含有生物治疗剂和胍或胍衍生物的水性药物组合物以及包含所述组合物的注射剂

摘要

本发明涉及一种水性药物组合物，特别是适合作为注射剂，特别是玻璃体内注射剂的水性眼用组合物。所述组合物包含趋向于提高组合物的粘度的生物治疗剂(例如，特异性结合至C5蛋白质的分离的单克隆抗体)和趋向于降低组合物的粘度的胍和/或胍衍生物(例如，L-精氨酸)。

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求基于2012年5月25日提交的美国临时专利申请序列号61/651,588的优先权。

发明领域

本发明涉及一种水性药物组合物，特别是水性眼用组合物，其适合呈注射剂，特别是玻璃体内注射剂形式，所述组合物包含生物治疗剂(例如，分离的单克隆抗体，其特异性结合至C5蛋白质)，和胍和/或胍衍生物(如L-精氨酸)。

发明背景

医药行业已经开发包含生物治疗剂(如生物制剂，如单克隆抗体)的组合物多年用于治疗各种疾病。这样的生物制剂往往是相对大的分子，它们非常适合于口服递送和某些形式的肠胃外递送。然而，生物制剂对于通过注射，尤其是通过玻璃体内注射来递送可能会造成劣势。由于它们的大小，生物制剂在包含于水性组合物中时，经常赋予那些组合物相当大的粘度。进而，这样的组合物可能难以通过注射装置(例如，注射器)来施用。然而，将生物制剂注射于疾病或病症部位是非常合乎需要的。

其结果是，医药行业已投入大量资源来开发技术以降低包含生物制剂如单克隆抗体的水性组合物的粘度。虽然此行业已经成功地试图降低很多含有生物制剂的水性组合物的粘度，但是形成适用于注射，特别是玻璃体内注射的组合物可能是特别艰巨的。尤其对于玻璃体内注射，典型地需要使用非常小号的针(即，典型地至少28号并且更典型地至少30号)，以避免伤害眼睛。然而，推动粘稠的组合物穿过这样的小针是特别不合需要的，因为医生可能难以确定在所需的速率下递送组合物所使用的适当量的力。

玻璃体注射对于治疗视网膜疾病，如年龄相关性黄斑变性(AMD)是特别理想的因为通常使用注射装置(例如，具有针头的注射器)将注射剂定位于接近于视网膜的玻璃体中，所述视网膜位于眼睛后部。最近，人们已经发现，IgG1/λ同种型单克隆抗体能够延缓年龄相关黄斑变性(AMD)的进展，参见美国专利申请号20100034809，其出于所有目的以引用方式并入本文。遗憾的是，IgG1/λ同种型单克隆抗体，与许多这样的抗体一样，趋于显著提高水性组合物的粘度，使得难以用玻璃体内注射剂形式递送。

用于降低含有单克隆抗体的水性组合物的粘度的一种机制是包括能够使粘度降低的一些量的一种或多种选定的化合物。已发现精氨酸，尤其是L-精氨酸可特别有效地降低水性组合物的粘度。然而，已经表明精氨酸，尤其是L-精氨酸对于眼睛和其它人体组织可能是有毒的。参见：Retinal Toxicity of Commercial Intravitreal Tissue PasminogenActivator Solution in Cat Eyes,Charles J Hrach,MD；Mark W.Johnson,MD；Adam S.Hassan,MD；Bo Lei,MD；Paul A.Sieving,MD,Phd；Victor M.Elner MD,PhD,Arch Ophthalmol.2000；118:659-663；以及Retinal Toxicity of Recombinant Tissue Pasminogen Activator in theRabbit,Mark W.Johnson,MD；Karl R.Olsen,MD；Eleut Hernandez；W.David Irvine,MD；Robert N.Johnson,MD,Arch Ophthalmol.1990；108(2):259-263。因此，医药界，特别是眼科界避免在眼用组合物中使用如精氨酸，尤其是L-精氨酸的化合物来降低粘度。

