杭白菊中芹菜素和叶黄素的提取及含量测定方法

摘要

本发明公开一种杭白菊中芹菜素和叶黄素的提取及含量测定方法，其特征在于：将杭白菊烘干，粉碎，以料液比1:150～1:20的料液比将杭白菊放入有机溶剂中提取，重复提取1～5次，将提取液经过过滤减压浓缩至蒸干，得到芹菜素和叶黄素。所述测量方法采用高效液相色谱法。本发明操作简单，可以同时提取并测定杭白菊中芹菜素和叶黄素两种物质含量，减少了分别提取测量的繁琐，并最大限度的减少了有效物质的损失，为杭白菊相关产品的进一步推广和深度加工提供理论依据。

说明书

技术领域

本发明涉及物质含量测定范畴，具体涉及的是同时提取杭白菊中芹菜素和叶 黄素，并进行含量测定的方法。

背景技术

杭白菊，又名甘菊、白菊花、茶菊、药菊，是甘菊中的佳品。杭白菊主产于 浙江桐乡，为道地药材“浙江八味”之一，亦为卫生部新批的药食两用资源。杭 白菊有很高的药用价值，还有延年益寿的功效。《补农书》载“甘菊性甘温，久 服最有益”，元代《本草衍义补遗》说“菊花能补阴”，李时珍《本草纲目》道 “菊能利五脉，调四肢，治头风热补”，可见杭白菊的功效。经常饮用，能增强 毛细血管抵抗力，抑制毛细血管的通性，起到抗炎强身的作用。

芹菜素和叶黄素分别是杭白菊中的有效成分。芹菜素属于黄酮类，分子式 C₁₅H₁₀O₅，该物质具有抑制致癌物质的致癌活性，可以作为治疗HIV和其它病毒感 染的抗病毒药物、MAP激酶的抑制剂，治疗各种炎症，做抗氧化剂，有镇静、安 神、降压功效。叶黄素是类胡萝卜素之一，属光和色素，分子式为C₄₀H₅₆O₂。叶黄 素有保护视力的作用，缺乏该物质时易引起黄斑退化和视力模糊，进而出现视力 退化近视等症状。叶黄素有较强的氧化作用，能抑制活性氧自由基的活性，阻止 活性氧自由基对正常细胞的破坏，同时其还有降低白内障的发生率延缓动脉硬化 及抗癌等作用。

桐乡当地对于杭白菊的应用主要是制作菊花茶，将菊花只进行整体初加工， 而对于杭白菊中有效成分的研究很少，更没有将其中的具有保健功能的有效成分 进行提取加工做成产品。杭白菊的价值没有得到更好的利用。

经对现有的技术文献检索发现，专利02128803.8利用乙醇热回流提取真菊 中的芹菜素，专利200510097010.2报道了用柚皮素半合成芹菜素的方法，国家 标准(GB/T19427-2003)公布了蜂胶中芹菜素含量的测定方法。专利 201310149262.X介绍了万寿菊叶黄素制备工艺，国家标准(GB/T23209-2008) 公布了奶粉中叶黄素的测定。尚没有文献报道在同一条件下提取杭白菊中芹菜素 和叶黄素两种物质，并进行含量测定的方法。

发明内容

针对现有技术中存在的上述不足，本发明的目的是提供一种可以同时提取杭 白菊中芹菜素和叶黄素两种物质并进行含量测定的方法。

根据本发明的一个方面，提供一种可以同时提取芹菜素和叶黄素两种物质的 方法，具体为：将杭白菊烘干，粉碎，以料液比1:150～1:20的料液比将杭白菊放 入有机溶剂中提取，重复提取1～5次，将提取液经过过滤减压浓缩至蒸干，用甲 醇定容，用于检测含量。

优选地，所述将杭白菊烘干是指：将杭白菊在20～100℃温箱中烘干。

优选地，所述有机溶剂为常用溶剂，如甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等。

优选地，所述提取的时间为15～120分钟。

根据本发明的另一方面，提供一种同时对提取溶液进行芹菜素和叶黄素的 含量测定方法，具体为高效液相色谱法：

色谱条件与系统适用性实验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，水-乙腈 为流动相，检测波长为芹菜素328nm,叶黄素444nm；

对照品溶液的制备：精密称取芹菜素和叶黄素对照品适量，置于棕色瓶中， 加甲醇制成每1mL含0.001mg～0.200mg的溶液，作为对照品溶液；

供试品溶液的制备：将提取液浓缩蒸干后，用甲醇定容至10～1000mL，得 到供试品溶液；

测定法：分别精密吸取不同浓度对照品溶液，得到两种物质标准曲线。精密 吸取等量供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，所得色谱中，找出与对照品色谱 保留时间相同的色谱图，通过峰面积与标准曲线，计算其含量。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

