蓝萼甲素衍生物及其在制备抗肿瘤药物中的应用

摘要

本发明涉及医药技术领域。本发明提供一类具有通式I所示的蓝萼甲素衍生物，本发明的化合物经体外抗肿瘤实验测试，结果显示本发明的蓝萼甲素衍生物均有明显的抗肿瘤作用，可用于制备抗肿瘤药物。

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及蓝萼甲素衍生物及其在制备抗肿瘤药物中的应用。 

背景技术

香茶菜属植物是我国民间广泛使用的草药，它们大都具有清热解毒、活血化淤、抗菌消炎，抗肿瘤等功效。蓝萼甲素是从唇形科香茶菜属植物中分离出的一贝壳杉烯二萜类天然有机化合物。 

已有的研究结果表明蓝萼甲素对肺癌、肠癌、白血病等有抗肿瘤作用（参见文献Gao et.al.,Toxicol.in Vitro,2011,25:51-36；中国专利CN200910044882.0，发明名称为“蓝萼香茶菜中二萜类化合物在制备抗癌药物中的应用”，申请公布号:CN101455652）。 

另有中国专利CN200910048554.8（发明名称为“蓝萼甲素衍生物、制备方法及其用途”，申请公布号:CN101851273A）公开了以蓝萼甲素为母体，在其羟基上引入了多肽链结构，对肺癌A549细胞，小鼠Lewis肺癌具有活性。 

还有发明公开了一类蓝萼甲素脂肪酸酯衍生物对人胃癌细胞AGS、人食管癌细胞株Eca-109、人肝癌细胞SMMC-7721、肺癌细胞A549、KB肿瘤细胞、宫颈癌细胞Hela、人结肠癌细胞SW480有活性（参见中国专利CN200910056458.8，发明名称为“蓝萼甲素的脂肪酸衍生物及其制备方法和应用”，申请公布号:CN101993359A；中国专利CN200910056457.3，发明名称为“蓝萼甲素酸酯衍生物及其制备方法和应用”，申请公布号:CN101993370A）。 

另有发明在羟基引入了苯磺酰基团对肺癌细胞A549、人肝癌细胞SMMC-7721、乳腺癌细胞MCF-7、人食管癌细胞株Eca-109、人口腔上皮肿瘤KB细胞、宫颈癌细胞Hela、结肠癌细胞SW480具有抑制作用（参见中国专利CN200910056459.2，发明名称为“酰氯化蓝萼甲素衍生物及其制备方 法和应用”，申请公布号:CN101993373A）；另有发明引入了阿魏酸的结构对人胃癌细胞AGS、人肝癌细胞SMMC-7721、肺癌细胞A549、人肾癌-A498细胞、人结肠癌细胞SW480具有抑制活性等（参见中国专利CN200910056456.9，发明名称为“蓝萼甲素的阿魏酸衍生物及其制备方法和应用”，申请公布号:CN102260173A）。以上公开化合的物，均未报道关于抗白血病的作用。 

另有中国专利申请CN201210015481.4公开了一类以醛或酮与蓝萼甲素的7和14位的羟基反应得到缩醛或缩酮，并公开了这些化合物对人绒毛癌细胞JEG-3、人肝癌HepG2肿瘤细胞、人肺癌A549细胞、人口腔上皮肿瘤KB细胞、人白血病K562和HL-60细胞。（参见，发明名称为“一种蓝萼甲素衍生物及其制备方法和应用”，申请公布号:CN102584780A）。 

可见蓝萼甲素和蓝萼甲素衍生物是新药研发的热点。 

发明内容

本发明的目的在于提供一类新的蓝萼甲素衍生物，本发明的另一目的是提供该类化合物在制备预防或治疗癌症的药物中的应用。 

本发明提供了一类蓝萼甲素衍生物，其化学结构如通式I所示： 

其中，R₁、R₂分别为一个代表H一个选自以下基团，或R₁、R₂均选自以下基团： 

（A）对氟苯甲酰基，对氯苯甲酰基，对溴苯甲酰基，对碘苯甲酰基，间氟苯甲酰基，间氯苯甲酰基，间溴苯甲酰基，间碘苯甲酰基，对甲氧基苯甲酰基，对乙氧基苯甲酰基，对丙氧基苯甲酰基，对丁氧基苯甲酰基； 

