫柳汞(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHA(0.200mg/g)作为 抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、以及EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂。

实施例制剂23

制剂23包括磷脂酰胆碱(38.276mg/g)作为脂质、克列莫佛(51.724mg/g)作为表面活性 剂、乳酸盐(pH 4)缓冲剂、硫柳汞(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHA(0.200mg/g)作为抗氧化剂、 EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(36.510mg/g)。

实施例制剂24

制剂24包括磷脂酰胆碱(42.500mg/g)作为脂质、克列莫佛(42.500mg/g)作为表面活性 剂、乳酸盐(pH 4)缓冲剂、硫柳汞(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHA(0.200mg/g)作为抗氧化剂、 EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(15.000mg/g)。

实施例制剂25

制剂25包括磷脂酰胆碱(85.000mg/g)作为脂质、克列莫佛(85.000mg/g)作为表面活性 剂、乳酸盐(pH 4)缓冲剂、硫柳汞(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHA(0.200mg/g)作为抗氧化剂、 EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂26

制剂26包括磷脂酰胆碱(38.276mg/g)作为脂质、克列莫佛(51.276mg/g)作为表面活性 剂、乳酸盐(pH 5)缓冲剂、硫柳汞(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHA(0.200mg/g)作为抗氧化剂、 以及EDTA(1.000mg/g)作为螯合剂。

实施例制剂27

制剂27包括磷脂酰胆碱(36.429mg/g)作为脂质、克列莫佛(48.571mg/g)作为表面活性 剂、乳酸盐(pH 5)缓冲剂、硫柳汞(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHA(0.200mg/g)作为抗氧化剂、 EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂28

制剂28包括磷脂酰胆碱(72.299mg/g)作为脂质、克列莫佛(97.701mg/g)作为表面活性 剂、乳酸盐(pH 5)缓冲剂、硫柳汞(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHA(0.200mg/g)作为抗氧化剂、 EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(15.000mg/g)。

实施例制剂29

制剂29包括磷脂酰乙醇胺(46.250mg/g)作为脂质、吐温80(46.250mg/g)作为表面活性 剂、磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、硫柳汞(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫酸氢 钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(20.000mg/g)。

实施例制剂30

制剂30包括磷脂酰乙醇胺(38.804mg/g)作为脂质、吐温80(46.196mg/g)作为表面活性 剂、磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、硫柳汞(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫酸氢 钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(15.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇 (30.000mg/g)。

实施例制剂31

制剂31包括磷脂酰乙醇胺(36.667mg/g)作为脂质、Brij 98和吐温80(33.333mg/g)作为 表面活性剂、磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、硫柳汞(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏 亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、 以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂32

制剂32包括磷脂酰甘油(23.333mg/g)作为脂质、克列莫佛和Brij 98(66.667mg/g)作为表 面活性剂、醋酸盐(pH 4)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g) 作为抗氧化剂、以及EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂。

实施例制剂33

制剂33包括磷脂酰甘油(45.833mg/g)作为脂质、Brij 98(41.667mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 4)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)作为抗氧 化剂、甘油(30.000mg/g)、以及EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂。

实施例制剂34

制剂34包括磷脂酰甘油(31.957mg/g)作为脂质、Brij 98(38.043mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 4)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)作为抗氧 化剂、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂35

制剂35包括磷脂酰甘油(47.143mg/g)作为脂质、Brij 98(42.857mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)作为抗氧 化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(1.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(25.000mg/g)。

实施例制剂36

制剂36包括磷脂酰甘油(96.905mg/g)作为脂质、Brij 98(88.095mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)作为抗氧 化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(20.000mg/g)。

实施例制剂37

制剂37包括磷脂酰甘油(31.957mg/g)作为脂质、Brij 98(38.043)作为表面活性剂、醋酸 盐(pH 5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)作为抗氧化剂、 EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂38

制剂38包括磷脂酰乙醇胺(35.455mg/g)作为脂质、克列莫佛(54.545mg/g)作为表面活性 剂、磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏 亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、以及EDTA(3.000mg/g)作为螯合 剂。

实施例制剂39

制剂39包括磷脂酰乙醇胺(84.457mg/g)作为脂质、克列莫佛(100.543mg/g)作为表面活 性剂、磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g) 和偏亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇 (30.000mg/g)。

