一种复方溶菌酶恩诺沙星注射制剂

摘要

本发明提供了一种复方溶菌酶恩诺沙星注射制剂，该制剂结合了恩诺沙星和溶菌酶两种抗菌药物，并有针对性的设计了制剂其他成分，从而实现了两种抗菌药物的优势互补。本发明注射制剂直接进入血液循环，避免了溶菌酶口服吸收差的问题。此外，由于溶菌酶属于生物源性药品，本身几乎无副作用，应用于动物体，更容易被动物体所接受，不易产生应激。同时，与溶菌酶形成复方制剂后，在使用中可降低恩诺沙星的用量，从而减少了药物残留，减轻了代谢负担，进而提升了用药安全性。

说明书

技术领域

本发明涉及兽药制剂技术领域，具体涉及一种复方溶菌酶恩诺沙星注射制剂。

背景技术

恩诺沙星化学名称为1-环丙基-6-氟-4-氧代-1,4-二氢-7-(4-乙基-1-哌嗪基)-3- 喹啉羧酸，又名乙基环丙沙星，属动物专用的第3代氟喹诺酮类抗菌药物，具有 抗菌谱广、杀菌活性强、体内分布广、抗菌作用独特、生物利用度高、毒副作用 小、无交叉耐药性等特点。恩诺沙星对大肠杆菌、沙门氏菌、布鲁氏杆菌、巴氏 杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、丹毒杆菌、链球菌等均有良好作用，对霉形体、某些 厌氧菌也有效。其抗菌作用机制是作用于细菌细胞的DNA旋转酶，干扰细菌 DNA的复制、转录和修复重组，使细菌不能正常生长繁殖而死亡。恩诺沙星内 服吸收一般较完全和迅速，肌注吸收更是完全和迅速。恩诺沙星排泄主要通过肾 脏，其次经胆汁排出。

现有技术中恩诺沙星广泛应用于细菌性疾病的治疗，但是对包括仔猪大肠杆 菌病在内的部分细菌性疾病其疗效有待提升，针对此缺陷大量研究者在恩诺沙星 单方的基础上结合其他抗菌性药物进行联用或形成复方，但是目前针对该层面的 研究仍存在两类问题：首先仍未发现一种能够与恩诺沙星药理作用形成有效互补 从而显著提升整体治疗效果的药物；此外，开发一种不影响各自药效及稳定性， 同时配比合理的复方制剂较为困难。

发明内容

本发明旨在针对现有技术的技术缺陷，提供一种复方溶菌酶恩诺沙星注射制 剂，以解决现有技术中利用单方恩诺沙星治疗部分细菌性疾病疗效不佳的技术问 题。

为实现以上技术目的，本发明采用以下技术方案：

一种复方注射剂，包括第一组分，所述第一组份是恩诺沙星或恩诺沙星的可 溶性盐，同时还包括溶菌酶。

优选的，所述第一组分中核心成分含量与溶菌酶含量的比值为1～1/3(m:m)， 所述核心成分是第一组分中恩诺沙星的含量与恩诺沙星的可溶性盐在成盐反应 中对应的恩诺沙星含量二者的总和，更优的可以是1～1/2(m:m)。

优选的，所述第一组分中核心成分含量为25～100mg/mL，所述核心成分是 第一组分中恩诺沙星的含量与恩诺沙星的可溶性盐在成盐反应中对应的恩诺沙 星含量二者的总和。

优选的，所述溶菌酶的含量为50～100mg/mL。

优选的，所述恩诺沙星可溶性盐是恩诺沙星的以下任意种盐：盐酸盐、乙酸 盐、硝酸盐、亚硝酸盐、连二硫酸盐、磷酸盐、苯甲酸盐、柠檬酸盐、延胡索酸 盐、乳酸盐、酒石酸盐。

优选的，还包括稳定剂、抑菌剂和助溶剂。在此基础上还可以进一步优选为： 所述稳定剂选自吐温80、烟酰胺、聚乙二醇400或丙二醇的其中一种，所述稳 定剂的含量为0.2～0.5mL/mL；所述抑菌剂选自苯甲醇、苯酚、甲酚、三氯叔丁 醇、苯甲酚或尼泊金的其中一种，所述抑菌剂的含量为5～20mg/mL；所述助溶 剂选自盐酸、磷酸、酒石酸、醋酸或乳酸的其中一种，所述助溶剂的含量为 0.1～0.2mL/mL。

