核酸酶放大的高灵敏电化学免疫分析方法

摘要

本发明涉及一种核酸酶放大的高灵敏电化学免疫分析方法。通过Au-S键合作用，在金电极表面自组装亚甲基蓝(MB)标记的发夹DNA，构成电化学免疫传感界面。以Mg2+、DNA1-抗体1、DNA2-抗体2、DNA3-抗体3的混合溶液为检测液，在目标蛋白质存在时，抗体1、抗体2、抗体3同时识别目标蛋白质形成免疫复合物，使得DNA1、DNA2与DNA3相互靠近进行邻位杂交，形成Mg2+依赖性核酸酶，进而催化裂解传感界面上的发夹DNA，导致MB脱离电极表面，氧化电流减小。通过检测MB电流的变化，实现对目标蛋白质浓度的测定。该免疫分析方法利用三个DNA-抗体偶合物邻位形成核酸酶放大检测信号，提高了检测灵敏度和选择性，同时可对目标蛋白质进行快速、一步化检测，具有很好的临床应用价值。