14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯衍生物及其药物组合物和应用

摘要

本发明属于药物技术领域，具体涉及通式（I）所示的14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯衍生物（1-4），其药物组合物，其制备方法，以及该类衍生物及其药物组合物在制备抗乙型肝炎药物中的应用。

说明书

技术领域

本发明属于药物技术领域，具体地说，涉及14-脱氧-11,12-二脱 氢穿心莲内酯衍生物（1-4），以其为活性成分的药物组合物，其制备 方法，以及该类化合物及其药物组合物在制备抗乙型肝炎药物中的应 用。

背景技术

乙型肝炎是乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus,HBV）引起的、以 肝脏病变为主并引起多器官损害的一种传染性疾病，全世界约有3.6 亿慢性感染者，每年因HBV感染导致约60万人死亡。目前，乙型肝 炎已经成为影响人类寿命的九大疾病之一。据2006年乙肝血清流行 病学数据表明，我国乙肝病毒表面抗原携带率7.18%，即乙肝病毒表 面抗原携带者0.93亿。目前临床使用的抗HBV药物主要为乙型肝炎 疫苗、免疫调节剂、核苷类药物。

乙型肝炎疫苗作为一种特殊的药物，是预防乙型肝炎感染的最重 要手段，但是疫苗对已经感染者无效。临床上用于治疗慢性乙肝药物 主要有免疫调节剂和核苷类药物。免疫调节剂会引起流感样症状、抑 郁、中性粒细胞减少、血小板减少等不良反应。核苷类药物主要有拉 米夫定（lamivudine，3-TC）、阿德福韦酯（adefovir dipivoxil，ADV）、 恩替卡韦（entecavir,ETV）、替比夫定（telbivudine,LdT），泰诺福韦 （tenofovir,TDF）等。核苷类药物具有抗HBV作用强，患者耐受性 良好等优点，但是停药后易复发，引起病情恶化，甚至发生肝脏失常， 长期治疗易产生耐药性。因此，寻找结构新颖、新的作用机制的非核 苷类药物已经成为研究热点。14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯是爵 床科穿心莲属（Andrographis）植物穿心莲（Andrographis panicuata） 主要成分，具有抗炎、抗菌、抗病毒、保肝、镇痛等功效[江苏新医 学院，中药大辞典，上海科学技术出版社，1995，1728-1729]。对其 进行修饰得到的衍生物：14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯琥珀酸半 酯钠钾盐（a）制备为的琥宁注射液已经用于上呼吸道感染和病毒性 肺炎；19-O-乙酰基-14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯（b），19-O-丁 二酸单酰-14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯（c）具有抗炎活性。C-11、 C-12双键加成衍生物具有抗HIV活性[黄文龙CN101829110A]。此 前报道，对14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯C-3，C-15，C-19修饰 得到衍生物（通式d），对HBsAg、HBV DNA复制有抑制作用，选 择指数（SI）小于8；鸭乙肝病毒模型测试表明该衍生物具有抗鸭乙 肝病毒活性，然而其结构与本申请所要求衍生物完全不同[戴桂馥, WO2013/004171A1]。

目前，该类型没有本发明提供的14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内 酯衍生物（I）及其作为有效成分的药物组合物应用在制备或治疗乙 型肝炎药物中的报道。

发明内容

本发明旨在提供一种新的具有药用价值的14-脱氧-11,12-二脱氢 穿心莲内酯衍生物（I），以及含有治疗乙型肝炎有效量的化合物14- 脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯衍生物（I）及药用载体或赋形剂的用 于治疗乙型肝炎药物组合物，其制备方法，该化合物或其药物组合物 在制备抗乙型肝炎药物中的应用。