优选的，还包括氢化可的松琥珀酸钠，所述氢化可的松琥珀酸钠的含量为 0.5～3mg/mL。

在以上技术方案中：复方注射剂中各种成分的含量均按注射液总体积计。溶 菌酶可以是各种方式生产的溶菌酶，包括从自然界的植物、动物组织中提取的， 包括但不限于从哺乳动物的组织和分泌液、鸡蛋清或鸟蛋清和微生物中提取的溶 解酶，或是采用生物工程方法制备的，如通过大肠杆菌、巴斯德毕赤酵母、霉菌、 CHO细胞等重组表达生产的人工组溶菌酶。

本发明技术方案具有以下技术优势：

1、效果显著。恩诺沙星为广谱抗生素，而溶菌酶主要对革兰氏阳性菌具有 较好的抗菌性，二者的复方制剂实现了优势互补，实践中发现本发明复方制剂的 两种有效成分具有协同作用，实现了预料不到的技术效果。

2、起效快。注射制剂直接进入血液循环，避免了溶菌酶口服吸收差的问题。

3、副作用小。溶菌酶属于生物源性药品，本身几乎无副作用，应用于动物 体，更容易被动物体所接受，不易产生应激。

4、提升了用药安全性。与溶菌酶形成复方制剂后，在使用中可降低恩诺沙 星的用量，从而减少了药物残留，减轻了代谢负担，进而提升了用药安全性。

在优选技术方案中，具体限定恩诺沙星与溶菌酶的用量比或限定恩诺沙星、 溶菌酶各自的含量是从剂量有效性和安全性角度确保二者配比及用量较为合理； 限定恩诺沙星的可溶性盐类别是考虑到上述优选例较恩诺沙星的其他盐类使用 效果更突出；限定复方注射剂中同时含有稳定剂、抑菌剂以及助溶剂是从保证产 品使用整体质量的角度确定的最优解决方案，能够有效提升制剂中各组分的稳定 性小、及贮藏时间；具体限定复方注射剂中还包括氢化可的松琥珀酸钠是在实验 中的意外发现，实验中发现在以上技术方案的基础上加入微量的氢化可的松琥珀 酸钠能够在一定程度上提升药效。

本发明复方制剂，通过有效成分药理作用的互补性，突出的的改善了原有制 剂的缺陷，有效提高该复方的疗效，可达到更好的治疗效果，尤其适用于治疗由 大肠杆菌引起的仔猪大肠杆菌病。

具体实施方式

以下将对本发明的具体实施方式进行详细描述。为了避免过多不必要的细节， 在以下实施例中对属于公知的结构或功能将不进行详细描述。

以下实施例中所使用的近似性语言可用于定量表述，表明在不改变基本功能 的情况下可允许数量有一定的变动。因此，用“大约”、“左右”等语言所修正 的数值不限于该准确数值本身。在一些实施例中，“大约”表示允许其修正的数 值在正负百分之十(10％)的范围内变化，比如，“大约100”表示的可以是90 到110之间的任何数值。此外，在“大约第一数值到第二数值”的表述中，大约 同时修正第一和第二数值两个数值。在某些情况下，近似性语言可能与测量仪器 的精度有关。

除有定义外，以下实施例中所用的技术和科学术语具有与本发明所属领域技 术人员普遍理解的相同含义。

实施例1(溶菌酶复方注射液1L量的制备)

注射用溶菌酶无菌原料50-100g，注射用恩诺沙星无菌原料25-100g，助溶 剂0.1-0.2L，稳定剂0.2-0.5L，抑菌剂5-20g，溶于40％注射用水，即0.4L中， 在配液罐中搅拌充分混合均匀，调节PH值为4.0-6.0之间，加注射用水至全量 1L，用0.45um微孔滤膜过滤至澄明，PH值、澄明度及含量合格后，每瓶10ml 分装于100瓶10mL安瓿瓶中，充氮、封口，湿热灭菌、灯检、检验，合格后成 品入库。

实施例2(溶菌酶复方注射液100L量的制备)