然而，出乎意料的是，本发明的组合物的发明人已经发现，一组化合物，特别是精氨酸可以相对低的浓度使用来降低含有特定生物制剂例如单克隆抗体，特别是IgG1/λ同种型单克隆抗体的水性组合物的粘度。此外，已经发现，粘度可以充分降低以适合于注射，甚至适合于玻璃体内注射，而不损害视网膜或其它眼组织。

发明概述

因此，本发明涉及适用于注射的水性组合物。组合物包含生物治疗剂、胍和/或胍衍生物(例如，仅胍、仅胍衍生物或其组合)和水。生物治疗剂在用于形成具有水中的100mM生物治疗剂的浓度的溶液时导致溶液的粘度为至少10cp。胍衍生物具有下式：

其中：

R1为不存在、CH₃、C_nH_2n+1、C_nH_2n或C_nH_2n-1(n＝1-10)；和/或

R2为不存在或不显著减小胍鎓基团降低组合物粘度的能力的任何化学基团；并且

R1和R2不同时不存在。

胍和/或胍衍生物以至少25mM但不大于100mM的浓度存在于组合物中。此外，组合物具有的粘度不大于10厘泊，更优选不大于7厘泊。

组合物特别理想的是呈适合玻璃体内注射的水性眼用组合物形式。组合物还可以包括稳定剂如海藻糖。组合物还可以包括表面活性剂。

生物治疗剂优选地是抗体。在高度优选的实施方案中，生物治疗剂是IgG1/λ同种型抗体和/或分离的单克隆抗体，其特异性结合至C5蛋白质。

在一个优选实施方案中：

R1为不存在、CH₃、C_nH_2n+1、C_nH_2n或C_nH_2n-1(n＝1-10)；并且

R2包括胺基、氨基、酰氨基、甲氧基、烷氧基、酯、醚、羧酸或其组合。

在进一步优选的实施方案中：

R1为不存在、CH₃、C_nH_2n+1、C_nH_2n或C_nH_2n-1(n＝1-10)；并且

R2包括胺基和羧酸基团。

在又一个优选的实施方案中：

R1是C₁-C₉烷基，更优选地C₁-C₅烷基，并且甚至更优选地C₂-C₄烷基；并且

R2是NH₂COOH、NH₂CH₂CH₂SO₃H或其组合。

在又一个优选的实施方案中：

R1是C₁-C₉烷基，更优选地C₁-C₅烷基，并且甚至更优选地C₂-C₄烷基；并且

R2是NH₂COOH。

在一个高度优选的实施方案中，胍衍生物是精氨酸，尤其L-精氨酸。

组合物在含有100mg/ml的浓度的生物制剂时表现出与不含有生物制剂的基本相同组合物的粘度相比大至少3厘泊(cp)，更典型地至少5cp，甚至更典型地至少7cp的粘度。

组合物在含有50mM的浓度的胍和/或胍衍生物时将典型地表现出与不含有胍和/或胍衍生物的基本相同组合物的粘度相比低至少3厘泊(cp)，更典型地至少5cp，甚至更典型地至少7cp的粘度。

生物治疗剂具有的分子量为至少25,000道尔顿，更典型地为至少50,000道尔顿，甚至可能至少75,000道尔顿，但不大于500,000道尔顿，更典型地不大于200,000道尔顿，甚至可能不大于125,000道尔顿。

本发明还涉及如本文所述的任何实施方案中的含有水性组合物的注射器。在注射装置中，所述注射装置包括界定容纳空间的腔室和界定通道的针，并且其中所述通道与所述容纳空间流体连通，并且其中所述针为至少25号。本文所描述的任何实施方案的水性组合物被布置在所述腔室的容纳空间中。容纳空间中的组合物所具有的体积优选为至少10毫升(ml)，更典型地为至少16ml，甚至更典型地至少18ml，但典型地不大于30ml，更典型地不大于24ml，甚至更典型地不大于22ml。