（B）桂皮酰基，4’-氟桂皮酰基，4’-氯桂皮酰基，4’-溴桂皮酰基，4’-碘桂皮酰基，3’,4’-二氟桂皮酰基，3’,4’-二氯桂皮酰基，3’,4’-二溴桂皮酰基，3’,4’-二氯桂皮酰基，3’,4’-二碘桂皮酰基； 

（C）对硝基苯乙酰基； 

（D）–COCH₂CH₂-R₃，其中R₃代表取代乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰 基；对甲氧基苯甲酰基，对乙氧基苯甲酰基，对丙氧基苯甲酰基，对丁氧基苯甲酰基，间甲氧基苯甲酰基，间乙氧基苯甲酰基，间丙氧基苯甲酰基，间丁氧基苯甲酰基，3’,4’-二甲氧基苯甲酰基，3’,4’-二乙氧基苯甲酰基，3’,4’-二丙氧基苯甲酰基，3’,4’-二丁氧基苯甲酰基； 

（E）

（F）其R₄代表甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、异丁基，苯基、苯甲基； 

（G）乙酰基、丙酰基、丁酰基。 

上述的蓝萼甲素衍生物，优选的，R1和R2的组合为如下： 

当R₁为H时，R₂选自: 

（A）对氟苯甲酰基、对氯苯甲酰基、对氟苯甲酰基，对氯苯甲酰基，对溴苯甲酰基，对碘苯甲酰基; 

（B）

（C）其R₄代表甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、异丁基，苯基、苯甲基； 

（D）–COCH₂CH₂-R₃，其中R₃代表取代乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基；对甲氧基苯甲酰基，对乙氧基苯甲酰基，对丙氧基苯甲酰基，对丁氧基苯甲酰基，间甲氧基苯甲酰基，间乙氧基苯甲酰基，间丙氧基苯甲酰基，间丁氧基苯甲酰基，3’,4’-二甲氧基苯甲酰基，3’,4’-二乙氧基苯甲酰基，3’,4’-二丙氧基苯甲酰基，3’,4’-二丁氧基苯甲酰基； 

（E）对硝基苯乙酰基； 

当R₂为H时，R₁选自： 

（A）对氟苯甲酰基、对氯苯甲酰基、对氟苯甲酰基，对氯苯甲酰基，对溴苯甲酰基，对碘苯甲酰基; 

（B）桂皮酰基，3’,4’-二氟桂皮酰基，3’,4’-二氯桂皮酰基，3’,4’-二溴桂皮 酰基，3’,4’-二氯桂皮酰基，3’,4’-二碘桂皮酰基； 

（C）其R₄代表甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、异丁基； 

（D）

（E）–COCH₂CH₂-R₃，其中R₃代表取代乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基； 

（F）对硝基苯乙酰基； 

具有上述通式I所示的化合物中，优选的化合物为： 

RA01：7-对氟苯甲酰蓝萼甲素； 

RA02：14-对氟苯甲酰蓝萼甲素 

RA03：7-对氯苯甲酰蓝萼甲素； 

RA04：14-对氯苯甲酰蓝萼甲素； 

RA05：14-间碘苯甲酰蓝萼甲素； 

RA06：7-间碘苯甲酰蓝萼甲素； 

RA07：14-（3’,4’-二氯桂皮酰基）蓝萼甲素； 

RA08：14-桂皮酰基蓝萼甲素； 

RA09：7,14-二（2-((5-苯基-1,3,4-噁二唑-2-基)硫)乙酰）蓝萼甲素； 

RA10：7-（-Boc-苯丙氨酰基）蓝萼甲素； 

RA11：7-（Boc-缬氨酰基）蓝萼甲素； 

RA12：14-（Boc-缬氨酰基）蓝萼甲素； 

RA13：7-（4-(3,4-二甲氧基苯基)-4-氧-丁酰基）蓝萼甲素； 

RA14：14-（4-氧戊酰基）蓝萼甲素； 

RA15：7-（4-氧戊酰基）蓝萼甲素； 

RA16：7-（对硝基苯乙酰基）蓝萼甲素； 

RA17：14-（对硝基苯乙酰基）蓝萼甲素； 

RA18：7,14-二乙酰基蓝萼甲素。 

本发明还提供了通式I化合物的合成路线如下： 

将蓝萼甲素与各种酸加入到干燥的二氯甲烷中，室温下搅拌溶解，然后加入一定量的对-N,N-二甲基吡啶，N,N'-二环己基碳二亚胺(DCC)以及三乙胺或吡啶，继续搅拌6～12h。然后过滤除去不溶物，滤液旋蒸除去溶剂，剩余固体硅胶柱层析分离（氯仿:甲醇=100:1～20:1）或薄层制备，得到本发明通式I的化合物。 

