一种单一抗性的大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭表达载体及其应用

摘要

本发明公开了一种单一抗性的大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭表达载体及其应用。本发明提供的枯草芽孢杆菌表达载体，包含如下元件：枯草芽孢杆菌组成型强启动子P43和编码信号肽的序列、多克隆位点、抗生素抗性基因(卡拉霉素或氯霉素)、在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中均能启动卡拉霉素或氯霉素抗性基因表达的双功能启动子序列、枯草芽孢杆菌和大肠杆菌的复制起始序列。本发明提供的表达载体既能在大肠杆菌中稳定复制，又能在枯草芽孢杆菌中稳定复制，并表达同源和外源蛋白，所有的载体均只含有一种抗性基因，质粒小于4000bp，易于基因操作和质粒转化，转化效率高，除了用于外源基因表达载体外，还可用于启动子筛选的载体和构建基因敲除载体。