为了实现本发明的上述目的，本发明提供了如下的技术方案：

具结构式（I）所示的的14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯衍生物 （1-4）

药物组合物，含有权利要求1所述的通式（I）的14-脱氧-11,12- 二脱氢穿心莲内酯衍生物（1-4）及可药用载体和/或赋形剂。

本发明制备含有14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯衍生物（1-4） 及其药物的方法为：向14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯、羧酸(桂皮 酸、3,4,5-三甲氧基-桂皮酸，2-呋喃甲酸、2-噻吩甲酸)、4-二甲胺基 吡啶的N,N-二甲基甲酰胺溶液中加入N,N-二环己基碳二亚胺，室温 搅拌10小时，所得反应液用3倍体积的乙酸乙酯稀释，依次用稀盐 酸、饱和碳酸氢钠水溶液和饱和食盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥后减 压回收溶剂得到粗品；粗品经硅胶柱层析，用乙酸乙酯-石油醚洗脱 得14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯衍生物（1-4）。

本发明提供了14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯衍生物（I）在制 备治疗乙型肝炎药物中的应用。

本发明提供了含14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯衍生物（I）的 药物组合物在制备治疗乙型肝炎药物中的应用。

基于本发明人的抗HBV筛选，发现14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲 内酯衍生物具有抗HBV作用。14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯衍生 物是以植物中存在的14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯 （14-deoxy-11,12-didehydroandrographolide）为原料，采用化学合成 方法所得到的4个化合物。本申请所要求保护的衍生物不同于之前的 报道，通过对14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯的C-19位进行化学修 饰，得到4个衍生物具有较好抗HBV活性，特别对HBV DNA复制 有较强抑制作用，均有较高选择指数，尤其化合物2选择指数大于 165.1，具有较好安全性。

本发明化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的 形式使用。该药物组合物含有0.1–99%，优选为0.5–90%的本发明化 合物，其余为药物学上可接受的，对人和动物无毒和惰性的可药用载 体和/或赋形剂。

所述的药用载体或赋形剂是一种或多种固体、半固体和液体稀释 剂、填料以及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物以单位体重服用 量的形式使用。本发明的药物可经注射（静注、肌注）和口服两种形 式给药。

具体实施方式

为了更好地理解本发明的实质性内容，下面用本发明的实施例来 说明本发明化合物14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯衍生物（I）的制 备方法和药理作用结果，但不以此来限定本发明。

化合物制备实施例1

原料14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯（14-deoxy-11,12- dehydroandrographolide）的制备：

10公斤穿心莲植物全草粉碎，以30公斤90%乙醇提取三次，每 次3小时，合并乙醇提取液，浓缩至体积10升，浓缩液用乙酸乙酯 萃取三次，每次18升，合并乙酸乙酯萃取液，减压回收乙酸乙酯， 得336克乙酸乙酯萃取部分。

将336克乙酸乙酯部分以丙酮溶解，吸附于600克硅胶上，室温 挥发至干，过60-100目筛，备用。取3000克柱层析硅胶（200-300 目，青岛美高公司），湿法以乙酸乙酯-石油醚（40：60）混合溶剂填 充于玻璃色谱柱中（柱直经18cm，填充硅胶高度28cm），上样后， 以乙酸乙酯-石油醚（40:60-60:40,体积比）混合溶剂洗脱，流速 100mL/min，每3升为一流份，经TLC薄板检查（青岛美高公司，展 开剂：乙酸乙酯-石油醚，60:40），将含有14-脱氧-11,12-二脱氢穿心 莲内酯的流份合并，回收溶剂得14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯粗 品70克。

将14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯粗品70克以80%乙醇溶解， 加入600毫克活性炭，回流一个小时，滤出活性炭，回收溶液得到 62克粗品，再用60毫升甲醇溶解，室温下结晶，过滤出晶体，50毫 升甲醇溶解后重结晶，得到14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯45克。 经波谱数据（¹H NMR,¹³C NMR,MS）鉴定，以及与标准品对照，确 认所得为14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯，作为以下制备14-脱氧 -11,12-二脱氢穿心莲内酯衍生物的原料使用。