RA18采用蓝萼甲素与乙酰氯在60度下反应后，硅胶柱层析分离得到。 

本发明所公开的衍生物采用MTT法测定了对A549（人肺腺癌细胞）；HCT116（人肠癌细胞）；CCRF-CEM（人白血病细胞）；HL-60（人白血病细胞）的抗肿瘤活性。结果表明受试化合物均具有很好的抗肿瘤活性。 

本发明还提供了上述的蓝萼甲素衍生物及其在药理上可接受的盐或水合物在制备抗肿瘤药物或保健品方面的应用。 

本发明还提供了上述的的蓝萼甲素衍生物及其在药理上可接受的盐或水合物在制备治疗白血病药物的应用。 

本发明的化合物及其药理上可以接受的盐或水合物，还在降血脂、降胆固醇、治疗和预防动脉硬化等方面具有显著的效果，可应用于治疗癌症或上述疾病的药物或保健品。 

具体实施方式

现结合实施例，对本发明作详细描述，但本发明的实施不仅限于此。 

本发明所用试剂和原料均市售可得或可按文献方法制备。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。 

实施例1：7-对氟苯甲酰蓝萼甲素（RA01）的制备 

将蓝萼甲素70mg与对氟苯甲酸103mg加入到干燥的二氯甲烷中，室温搅拌下加入少量的对-N,N-二甲基吡啶，然后加入DCC152.2mg以及三乙胺0.5ml或吡啶0.5ml，搅拌6～12h。然后过滤除去不溶物，滤液旋蒸除去溶剂，剩余固体硅胶柱层析分离（氯仿:甲醇=100:1～20:1）或薄层制备，得到RA01的化合物。 

收率42%。¹H-NMR(δ,ppm)：5.45(1H,s,H-17α)，6.16(1H,s,H-17β)，5.61(1H,dd,J=12.0,3.5Hz,H-7)，4.93(1H,s,H-14)，3.71(1H,s,H-13)7.06(2H,m,H-23,H-27),7.84(2H,m,H-24,H-26)。¹³C-NMR(δ,ppm)：39.0(C-1),34.4(C-2),217.3(C-3),47.6(C-4),52.2(C-5),27.5(C-6),75.3(C-7),62.4(C-8),54.4(C-9),39.9(C-10),19.0(C-11),32.0(C-12),46.7(C-13),77.6(C-14),205.5(C-15),147.3(C-16),119.8(C-17),29.0(C-18),21.7(C-19),19.6(C-20),167.92(C-21),126.8(C-22),133.0(C-23),117.0(C-24),165.0(C-25),116.8(C-26),132.9(C-27)。MS：M+Na⁺=477.4，M+Cl^-=489.4。 

实施例2：14-对氟苯甲酰蓝萼甲素（RA02）的制备 

制备方法同实施例1。 

收率51%。¹H-NMR(δ,ppm)：5.45(1H,s,H-17α)，6.17(1H,s,H-17β)，4.22(1H,dd,J=12.0,3.0Hz,H-7)，6.24(1H,s,H-14)，3.23(1H,s,H-13),7.06(2H,m,H-23,H-27),7.90(2H,m,H-24,H-26)。¹³C-NMR(δ,ppm)：39.1(C-1),34.6(C-2),217.6(C-3),47.8(C-4),53.0(C-5),29.7(C-6),73.8(C-7),63.0(C-8),55.3(C-9),40.0(C-10),19.0(C-11),33.0(C-12),45.4(C-13),77.5(C-14),207.0(C-15),147.0(C-16),119.1(C-17),28.7(C-18),22.0(C-19),19.5(C-20),167.8(C-21),127.4(C-22),133.2(C-23),116.5(C-24),166.1(C-25),116.7(C-26),133.2(C-27)。MS：M+Na⁺=477.3，M+Cl^-=489.2。 

