氯化钾氯化钠注射液的氯化钾和氯化钠含量的测定方法

摘要

本发明涉及一种氯化钾氯化钠注射液的氯化钾和氯化钠含量的测定方法，以及确定氯化钾氯化钠注射液的氯化钾和氯化钠含量是否符合质量标准的方法。所述测定方法采用原子吸收分光光度计通过原子吸收分光光度法进行。

说明书

技术领域

本发明涉及一种氯化钾氯化钠注射液的氯化钾和氯化钠含量的测定方法，以及确 定氯化钾氯化钠注射液的氯化钾和氯化钠含量是否符合质量标准的方法。

背景技术

氯化钾(KCl)是最基础的临床用药之一，为全国基本医疗用药目录产品、全国社 保目录产品；主要用于治疗各类低钾血症，在各大中小医院长期、广泛运用。据默克 诊疗手册第十七版第157页所述：为了补充KCl，葡萄糖液不是理想选择，因为随后 增高病人血浆胰岛素水平可导致一过性低钾血症加重，症状加剧，特别是洋地黄病人。 最后，当低钾血症伴有低镁，通常需矫正镁缺乏阻止盛钾丢失和促使钾充盈。”国内 亦有文献报道“因葡萄糖的输入有在合成糖元时使K⁺进入细胞，降低血钾的现象，10％ 葡萄糖还有渗透利尿作用，故用10％葡萄糖做氯化钾注射剂稀释有不妥之处。

目前国内上市KCl制剂主要有：(1)口服片剂，主要用于轻症低钾血症的门诊 病人和无消化道疾病者：(2)KCl注射剂，现有市售氯化钾注射液规格为10ml∶1.5g及 1.0g，临床用于严重低钾血症或不能口服者。据“10ml∶1.5g”规格水针剂产品说明书 中描述的临床给药方法为：一般是将15％氯化钾注射液7-10ml加入5％葡萄糖注射液 500ml中滴注(忌直接静脉滴注与推注)。因此，实际使用过程中有可能产生二次污 染。

中国药典中复方氯化钠注射液中氯化钾的含量测定采用四苯硼钠法，这种方法操 作手续繁杂而且费时，氯化钠含量测定采用银量法，实际操作中，往往由于滴定终点 突跃现象不明显而造成误差。

为了解决上述问题，需要一种新的氯化钾注射剂，并建立一种准确的含量测定方 法，为该产品的质量控制提供科学的测定依据并获得准确的测定结果。

发明内容

为了解决氯化钾注射液使用过程中的上述问题，申请人开发了一种KCl注射液 的新剂型，即氯化钾氯化钠注射液。同时，为控制氯化钾氯化钠注射液的质量，采用 原子吸收分光光度计通过原子吸收分光光度法进行测定。并且，该方法能够对氯化钾 氯化钠注射液中的氯化钾和氯化钠含量进行连续测定。并且，根据该方法的测定结果， 可以判定氯化钾氯化钠注射液中的氯化钾和氯化钠含量是否符合质量标准。

本发明提供了下列三种规格，可根据临床需要灵活使用：

(1)100mL：氯化钾0.11g与氯化钠0.9g的氯化钾氯化钠注射液；

(2)100mL：氯化钾0.22g与氯化钠0.9g的氯化钾氯化钠注射液；

(3)100mL：氯化钾0.11g与氯化钠0.9g的氯化钾氯化钠注射液。

与传统的KCl注射剂比较，无需在使用前稀释，使用方便，减少了二次污染的 机会。并且由于以氯化钠溶液为载体，无糖，可在糖尿病等高血糖病人中使用。

本发明采用原子吸收分光光度法来测定氯化钾和氯化钠的含量。原子吸收光谱分 析的基本原理是测量基态原子对共振辐射的吸收。为了准确测定氯化钾和氯化钠的含 量需要对原子吸收分光光度计的参数进行精确调节和选择。所用水的纯度对分析测定 结果有很大影响，不纯净的水会污染待测样品影响测定结果，另外，为了防止水中的 杂质影响测定结果，需要使用超纯水。申请人经过大量实验确定，使用以下参数可以 获得最佳测定结果：对于氯化钾含量的测定，灯电流：12.0mA；狭缝：1.3nm；波 长：766.5nm；且燃烧器高度：7.5mm。对于氯化钠含量的测定，灯电流：12.0mA； 狭缝：0.4nm；波长：589.0nm；且燃烧器高度：7.5mm。同时，使用电阻率为18MΩ·CM 的超纯水作为溶剂。

