一种单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法

摘要

本发明公开了一种单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法，是以长日照单瓣矮牵牛品种的种子为外植体，进行灭菌处理，并置于MS培养基中表面进行发芽，待成苗后，剪切带2-3片真叶的茎段插入继代培养基中持续继代培养，再从继代苗中剪切带4-6片真叶的茎尖接种于花芽培养基，通过培养环境诱导产生花芽、绽放，最终形成试管花卉。本发明的有益效果为：通过组织培养技术，人工控制其在试管中的株形大小、花芽诱导、花芽绽放、最终获得试管花卉，该试管花卉具有花色丰富，花期持续一个月，且可以连续开花特性，该制作方法简单、可靠，具备生产的实用性，可丰富试管花卉新品种。

说明书

技术领域

本发明涉及植物组织培养领域，具体涉及一种单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法。

背景技术

利用花卉植物美化环境是人类对舒适生活的追求方式，随着人们对欣赏花卉的的需求不断提升，市场上出 现了试管花卉，因其植株小，培养在精致的玻璃瓶内而出名，它是利用组织培养技术将植物小型化培养在 无菌的玻璃瓶中，外形较为美观的试管玻璃瓶为瓶中植物提供生长空间。接种植物在狭小空间中生长并开 花，试管花卉具有无需施肥管理，观赏花期长等优点，受都市人群欢迎，也称作“迷你花卉”。2004年， 韩国培育成功的“手指玫瑰”是试管花卉成功的典型代表，该品种不仅东南亚国家非常流行，而且远销欧 洲等国家。由于在试管内的诱导开花，难度较大，开花不稳定，目前已报道的试管花卉产品有花色单一、 制作复杂等诸多缺点，因此，试管花卉产业需要持续开发新的产品，以解决上述遇到的难点，满足市场需 要。

矮牵牛，碧冬茄属。又称碧冬茄。多年生草本，常作一二年生栽培，高20-45厘米；茎匍地生长，被 有粘质柔毛；叶质柔软，卵形，全缘，互生，上部叶对生；花单生，呈漏斗状，花朵颜色丰富，非常美丽， 耐寒，花期极长，可开花4月至降霜，且耐寒，大部分矮牵牛属于长日照植物，即长日照可诱导开花，由 于矮牵牛花色丰富，及生长的广泛适应性，因此，单瓣矮牵牛试管花卉开发对试管花卉产业发展具有建设 意义。胡惠蓉在权威期刊《园艺学报》上已阐明光照16hr/d,可诱导矮牵牛产生花芽，该结果为探索矮牵 牛生长习性，也是本专利内容中利用矮牵牛生长习性结合组织培养制作试管花卉的主要依据； CN102499091A公开了一种通过花药培养获得矮牵牛再生植株的方法，该方法通过对矮牵牛花蕾进行处理， 放置于诱导愈伤组织培养基中培养，愈伤培养基中培养得到愈伤组织转接到分化培养基中，分化出不定芽， 所得的不定芽达到3-5厘米时停止分化，将培养的不定芽培养在生根培养基中得到植株。该方法以花蕾为 外植体进行愈伤分化得到再生植株，不能得到试管花卉。CN101578961A公开了一种矮牵牛体细胞自然突变 个体组培快繁方法，其技术要点是在特别配置的培养基中培养忠明显得到增长且分化出小芽，将小芽接种 到诱导生根的培养基中，待小芽生长生根后驯化两周移栽到人工基质，一周后移至温室栽种。该方法旨在 克服矮牵牛自花不育及扦插难发根的优良性状保存问题，并最终进行盆栽，该方法不能得到试管花卉。

综上所述，目前矮牵牛试管花卉的制作方法在现有的技术中未见报道。

发明内容

本发明的目的就是针对上述现有技术中的缺陷，提供了可在培养瓶中连续开花且花色种类丰富的单瓣 矮牵牛试管花卉的培养方法。

为了实现上述目的，本发明提供的技术方案为：一种单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法，是以长日照矮 牵牛种子为外植体，进行灭菌处理后，置于MS培养基-表面进行发芽，待成苗后，剪切带2-3片真叶的茎 段插入继代培养基中持续继代培养，再从继代苗中剪切带4-6片真叶的茎尖接种于花芽培养基，调整培养 环境，诱导花芽并生长绽放，形成试管花卉。