注射用溶菌酶无菌原料5-10kg，注射用恩诺沙星无菌原料2.5-10kg，助溶剂 10-20L,稳定剂20-50L，抑菌剂0.5-2kg，溶于40％注射用水，即40L中，搅拌至 主药充分溶解，调节PH值为4.0-6.0之间，用0.45um微孔滤膜粗滤，加注射用 水至全量100L，用搅拌器搅拌至充分混匀，再用0.22um微孔滤膜精滤后，进行 PH值、澄明度及含量的检查。将上述检验合格的半成品注射液打入管道，用安 瓿拉丝灌封机进行充氮灌封。在同一室内进行，洁净度控制在万级，装量控制在 10mL～10.3mL，每灌完一盘药后，仔细检查将不合格品挑出，堵头插牢，放入 灌封卡，整齐摆放在指定地点。灌封6h内进行湿热灭菌，灭菌后进行检漏。而 后进行产品外观质量和澄明度的检查，将不合格品挑出，成品入库。

实施例3(溶菌酶复方制剂对大肠杆菌感染猪的临床试验)

选择洁净级广西巴马小型猪，隔离饲养观察一周后，供试验用。

将确认未受大肠杆菌感染的试验猪随机分成三组，第一组为空白对照组(10 头)，第二组为攻毒对照组(10头)，第三组为攻毒治疗组(10头)。第一组为 空白对照组，不注射任何药品，隔离饲养。第二组和第三组每头猪注射大肠杆菌 菌液2ml,约含10亿个活菌。于攻毒呈现发病症状后给第三组每头肌肉注射2ml 复方溶菌酶、恩诺沙星注射剂，第二组肌肉注射生理盐水2ml。观察猪的发病和 死亡情况至第21天，结果见表1。

表1 各组试验猪的发病和死亡情况

编号 组别 发病数 死亡数 死亡率 第一组 空白对照组 0 0 0 第二组 攻毒对照组 10 8 80％ 第三组 攻毒治疗组 10 2 20％

实施例4(溶菌酶复方制剂对链球菌感染猪的临床试验)

选择洁净级广西巴马小型猪，隔离饲养观察一周后，供试验用。

将确认未受链球菌感染的试验猪随机分成三组，第一组为空白对照组(10头)， 第二组为攻毒对照组(10头)，第三组为攻毒治疗组(10头)。第一组为空白 对照组，不注射任何药品，隔离饲养。第二组和第三组每头猪均注射链球菌菌液 2ml,约含10亿个活菌。于攻毒呈现发病症状后给第三组每头肌肉注射2ml复方 溶菌酶、恩诺沙星注射剂，第二组肌肉注射生理盐水2ml。观察猪的发病和死亡 情况至第28天，结果见表2。

表2 各组试验猪的发病和死亡情况

编号 组别 发病数 死亡数 死亡率 第一组 空白对照组 0 0 0 第二组 攻毒对照组 10 8 80％ 第三组 攻毒治疗组 10 1 10％

实施例5(溶菌酶复方制剂对鸡大肠杆菌感染雏鸡的临床试验)

选择SPF，10日龄雏鸡90羽，隔离饲养观察一周后，供试验用。

将雏鸡90只随机分成三组，第一组为空白对照组(30只)，第二组为攻毒对 照组(30只)，第三组为攻毒治疗组(30只)。第一组为空白对照组，不注射 任何药品，隔离饲养。第二组和第三组每只鸡于雏鸡胸背部气囊注射大肠杆菌2 ml约含大肠杆菌活菌1亿个。于攻毒呈现发病症状后给第三组每头肌肉注射2ml 复方溶菌酶、恩诺沙星注射剂，第二组肌肉注射生理盐水2ml。观察雏鸡的发病 和死亡情况至第21天，结果见表3。