本发明所述的方法测定氯化钾氯化钠注射液的氯化钾含量，如果测定得到的氯化 钾含量为标示量的95.0％～105.0％，则该氯化钾氯化钠注射液符合质量标准。

本发明所述的方法测定氯化钾氯化钠注射液的氯化钠含量，如果测定得到的氯化 钠含量为标示量的95.0％～105.0％，则该氯化钾氯化钠注射液符合质量标准。

以上述方法进行测定，可以获得更低的检出限，说明本发明与现有技术相比，具 有更好的技术优势。

另外，在以往的测定方法中，通常将标准液稀释后作为对照品溶液。但是，申请 人发现，在测定氯化钾氯化钠注射液中的氯化钾和氯化钠的含量时，钠离子和钾离子 会相互影响，降低了测定结果的准确性。为了避免上述影响，在测定氯化钾含量时， 本发明在对照品溶液中加入氯化钠溶液，以消除钠离子对钾离子测定的干扰；在测定 氯化钠含量时，本发明在对照品溶液中加入氯化钾溶液，以消除钾离子对钠离子测定 的干扰。这样做的结果是最大程度的保证了测定结果的准确性。在对照品溶液的选择 上，对于氯化钾和氯化钠的量不接近的样品来说，如果都使用同一对照品溶液，会产 生很大的误差，甚至得到错误的结果。也就是说，针对不同的样品，尤其是氯化钾和 氯化钠的量不接近的样品，需要根据具体产品的情况制备不同的对照品溶液，才能得 到准确的结果。另外，本申请主要测定以下规格的氯化钾氯化钠注射液

(1)100mL：氯化钾0.11g与氯化钠0.9g的氯化钾氯化钠注射液；

(2)100mL：氯化钾0.22g与氯化钠0.9g的氯化钾氯化钠注射液；或

(3)100mL：氯化钾0.11g与氯化钠0.9g的氯化钾氯化钠注射液。

为了同时测定溶液中两种组分的浓度，本领域技术人员可能会想到用氯化钾标准 溶液和氯化钠标准溶液混合来得到氯化钾浓度和氯化钠浓度不同的一系列对照品溶 液，再根据该系列对照品溶液来测定氯化钾氯化钠注射液中氯化钾的浓度和氯化钠的 浓度。但是，以上方法并未考虑到钾离子与钠离子之间的相互干扰。申请人发现，由 于不同浓度下钠离子与钾离子的相互干扰随浓度不同而不同。在一定的浓度范围内， 需要用特定量的钾离子和钠离子来消除该干扰。否则无法精确测定氯化钾含量和氯化 钠含量。具体而言，对于本发明的上述规格，在测定氯化钾含量时，以氯化钠溶液作 为空白试验溶液，其制备方法如下：将0.7g～1.1g氯化钠，优选0.8～1.0g氯化钠， 更优选0.9g氯化钠加水溶解并稀释至100mL，摇匀，精密量取所得溶液5.0mL，置 于50mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，得到空白试验溶液。同时，在测定氯化钠 含量时，以氯化钾溶液作为空白试验溶液，其制备方法如下：将0.1g～0.5g氯化钾， 优选0.2～0.4g氯化钾，更优选0.3g氯化钾加水溶解并稀释至100mL，摇匀，精密量 取所得溶液5.0mL，置于100mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，得到空白试验溶 液。由此，可以实现本发明的技术效果。

本发明中氯化钾含量测定与药典中四苯硼钠法相比较，具有操作简单、快速、取 样量少，结果准确的优点，满足了药厂和医院快速分析的需要，同时可以对药品生产 进行质量控制。本发明中氯化钠含量测定与银量法相比，没有滴定终点的控制带来的 误差，测定结果更为精确，并且方法更简单、快速。

本发明采用原子吸收分光光度法测定氯化钾和氯化钠含量，有效控制了两种盐的 真实含量，操作简便，回收率满意。

附图说明

图1为钾离子标准曲线；

图2为钠离子标准曲线。

具体实施方式

本发明的测定方法中，首先制备氯化钾或氯化钠的标准溶液。该标准溶液可以购 得，例如从钢铁研究总院国家钢铁材料测试中心购得，也可以自行配制。随后，由标 准溶液和空白试验溶液制备对照品溶液。然后由待测样品制备供试品溶液。最后采用 原子吸收分光光度法进行测定。