进一步的，上述的一种单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法，所述单瓣矮牵牛种子外植体的灭菌方法是： 先用体积百分浓度为75％的酒精灭菌1min后，以无菌水冲洗，再以质量百分浓度为0.1％的氯化汞溶液震 荡灭菌5-9min，最后以无菌水反复冲洗四次。

进一步的，上述的一种单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法，所述置于MS培养基表面进行发芽的培养环 境为温度为18-25℃，光照强度为2000lx，光周期为10hrs/d。

进一步的，上述的一种单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法，所述组织培养继代培养基的组成为1/2MS-MS 培养基、琼脂5g/L、白砂糖30g/L、PH值5.8-6.2；继代培养温度为18-25℃，光照强度为2000lx，光周 期为10hrs/d。

进一步的，上述的一种单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法，所述花芽培养基的组成为：MS培养基、琼脂 5g/L、白砂糖38-40g/L、PH值5.8-6.2，花芽培养温度为22-28℃，光照强度为3000lx-24000lx，光周 期为15-16hrs/d，培养时间为1-3周。

进一步的，上述的一种单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法，所述试管花卉采用的玻璃培养瓶的大小大于 7cm×13cm；所述玻璃培养瓶瓶口需包装有透气膜。

本发明的有益效果为：本发明提供的一种单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法，通过组织培养技术，人工 控制其在试管中的株形大小、花芽诱导、花芽绽放、最终获得试管花卉，该试管花卉具有花色丰富，花期 持续一个月，且可以连续开花特性，该制作方法简单、可靠，具备生产的实用性，可丰富试管花卉新品种。

附图说明

图1为以本发明提供的单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法培养的花芽诱导结果。

图2为以本发明提供的单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法培养的试管花卉形成前期(剪切花芽及携带4～6 片真叶茎节的接种)。

图3为以本发明提供的单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法培养的连续开花结果。

图4为以本发明提供的单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法培养的多花色单瓣矮牵牛试管花卉品种实例(图中 从左至右，前三瓶花朵颜色为粉红脉纹、第四瓶花朵颜色为紫红、第五瓶花朵颜色为红色，其中不同花色 为不同矮牵牛品种)。

具体实施方式

实施例1：

一种单瓣矮牵牛试管花卉的培养方法，具体操作过程如下：

1、在市场上购得“梦幻”粉红脉纹品种的矮牵牛种子；

2、外置体灭菌发芽：

带无菌手套数取40～50粒矮牵牛种子放置于无菌三角瓶中，倒入75％酒精30ml，振荡灭菌1min，倒 出酒精废液，加入无菌水50ml冲洗，倒出废水，加入0.1％氯化汞溶液50ml震荡灭菌5-7min，倒出氯化 汞废液，加入无菌水100ml振荡冲洗，反复四次，倒出最终废液后，利用镊子将灭菌后的种子放置于MS 培养基表面发芽，培养温度22-24℃，光照强度2000lx,光周期10hrs/d(种子极小，需要精细操作，倒出 残液时，可转瓶，将漂浮种子荡在瓶面上吸附)；

3、继代培养：

待发芽生长至成苗后，剪切带2～3片真叶的茎段扦插于MS培养基，琼脂5g/L、白砂糖30g/L，PH值 5.8-6.2的培养基中生长。培养温度18～25℃，光照强度2000LX,光周期10hrs/d，可反复继代快繁。

4、花芽培养：

剪切无菌成苗带4～6片真叶的茎尖接种于花芽培养基培养花芽，花芽培养基为：MS培养基、琼脂5g/L、 白砂糖35g/L、PH值5.8-6.2，光照强度18000lx，光周期16hrs/d，温度25℃，用“振泰”品牌透气膜 包瓶，三周内，可产生花芽。

剪切花芽及携带4～6片真叶的茎节扦插于MS培养基中，其中琼脂5g/L、白砂糖40g/L、PH值5.8-6.2， 获得试管花卉，在光照强度18000lx，光周期16hrs/d，温度25℃下生长绽放。

最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施 例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方 案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、 等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。