本发明方法操作简单，可以同时提取并测定杭白菊中芹菜素和叶黄素两 种物质含量，减少了分别提取测量的繁琐，并最大限度的减少了有效物质的 损失，为杭白菊相关产品的进一步推广和深度加工提供理论依据。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的 技术人员进一步理解本发明，但不以任何形式限制本发明。应当指出的是，对本 领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形 和改进。这些都属于本发明的保护范围。以下实施例中没有详细说明的部分均可 以采用现有技术实现。

实施例1

将杭白菊在20℃温箱中烘干，粉碎，取1g杭白菊在50mL95％酒精中提取 120分钟，重复提取3次，将提取液经过过滤减压浓缩至蒸干，用甲醇定容至 10mL，使用HPLC检测。

色谱条件与系统适用性实验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水- 乙腈为流动相，检测波长为芹菜素328nm，叶黄素444nm；

对照品溶液的制备：精密称取芹菜素和叶黄素对照品，置于棕色瓶中，加甲 醇制成每1mL含10ug的溶液，作为对照品溶液；

供试品溶液的制备：将提取液浓缩蒸干后，用甲醇定容至10mL，得到供试 品溶液；

测定法：分别精密吸取不同浓度对照品溶液，得到两种物质标准曲线，精密 吸取5ul供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，所得色谱中，找出与对照品色谱 保留时间相同的色谱图，通过峰面积与标准曲线，计算其含量，得到1g干菊花 中含芹菜素为3.4mg，叶黄素0.07mg。

实施例2

将杭白菊在100℃温箱中烘干，粉碎，取2g杭白菊在50mL丙酮中提取30 分钟，重复提取2次，将提取液经过过滤减压浓缩至蒸干，用甲醇定容至100mL， 使用HPLC检测。

色谱条件与系统适用性实验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水- 乙腈为流动相，检测波长为芹菜素328nm，叶黄素444nm；

对照品溶液的制备：精密称取芹菜素和叶黄素对照品，置于棕色瓶中，加甲 醇制成每1mL含20ug的溶液，作为对照品溶液；

供试品溶液的制备：将提取液浓缩蒸干后，用甲醇定容至50mL，得到供试 品溶液；

测定法：分别精密吸取不同浓度对照品溶液，得到两种物质标准曲线，精密 吸取10ul供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，所得色谱中，找出与对照品色 谱保留时间相同的色谱图，通过峰面积与标准曲线，计算其含量，得到1g干菊 花中含芹菜素为5.2mg，叶黄素0.04mg。

实施例3

将杭白菊在50℃温箱中烘干，粉碎，取1g杭白菊在30mL丙酮中提取60 分钟，重复提取1次，将提取液经过过滤减压浓缩至蒸干，用甲醇定容至10mL， 使用HPLC检测。

色谱条件与系统适用性实验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水- 乙腈为流动相，检测波长为芹菜素328nm，叶黄素444nm；

对照品溶液的制备：精密称取芹菜素和叶黄素对照品，置于棕色瓶中，加甲 醇制成每1mL含50ug的溶液，作为对照品溶液；

供试品溶液的制备：将提取液浓缩蒸干后，用甲醇定容至25mL，得到供试 品溶液；

测定法：分别精密吸取不同浓度对照品溶液，得到两种物质标准曲线，精密 吸取5ul供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，所得色谱中，找出与对照品色谱 保留时间相同的色谱图，通过峰面积与标准曲线，计算其含量，得到1g干菊花 中含芹菜素为3.9mg，叶黄素0.05mg。

实施例4

将杭白菊在100℃温箱中烘干，粉碎，取5g杭白菊在150mL甲醇中提取15 分钟，重复提取3次，将提取液经过过滤减压浓缩至蒸干，用甲醇定容至10mL， 使用HPLC检测。

色谱条件与系统适用性实验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水- 乙腈为流动相，检测波长为芹菜素328nm，叶黄素444nm；

对照品溶液的制备：精密称取芹菜素和叶黄素对照品，置于棕色瓶中，加甲 醇制成每1mL含50ug的溶液，作为对照品溶液；

供试品溶液的制备：将提取液浓缩蒸干后，用甲醇定容至100mL，得到供 试品溶液；

测定法：分别精密吸取不同浓度对照品溶液，得到两种物质标准曲线，精密 吸取20ul供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，所得色谱中，找出与对照品色 谱保留时间相同的色谱图，通过峰面积与标准曲线，计算其含量，得到1g干菊 花中含芹菜素为6.7mg，叶黄素0.06mg。

以上对本发明的具体实施例进行了描述。需要理解的是，本发明并不局 限于上述特定实施方式，本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种 变形或修改，这并不影响本发明的实质内容。