实施例制剂40

制剂40包括磷脂酰乙醇胺(89.048mg/g)作为脂质、克列莫佛(80.952mg/g)作为表面活性 剂、磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏 亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、 以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂41

制剂41包括磷脂酰甘油(41.087mg/g)作为脂质、吐温80(48.913mg/g)作为表面活性剂、 丙酸盐(pH 4)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(36.510mg/g)。

实施例制剂42

制剂42包括磷脂酰甘油(45.280mg/g)作为脂质、吐温80(39.720mg/g)作为表面活性剂、 丙酸盐(pH 4)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、以及EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂。

实施例制剂43

制剂43包括磷脂酰甘油(107.500mg/g)作为脂质、吐温80(62.500mg/g)作为表面活性剂、 丙酸盐(pH 4)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂44

制剂44包括磷脂酰甘油(77.243mg/g)作为脂质、吐温80(67.757mg/g)作为表面活性剂、 丙酸盐(pH 4)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂45

制剂45包括磷脂酰甘油(45.280mg/g)作为脂质、吐温80(39.720mg/g)作为表面活性剂、 丙酸盐(pH 5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂46

制剂46包括磷脂酰甘油(90.561mg/g)作为脂质、吐温80(79.439mg/g)作为表面活性剂、 丙酸盐(pH 5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂47

制剂47包括磷脂酰甘油(47.944mg/g)作为脂质、吐温80(42.056mg/g)作为表面活性剂、 丙酸盐(pH 5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(10.000mg/g)。

实施例制剂48

制剂48包括磷脂酰丝氨酸(50.607mg/g)作为脂质、Brij 98(44.393mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 5.5)缓冲剂、硫柳汞(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫酸氢钠 (0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、以及EDTA(1.000mg/g)作为螯合剂。

实施例制剂49

制剂49包括磷脂酰丝氨酸(107.500mg/g)作为脂质、Brij 98(62.500mg/g)作为表面活性 剂、磷酸盐(pH 5.5)缓冲剂、硫柳汞(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫酸氢 钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、以及EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂。

实施例制剂50

制剂50包括磷脂酰丝氨酸(47.944mg/g)作为脂质、Brij 98(42.056mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 5.5)缓冲剂、硫柳汞(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫酸氢钠 (0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇 (30.000mg/g)。

实施例制剂51

制剂51包括磷脂酰甘油(46.364mg/g)作为脂质、Brij 98(38.636mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 4)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)作为抗氧 化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(25.000mg/g)。

实施例制剂52

制剂52包括磷脂酰甘油(46.364mg/g)作为脂质、Brij 98(38.636mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 4)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)作为抗氧 化剂、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(20.000mg/g)。

实施例制剂53

制剂53包括磷脂酰甘油(46.098mg/g)作为脂质、Brij 98(43.902mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)作为抗氧 化剂、甘油(15.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂54

制剂54包括磷脂酰甘油(43.537mg/g)作为脂质、Brij 98(41.463mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)作为抗氧 化剂、甘油(30.000mg/g)、以及EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂。

实施例制剂55

制剂55包括磷脂酰甘油(45.000mg/g)作为脂质、Brij 98(45.000mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)作为抗氧 化剂、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂56

制剂56包括磷脂酰甘油(59.492mg/g)作为脂质、Brij 98(30.508mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)作为抗氧 化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂57

制剂57包括磷脂酰甘油(39.054mg/g)作为脂质、Brij 98(45.946mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)作为抗氧 化剂、以及EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂。

实施例制剂58

制剂58包括磷脂酰甘油(35.854mg/g)作为脂质、Brij 98(34.146mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)作为抗氧 化剂、甘油(30.000mg/g)、以及EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂。

实施例制剂59

制剂59包括磷脂酰胆碱(50.000mg/g)作为脂质、吐温80(40.000mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂60

制剂60包括磷脂酰胆碱(38.571mg/g)作为脂质、吐温80(51.429mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)、以及乙醇 (30.000mg/g)。

实施例制剂61

制剂61包括磷脂酰胆碱(41.954mg/g)作为脂质、吐温80(50.546mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)、以及乙醇 (30.000mg/g)。

实施例制剂62

制剂62包括磷脂酰胆碱(42.632mg/g)作为脂质、吐温80(47.368mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂63

