一种从日本楤木叶片中提取齐墩果酸的方法

摘要

一种从日本楤木叶片中提取齐墩果酸的方法，步骤如下：将日本楤木叶片碎料加入提取液中加热到90-95℃，直至混合液体积减少到五分之一，分离提取后的液体，然后在日本楤木叶片粉料中重新加入提取液并加热到90-95℃，直至混合液体积减少到五分之一，重复上述提取过程3-4次；合并提取后的液体，冷却至室温，经滤膜过滤得到滤液；将滤液与去离子水混合，90℃水浴使乙醇挥发直至出现浅棕色浆液；将浆液用乙醚萃取,然后70℃水浴直至乙醚挥发完全，得到齐墩果酸提取物。本发明的的优点是：该从日本楤木叶片中提取齐墩果酸的方法工艺简单、耗时短、提取的效率高，检测结果表明：经3次提取、用时2小时，提取率可达到99.81%。

说明书

技术领域

 本发明涉及齐墩果酸的提取方法，特别是一种从日本楤木叶片中提取齐墩果酸的方法。

背景技术

齐墩果酸（oleanolic acid）是一种五环三萜类化合物，早在1908年，英国的 F B Powers 首次从木樨科植物橄榄( Olea europaea L)的叶中分离出齐墩果酸，并在1946年由 Ruzicka 确定了它的结构。据不完全统计，有190余种植物中含有齐墩果酸。齐墩果酸以游离态或皂苷的形式存在于植物体内，广泛分布于双子叶植物五加科、木犀科、龙胆科等多种植物中。齐墩果酸为抗肝炎药，用于治疗病毒性迁延性慢性肝炎，对症状、体征和肝功能均有明显改善作用。现代研究表明齐墩果酸具有降低谷丙转氨酶、促进细胞再生、防止肝硬化、抗炎等作用，是治疗肝炎的有效成分。其药用价值主要有：保肝护肝作用、抗癌作用、降血糖血脂作用、抗病毒及微生物作用、抗炎作用、抗衰老作用、抗溃疡作用以及对免疫系统的影响。在医学领域主要有：用于急性病毒性肝炎的治疗，用于慢性肝炎的治疗、肝硬化治疗、免疫治疗恶性肿瘤。

对楤木属植物进行齐墩果酸含量测定，结果表明在植物各个部位根皮部、茎皮部和叶片中的含量均较高。对多种中药材中的齐墩果酸的含量进行测定，结果表明，女贞子中的齐墩果酸含量最高为31.8mg/g，日本楤木叶中含量为15.2mg/g，木瓜中含量为7.14 mg/g，枇杷叶子中的含量为6.8mg/g，山楂中含量为2.2 mg/g，酸枣中含量为0.39 mg/g，赤豆含量为0.18 mg/g。由此可以看出，日本楤木叶中齐墩果酸的含量较一般植物中高，可用于大量提取。

齐墩果酸的提取方法主要有：回流提取、索氏提取、渗滤提取和冷浸提取。实验证明, 索氏提取法中齐墩果酸的提出率较其它三种方法高,且溶剂用量也较少。目前从日本楤木中提取和测定齐墩果酸的方法报道较少，且主要集中于对楤木组织中齐墩果酸的含量测定上。

因此利用索氏提取法，在提取齐墩果酸的过程中通过对提取试剂的种类、试剂的比例、提取次数、提取试剂的去除、提取液过滤的材料的选择上进行改进，以达到较高的提取的效率和纯度，为日本楤木叶片中齐墩果酸的工业化提取工艺提供依据。

发明内容

本发明的目的是针对上述技术分析，提供一种从日本楤木叶片中提取齐墩果酸的方法，该从日本楤木叶片中提取齐墩果酸的方法工艺简单、耗时短、提取的效率高。

本发明的技术方案：

一种从日本楤木叶片中提取齐墩果酸的方法，步骤如下：

1）采用展叶20天的日本楤木叶片在70℃恒温干燥箱中烘干48小时，研磨后过60目筛，得到日本楤木叶片碎料；

2）将上述日本楤木叶片碎料加入提取液中并混合均匀，然后加热到90-95℃，直至混合液体积减少到五分之一停止，分离提取后的液体，然后在日本楤木叶片粉料中重新加入提取液并加热到90-95℃，直至混合液体积减少到五分之一停止，重复上述提取过程3-4次；

3）合并提取后的液体，冷却至室温，经滤膜过滤，得到滤液；

4）将上述滤液与去离子水混合，然后90℃水浴使乙醇挥发直至出现浅棕色浆液；

5）将上述浆液用乙醚萃取,然后70℃水浴直至乙醚挥发完全，得到齐墩果酸提取物。

所述提取液为37wt%盐酸与无水乙醇的混合液，混合液中37wt%盐酸与无水乙醇的体积比为2:8；日本楤木叶片碎料与一次提取液的用量比为1g：100mL。

所述滤膜为聚酯纤维膜，膜孔径为0.22μm。

所述浆液与乙醚的体积比为1:1。

所述滤液与去离子水的体积比为4:3。

    本发明的的优点是：该从日本楤木叶片中提取齐墩果酸的方法工艺简单、耗时短、提取的效率高,检测结果表明：经3次提取、用时2小时，提取率可达到99.81%。

具体实施方式

实施例：

1）采用展叶20天的日本楤木叶片在70℃恒温干燥箱中烘干48小时，研磨后过60目筛，得到日本楤木叶片碎料；

2）将1g上述日本楤木叶片碎料加入100mL提取液中并混合均匀，然后加热到95℃，直至混合液体积减少到五分之一停止，分离提取后的液体，然后在日本楤木叶片粉料中重新加入100mL提取液并加热到95℃，直至混合液体积减少到五分之一停止，重复上述提取过程3次，所述提取液为37wt%盐酸与无水乙醇的混合液，混合液中37wt%盐酸与无水乙醇的体积比为2:8；

3）合并提取后的液体，冷却至室温，经孔径为0.22μm的聚酯纤维膜滤膜过滤，得到滤液；

4）将20mL上述滤液与15mL去离子水混合，然后90℃水浴使乙醇挥发直至出现浅棕色浆液；

5）将10mL上述浆液用10mL乙醚萃取,然后70℃水浴直至乙醚挥发完全，得到齐墩果酸提取物。

齐墩果酸提取物的检测：

将得到的200mg齐墩果酸提取物用10mL甲醇溶解定容，采用高效液相色谱进行检测，色谱柱为CoMetro KromasilC18（250×4.6mm，5μm）。

检测结果表明：齐墩果酸的纯度为84.16%，提取率为99.81%。