实施例3：7-对氯苯甲酰蓝萼甲素（RA03）的制备 

制备方法同实施例1，其中酸采用对氯苯甲酸。 

收率42%。¹H-NMR(δ,ppm)：5.46(1H,s,H-17α)，6.18(1H,s,H-17β)，5.64(1H,dd,J=12.0,3.5Hz,H-7)，4.94(1H,s,H-14)，3.22(1H,s,H-13),7.38(2H,m,H-23,H-27),7.78(2H,m,H-24,H-26)。¹³C-NMR(δ,ppm)：39.0(C-1),34.4(C-2),217.2(C-3),47.6(C-4),52.2(C-5),27.5(C-6),75.3(C-7),62.4(C-8),54.4(C-9),39.9(C-10),19.0(C-11),32.0(C-12),46.7(C-13),77.8(C-14),205.4(C-15),147.3(C-16),119.8(C-17),29.0(C-18),21.7(C-19),19.6(C-20),165.1(C-21),129.0(C-22),130.0(C-23),131.8(C-24),140.9(C-25),131.8(C-26),130.0(C-27)。MS：M+Na⁺=493.3，M+Cl^-=505.2。 

实施例4：14-对氯苯甲酰蓝萼甲素（RA04）的制备 

制备方法同实施例3。 

收率46%。¹H-NMR(δ,ppm)：5.48(1H,s,H-17α)，6.20(1H,s,H-17β)，4.22(1H,dd,J=12.5,3.5Hz,H-7)，6.26(1H,s,H-14)，3.25(1H,s,H-13),7.38(2H,m,H-23,H-27),7.84(2H,m,H-24,H-26)。¹³C-NMR(δ,ppm)：39.1(C-1),34.6(C-2),217.6(C-3),47.8(C-4),53.0(C-5),29.7(C-6),73.8(C-7),63.0(C-8),55.3(C-9),40.0(C-10),19.0(C-11),33.0(C-12),45.4(C-13),77.6(C-14),207.0(C-15),147.0(C-16),119.1(C-17),28.9(C-18),22.0(C-19),19.5(C-20),166.2(C-21),129.6(C-22),132.0(C-23),129.8(C-24),140.6(C-25),129.8(C-26),132.2(C-27)。MS：M+Na⁺=493.4，M+Cl^-=505.3。 

实施例5：14-间碘苯甲酰蓝萼甲素（RA05）的制备 

制备方法同实施例1，其中酸采用对碘苯甲酸。 

收率32%。¹H-NMR(δ,ppm)：5.48(1H,s,H-17α)，6.18(1H,s,H-17β)，4.21(1H,dd,J=10.5,3.5Hz,H-7)，6.26(1H,s,H-14)，3.23(1H,s,H-13),8.22(1H,m,H-23),7.83(2H,m,H-25,H-27),7.10(1H,m,H-26)。¹³C-NMR(δ,ppm)：39.1(C-1),34.6(C-2),217.6(C-3),47.8(C-4),53.0(C-5),29.5(C-6),73.7(C-7),63.1(C-8),55.3(C-9),40.0(C-10),18.9(C-11),33.0(C-12),45.4(C-13),77.6(C-14),207.0(C-15),146.9(C-16),119.2(C-17),28.6(C-18),22.0(C-19),19.5(C-20),165.7(C-21),133.1(C-22),139.4(C-23),94.8(C-24),142.9(C-25),129.7(C-26),131.1(C-27)。MS：M+Na⁺=585.3。 

实施例6：7-间碘苯甲酰蓝萼甲素（RA06）的制备 

制备方法同实施例5。 

收率30%。¹H-NMR(δ,ppm)：5.44(1H,s,H-17α)，6.16(1H,s,H-17β)，5.64(1H,dd,J=12.0,3.6Hz,H-7)，4.92(1H,s,H-14)，3.20(1H,s,H-13),8.21(1H,m,H-23),7.72(2H,m,H-25)，7.12(1H，m，H-26)，7.85(1H，m，H-27)。 ¹³C-NMR(δ,ppm)：37.5(C-1),32.9(C-2),215.7(C-3),46.1(C-4),50.7(C-5),26.0(C-6),73.8(C-7),60.9(C-8),52.9(C-9),38.4(C-10),17.5(C-11),30.4(C-12),45.2(C-13),76.2(C-14),203.8(C-15),145.8(C-16),118.3(C-17),27.4(C-18),20.2(C-19),18.0(C-20),163.0(C-21),131.0(C-22),138.0(C-23),93.5(C-24),141.7(C-25),128.7(C-26),129.7(C-27)。MS：M+Na⁺=585.3，M+Cl^-=597.2。 