本发明还涉及注射本文所述的任何实施方案的水性药物组合物的方法。所述方法包括以下步骤：

提供如本文所描述的注射剂；

将针刺入生物靶标的生物组织；并且

将组合物注射到生物靶标中。

优选地，所述生物组织是角膜、巩膜、结膜或其组合，生物靶标是眼睛，并且注射组合物的步骤包括将所述组合物注射到眼睛的玻璃体中。

附图简述

图1是显示各种不同组合物中的生物制剂的聚集的图表。

发明详述

本发明基于药物组合物，优选眼用组合物的形成，所述组合物适合于注射至哺乳动物，特别是人体内并且优选适于玻璃体内注射至哺乳动物眼睛，特别是人眼睛的玻璃体内。在狭义上，本发明涉及以下发现：低浓度的精氨酸，尤其是L-精氨酸，对于眼睛不表现出任何显著毒性，同时仍保持充分降低含有IgG1/λ同种型单克隆抗体的水性组合物的粘度的能力，从而使水性组合物适合于玻璃体内注射。在更广泛的意义上，预期本申请的发明可以一般应用于其它单克隆抗体或其它抗体或生物治疗剂(例如，生物制剂)。进一步预期除了精氨酸以外的胍和胍衍生物也可以低浓度使用以降低含有IgG1/λ同种型单克隆抗体或其它此类抗体或生物制剂的水性组合物的粘度。虽然已发现本发明的组合物对于玻璃体内注射是尤为适宜的，但是进一步预期可据此形成组合物以施用于身体的其它生物靶标(例如，肌内注射等)，只要胍和/或胍衍生物尤其精氨酸的毒性被证明为相对于生物靶标是足够低的。有利的是，本文所论述的发现不仅开启了递送本文所论述的抗体的途径，而且潜在地也开启了递送其它生物制剂的途径。

本申请的组合物的生物制剂优选地是结合抗体或抗原结合片段。生物制剂典型地以至少10毫克/毫升(mg/ml)，更典型地至少50mg/ml，甚至更典型地至少75mg/ml，还更典型地至少90mg/ml的浓度存在于组合物中。生物制剂也典型地以不大于200毫克/毫升(mg/ml)，更典型地不大于150mg/ml，甚至更典型地不大于125mg/ml，还更典型地不大于110mg/ml的浓度存在于组合物中。在这些浓度下并且尤其在100mg/ml的浓度下的含有生物制剂的本发明组合物典型地表现出与不含有生物制剂的基本相同组合物的粘度相比大至少3厘泊(cp)，更典型地至少5cp，甚至更典型地至少7cp的粘度。如本文使用，不含有生物制剂的基本相同组合物是如下组合物，这种组合物除了不存在生物制剂以外，具有完全相同浓度的本发明组合物的每一种赋形剂。因此基本相同组合物的这一定义，水不被认为是赋形剂，但是以足以使赋形剂处于合适浓度下的量存在于基本相同组合物中。下面给出的实施例的实施例2示出这样一种基本相同的组合物。此外，仅含有水中的这些浓度、特别是100mg/mL的浓度下的生物制剂的组合物典型地具有的粘度为至少10cp，更典型地为至少15cp，甚至可能为至少20或甚至22cp。

除非另有特别说明，本文中所论述的任何组合物的粘度是在20℃的温度和1029s^-1的剪切速率下、以0.5°/40mm几何形状锥形心轴来测定。

本发明的生物制剂典型地具有至少25,000道尔顿的分子量，更典型地为至少50,000道尔顿，甚至可能为至少75,000道尔顿。本发明的生物制剂也典型地具有不大于500,000道尔顿的分子量，更典型地不大于280,000道尔顿，甚至可能不大于175,000道尔顿。

