胍丁胺用于制备治疗创伤后免疫功能低下药物的用途

摘要

本发明涉及胍丁胺在制备用于预防和/或治疗创伤后免疫功能低下的药物中用途。本发明通过小鼠实验，采用腹膜内给药途径，在创伤模型中观察证实胍丁胺具有治疗创伤后免疫功能低下的作用。

说明书

发明领域

本发明涉及医药领域，特别涉及胍丁胺用于制备治疗创伤后免疫功能低下药物的用途。

背景技术

众所周知，在严重创伤、感染所致系统性炎症反应综合征（systemic inflammatory response syndrome, SIRS）、脓毒症、多器官功能障碍综合征（multiple organ dysfunction syndrome, MODS）的病理进程中，机体的免疫功能紊乱扮演了重要角色。其功能障碍一方面表现为炎性细胞过度活化并大量释放炎症介质，另一方面表现为抗原呈递细胞对病原微生物、凋亡/坏死细胞清除能力降低，同时T细胞介导的抗感染免疫功能受到抑制。目前的临床治疗措施要么顾及了前者但加剧了后者（如传统的甾类、非甾类抗炎药物）或顾及了后者但加剧了前者（如干扰素γ），尽管可采取免疫增强剂与抗炎药物联用策略（如胸腺肽+乌司他丁），但其疗效亟待提高。故寻求既具有免疫增强作用，又具备抗炎活性的药物则成为国内外学者探索的热点与难点。

胍丁胺是一已知化合物，其化学名称为4-胍基-丁胺硫酸盐，线性分子式为H2N(CH2)4NHC(=NH)NH2·H2SO4，分子量为228.27，并具有下面结构

或者

 

胍丁胺是近年来发现的一种生物胺类，广泛存在于哺乳动物体内并以肝脏含量最为丰富，在体内由精氨酸经过精氨酸脱羧酶转化生成。其在生物体内发挥着诸多生理效应，如在神经系统有神经保护、抗焦虑、抗抑郁、镇痛的作用，在心血管系统有抗平滑肌痉挛、抗粥样斑块形成的效果，在泌尿系统则有促进肾脏血液循环、保护肾小球的功能。此外还有降血糖、戒毒及抗炎作用。

发明内容

本发明的目的是提供一种既具有免疫增强作用，又具备抗炎活性的药物，该药物可用于逆转创伤后免疫功能低下。

本发明的技术方案是：

胍丁胺在制备用于预防和/或治疗创伤后免疫功能低下的药物中用途。

用胍丁胺制备的药物以注射剂或输液剂给药。

用胍丁胺制备的药物用药量为每公斤体重每天100mg或每公斤体重每天200mg或每公斤体重每天400mg。

本发明所述药物为胍丁胺单独或以药物组合物形式，使用非肠道给药剂型通过皮下、肌肉、腹膜内给药的注射剂或滴注等。所述药物通过可提高创伤模型动物的免疫功能，进而提高模型动物对后续细菌内毒素攻击的耐受性。

所述胍丁胺可以采用药物组合物用于治疗创伤后免疫功能低下，其包括治疗创伤后免疫功能低下的有效量的胍丁胺及药用载体或赋形剂。

所述胍丁胺可单独或也可以药物组合物形式使用并可通过口服或局部途径给予。如：以药物组合物的口服剂型可为片剂、胶囊、溶液或悬浮液等；其局部给药剂型可是贴剂、软膏等。

根据本发明，胍丁胺的给药剂量取决于多种因素如性别、年龄、体重、创伤严重程度或给药途径并有临床医师判断。发明人通过小鼠实验，采用腹膜内给药途径，在创伤模型中观察证实胍丁胺具有治疗创伤后免疫功能低下的作用。胍丁胺用量分为每公斤体重每天100mg、每公斤体重每天200mg、每公斤体重每天400mg低、中、高三个浓度，便于观察药物的量效关系。经试验验证，上述剂量均为胍丁胺有效剂量。

胍丁胺作为一种已知化合物可通过本领域已知方法制备或从市场上获得。

本说明书中术语“创伤”是指机械性致伤因素作用于机体所造成组织结构完整性破坏或功能障碍。“免疫功能”是指机体识别和排除抗原性异物的一种功能，其目的是维持机体的生理平衡。