实施例7：14-（3’,4’-二氯桂皮酰基）蓝萼甲素（RA07）的制备 

制备方法同实施例1，其中酸采用3’,4’-二氯桂皮酸。 

收率35%。¹H-NMR(δ,ppm)：5.44(1H,s,H-17α)，6.21(1H,s,H-17β)，4.19(1H,dd,J=12.0,3.5Hz,H-7)，6.06(1H,s,H-14)，3.18(1H,s,H-13),6.32(1H,d,J=16.0Hz,H-22),7.50(1H,d,J=16.0Hz,H-23),7.55(1H,d,J=2.0Hz,H-25),7.41(1H,d,J=8.0Hz,H-28),7.28(1H,dd,J=13.5,3.5Hz,H-29)。¹³C-NMR(δ,ppm)：39.1(C-1),34.6(C-2),217.7(C-3),47.8(C-4),52.9(C-5),29.7(C-6),73.8(C-7),62.9(C-8),55.3(C-9),40.0(C-10),18.9(C-11),33.0(C-12),45.3(C-13),77.4(C-14),206.9(C-15),146.9(C-16),119.1(C-17),28.6(C-18),21.9(C-19),19.5(C-20),166.7(C-21),120.7(C-22),143.7(C-23),135.4(C-24),128.1(C-25),134.2(C-26),135.2(C-27),131.9(C-28),130.7(C-29)。MS：M+Na⁺=553.3，M+Cl^-=565.2。 

实施例8：14-桂皮酰基蓝萼甲素（RA08）的制备 

制备方法同实施例7。 

收率31%。¹H-NMR(δ,ppm)：5.45(1H,s,H-17α)，6.23(1H,s,H-17β)，4.21(1H,m,H-7)，6.07(1H,s,H-14)，3.22(1H,s,H-13),6.35(1H,d,J=16.0Hz,H-22),7.63(1H,d,J=16.0Hz,H-23),7.48(2H,m,H-25,H-29),7.36(3H,m,H-26,H-27,H-28)。¹³C-NMR(δ,ppm)：39.1(C-1),34.6(C-2),217.6(C-3),47.8(C-4),53.0(C-5),30.0(C-6),73.9(C-7),62.7(C-8),55.4(C-9),40.0(C-10),19.0(C-11),33.0(C-12),45.4(C-13),77.6(C-14),206.9(C-15),147.0(C-16),119.1(C-17),28.7(C-18),21.9(C-19),19.5(C-20),167.2(C-21),118.5(C-22),146.8(C-23),135.1(C-24),129.2(C-25),129.9(C-26),131.6(C-27),129.9(C-28),129.2(C-29)。 MS：M+Na⁺=485.4，M+Cl^-=497.4 

实施例9：7,14-二（2-((5-苯基-1,3,4-噁二唑-2-基)硫)乙酰）蓝萼甲素（RA09）的制备 

制备方法同实施例1，其中酸换成2-((5-苯基-1,3,4-噁二唑-2-基)硫)乙酸。 

收率33%。¹H-NMR(δ,ppm)：5.37(1H,s,H-17α)，6.05(1H,s,H-17β)，5.37(1H,dd,J=11.0,4.5Hz,H-7)，6.06(1H,s,H-14)，3.17(1H,s,H-13),4.24(4H,m,H-2’,H-2’’),7.95(4H,m,H-6’,10’,6’’,10’’),7.47(6H,m,H-7’,8’,9’,7’’,8’’,9’’)。¹³C-NMR(δ,ppm)：37.9(C-1),33.4(C-2),216.3(C-3),46.7(C-4),51.6(C-5),25.5(C-6),76.0(C-7),60.8(C-8),54.7(C-9),39.0(C-10),17.8(C-11),32.1(C-12),44.2(C-13),76.9(C-14),202.8(C-15),144.8(C-16),118.8(C-17),27.8(C-18),20.8(C-19),18.6(C-20),167.3(C-1’),34.6(C-2’),123.4(C-3’),166.9(C-4’),126.7(C-5’),126.7(C-6’),129.0(C-7’),131.8(C-8’),129.0(C-9’),126.7(C-10’)167.3(C-1’’),33.6(C-2’’),123.4(C-3’’),166.9(C-4’’),126.7(C-5’’),126.7(C-6’’),129.0(C-7’’),131.7(C-8’’),129.0(C-9’’),126.7(C-10’’)。MS：M+H⁺=769.0 