在优选的实施方案中，生物制剂是分离的补体C5结合分子(例如，C5结合抗体或其抗原结合片段)。生物制剂可以是分离的抗体或其抗原结合片段，其特异性结合至C5蛋白质，其中所述抗体具有至少1×10⁷M^-1、10⁸M^-1、10⁹M^-1、10¹⁰M^-1或10¹¹M^-1的亲和力常数(K_A)。另外地或可替代地，生物制剂可以是分离的抗体或其抗原结合片段，其特异性结合至C5蛋白质，并抑制如通过体外溶血测定来测量的约20pM至约200pM的IC₅₀范围内的替代完整路径。

在优选的实施方案中，本发明的抗体是分离的单克隆抗体，其特异性结合至C5蛋白质。抗体可以是分离的人或人源化单克隆抗体，其特异性结合至C5蛋白质。抗体可另外或可替代地是分离的嵌合抗体，其特异性结合至C5蛋白质。作为进一步的附加或可替代的特征，所述抗体可包含人重链恒定区和人轻链恒定区。

抗体可以是单链抗体，其特异性结合至C5蛋白质。抗体可以是Fab片段。抗体可另外或可替代地是scFv。优选地，抗体是IgG同种型。

还预期，分离的抗体或其抗原结合片段可以包含框架，其中氨基酸被替换成来自各自人VH或VL种系序列的抗体框架。

生物制剂可包括包含核酸的载体和宿主细胞。在一个实施方案中，生物制剂包含一个或多个分离的宿主细胞，其包括，但不限于，(1)编码本发明的抗体的重链的重组DNA区段，和(2)编码本发明的抗体的轻链的第二重组DNA区段；其中所述DNA区段分别可操作地连接至第一和第二启动子，并且能够表达于所述宿主细胞中。在另一个实施方案中，生物制剂可包括包含分别编码抗体重链和轻链的重组DNA区段的分离宿主细胞，其中所述DNA区段可操作地连接至启动子，并且能够表达于所述宿主细胞中。在一些实施方案中，宿主细胞是非人哺乳动物细胞系。在一些实施方式中，所述抗体或抗原结合片段是人单克隆抗体或其抗原结合片段。

特异性结合至C5蛋白质的所需单克隆抗体或其抗原结合片段的实例在美国专利申请号20100034809中公开，其出于所有目的以引用方式并入本文。

本发明的组合物还包含胍或胍衍生物(即，包括胍鎓基团的任何分子)或其组合。这意味着组合物可以仅包括胍，仅包括胍衍生物或者包括胍和胍衍生物的组合。胍衍生物优选是根据下式：

其中：

R1为不存在、CH₃、C_nH_2n+₁、C_nH_2n或C_nH_2n-1(n＝1-10)；和/或

R2为不存在或不显著减小胍鎓基团降低组合物粘度的能力的任何化学基团；并且

R1和R2不同时不存在。

如本文所用，短语“不显著减小胍鎓基团降低组合物粘度的能力”是指相较于预定量的胍，等摩尔量的胍衍生物降低组合物的粘度至多为胍的至少70％。换句话说，如果2摩尔的胍提供于组合物中，并且相对于没有胍的组合物降低组合物的粘度10cps，那么将2摩尔的胍更换为2摩尔的胍衍生物将相对于没有胍或胍衍生物的组合物降低相同组合物的粘度至少7cps。