19-O-桂皮酰基-14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯（化合物1）的 制备：

在10mL圆底烧瓶中加入0.57mmol（200mg）14-脱氧-11,12-二 脱氢穿心莲内酯、0.28mmol（14mg）4-二甲胺基吡啶（DMAP）和 0.7mmol（103mg）桂皮酸，然后加入5毫升无水N,N-二甲基甲酰胺 （DMF），搅拌溶解后，冰浴条件下再加0.7mmol（144mg）N,N-二 环己基碳二亚胺（DCC）搅拌，反应温度升至室温。TLC检测14-脱 氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯反应完后，反应液加入30mL乙酸乙酯溶 解，依次用稀盐酸、饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水溶液洗涤三次， 经无水硫酸钠干燥后减压回收溶剂得粗品，经硅胶柱层析，用乙酸乙 酯-石油醚（30:70）洗脱得化合物19-O-桂皮酰基-14-脱氧-11,12-二脱 氢穿心莲内酯170毫克。

HRESIMS在LCMS-IT-TOF质谱仪（Shimadzu，Kyoto，Japan） 上测定，核磁共振谱（¹H和¹³C NMR）在Bruker AM400（¹H/¹³C， 400M Hz/100M Hz）超导核磁共振波谱仪（Bruker，Bremerhaven， Germany）测定，以TMS（四甲基硅烷）为内标。柱色谱硅胶（200～ 300目）和薄层色谱硅胶GF254均为青岛美高集团有限公司生产。反 应试剂购自Alfa Aesar、百灵威以及Acros公司。

19-O-桂皮酰基-14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯（1）结构数据：

分子式：C₂₉H₃₄O₅

分子量：462

性状：白色无定型粉末

图谱数据：

¹H NMR(CDCl₃,400MHz):δ0.76(3H,s,H-20),1.08(3H,s, H-18),3.21(1H,dd,J=10.4,5.1Hz,H-3),4.22(1H,d,J=11.8Hz, H-19a),4.27(1H,d,J=11.8Hz,H-19b),4.40(1H,brs,H-17a),4.65(1H, brs,H-17b),4.72(2H,s,H-15),6.00(1H,d,J=15.8Hz,H-12),6.31(1H, d,J=15.7Hz,H-2),6.74(1H,dd,J=15.8,10.1Hz,H-11),7.14(1H,s, H-14),7.41(2H,d,J=7.1Hz,H-5and H-9),7.53(1H,d,J=15.7Hz, H-3).¹³C NMR(CDCl₃,100MHz):δ14.9(C-20),22.3(C-18),23.6(C-6), 27.0(C-2),36.4(C-7),38.3(C-1),38.5(C-10),42.3(C-4),54.3(C-5), 61.4(C-9),65.2(C-19),69.8(C-15),78.3(C-3),108.6(C-17),117.3 (C-2),120.8(C-12),127.8(2C,C-6,8),128.6(2C,C-5,9),128.7(C-13), 130.2(C-7),133.9(C-4),135.4(C-11),143.6(C-3),144.9(C-14),147.9 (C-8),167.2(C-1),172.8(C-16).HRESIMS：计算值C₂₉H₃₅O₅[M+H]⁺463.2479,实验值463.2503。

化合物制备实施例2-4

依照实施例1在10mL圆底烧瓶中加入0.4mmol（200mg）14- 脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯、0.2mmol（24mg）4-二甲胺基吡啶 （DMAP）和0.7mmol相应酸，然后加入5毫升无水N,N-二甲基甲 酰胺，搅拌溶解后，冰浴条件下再加0.7mmol（144mg）N,N-二环己 基碳二亚胺（DCC）搅拌，反应温度升至室温。TLC检测14-脱氧-11,12- 二脱氢穿心莲内酯反应完后，反应液过滤，依次用稀盐酸、饱和碳酸 氢钠水溶液、饱和食盐水溶液洗涤三次，经无水硫酸钠干燥后，减压 回收溶剂得到粗品，经硅胶柱层析，用乙酸乙酯-石油醚 （30:70–40:60）洗脱得化合物，制备以下结构14-脱氧-11,12-二脱氢 穿心莲内酯衍生物（2-4）：