实施例10：7-（Boc-苯丙氨酰基）蓝萼甲素（RA10）的制备 

制备方法同实施例1，其中酸换成Boc-苯丙氨酸。 

收率32%。¹H-NMR(δ,ppm)：5.41(1H,s,H-17α)，6.14(1H,s,H-17β)，5.38 (1H,dd,J=12.0,3.6Hz,H-7)，4.67(1H,s,H-14)，3.10(1H,s,H-13),4.28(1H,dd,J=13.8,7.2Hz,H-2’),4.97(2H,d,J=7.2Hz，H3’x2),7.15(3H,m,H-5’,7’,9’),7.30(2H,m,H-6’,8’,NH)。¹³C-NMR(δ,ppm)：37.4(C-1),32.8(C-2),215.6(C-3),46.0(C-4),50.5(C-5),25.6(C-6),72.1(C-7),60.5(C-8),52.7(C-9),38.2(C-10),17.4(C-11),30.3(C-12),45.1(C-13),75.8(C-14),203.7(C-15),146.0(C-16),118.1(C-17),27.3(C-18),20.2(C-19),17.9(C-20),169.3(C-1’),49.2(C-2’),37.5(C-3’),135.3(C-4’),128.9(C-5’),128.2(C-6’),126.7(C-7’),128.7(C-8’),128.7(C-9’),157.6(C-1’’)76.0(C-2’’),27.7(C-3’’),27.7(C-4’’),27.7(C-5’’)。MS：M+Na⁺=602.5,M+Cl^-=614.3 

实施例11：7-（Boc-缬氨酰基）蓝萼甲素（RA11）的制备 

制备方法同实施例1，其中酸换成Boc-缬氨酸。 

收率31%。¹H-NMR(δ,ppm)：5.42(1H,s,H-17α)，6.09(1H,s,H-17β)，5.36(1H,dd,J=12.0,3.6Hz,H-7)，4.80(1H,s,H-14)，3.10(1H,brs,H-13),3.42(1H,m,H-2’),3.30(1H,s,H-3’),7.56(1H,s,NH)。¹³C-NMR(δ,ppm)：37.3(C-1),32.9(C-2),217.5(C-3),46.0(C-4),50.5(C-5),29.9(C-6),73.2(C-7),60.8(C-8),53.0(C-9),38.3(C-10),17.3(C-11),30.4(C-12),45.4(C-13),75.0(C-14),204.9(C-15),146.3(C-16),117.6(C-17),29.9(C-18),19.8(C-19),17.9(C-20),169.7(C-1’),59.6(C-2’),26.8(C-3’),17.6(C-4’),17.2(C-5’),157.9(C-1’’)79.3(C-2’’),27.3(C-3’’),27.3(C-4’’),27.3(C-5’’)。MS：M+Na⁺=554.5,M+Cl^-=566.3实施例12：14-（Boc-缬氨酰基）蓝萼甲素（RA12）的制备 

制备方法同实施例11。 

收率30%。¹H-NMR(δ,ppm)：5.38(1H,s,H-17α)，6.12(1H,s,H-17β)，3.75(1H,d,J=6.0Hz,H-7)，6.00(1H,s,H-14)，3.04(1H,brs,H-13),3.31(1H,m,H-2’),3.30(1H,m,H-3’),7.41(1H,s,NH)。¹³C-NMR(δ,ppm)：37.4(C-1),33.0(C-2),217.8(C-3),46.2(C-4),51.5(C-5),28.2(C-6),71.8(C-7),61.1(C-8),53.9(C-9),38.3(C-10),17.3(C-11),32.9(C-12),44.1(C-13),75.9(C-14),205.4(C-15),145.6(C-16),117.1(C-17),29.4(C-18),20.0(C-19),17.5(C-20),172.1(C-1’),59.2(C-2’),27.1(C-3’),17.8(C-4’),18.1(C-5’),156.2(C-1’’)79.7(C-2’’),27.5(C-3’’),27.5(C-4’’),27.5(C-5’’)。MS：M+Na⁺=554.2,M+Cl^-=566.0 

实施例13：7-（4-(3,4-二甲氧基苯基)-4-氧-丁酰基）蓝萼甲素（RA13）的制备 

制备方法同实施例1，其中酸换4-(3,4-二甲氧基苯基)-4-氧-丁酸。 

收率51%。¹H-NMR(δ,ppm)：5.41(1H,s,H-17α)，6.14(1H,s,H-17β)，5.42(1H,dd,J=12.0,4.2Hz,H-7),4.82(1H,s,H-14)，3.14(1H,brs,H-13),7.49(1H,m,H-26),7.18(1H,m,H-29),7.58(1H,m,H-30)。¹³C-NMR(δ,ppm)：37.5(C-1),32.9(C-2),215.9(C-3),49.0(C-4),50.6(C-5),28.0(C-6),73.6(C-7),60.6(C-8),52.7(C-9),38.3(C-10),17.5(C-11),32.3(C-12),45.1(C-13),75.4(C-14),204.2(C-15),146.1(C-16),118.0(C-17),27.3(C-18),20.2(C-19),17.5(C-20),170.2(C-21),25.8(C-22)30.3(C-23),195.7(C-24),148.5(C-25),114.9(C-26),153.0(C-27),155.8(C-28),122.3(C-29),129.0(C-30),55.5(OCH3),55.6(OCH3’)。MS：M+Na⁺=574.7 

