低剂量高低密度梯度离心法洗涤人类PESA精子的方法

摘要

低剂量高低密度梯度离心法洗涤人类PESA精子的方法，将80%密度梯度培养基0.5ml加入锥形管中，然后将40%密度梯度培养基0.5ml加在液面之上，使之液面分层清晰；充分混合附睾液标本，将0.5ml附睾液缓慢的加在40%密度梯度培养基液面上，使之液面分层清晰；离心400×g15min，优质精子将在锥形管底部沉淀；轻轻吸取出沉淀，悬浮于5mlHET培养基中，离心300×g8min以去除残留的密度梯度培养基；吸出沉淀，悬浮于3.0ml精子获能培养基中，离心300×g5min以去除残留的HTF培养基；去除上清液，留取0.5ml左右的获能液与沉淀充分混匀，置于37℃、5%CO2培养箱中代用。