化合物2、3、4结构确定数据：

19-O-（3,4,5-三甲氧基）桂皮酰基-14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲 内酯（2）

分子式：C₃₂H₄₀O₈

分子量：552

性状：白色无定型粉末

图谱数据：

¹H NMR(CDCl₃,400MHz):δ0.76(3H,s,H-20),1.08(3H,s, H-18),3.79(3H,s,H-OMe),3.81(6H,s,H-OMe),4.46(1H,brs,H-17a), 4.71(1H,brs,H-17b),4.74(2H,s,H-15),6.05(1H,d,J=15.7Hz,H-12), 6.26(1H,d,J=15.9Hz,H-2),6.67(2H,s,H-5and H-9),6.81(1H,dd,J =15.7,10.1Hz,H-11),7.14(1H,s,H-14),7.49(1H,d,J=15.9Hz, H-3).¹³C NMR(CDCl₃,100MHz):δ15.5(C-20),22.5(C-18),23.5(C-6), 27.6(C-2),36.6(C-7),38.4(C-1),38.7(C-10),42.7(C-4),54.7(C-5), 56.1(2×OMe),60.9(OMe),61.5(C-9),65.0(C-19),69.7(C-15),79.0 (C-3),105.1(2C,C-5,9),109.1(C-17),117.0(C-2),121.2(C-12),129.0 (C-13),129.7(C-4),135.6(C-11),139.9(C-7),143.4(C-14),145.2(C-3), 148.0(C-8),153.3(2C,C-6,8),167.0(C-1),172.4(C-16).HRESIMS： 计算值C₃₂H₄₁O₈[M+H]⁺553.2796,实验值553.2820。

19-O-（2-呋喃甲酰基）-14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯（3）

分子式：C₂₅H₃₀O₆

分子量：426

性状：白色无定型粉末

图谱数据：

¹H NMR(CDCl₃,400MHz):δ0.84(3H,s,H-20),1.19(3H,s, H-18),2.31(1H,d,J=9.8Hz,H-9),3.33(1H,dd,J=11.4,4.6Hz,H-3), 4.34(1H,d,J=11.1,H-19a),4.51(1H,brs,H-17a),4.74(1H,brs, H-17b),4.76(2H,s,H-15),6.09(1H,d,J=15.7Hz,H-12),6.47(1H,dd, J=3.5,1.7Hz,H-4),6.84(1H,dd,J=15.7,10.1Hz,H-11),7.18(1H,s, H-14),7.11(1H,d,J=3.5Hz,H-3),7.54(1H,dd,J=1.7,0.8Hz,H-5). ¹³C NMR(CDCl₃,100MHz):δ15.4(C-20),22.6(C-18),23.6(C-6), 27.6(C-2),36.6(C-7),38.5(C-1),38.7(C-10),42.7(C-4),54.6(C-5), 61.6(C-9),65.5(C-19),69.7(C-15),78.9(C-3),109.1(C-17),111.9 (C-4),118.0(C-3),121.2(C-12),129.0(C-13),135.6(C-11),143.3 (C-14),144.5(C-5),146.5(C-2),148.0(C-8),158.6(C-1),172.4(C-16). HRESIMS：计算值C₂₅H₃₀O₆Na[M+Na]⁺449.1935,实验值449.1951。

19-O-（2-噻吩甲酰基）-14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯（4）

分子式：C₂₅H₃₀O₅S

分子量：442

性状：白色无定型粉末

图谱数据：

¹H NMR(CDCl₃,400MHz):δ0.94(3H,s,H-20),1.17(3H,s, H-18),4.80(2H,s,H-15),6.14(1H,dd,J=15.7,9.9Hz,H-11),6.30(1H, d,J=15.7Hz,H-12),7.57(1H,m,H-4).¹³C NMR(CDCl₃,100MHz):δ 15.4(C-20),22.8(C-18),23.8(C-6),24.4(C-2),36.6(C-7),38.2(C-1), 38.6(C-10),41.8(C-4),55.9(C-5),61.6(C-9),64.8(C-19),69.6(C-15), 78.7(C-3),109.4(C-17),117.3(C-4),121.4(C-12),129.0(C-13),129.5 (C-3),135.5(C-11),143.4(C-14),144.9(C-5),147.8(C-8),153.3(C-2), 166.9(C-1),172.2(C-16).HRESIMS：计算值C₂₅H₂₉O₅S[M-H]^-441.1741,实验值441.1753。