制剂63包括磷脂酰胆碱(46.098mg/g)作为脂质、吐温80(43.902mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂64

制剂64包括磷脂酰胆碱(39.721mg/g)作为脂质、吐温80(50.279mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂65

制剂65包括磷脂酰胆碱(44.198mg/g)作为脂质、吐温80(50.802mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂66

制剂66包括磷脂酰胆碱(46.453mg/g)作为脂质、吐温80(51.047mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂67

制剂67包括磷脂酰胆碱(51.221mg/g)作为脂质、吐温80(43.779mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂68

制剂68包括磷脂酰胆碱(54.167mg/g)作为脂质、吐温80(43.333mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂69

制剂69包括磷脂酰胆碱(66.440mg/g)作为脂质、Brij 98(23.560mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。实施例制剂69为乳剂。

实施例制剂70

制剂70包括磷脂酰胆碱(66.440mg/g)作为脂质、Brij 98(23.560mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。实施例制剂70为悬浮剂。

实施例制剂71

制剂71包括磷脂酰胆碱(66.440mg/g)作为脂质、Brij 98(23.560mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂72

制剂72包括磷脂酰胆碱(40.000mg/g)作为脂质、吐温80(50.000mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。实施例制剂72为乳剂。

实施例制剂73

制剂73包括磷脂酰胆碱(40.000mg/g)作为脂质、吐温80(50.000mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。实施例制剂73为悬浮剂。

实施例制剂74

制剂74包括磷脂酰胆碱(40.000mg/g)作为脂质、吐温80(50.000mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 5.5)缓冲剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油 (30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂75

制剂75包括磷脂酰胆碱(40.000mg/g)作为脂质、吐温80(50.000mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂76

制剂76包括磷脂酰胆碱(40.000mg/g)作为脂质、Brij 98(50.000mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯扎氯胺(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫酸氢钠 (0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇 (30.000mg/g)。

实施例制剂77

制剂77包括磷脂酰胆碱(40.000mg/g)作为脂质、吐温80(50.000mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂78

制剂78包括磷脂酰胆碱(66.440mg/g)作为脂质、Brij 98(23.560mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯扎氯胺(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫酸氢钠 (0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇 (30.000mg/g)。

实施例制剂79

制剂79包括磷脂酰胆碱(66.440mg/g)作为脂质、Brij 98(23.560mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂80

制剂80包括磷脂酰胆碱(40.000mg/g)作为脂质、吐温80(50.000mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 5.5)缓冲剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油 (30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂81

制剂81包括磷脂酰胆碱(40.000mg/g)作为脂质、吐温80(50.000mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 5.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂82

制剂82包括磷脂酰胆碱(44.444mg/g)作为脂质、吐温80(55.556mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 5.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂83

制剂83包括磷脂酰胆碱(66.440mg/g)作为脂质、吐温80(23.560mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 5.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂84

制剂84包括磷脂酰胆碱(54.000mg/g)作为脂质、吐温80(36.000mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 4)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHA(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂85

制剂85包括磷脂酰胆碱(50.000mg/g)作为脂质、吐温80(40.000mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 4)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHA(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂86

制剂86包括磷脂酰胆碱(48.611mg/g)作为脂质、吐温80(38.889mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 4)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHA(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂87

制剂87包括磷脂酰胆碱(46.575mg/g)作为脂质、吐温80(38.425mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 4)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHA(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。实施例制剂87为乳剂。

实施例制剂88

制剂88包括磷脂酰胆碱(46.575mg/g)作为脂质、吐温80(38.425mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 4)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHA(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。实施例制剂88为悬浮剂。

实施例制剂89

制剂89包括磷脂酰胆碱(46.575mg/g)作为脂质、吐温80(38.425mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 4)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂90

制剂90包括磷脂酰胆碱(50.000mg/g)作为脂质、吐温80(40.000mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 4.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂91

制剂91包括磷脂酰胆碱(94.444mg/g)作为脂质、吐温80(75.556mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 4)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂92

制剂92包括磷脂酰胆碱(46.712mg/g)作为脂质、吐温80(38.288mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 4)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂93

制剂93包括磷脂酰胆碱(48.889mg/g)作为脂质、吐温80(39.111mg/g)作为表面活性剂、 醋酸盐(pH 4)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂94