实施例14：14-（4-氧戊酰基）蓝萼甲素（RA14）的制备 

制备方法同实施例1，其中酸换成4-氧戊酸。 

收率29%。¹H-NMR(δ,ppm)：5.42(1H,s,H-17α)，6.18(1H,s,H-17β)，4.17(1H,dd,J=10.2,4.8Hz,H-7),5.96(1H,s,H-14)，3.11(1H,brs,H-13)。 ¹³C-NMR(δ,ppm)：37.6(C-1),33.1(C-2),216.1(C-3),46.3(C-4),51.5(C-5),28.1(C-6),72.2(C-7),61.3(C-8),53.8(C-9),38.4(C-10),17.4(C-11),31.5(C-12),43.7(C-13),75.5(C-14),206.4(C-15),145.5(C-16),117.4(C-17),27.1(C-18),20.4(C-19),17.4(C-20),171.7(C-21),27.5(C-22),37.4(C-23),205.4(C-24),29.2(C-25)。MS：M+Na⁺=453.4,M+Cl^-=465.3 

实施例15：7-（4-氧戊酰基）蓝萼甲素（RA15）的制备 

制备方法同实施例14。 

收率32%。¹H-NMR(δ,ppm)：5.43(1H,s,H-17α)，6.16(1H,s,H-17β)，5.38(1H,dd,J=12.0,3.6Hz,H-7),4.82(1H,s,H-14)，3.15(1H,brs,H-13)。 ¹³C-NMR(δ,ppm)：37.5(C-1),32.9(C-2),215.8(C-3),46.1(C-4),50.6(C-5),27.9(C-6),73.6(C-7),60.6(C-8),52.7(C-9),38.3(C-10),17.5(C-11),31.5(C-12),45.1(C-13),75.4(C-14),205.7(C-15),146.1(C-16),118.0(C-17),27.5(C-18),20.2(C-19),17.9(C-20),169.9(C-21),25.8(C-22),37.3(C-23),204.1(C-24),28.7(C-25)。MS：M+Na⁺=453.4,M+Cl^-=465.3 

实施例16：7-（对硝基苯乙酰基）蓝萼甲素（RA16）的制备 

制备方法同实施例1，其中酸对硝基苯乙酸。 

收率26%。¹H-NMR(δ,ppm)：5.40(1H,s,H-17α)，6.11(1H,s,H-17β)，5.41(1H,dd,J=12.0,3.6Hz,H-7),4.74(1H,s,H-14)，3.08(1H,brs,H-13),3.70 (2H,s,H-22),7.39(2H,m,H-24,H-28),8.16(2H,m,H-25,H-27)。¹³C-NMR(δ,ppm)：37.4(C-1),32.8(C-2),215.5(C-3),46.0(C-4),50.7(C-5),27.7(C-6),73.5(C-7),60.6(C-8),52.8(C-9),38.5(C-10),17.4(C-11),30.2(C-12),45.1(C-13),75.7(C-14),203.9(C-15),145.9(C-16),118.1(C-17),27.4(C-18),20.2(C-19),17.9(C-20),167.4(C-21),40.6(C-22)139.7(C-23),129.7(C-24),123.5(C-25),145.3(C-26),123.5(C-27),129.7(C-28)。MS：M+Na⁺=518.4,M+Cl^-=530.1 