下面的抗乙肝病毒药理试验例用来说明本发明的14-脱氧 -11,12-二脱氢穿心莲内酯衍生物的药理作用结果：

试验例1：

本发明上述的化合物制备实施例得到的化合物14-脱氧-11,12-二 脱氢穿心莲内酯衍生物（I）（化合物1、2、3、4）在HepG2.2.15细 胞模型上对乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、e抗原（HBeAg）和 HBV DNA复制的抑制作用以及其对细胞的毒性：

1材料和方法

1.1材料：本发明制备实施例得到的化合物14-脱氧-11,12-二脱 氢穿心莲内酯衍生物（化合物1-4）；泰诺福韦（江西晨阳药业有限公 司）作阳性对照药；HBV转染的Hep G2.2.15细胞（自行传代培养）； 细胞培养液：高糖培养液添加10%胎牛血清，0.03%L–谷氨酰胺， 100mg/L G418，105IU/L青酶素，100mg/L链霉素，用5%Na₂CO₃调 pH至6.8–7.0；高糖DMEM（GIBICO）；G418（GIBICO）；胎牛血 清（天津血研所）；L–谷氨酰胺（AMRESCO）；青霉素，链霉素（石 药集团中诺药业（石家庄）有限公司）；HBsAg和HBeAg试剂盒（安 图生物工程公司）。

1.2Hep G2.2.15细胞，用高糖DMEM液培养，培养液添加10% 胎牛血清，0.03%L–谷氨酰胺，100mg/L G418，10⁵IU/L青酶素， 100mg/L链霉素，5%NaHCO₃调pH至6.8–7.0。

1.3仪器：酶标仪Bio-RAD680（美国）；CO₂培养箱Thermo Forma 3310（美国）；倒置生物显微镜XD-101型（南京）等。

1.4实验过程

1.4.1HBsAg和HBeAg抑制活性的测定：

利用ELISA（酶联免疫吸附试验）法，测定样品对HBsAg和 HBeAg抑制活性。Hep G2.2.15细胞接种与48孔板，3×10⁴细胞每孔， 加入生长培养基，于5％CO₂，37℃培养箱中培养72h，吸除原培养 基，加入不同浓度待测样品溶液，于5％CO₂，37℃培养箱中培养72h。 取上清液，分别利用HBsAg和HBeAg试剂盒检测。利用酶标仪测定 溶液在的吸光度值（490nm）。

抑制率η_inhibitory=（A_{细胞对照组}–A_{供试样品组}）/（A_{细胞对照组}–A_空白组）×100

IC₅₀=Anti lg[（50–<50%抑制率）/（>50%抑制率–<50%抑 制率）×lg（稀释倍数）+lg（<50%抑制率的浓度）]

SI=CC₅₀/IC₅₀

1.4.2HBV DNA复制抑制活性的测定：

Hep G2.2.15细胞接种于24孔细胞板，5×10⁵个每孔，于5％CO₂， 37℃培养箱中培养72h。更换为含药培养基，培养48h后再次更换一 次含药培养基，继续培养48h。使用血液/细胞/组织基因组DNA提取 试剂盒（TIANamp Gemomic DNA Kit，TIANGEN，China）提取DNA。 用荧光定量PCR的方法定量检测HBV DNA载量。1μL DNA样品用 20μL2×SYBR Green PCR Master Mix（Applied Biosystems,USA）以 及2条HBV特异的引物作为PCR扩增体系：前引物（5'GGA ACC  TCT ATG TAT CCC TCC3'），后引物（5'TCC GTC CGA AGG TTT  GGT AC3'）.扩增以及检测试用Mastercycler Ep Realplex System定 量PCR仪（Eppendorf,Masteraycler Eprealplex,German）在95℃预 热2分钟,并按95℃（20秒），58℃（15秒），72℃（20秒）的条 件重复进行40个循环的反应。根据结果计算药物的抑制百分率和 IC₅₀值，计算方法与1.4.1相同。