制剂94包括磷脂酰胆碱(39.721mg/g)作为脂质、吐温80(50.279mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.25mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂95

制剂95包括磷脂酰胆碱(90.000mg/g)作为脂质、磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊 金作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油 (30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂96

制剂96包括磷脂酰胆碱(68.700mg/g)作为脂质、吐温80(8.500mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 7.5)缓冲剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、苯甲醇 或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(1.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(36.51mg/g)。

实施例制剂97

制剂97包括磷脂酰胆碱(71.460mg/g)作为脂质、吐温80(4.720mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 7.5)缓冲剂、BHA(0.200mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、苯甲醇 或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、甘油(50.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(35.000mg/g)。

实施例制剂98

制剂98包括磷脂酰胆碱(71.460mg/g)作为脂质、吐温80(4.720mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 7.8)缓冲剂、BHA(0.200mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、苯甲醇 或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、甘油(15.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(35.000mg/g)。

实施例制剂99

制剂99包括磷脂酰胆碱(71.460mg/g)作为脂质、吐温80(4.720mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 7.8)缓冲剂、BHA(0.200mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油 (50.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(15.000mg/g)。

实施例制剂100

制剂100包括磷脂酰胆碱(71.460mg/g)作为脂质、吐温80(4.720mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 7.5)缓冲剂、BHA(0.200mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油 (50.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(35.000mg/g)。

实施例制剂101

制剂101包括磷脂酰胆碱(46.575mg/g)作为脂质、吐温80(38.425mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 4)缓冲剂、BHT(0.500mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.200mg/g)作为抗氧化剂、以及 EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂。实施例制剂101为乳剂。

实施例制剂102

制剂102包括磷脂酰胆碱(46.575mg/g)作为脂质、吐温80(38.425mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 4)缓冲剂、BHT(0.500mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.200mg/g)作为抗氧化剂、以及 EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂。实施例制剂102为悬浮剂。

实施例制剂103

制剂103包括磷脂酰胆碱(54.643mg/g)作为脂质、吐温80(30.357mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 4)缓冲剂、BHA(0.500mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.200mg/g)作为抗氧化剂、以及 EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂。

实施例制剂104

制剂104包括磷脂酰胆碱(39.72mg/g)作为脂质、吐温80(50.279mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.00mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)作为软化剂、EDTA(3.000mg/g)作为螯 合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂105

制剂105包括磷脂酰胆碱(90.00mg/g)作为脂质、磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊 金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘 油(30.000mg/g)作为软化剂、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂106

制剂106包括磷脂酰胆碱(46.57mg/g)作为脂质、吐温80(38.425mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 4)缓冲剂、BHT(0.500mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.200mg/g)作为抗氧化剂、以及 EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂。制剂106被制成乳剂。

实施例制剂107

制剂107包括磷脂酰胆碱(46.57mg/g)作为脂质、吐温80(38.425mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 4)缓冲剂、BHT(0.500mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.200mg/g)作为抗氧化剂、以及 EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂。制剂107被制成悬浮剂。

实施例制剂108

制剂108包括磷脂酰胆碱(54.64mg/g)作为脂质、吐温80(30.357mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 4)缓冲剂、BHA(0.500mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.200mg/g)作为抗氧化剂、EDTA (3.000mg/g)作为螯合剂。

实施例制剂109

制剂109包括磷脂酰甘油和溶血磷脂(46.364mg/g)作为脂质、Brij 98(38.636mg/g)作为 表面活性剂、醋酸盐(pH 4)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g) 作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(25.000mg/g)。

实施例制剂110

制剂110包括磷脂酰甘油和溶血磷脂(46.364mg/g)作为脂质、Brij 98(38.636mg/g)作为 表面活性剂、醋酸盐(pH 4)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g) 作为抗氧化剂、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(20.000mg/g)。

实施例制剂111

制剂111包括磷脂酰甘油和溶血磷脂(46.098mg/g)作为脂质、Brij 98(43.902mg/g)作为 表面活性剂、醋酸盐(pH 5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g) 作为抗氧化剂、甘油(15.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂112

制剂112包括磷脂酰甘油和溶血磷脂(43.537mg/g)作为脂质、Brij 98(41.463mg/g)作为 表面活性剂、醋酸盐(pH 5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g) 作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、以及EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂。