下面的试验实施例是对本发明的进一步详细说明但不意味着对本发明的限制。

附图说明

图1为胍丁胺对创伤小鼠脾细胞增殖能力的影响，Con A（2.5μg/ml）刺激脾细胞48h，MTT法检测增殖能力；

图2a为胍丁胺对创伤小鼠脾细胞分泌IFN-γ的影响;图2b为胍丁胺对创伤小鼠脾细胞分泌IL-2的影响，图2a、图2b采用Con A（2.5μg/ml）刺激脾细胞48h，ELISA法检测分泌功能；

图3 a为胍丁胺对创伤小鼠脾巨噬细胞分泌TNF-α功能的影响; 图3b为胍丁胺对创伤小鼠脾巨噬细胞分泌IL-6功能的影响;图3a、图3b采用LPS（10μg/ml）刺激脾巨噬细胞24h，ELISA法检测分泌功能；

图4 a为胍丁胺对创伤小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α的影响，图4b为胍丁胺对创伤小鼠脾巨噬细胞分泌IL-6的影响;图4a、图4b采用LPS（10μg/ml）刺激腹腔巨噬细胞24h，ELISA法检测分泌功能；

图5为胍丁胺对创伤小鼠LPS攻击后死亡率的影响。

具体实施方式

本实施例实验所用胍丁胺购自美国Sigma公司；

本实施例其它试剂为市售的分析纯试剂；

实验动物为C57BL/6小鼠，随机地将实验小鼠分为以下五组（每组8只）：①对照组：小鼠腹膜后注射无菌生理盐水0.6ml；②创伤组：实施双后肢股骨骨折合并眼眶放血40%，构建严重创伤失血模型，伤后立即在腹膜后注射无菌生理盐水0.6ml；③创伤+胍丁胺低剂量治疗组：致伤模型同创伤组，伤后立即在腹膜后注射胍丁胺100mg/kg（溶解于0.6ml生理盐水中）；④创伤+胍丁胺中剂量治疗组：致伤模型同创伤组，伤后立即在腹膜后注射胍丁胺200mg/kg（溶解于0.6ml生理盐水中）；⑤创伤+胍丁胺高剂量治疗组：致伤模型同创伤组，伤后立即在腹膜后注射胍丁胺400mg/kg（溶解于0.6ml生理盐水中）。各组于24小时取材检测相关指标。

实施例1 胍丁胺对创伤小鼠脾细胞功能低下的纠正作用

对C57BL/6小鼠实施双后肢股骨骨折合并眼眶放血40%，构建严重创伤失血模型。相比对照组，严重创伤后小鼠免疫功能抑制，表现为脾细胞增殖能力明显降低，分泌干扰素γ（IFN-γ）和白细胞介素2（IL-2）明显减少。

对严重创伤小鼠腹膜后给予胍丁胺，致伤后立即给予100mg/kg、200mg/kg和400mg/kg胍丁胺治疗（每天一次，治疗时间为1天），治疗后，显著地改善严重创伤所致免疫抑制，表现为剂量依赖性的增强脾细胞增殖及分泌IFN-γ和IL-2的能力（参见图1、2）。 

实施例2 胍丁胺对创伤小鼠脾巨噬细胞和腹腔巨噬细胞分泌功能的影响

创伤小鼠的模型制备及胍丁胺治疗同实施例1。

相比对照组，严重创伤小鼠脾巨噬细胞和腹腔巨噬细胞在体外经内毒素（LPS）刺激分泌的肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）明显降低，采用胍丁胺（100mg/kg、200mg/kg和400mg/kg）治疗（每天一次，治疗时间为1天），治疗后，可显著上调创伤小鼠脾巨噬细胞和腹腔巨噬细胞的分泌功能（参见图3、4）。

实施例3 胍丁胺对创伤小鼠LPS攻击后死亡率的影响

创伤小鼠模型同实施例1。对严重创伤小鼠腹膜后给予胍丁胺（致伤后立即给予100mg/kg、200mg/kg和400mg/kg）治疗（每天一次，治疗时间为1天），伤后24小时进行LPS攻击（LPS 25mg/kg，腹膜后注射），同时追加给予胍丁胺（400mg/kg，腹膜后注射）治疗（每天一次，治疗时间为1天）。结果显示，相比于单纯LPS攻击组，严重创伤能明显提高LPS攻击模型小鼠死亡率（创伤+LPS vs LPS，80% vs 20%），创伤后立即进行胍丁胺干预治疗（100mg/kg、200mg/kg和400mg/kg）可呈剂量依赖性地降低LPS攻击小鼠死亡率（40%，33.33%，25%，参见图5）。