出芽短梗霉苹果酰辅酶A连接酶及其重组表达载体和应用

摘要

本发明公开了出芽短梗霉苹果酰辅酶A连接酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO.10所示，含有439位氨基酸，cDNA序列如SEQ ID NO.9所示，基因组序列如SEQ ID NO.8所示，将cDNA序列经重组表达后能够获得分子量约为68kDa的重组蛋白，经酶学性质检测发现，重组表达的苹果酰辅酶A连接酶的活性为0.176U，最适反应温度为25℃，最适pH为8.0，最适ATP底物浓度为0.2mM，并且具有较广的底物选择性，可以催化不同单体苹果酸、草酸、草酰乙酸、琥珀酸、柠檬酸、丁酸或丙二酸反应，并提高聚苹果酸的产量。