实施例制剂113

制剂113包括磷脂酰甘油和溶血磷脂(45.000mg/g)作为脂质、Brij 98(45.000mg/g)作为 表面活性剂、醋酸盐(pH 5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g) 作为抗氧化剂、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂114

制剂114包括磷脂酰甘油和溶血磷脂(59.492mg/g)作为脂质、Brij 98(30.508mg/g)作为 表面活性剂、醋酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT (0.200mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇 (30.000mg/g)。

实施例制剂115

制剂115包括磷脂酰甘油和溶血磷脂(39.054mg/g)作为脂质、Brij 98(45.946mg/g)作为 表面活性剂、醋酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT (0.200mg/g)作为抗氧化剂、以及EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂。

实施例制剂116

制剂116包括磷脂酰甘油和溶血磷脂(35.854mg/g)作为脂质、Brij 98(34.146mg/g)作为 表面活性剂、醋酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、 BHT(0.200mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、以及EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂。

实施例制剂117

制剂117包括磷脂酰胆碱和溶血磷脂(50.000mg/g)作为脂质、吐温80(40.000mg/g)作为 表面活性剂、磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT (0.200mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g) 作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂118

制剂118包括磷脂酰胆碱和溶血磷脂(38.571mg/g)作为脂质、吐温80(51.429mg/g)作为 表面活性剂、磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT (0.200mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA (3.000mg/g)、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂119

制剂119包括磷脂酰胆碱和溶血磷脂(41.954mg/g)作为磷脂、吐温80(50.546mg/g)作为 表面活性剂、磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT (0.200mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA (3.000mg/g)、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂120

制剂120包括磷脂酰胆碱和溶血磷脂(42.632mg/g)作为脂质、吐温80(47.368mg/g)作为 表面活性剂、磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT (0.200mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g) 作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂121

制剂121包括磷脂酰胆碱和溶血磷脂(46.098mg/g)作为脂质、吐温80(43.902mg/g)作为 表面活性剂、磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、 BHT(0.200mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、 EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂122

制剂122包括磷脂酰胆碱和溶血磷脂(39.721mg/g)作为脂质、吐温80(50.279mg/g)作为 表面活性剂、磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT (0.200mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g) 作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂123

制剂123包括磷脂酰胆碱和溶血磷脂(44.198mg/g)作为脂质、吐温80(50.802mg/g)作为 表面活性剂、磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT (0.200mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g) 作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂124

制剂124包括磷脂酰胆碱和溶血磷脂(46.453mg/g)作为脂质、吐温80(51.047mg/g)作为 表面活性剂、磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT (0.200mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g) 作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂125

制剂125包括磷脂酰胆碱和溶血磷脂(51.221mg/g)作为脂质、吐温80(43.779mg/g)作为 表面活性剂、磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT (0.200mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g) 作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂126

制剂126包括磷脂酰胆碱(54.167mg/g)作为脂质、吐温80(43.333mg/g)作为表面活性剂、 磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT(0.200mg/g)和偏亚硫 酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g)作为螯合剂、以及 乙醇(30.000mg/g)。

实施例制剂127

制剂127包括磷脂酰胆碱和溶血磷脂(66.440mg/g)作为脂质、Brij 98(23.560mg/g)作为 表面活性剂、磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT (0.200mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g) 作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。实施例制剂69为乳剂。

实施例制剂128

制剂128包括磷脂酰胆碱和溶血磷脂(66.440mg/g)作为脂质、Brij 98(23.560mg/g)作为 表面活性剂、磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT (0.200mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g) 作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。实施例制剂70为悬浮剂。

实施例制剂129

制剂129包括磷脂酰胆碱和溶血磷脂(66.440mg/g)作为脂质、Brij 98(23.560mg/g)作为 表面活性剂、磷酸盐(pH 6.5)缓冲剂、苯甲醇或尼泊金(5.000mg/g)作为抗菌剂、BHT (0.200mg/g)和偏亚硫酸氢钠(0.500mg/g)作为抗氧化剂、甘油(30.000mg/g)、EDTA(3.000mg/g) 作为螯合剂、以及乙醇(30.000mg/g)。