在一个优选实施方案中：

R1为不存在、CH₃、C_nH_2n+1、C_nH_2n或C_nH_2n-1(n＝1-10)；并且

R2包括胺基、氨基、酰氨基、甲氧基、烷氧基、酯、醚、羧酸或其组合。

在进一步优选的实施方案中：

R1为不存在、CH₃、C_nH_2n+1、C_nH_2n或C_nH_2n-1(n＝1-10)；并且

R2包括胺基和羧酸基团。

在又一个优选的实施方案中：

R1是C₁-C₉烷基，更优选地C₁-C₅烷基，并且甚至更优选地C₂-C₄烷基；并且

R2是NH₂COOH、NH₂CH₂CH₂SO₃H或其组合。

在又一个优选的实施方案中：

R1是C₁-C₉烷基，更优选地C₁-C₅烷基，并且甚至更优选地C₂-C₄烷基；并且

R2是NH₂COOH。

R1是直链烷基也是优选的。精氨酸，尤其是L-精氨酸，是用于组合物的高度优选的胍衍生物，并且也是胍衍生物和氨基酸。

已经提出了精氨酸和类似于精氨酸的化合物可能是有毒的。然而，已经有利地发现，低水平的精氨酸表现出基本上较低的毒性，甚至基本上无毒性。已经具体地发现，较低浓度的精氨酸不导致对兔子的眼睛的感光细胞的损害，而较高浓度(例如，约150mM)已经表明损害感光细胞。因此，胍和/或胍衍生物，特别是精氨酸和更特别L-精氨酸典型地以至少25mM的浓度存在于组合物中，更典型地至少35mM，甚至更典型地至少45mM。胍和/或胍衍生物，特别是精氨酸并且更特别是L-精氨酸，典型地也以不大于100mM的浓度存在于组合物中，更典型地不大于65mM，甚至更典型地为至少55mM。

有利地，即使在上述低浓度下，胍和/或胍衍生物(如L-精氨酸)可以大大减少通过将生物制剂包含于组合物中所产生的组合物的粘度。在上述浓度下并且尤其在50mM的浓度下含有胍和/或胍衍生物的本发明组合物典型地表现出与不含有胍和/或胍衍生物的基本相同组合物的粘度相比低至少3厘泊(cp)，更典型地至少5cp，甚至更典型地至少7cp的粘度。如本文使用，不含有胍和/或胍衍生物的基本相同组合物是如下组合物，这种组合物除了不存在胍和/或胍衍生物以外，具有完全相同浓度的本发明组合物的每一种赋形剂和生物制剂。因此基本相同组合物的这一定义，水不被认为是赋形剂，但是以足以使赋形剂和生物制剂处于合适浓度下的量存在于基本相同组合物中。下面给出的实施例的实施例3示出这样一种基本相同的组合物。

本发明的组合物还典型地包括蛋白质稳定剂，但是除非特别说明，否则不一定需要所述蛋白质稳定剂。潜在的蛋白稳定剂的实例包括但不限于甘露糖醇、氯化钠、甘氨酸和海藻糖。在一个优选的实施方案中，所述蛋白质稳定剂是海藻糖或基本上由海藻糖组成。当包括在内时，蛋白质稳定剂典型地以至少50mM的浓度存在于组合物中，更典型地至少80mM，甚至更典型地至少110mM。当包括在内时，蛋白质稳定剂也典型地以不大于250mM的浓度存在于组合物中，更典型地不大于175mM，甚至更典型地不大于130mM。

本发明的组合物还典型地包括表面活性剂，但是除非特别说明，否则不一定需要所述表面活性剂。表面活性剂可以包括非离子型、阴离子型、阳离子型或两性或两性离子型表面活性剂或这些表面活性剂的组合。潜在合适的表面活性剂的实例包括但不限于脂肪醇醚和/或聚氧乙烯烷基醚如聚乙二醇醚如聚西托醇1000、聚氧乙烯蓖麻油衍生物、聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯例如市售的聚氧乙烯硬脂酸酯、聚山梨醇酯、泊洛沙姆、环糊精、其组合或类似物。聚山梨醇酯20是特别优选的表面活性剂。当包括在内时，表面活性剂典型地以至少0.001w/v％的浓度存在于组合物中，更典型地至少0.005w/v％，甚至更典型地至少0.009w/v％。当包括在内时，蛋白质稳定剂也典型地以不大于0.1w/v％的浓度存在于组合物中，更典型地不大于0.05w/v％，甚至更典型地不大于0.015w/v％。

本发明的组合物还典型地包括缓冲剂，但是除非特别说明，否则不一定需要所述缓冲剂。潜在合适的缓冲剂的实例包括但不限于磷酸钠、柠檬酸盐和组氨酸。组氨酸是特别优选的缓冲剂。当包括在内时，缓冲剂典型地以至少2mM的浓度存在于组合物中，更典型地至少7mM，甚至更典型地至少9mM。当包括在内时，缓冲剂是也典型地以不大于30mM的浓度存在于组合物中，更典型地不大于15mM，甚至更典型地不大于11mM。