1.4.3细胞毒性测定：

根据Mosmann建立的MTT法检测药物的细胞毒性。具体方法是： Hep G2.2.15细胞接种与48孔板，3×10⁴细胞每孔，加入生长培养基， 于5％CO₂，37℃培养箱中培养72h，吸除原培养基，加入不同浓度 待测样品溶液，于5％CO₂，37℃培养箱中培养72h。吸除上清后（用 于两抗测定），每孔加入浓度为0.4mg/mL的MTT，0.3mL，于5%CO₂， 37℃孵育4h。吸除上清液，每孔中加入0.3mL二甲基亚砜，于37℃ 孵育10min，在酶标仪上测定溶液在的吸光度值（490nm）。根据结 果计算药物对细胞的破坏百分率：

破坏率η_destroy=（A_{细胞对照组}–A_{供试样品组}）/（A_{细胞对照组}–A_空白组）×100

CC₅₀=Anti lg[（50–<50%破坏率）/（>50%破坏率–<50%破 坏率）×lg（稀释倍数）+lg（<50%破坏率的浓度）]

2.结果：对HBsAg，HBeAg的抑制作用结果以选择指数（Sective  Index,SI，SI=CC₅₀/IC₅₀,为评价药物临床应用前景的参数）来评价， 其中SI>2为无毒有效，1<SI<2为有毒有效，SI<1为有毒无效。 具体结果见表2：

表214-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯衍生物（I）对Hep G2.2.15 细胞的毒性作用，对HBsAg、HBeAg和HBV DNA的抑制活性

3.结论：实验结果显示，化合物14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内 酯衍生物在体外Hep G2.2.15细胞中，对HBV DNA的复制有较强的 抑制作用，特别19-O-（3,4,5-三甲氧基）桂皮酰基-14-脱氧-11,12- 二脱氢穿心莲内酯（2）SI值大于165.1；此外，19-O-（2-呋喃甲酰 基）-14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯（3）抑制HBsAg；化合物19-O- （2-噻吩甲酰基）-14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯（4）对HBeAg 有较好的抑制作用。

制剂实施例

制剂实施例1：

按制备实施例1的方法先制得14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯 衍生物，用少量的DMSO溶解后，按常规加注射用水，精滤，灌封 灭菌制成注射液。

制剂实施例2：

按制备实施例1的方法先制得14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯 衍生物，用少量的DMSO溶解后，将其溶于无菌注射用水中，搅拌 使溶解，用无菌抽滤漏斗过滤，再无菌精滤，分装于安瓿中，低温冷 冻干燥后无菌熔封得粉针剂。

制剂实施例3：

按制备实施例1的方法先制得14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯 衍生物，按其与赋形剂重量比为9：1的比例加入赋形剂，制成粉剂。

制剂实施例4：

按制备实施例1的方法先制得14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯 衍生物，按其与赋形剂重量比为5：1的比例加入赋形剂，制粒压片。

制剂实施例5：

按制备实施例1的方法先制得14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯 衍生物，按常规口服液制法制成口服液。

制剂实施例6：

按制备实施例1的方法先制得14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯 衍生物，按其与赋形剂重量比为5：1的比例加入赋形剂，制成胶囊。

制剂实施例7：

按制备实施例1的方法先制得14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯 衍生物，按其与赋形剂重量比为3：1的比例加入赋形剂，制成胶囊。

制剂实施例8：

按制备实施例1的方法先制得14-脱氧-11,12-二脱氢穿心莲内酯 衍生物，按其与赋形剂重量比为5：1的比例加入赋形剂，制成颗粒 剂。