可以理解的是在不脱离本发明范围的前提下，可以对制剂中各成份的精确量进行微 调。例如，在上述各制剂中，抗菌剂的量为约1mg/g至约15mg/g、或约5mg/g至约12mg/g、 或约5.25mg/g、6mg/g、7mg/g、8mg/g、9mg/g、10mg/g或10.25mg/g。此外，抗菌剂可以 为各成份的组合，例如苯甲醇和尼泊金(例如，乙基和/或丙基)。

实施例制剂1至129还可以任选地包括增稠剂，如果胶、黄原胶、HPMC凝胶、甲基 纤维素或卡波姆。

实施例2

本实验在6周龄无毛雌性大鼠(Charles River实验室)上进行。

将DiO-标记的可变形的囊泡用于四只无毛大鼠的膝关节，剂量为每个关节10mg。待 测药物(每个膝盖10mg)每日施用2-5次，时间间隔为4小时，共使用3天。由大豆磷脂 酰胆碱(68.7mg/g)和吐温80(8.5mg/g)组成的制剂形成囊泡组分，其在水中含有荧光 物质DIO+卡波姆(12.5mg/g)+防腐剂、抗氧剂和稳定剂(816mg/g)，将所述制剂用于 关节的皮肤上并使其干燥。要特别小心以避免对皮肤造成任何机械损伤。在末次施用待测 药物后处死动物。每只动物切下一个膝盖并在Acrytol封片剂(Leica Inc.)中快速冰冻，所 述封片剂含有10％的聚乙烯醇(PVA)。如下文所述针对DIO染色和滑液中的囊泡密度数 对10μm厚的冰冻切片进行成像和分析。

将所有收集的关节组织进行冰冻切片和固定(并使用DAPI染色以进行细胞定位)。 图1和图2中记录了图像并显示了本发明制剂的囊泡的定位。

实施例3至5

使用制剂X在骨关节炎患者的膝盖上进行了六项临床试验。一个有效性指标为在研究 结束时患者关节僵硬和生理功能的感知相对于基线的变化情况。在CL-033-III-03和 CL-033-III-06两项研究中，使用两个描述僵硬严重程度的单项评估关节僵硬情况，其均使 用西安大略和麦克马斯特大学(WOMAC)骨关节炎指数(3.1版)量表僵硬分量上的11 点数字评级(NRS)测定。在全部六项研究中，生理功能测定均使用WOMAC骨关节炎指 数(3.1版)，其中包括描述在进行日常活动中的难度的17个单项。在VAS或11点数字 量表中对各项目进行评定。

CL-033-III-02、CL-033-III-03和CL-033-III-06这三项研究考察了表皮施用制剂X(4.4 g或2.2g，每日两次)或在转移体凝胶中的酮洛芬12周的有效性和安全性。CL-033-III-03 是一项活性对照研究，该研究比较了给予制剂X(4.4g或2.2g，每日两次)和塞来昔布(100 mg，每日两次)、口服安慰剂或在转移体凝胶中的酮洛芬12周。

CL-033-II-03、CL-033-III-04和CL-033-III-05这三项研究提供了针对制剂X联用方案 的附加的支持性的有效性和安全性数据。CL-033-II-03研究评估了使用制剂X(4.8g，每日 两次)联合塞来昔布(100mg，每日两次)或口服安慰剂对比在转移体凝胶中的酮洛芬进 行的6周治疗。CL-033-III-04研究比较了使用制剂X(4.95g、2.65g和1.45g，每日两次) 联合口服萘普生(500mg，每日两次)或口服安慰剂对比在转移体凝胶中的酮洛芬进行的 12周治疗。CL-033-III-05是超过52周的CL-033-III-04研究的双盲扩展性研究，在这项研 究中患者使用制剂X 4.95g联合口服萘普生(500mg，每日两次)对比在转移体凝胶中的 酮洛芬加口服安慰剂。

此处报告的有效性结果着重于单独使用制剂X的943名患者上。

“制剂X”如下所示，并且其对应于上文所述的示例性制剂96：

实施例3

在CL-033-III-03和CL-033-III-06研究中，测定了在3个月治疗期结束时单独使用制 剂X与基线相比关节僵硬的差异。753名患者的关节僵硬评级改善达43.8％(图3)(CSR CL-033-III-03；CSR CL-033-III-06)。