附加成分

各种另外的成分可以包含在本发明的组合物中。本发明的组合物典型地为水溶液，典型地包含大量(例如，至少60或90w/v％)的水。

作为本发明的一个特殊的优点，已经发现，胍和/或胍衍生物，尤其是精氨酸，可以减少生物制剂的聚集，尤其是特异性结合至C5蛋白质的分离单克隆抗体的聚集。还有利地发现，胍和/或胍衍生物(如L-精氨酸)和生物制剂(例如，特异性结合至C5蛋白质的分离单克隆抗体)可在本发明的组合物中组合以基本上降低组合物的粘度，尤其是在较低的pH值下。组合物的粘度典型地为至少2cp、更典型地至少3cp、甚至更典型地为至少4cp。组合物的粘度也典型地不大于10cp、更典型地不大于7.5cp、甚至更典型地不大于6cp或甚至5.5cp。组合物的pH值典型地为至少3，更典型地至少4，甚至更典型地至少5.2。组合物的粘度也典型地不大于8、更典型地不大于6.5、甚至更典型地不大于5.9或甚至5.7。

通过提供这种降低的粘度，所述组合物可以更容易地通过注射装置，特别是通过相对小号针头来施用。如本文所用，术语“小号针”是指设计成穿透并且插入生物组织例如皮肤或眼组织(例如，角膜、巩膜和/或结膜组织)的任何细长的管状构件。此外，如本文所使用的术语“号”用来指注射器针头的常用数值针号系统的内径和外径。有利地，本发明的组合物可以通过具有至少27、更典型地至少28、还更典型地至少29或30、甚至可能至少31的针号的小号针来注入。作为另一个优点，使用这样的小号针的能力允许更理想地玻璃体内注射本发明的组合物来治疗视网膜疾病，如年龄相关性黄斑变性。

因此，本发明还涉及治疗疾病的方法。因此，典型地提供具有界定与小号针的通道流体连通的容纳空间的腔室的注射装置(例如注射器)。向容纳空间载入或以其它方式填充本发明的组合物。然后，注射装置可以用于将组合物递送至生物靶标。优选地，小号针被用来刺穿生物靶标的组织，随后将组合物注射至靶标。如所提出，组合物可特别适合地被注射至眼睛。因此，在一个优选实施方案中，生物靶标是眼睛，通过针头刺穿的组织是角膜、结膜、巩膜或其组合并且组合物注射到眼睛的玻璃体中。

注射体积典型地是至少10微升(μl)，更典型地至少35μl，甚至更典型地至少45μl。注射体积也典型地不大于100μl，更典型地不大于75μl，甚至更典型地不大于60μl。

申请人特别地将所有引用的参考文献的全部内容并入本公开中。此外，当数量、浓度或其它值或参数以范围、优选范围或上限优选值和下限优选值的列表给出时，这应理解为具体公开了由任何成对的任何范围上限或优选值和任何范围下限或优选值形成的所有范围，无论是否范围单独公开。当在本文中叙述数值范围时，除非另有说明，否则范围意欲包括其端点，以及范围内的所有整数和分数。不希望本发明的范围限制于定义范围时列举的具体数值。

通过考虑本说明书和本文所述的本发明的实践，本发明的其它实施方案对于本领域技术人员将是明显的。本说明书和实例意图仅被视为示例性的，并且本发明的真实范围和精神由以下权利要求书和其等效物来指出。

实施例

实施例1

上表1是根据本发明的一种示例性乳液的制剂。

表1

应了解，表I中的浓度可以这些浓度的±10％、±20％、±30％、±90％或更多来变化，而且这些偏差可以特定地用于产生本发明组合物的成分的范围。例如，偏差为±20％的10mM浓度的成分意味着成分可具有8至12mM的浓度范围。