实施例17：14-（对硝基苯乙酰基）蓝萼甲素（RA17）的制备 

制备方法同实施例16。 

收率31%。¹H-NMR(δ,ppm)：5.41(1H,s,H-17α)，6.18(1H,s,H-17β)，4.20(1H,dd,J=12.0,3.6Hz,H-7),6.00(1H,s,H-14)，3.20(1H,brs,H-13),3.70(2H,s,H-22),7.40(2H,m,H-24,H-28),8.16(2H,m,H-25,H-27)。 ¹³C-NMR(δ,ppm)：37.4(C-1),32.8(C-2),215.5(C-3),46.0(C-4),50.7(C-5),25.8(C-6),73.5(C-7),60.6(C-8),52.8(C-9),38.3(C-10),17.4(C-11),30.2(C-12),45.1(C-13),76.3(C-14),203.9(C-15),145.9(C-16),118.1(C-17),27.4(C-18),20.2(C-19),17.9(C-20),167.4(C-21),40.6(C-22)139.7(C-23),129.7(C-24),123.5(C-25),145.3(C-26),123.5(C-27),129.7(C-28)。MS：M+Na⁺=518.4 

实施例18：7，14-二乙酰蓝萼甲素（RA18）的制备 

蓝萼甲素80mg，DMAP10mg，吡啶10ml，新蒸乙酰氯0.5ml，氮气保护下于60度反应8h。然后将反应液倒入到200ml水中，并用稀盐酸酸化至中性，然后用氯仿萃取。萃取液Na₂SO₄干燥后，过滤除去，然后旋蒸得到固体。制备薄层分离（氯仿：甲醇40:1）得到目标化合物。收率30%。 

¹H-NMR(δ,ppm)：5.48(1H,s,H-17α)，6.09(1H,s,H-17β)，5.20(1H,dd,J=12.0,3.5Hz,H-7),6.02(1H,s,H-14)，3.14(1H,brs,H-13)。¹³C-NMR(δ,ppm)：39.4(C-1),35.2(C-2),219.9(C-3),48.4(C-4),53.2(C-5),27.3(C-6),75.9(C-7),63.1(C-8),56.7(C-9),40.9(C-10),19.5(C-11),33.9(C-12),46.3(C-13),76.8(C-14),206.1(C-15),148.3(C-16),118.9(C-17),28.7(C-18),22.1(C-19),19.6(C-20),173.0(C-1’),22.0(C-2’),172.3(C-1’’),22.0(C-2’’)。MS：M+Na⁺=439.3，M+Cl^-=451.1 

实施例19：14-丁酰蓝萼甲素（RA19）的制备 

由蓝萼甲素80mg，DMAP10mg，吡啶10ml，新蒸丁酰氯0.5ml，氮气保护下反应6h。然后将反应液倒入到200ml水中，并用稀盐酸酸化至中性，然后用氯仿萃取。萃取液Na₂SO₄干燥后，过滤除去，然后旋蒸得到固体。制备薄层分离（氯仿：甲醇50:1）得到目标化合物采用上述方法制备，收率25%。MS：M+Na⁺=425.2 

实施例20：蓝萼甲素7,14-缩苯甲醛（RA20） 

采用专利文献CN102584780A公开的方法制备。MS：M+Na⁺=443.5 

实施例21：蓝萼甲素7,14-缩苯甲醛（RA20）缩乙醛（RA21） 

采用专利文献CN102584780A公开的方法制备。M+Na⁺=381.0 

实施例22：蓝萼甲素（GA）的制备 

参考文献《中国中药杂志》,25(2000)678-679所公开的方法制备。 

实施例23：抗肿瘤活性测试 

本发明的蓝萼甲素衍生物（RA1-RA18），以及对照例RA19、RA20、RA21和GA，采用如下方法进行了对A549（人肺腺癌细胞）；HCT116（人肠癌细胞）；CCRF-CEM（人白血病细胞）；HL-60（人白血病细胞）抗肿瘤实验。96孔板每孔加入浓度为4-10×10⁴个/ml的细胞悬液100μl，置37℃，5%CO₂培养箱内。24h后，加入样品液，10μl/孔，设双复孔，37℃，5%CO₂作用72h。每孔加入5mg/ml的MTT溶液20μl，作用4h后加入溶解液，100μl/孔，置培养箱内，溶解后用全波长多功能酶标仪测570nm OD值。药理实验具体结果如表1所示所有受试化合物均表现出了较好的抗肿瘤作用，并且化合物RA01～RA09、RA12～18对白血病细胞CCRF和HL-60表现出了较好的抑制作用。 

表1蓝萼甲素衍生物人体肿瘤细胞的体外增殖抑制作用 

以上已对本发明创造的较佳实施例进行了具体说明，但本发明创造并不限于所述实施例，熟悉本领域的技术人员在不违背本发明创造精神的前提下还可作出种种的等同的变型或替换，这些等同的变型或替换均包含在本申请权利要求所限定的范围内。