表3 各组试验雏鸡的发病和死亡情况

编号 组别 发病数 死亡数 死亡率 第一组 空白对照组 0 0 0 第二组 攻毒对照组 30 23 76.7％ 第三组 攻毒治疗组 30 4 13.3％

实施例6

一种复方注射剂，包括第一组分，所述第一组份是恩诺沙星和恩诺沙星的可 溶性盐的混合物，同时还包括溶菌酶。

在此基础上：

所述第一组分中核心成分含量与溶菌酶含量的比值为1/2(m:m)，核心成分是 指第一组分中恩诺沙星的含量与恩诺沙星的可溶性盐在成盐反应中对应的恩诺 沙星含量二者的总和。所述第一组分中核心成分含量为25mg/mL，核心成分是 指第一组分中恩诺沙星的含量与恩诺沙星的可溶性盐在成盐反应中对应的恩诺 沙星含量二者的总和。所述溶菌酶的含量为50mg/mL。所述恩诺沙星可溶性盐 是恩诺沙星的盐酸盐、硝酸盐和连二硫酸盐的混合物。

同时该复方注射剂还包括稳定剂、抑菌剂和助溶剂。所述稳定剂选自烟酰胺， 其含量为0.2mL/mL。所述抑菌剂选自苯酚，其含量为5mg/mL。所述助溶剂选 自磷酸，其含量为0.1mL/mL。

同时该复方注射剂还包括氢化可的松琥珀酸钠，其含量为0.5mg/mL。

对本实施例制备的复方注射剂验证其治疗效果：

选择SPF，10日龄雏鸡90羽，隔离饲养观察一周后，供试验用。

将雏鸡90只随机分成三组，第一组为空白对照组(30只)，第二组为攻毒对 照组(30只)，第三组为攻毒治疗组(30只)。第一组为空白对照组，不注射 任何药品，隔离饲养。第二组和第三组每只鸡于雏鸡胸背部气囊注射大肠杆菌2 ml约含大肠杆菌活菌1亿个。于攻毒呈现发病症状后给第三组每头肌肉注射2ml 复方溶菌酶、恩诺沙星注射剂，第二组肌肉注射生理盐水2ml。观察雏鸡的发病 和死亡情况至第21天，结果见表4。

表4 各组试验雏鸡的发病和死亡情况

编号 组别 发病数 死亡数 死亡率 第一组 空白对照组 0 0 0 第二组 攻毒对照组 30 25 83.3％ 第三组 攻毒治疗组 30 1 3.3％

实施例7

一种复方注射剂，包括第一组分，所述第一组份是恩诺沙星和恩诺沙星的可 溶性盐的混合物，同时还包括溶菌酶。

在此基础上：

所述第一组分中核心成分含量与溶菌酶含量的比值为1(m:m)，核心成分是 指第一组分中恩诺沙星的含量与恩诺沙星的可溶性盐在成盐反应中对应的恩诺 沙星含量二者的总和。所述第一组分中核心成分含量为100mg/mL，核心成分是 指第一组分中恩诺沙星的含量与恩诺沙星的可溶性盐在成盐反应中对应的恩诺 沙星含量二者的总和。所述溶菌酶的含量为100mg/mL。所述恩诺沙星可溶性盐 是恩诺沙星的苯甲酸盐、柠檬酸盐、延胡索酸盐和酒石酸盐的混合物。

同时该复方注射剂还包括稳定剂、抑菌剂和助溶剂。所述稳定剂选自聚乙二 醇400，其含量为0.5mL/mL。所述抑菌剂选自三氯叔丁醇，其含量为20mg/mL。 所述助溶剂选自醋酸，其含量为0.2mL/mL。

同时该复方注射剂还包括氢化可的松琥珀酸钠，其含量为2mg/mL。

实施例8

一种复方注射剂，包括第一组分，所述第一组份是恩诺沙星，同时还包括溶 菌酶。

在此基础上：

恩诺沙星与溶菌酶含量的比值为1/3(m:m)，恩诺沙星的含量为30mg/mL， 所述溶菌酶的含量为90mg/mL。

同时该复方注射剂还包括稳定剂、抑菌剂和助溶剂。所述稳定剂选自丙二醇， 其含量为0.3mL/mL。所述抑菌剂选自尼泊金，其含量为10mg/mL。所述助溶剂 选自盐酸，其含量为0.15mL/mL。

实施例9

一种复方注射剂，包括第一组分，所述第一组份是恩诺沙星的可溶性盐，同 时还包括溶菌酶。

以上对本发明的实施例进行了详细说明，但所述内容仅为本发明的较佳实施 例，并不用以限制本发明。凡在本发明的申请范围内所做的任何修改、等同替换 和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。