在评估单独使用制剂X的临床试验中，在3个月治疗期结束时，在943名患者中观察 到生理功能增强高达42.3％(图4)(CSR CL-033-III-02；Conaghan等，2012；Rother等， 2012a)。在CL-033-III-02研究中使用制剂X的患者中，近40％的患者使用EURO QoL评 估的生活质量得到改善。

在CL-033-II-03(CSR CL-033-II-03)研究中，在6周治疗期结束时，报告了单独使用 制剂X及其与塞来昔布联用使生理功能得到改善：单独使用制剂X得到的改善为10.2％， 相比之下，制剂X/塞来西布为16.6％(p＝0.01)，局部使用在转移体凝胶中的酮洛芬为 14.6％(p＝0.077)。

在CL-033-III-04研究中，在3个月后，制剂X/萘普生组和制剂X/安慰剂组均显示出 生理功能的改善(分别为41.8％和29.9％)(CSR CL-033-III-04)，并且在CL-033-III-05 研究中治疗52周后也维持了这种结果(42.3％，相比之下，局部使用在转移体凝胶中的 酮洛芬为8.6％[p＝0.05])(CSR CL-033-III-05)。在CL-033-III-04研究中，在两个含有制 剂X的研究组中还观察到在精神健康评分中(SF-36健康状况调查)有36.5％的改善。

实施例4

在CL-033-III-03研究中比较了疼痛、关节运动性和生理功能结果。已知塞来昔布 减轻OA的疼痛并且认为其是本研究中适宜的活性对照，使用其控制偏倚并 提供对照来比较制剂X的治疗作用。在CL-033-III-03研究中，患者被分配至使用塞来昔布 (100mg，每日两次)、安慰剂或活性对照(双氯芬酸)治疗6周(McKenna等，2001)。

在CL-033-III-03研究中3个月的治疗期结束时，制剂X同时减轻关节疼痛(达39.8％) 和僵硬(达35.9％)，并且改善生理功能(达37.0％)，其与口服塞来昔布的作用相当(分 别为40.4％、37.9％和38.2％)(图5)(CSR CL-033-III-03；Conaghan等，2012)。制剂 X使疼痛的减轻与口服塞来昔布相比，具有统计学意义的非劣效性，并且其与口服安慰剂 相比的优效性在程度上与塞来昔布相当(表1)。制剂X的这些应答率数据与在Bensen等 (1999)进行的大规模双盲、安慰剂对照研究中报道的针对使用口服塞来昔布治疗12周的 患者的那些(WOMAC疼痛、功能和僵硬的降低百分率分别为约30％、26％和26％[估计数 据])相比毫不逊色。这表明在CL-033-III-03研究中制剂X的有效性数据与已发表的塞来 昔布数据是一致的。

表3 在CL-033-III-03研究中使用制剂X治疗3个月后针对WOMAC疼痛和功能的效 应量(曼-惠特尼估计量)的验证性分析。预先设定的优效性基准为MW>0.5。在使用预先 设定的较低等量标准MW＝0.4的探索性和事后分析中，针对疼痛和功能对相对于塞来昔布 的非劣效性进行了检验。

LB，置信区间的下边界；MW，曼-惠特尼估计量；SD，标准偏差；WOMAC，西安 大略和麦克马斯特大学。

*表示使用基于单侧置信区间98.75％的威尔科克森-曼-惠特尼U检验计算的P-值。

**表示对优效性的检验P-值。

实施例5

对来自5项临床研究(CL-033-II-03；CL-033-III-02；CL-033-III-03；CL-033-III-04； CL-033-III-06)的WOMAC骨关节炎指数疼痛和功能分量相对于基线的变化情况的荟萃分 析结果表明，制剂X在临床研究中体现的治疗作用代表了对OA患者结果的真正改善，而 非仅仅是由于在OA中进行的介入性试验中已报道的安慰剂应答(Zhang等，2010)。

将各研究的WOMAC骨关节炎指数疼痛和功能相对于基线的变化情况标准化为0-100 级。根据在不同时间点WOMAC疼痛量表评分相对于基线变化情况的标准差计算得到前后 效应值(ES)。将结果与从Zhang等(2010)的研究中得到的数据进行比较，该研究考察 了在对198项随机的OA试验进行的荟萃分析中安慰剂应答的决定因素。

表4 通过针对使用制剂X治疗6周后WOMAC疼痛和功能适用的标准差和95％CI 评估各项研究及其荟萃分析的效应值(ITT分析，LOCF)