在测定氯化钾氯化钠注射液的氯化钾含量时，申请人通过大量实验，确定了原子 吸收分光光度计的设定参数，这些参数是影响灵敏度和稳定性的主要因素。其中灯电 流为7～12mA。若灯电流过高，易产生自吸作用，多普勒效应增强，谱线变宽，测 定灵敏度降低，灯寿命缩短。但是灯电流过低，发光强度减弱，谱线信噪比降低。优 选灯电流为12.0mA。狭缝为1.3nm或0.4nm，优选为1.3nm。狭缝设定宽，信噪比 好，但分辨率差；狭缝设定窄，分辨率好，但信噪比下降，应两者兼顾。波长为766.5 nm。燃烧器高度为5～10mm，优选为7.5mm。燃烧器高度不同则温度不同。通过 限定以上参数，可以更加准确地测定氯化钾含量。

在测定氯化钾氯化钠注射液的氯化钠含量时，申请人同样通过大量实验，确定了 原子吸收分光光度计的设定参数。其中灯电流为8～12mA。优选灯电流为12.0mA。 狭缝为0.4nm或1.3nm，优选为0.4nm。波长为589.0nm。燃烧器高度为5～10mm， 优选为7.5mm。通过限定以上参数，可以更加准确地测定氯化钠含量。

另外，由于钠离子和钾离子会相互影响，降低了测定结果的准确性，为了避免上 述影响，在测定氯化钾含量时，本发明在对照品溶液中加入氯化钠溶液，以消除钠离 子对钾离子测定的干扰；在测定氯化钠含量时，本发明在对照品溶液中加入氯化钾溶 液，以消除钾离子对钠离子测定的干扰。申请人通过大量实验发现了对照品溶液中最 为合适的空白试验溶液的浓度(对于氯化钾浓度测定，为氯化钠空白试验溶液的浓度； 对于氯化钠浓度测定，为氯化钾空白试验溶液的浓度)，而不是一概的使用相同的对 照品溶液，从而保证了测定结果的准确性，同时提高了测定精度。

以下通过实施例说明本发明的测定方法快速、准确、容易操作，而且精密度高， 数据准确可靠，适用于氯化钾氯化钠注射液中氯化钾和氯化钠含量测定。

实施例

在本发明中，可以使用Z-5000原子吸收分光光度计(日立公司)，并且可以使用 AE240电子天平(梅特勒公司)(感量：0.01mg)进行称量。

实施例1氯化钾含量的测定

1)空白试验溶液的制备：

将0.9g氯化钠加水溶解并稀释至100mL，摇匀，精密量取所得溶液5.0mL，置 于50mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，得到空白试验溶液；

2)对照品溶液的制备：

精密量取浓度为1000μg/mL、介质为10％HCl的钾标准溶液(【国家标准溶液GBS G 62020-90(2601)】国家钢铁材料测试中心，钢铁研究总院)5.0mL，置于50mL 量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，得到浓度为100μg/mL的溶液，精密量取100μg/mL 的溶液1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL和5.0mL，分别置于100mL量瓶中，再精密 加入空白试验溶液5.0mL，加水稀释至刻度，摇匀，得到对照品溶液；

3)供试品溶液的制备：

精密量取待测样品，加水稀释制成浓度为3μg/mL的钾离子溶液，得到供试品溶 液；

4)测定：

采用原子吸收分光光度法测定对照品溶液和供试品溶液的吸光度，测定条件：检 测波长766.5nm，灯电流：12.0mA；狭缝：1.3nm；且燃烧器高度：7.5mm。检 测对照品溶液的吸光度，绘制标准曲线(见图1)；检测供试品溶液的吸光度，从标 准曲线上查得供试品溶液的浓度，计算含量，含量＝查得的浓度×稀释倍数/标示量。

在以上步骤中，所使用的水得自Milli-Q超纯水系统(电阻率为18MΩ·CM)。

5.检出限与定量限

取空白试验溶液，采用原子吸收分光光度法，在灯电流：12.0mA；狭缝：1.3nm； 波长：766.5nm；且燃烧器高度：7.5mm的条件下测定吸光度，连续测定20次，计 算20次空白值的标准偏差为0.0004(Abs)。

检出限＝3s/b＝3×4×10^-4/8.872×10^-2＝1.35×10^-2(μg/mL)

定量限＝3.3×检出限＝3.3×1.35×10^-2＝4.46×10^-2(μg/mL)

6.线性

精密量取对照品溶液，按上述条件检测，结果如表1所示。

表1钾离子线性

  浓度(μg/mL)   1.0   2.0   3.0   4.0   5.0   吸光度(Abs)   0.0980   0.1915   0.2830   0.3753   0.4497

以吸光度(abs)为纵坐标(Y)，浓度为横坐标(X)，计算回归方程为： Y＝8.872×10^-2X+1.334×10^-2，r＝0.9992。说明钾离子在1μg/mL～5μg/mL的范围内， 浓度与吸光度的线性关系良好。