实施例2

如上所论述的，含有特定浓度的生物制剂的本发明组合物展示与不含有生物制剂的基本相同组合物的粘度相比更大的粘度。为了示例的目的，下表2示出了根据本发明的组合物和不包含生物制剂的基本相同组合物。

表2

成分本发明的制剂基本相同的制剂生物制剂100mg/ml0.000mg/ml精氨酸10.5mg/ml10.5mg/ml聚山梨醇酯0.1mg/ml0.1mg/mlNaOH0.5mg/ml0.5mg/ml海藻糖45.4mg/ml45.4mg/ml水适量到1ml适量到1ml

实施例3

如上所论述的，含有特定浓度的胍和/或胍衍生物的本发明组合物将表现出与不含有胍和/或胍衍生物的基本相同组合物的粘度相比更低的粘度。为了示例的目的，下表3示出了根据本发明的组合物，和不含有胍和/或胍衍生物的基本相同组合物。

表3

成分本发明的制剂基本相同的制剂生物制剂100mg/ml100mg/ml精氨酸10.5mg/ml0.0mg/ml聚山梨醇酯0.1mg/ml0.1mg/mlNaOH0.5mg/ml0.5mg/ml海藻糖45.4mg/ml45.4mg/ml水适量到1ml适量到1ml

实施例4

提供下表4以说明根据本发明相对低浓度的胍和/或胍衍生物、L-精氨酸对于包含生物制剂的制剂的作用。表4的制剂1至13中的特定生物制剂是特异性结合至C5蛋白质的分离单克隆抗体。

如可以看到的，即使相对低浓度的精氨酸可以显著降低含有生物制剂的组合物的粘度。如所提出，胍和/或胍衍生物，特别是精氨酸可降低生物制剂的聚集。参考图1，可以看出，具有精氨酸的制剂(即，制剂2、3、5、6、9、10、12和13)表现出显著减少的聚集。对于图1，t＝0是时间等于零，摇动是摇动后的测量，F/T是经过冷冻/解冻循环后的测量，并且40℃6w是在40℃下存储6周后的测量。

对比数据

下表5呈现比较数据，其示出相对于在现有技术中用于降低粘度的其它化学实体的能力，胍和胍衍生物减少生物制剂的粘度的能力。

表5

如可以看到的，精氨酸和胍在降低生物制剂(即，IgG1/λ同种型单克隆抗体)的粘度方面远优于海藻糖、尿素和牛磺酸。

毒性数据

进行研究以确定在玻璃体内施用至新西兰白兔历时4周之后，含有精氨酸的配制缓冲液的毒性。具有50μl体积并且精氨酸的浓度发生变化的三个缓冲液每周进行玻璃体内注射历时3周(即，三个剂量)，并且评价毒性。三个缓冲液如下：(1)10mM组氨酸，170mM海藻糖，0.01％聚山梨醇酯20，pH值5.5；(2)50mM精氨酸，10mM组氨酸，120mM海藻糖，0.01％聚山梨醇酯20，pH值5.5；和(3)150mM精氨酸，10mM组氨酸，0.01％聚山梨醇酯)。在6只动物中，含有精氨酸150mM的缓冲液在4只动物中显示双侧或单侧的视网膜退化/萎缩。最小变化以感光层的局灶性或多灶性损失为特征，而在更严重的情况下，其它各层都受到影响，从而导致视网膜的萎缩。含有50mM精氨酸的缓冲液的玻璃体内施用可很好地被耐受，并且没有眼睛毒性的指示。

进行一项研究，其中将以下制剂：抗体，50mM精氨酸；10mM组氨酸；120mM海藻糖，0.01％聚山梨醇酯20，pH 5.5玻璃体内施用于食蟹猴历时至少26周。将制剂每两周一次施用于两只眼睛(50μL/眼晴)历时26周(14个剂量)。基于这项研究的结果，制剂以高达5mg/眼晴的重复给药来玻璃体内施用至食蟹猴可很好地被耐受，并且没有测试制品毒性的指示。