在使用火炬设计(ES:1.00[95％CI:0.93–1.07])进行的研究中和在具有较高(ES:1.08 [95％CI:1.00–1.17)或较低(ES:1.03[95％CI:0.95–1.11])基线疼痛严重程度的患者中均 报道了制剂X的研究与Zhang等(2010)的数据相比针对疼痛缓解情况具有更高的ES。 这些数据以及使用制剂X的ES的数量级均表明，其作用不可能仅仅是安慰剂应答的结果。

实施例6

在老年人的社区中进行了一项调查以评估当在关节炎患者中每日常规使用时制剂X的 效果，并且了解其对该制剂的益处和作用的看法。

总计招募了390名患有OA的对象以便在索引关节上对试剂X进行检测。基线特征表 明，这是一个相当标准的患有OA的个体的群体。受访者的平均年龄为65岁，85％具有合 并疾病，并且83％已报告在一个以上的关节患有OA。在入组的390名受试者的人群中， 有177名受试者的人群已完成了制剂X为期3周的治疗。在这组中，平均基线疼痛为6.85 和平均基线僵硬为5.29，其均使用10点视觉模拟评分法(VAS)测定。

在入组的390名受试者的人群中，有334名使用制剂X至少一次，并且在1、2和3 周后，分别有333、248和177名受试者仍使用制剂X。导致终止治疗的原因有很多种，包 括副作用(随后讨论)和用完了两管制剂X凝胶。

尽管要求受试者仅在一个索引关节使用该凝胶，但是有172名(51.5％)报告在一个 或更多的关节使用了该凝胶。被治疗的关节列于表5。

表5：使用制剂X治疗的关节

膝,n(％) 肘,n(％) 腕,n(％) 肩,n(％) 踝,n(％) 手指,n(％) 其他,n(％) 222(66.5) 21(6.3) 57(17.1) 59(17.7) 35(10.5) 91(27.2) 87(26.0)

在总人群中，平均基线疼痛为6.92和平均基线僵硬为5.15。这些值与已完成了3周治 疗的受试者的基线值接近(针对疼痛为6.85和针对僵硬为5.29)，这表明3周完成者代表 了整个数据集，并提供了在接受3周治疗的受试者子集中评估制剂X对疼痛和僵硬作用的 机会。

3周的治疗使平均疼痛评分降低2.13(31.1％)，使平均僵硬评分改善1.52(28.7％) (图6)。

应答者分析

在使用制剂X治疗3周后，分别有73.4％和57.1％的受试者报告在其索引关节的疼痛 中有≥1点或≥2点的改善，而分别有64.8％和46.1％的受试者报告在其索引关节的僵硬中有 ≥1点或≥2点的改善。

虽然有极少的患者报告当其开始使用时就可以见有益的效果，但超过半数(52.8％) 的患者在治疗一周后报告了≥1点的改善。

根据初始疼痛水平对应答的分析表明，在基线时具有中度或更严重疼痛的受试者中观 察到了最显著的疼痛改善(表6)。

表6：根据基线疼痛对效用的分析

在对所述制剂的反馈的分析中，97％的受访者报告，在对疼痛的作用方面，制剂X等 于或优于其他产品，而74％报告其略好或更好(表7)。类似地，对于僵硬，99％的受访 者报告制剂X等于或优于其他OA产品，而67％的受访者报告其略好或更好。

总的看来，94％的受访者报告制剂X与其他产品相比具有相同或更好的耐受性，而超 过半数的受访者报告其略好或更好。当受访者被问及与其他产品相比使用制剂X的难易程 度时，观察到了类似的模式，仅8％报告该制剂比其他产品差。

表7：受访者对于制剂X与其他OA产品相比的观点

这项观察性研究得到的积极成果充实了在制剂X的临床试验中得到的结果(实施例3 至5)，表明这种创新性的、无药治疗对于治疗与OA相关的疼痛和僵硬是有效的，并且 耐受性良好。制剂X的益处还反应在使用该产品的那些患者具有较高的患者满意度上。由 于制剂X在无需活性药物成分的情况下就能够改善OA的症状，其代表了对这种疾病的治 疗方面真正的突破，能够放心地将其广泛用于具有伴发疾病和使用伴随药物的人群中。