以吸光度(abs)为纵坐标(Y)，钾离子的浓度(μg/mL)为横坐标(X)，绘制标 准曲线，见图1。

7.精密度

取批号为090401的样品(100mL：氯化钾0.11g与氯化钠0.9g)作为试验样品， 照上述条件进行试验，连续测定5次，测定结果见表2。

表2精密性试验

  测定次数   1   2   3   4   5  吸光度(Abs)   0.2839   0.2834   0.2826   0.2844   0.2746

同一供试品溶液重复测定5次，结果平均值为0.2818，相对标准偏差(RSD％) 为1.44％，符合测定要求。

8.方法重现性

取批号为090401的样品(100mL：氯化钾0.11g与氯化钠0.9g)5份，照上述 条件进行试验，测定结果见表3。

表3重现性试验

  编号   1   2   3   4   5   6  吸光度(Abs)   0.2792   0.2771   0.2778   0.2748   0.2731   0.2784

同一批号样品重复测定5次，结果平均值为0.2767，相对标准偏差(RSD％)为 0.84％，说明本方法重现性良好。

9.供试液稳定性

取批号为090401的样品(100mL：氯化钾0.11g与氯化钠0.9g)作为供试品溶液， 分别在0、1、2、4、8小时照上述条件进行测定，测定结果见表4。

表4稳定性试验

  时间(h)   0   1   2   4   8  吸光度(Abs)   0.2791   0.2764   0.2795   0.2809   0.2755

结果平均值为0.2783，相对标准偏差(RSD％)为0.81％，上述结果表明供试品 溶液在8小时内测定较稳定，能满足测定的需要。

10.回收率：

精密量取钾标准溶液(100μg/mL)2.4mL、3.0mL、3.6mL、分置100mL量瓶中， 再精密量取空白试验溶液【氯化钠0.9g加水溶解并稀释至100mL，摇匀。精密量取 上述溶液5.0mL置50mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀】2.0mL，加水稀释至刻度， 摇匀。按上述条件检测，结果如表5所示。

表5：回收率试验

  编号   加入量(μg/ml)   吸光度(Abs)   测得量(μg/ml)   回收率(％)   1   2.40   0.2260   2.3964   99.85   2   2.40   0.2255   2.3908   99.62   3   2.40   0.2298   2.4393   101.64   4   3.00   0.2821   3.0287   100.96   5   3.00   0.2847   3.0581   101.94   6   3.00   0.2862   3.0750   102.50   7   3.60   0.3408   3.6904   102.51   8   3.60   0.3399   3.6803   102.23   9   3.60   0.3420   3.7039   102.89

由上表可见，九个供试品的回收率在99.62％～102.51％之间，平均回收率为 101.57％，RSD为1.16％，表明本测定法能准确地测定出样品中钾离子的含量，方法 可行。

11.三批样品的含量测定结果

在批号为090401～090403的三批样品中，取每个批号各三份中试样品，按氯化 钾氯化钠注射液含量测定方法测定，得到吸光度后在标准曲线上找到相应的浓度，按 照：含量＝查得的浓度×稀释倍数/标示量，计算含量，其结果见表6。

表6样品中氯化钾含量测定结果

因此，根据该测定结果，所述三种规格的三批样品氯化钾(KCl)含量为标示量 的97.9～104.4％，符合规定的95.0～105.0％。

实施例2氯化钠含量的测定

1)空白试验溶液的制备：

将氯化钾0.3g加水溶解并稀释至100mL，摇匀，精密量取所得溶液5.0mL，置 于100mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，得到空白试验溶液；

2)对照品溶液的制备：

精密量取浓度为1000μg/mL、介质为10％HCl的钠标准溶液(【国家标准溶液GBS G 62020-90(2601)】国家钢铁材料测试中心，钢铁研究总院)5.0mL，置于100mL 量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，得到浓度为50μg/mL的溶液，精密量取50μg/mL 的溶液1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL和5.0mL，分别置于100mL量瓶中，再精密 加入空白试验溶液1.0mL，加水稀释至刻度，摇匀，得到对照品溶液；

3)供试品溶液的制备：

精密量取待测样品，加水稀释制成浓度为1.8μg/mL的钠离子溶液，得到供试品 溶液；

4)测定：

采用原子吸收分光光度法测定对照品溶液和供试品溶液的吸光度，测定条件为： 检测波长589.0nm；灯电流：12.0mA；狭缝：0.4nm；波长：589.0nm；且燃烧器高 度：7.5mm。检测对照品溶液的吸光度，绘制标准曲线(见图2)；检测供试品溶液 的吸光度，从标准曲线上查得供试品溶液的浓度，计算含量，含量＝查得的浓度×稀 释倍数/标示量。

在以上步骤中，所使用的水得自Milli-Q超纯水系统(电阻率为18MΩ·CM)。

5.检出限与定量限

取空白试验溶液，采用原子吸收分光光度法，在灯电流：12.0mA；狭缝：0.4nm； 波长：589.0nm；且燃烧器高度：7.5mm的条件下测定吸光度，连续测定20次，计 算20次空白值的标准偏差为2.5×10-3(Abs)。

检出限＝3s/b＝3×2.5×10^-3/2.149×10^-1＝3.49×10^-2(μg/mL)

定量限＝3.3×检出限＝3.3×3.49×10^-2(μg/mL)＝1.15×10^-1(μg/mL)

6.线性

精密量取对照品溶液，按上述条件检测，结果如表7所示。

表7钠离子线性

  浓度(μg/mL)   0.5   1.0   1.5   2.0   2.5   吸光度(Abs)   0.0679   0.1625   0.2722   0.3846   0.4942

以吸光度(Abs)为纵坐标(Y)，浓度(μg/mL)为横坐标(X)，计算回归方程 为：Y＝2.1494×10^-1X-4.613×10^-2，r＝0.9995。说明钠离子在0.5μg/mL～2.5μg/mL的 范围内，浓度与吸光度的线性关系良好。

以吸光度(abs)为纵坐标(Y)，钾离子的浓度为横坐标(X)，绘制标准曲线， 见图2。

7.进样精密度

以批号为090401的样品(规格：100mL：氯化钾0.11g与氯化钠0.9g)为试验样 品，照上述条件进行试验，连续测定5次，测定结果见表8。

表8精密度试验结果

  测定次数   1   2   3   4   5  吸光度(Abs)   0.3228   0.3229   0.3235   0.3220   0.3238

同一供试品溶液重复测定5次，结果平均值为0.3230，相对标准偏差(RSD％) 为0.22％，符合测定要求。

8.方法重现性

取批号为090401的样品(规格：100mL：氯化钾0.11g与氯化钠0.9g)5份，照 上述条件进行试验，测定结果见表9。

表9重现性试验结果

  编号   1   2   3   4   5   6  吸光度(Abs)   0.3203   0.3293   03228   0.3222   0.3220   0.3196

同一批号样品重复测定5次，结果平均值为0.3227，相对标准偏差(RSD％)为 1.07％，说明本方法重现性良好。

9.供试液稳定性

批号为090401的样品(规格：100mL：氯化钾0.11g与氯化钠0.9g)为试验样品， 照上述条件进行试验，分别在0、1、2、4、8小时进行测定，测定结果见表10。

表10稳定性试验结果

  时间(h)   0   1   2   4   8  吸光度(Abs)   0.3206   0.3183   0.3221   0.3160   0.3218

结果平均值为0.3198，相对标准偏差(RSD％)为0.807％，上述结果表明供试 品溶液在8小时内测定较稳定，能满足测定的需要。

10.回收率：

精密量取钠标准溶液(50μg/mL)2.8mL、3.6mL、4.4mL、分置100mL量瓶中， 再精密量取空白试验溶液【氯化钾0.3g加水溶解并稀释至100mL，摇匀。精密量取 上述溶液5.0mL置100mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀】1.0mL，加水稀释至刻 度，摇匀。按上述条件检测，结果如表11所示。

表11：回收率试验

  编号   加入量(μg/mL)   吸光度(Abs)   测得量(μg/mL)   回收率(％)   1   1.40   0.2533   1.3644   97.46   2   1.40   0.2545   1.3700   97.79   3   1.40   0.2551   1.3730   98.07   4   1.80   0.3298   1.7433   97.03   5   1.80   0.3305   1.7467   97.04   6   1.80   0.3294   1.7413   96.74   7   2.20   0.4254   2.2171   100.78   8   2.20   0.4248   2.2144   100.65   9   2.20   0.4183   2.1821   99.19

由上表可见，九个供试品的回收率在96.74％～100.78％之间，平均回收率为98.32 ％，RSD为1.57％，表明本测定法能准确地测定出样品中钠离子的含量，方法可行。

11.三批样品的含量测定结果

取三批中试样品，按氯化钾氯化钠注射液含量测定方法测定，得到吸光度后在标 准曲线上找到相应的浓度，按照：含量＝查得的浓度×稀释倍数/标示量，计算含量， 其结果见表12。

表12样品中氯化钠含量测定结果

因此，根据该测定结果，所述三种规格的三批样品中氯化钠(NaCl)含量为标示 量的96.02～101.24％，符合规定的95.0～105.0％。