一种苹果中福美胂农药残留的检测方法

摘要

本发明公开了一种苹果中福美胂农药残留的检测方法，采用苯作为萃取溶剂可将苹果中残留的福美胂萃取得率控制在80.87%～84.38%之间，采用C

说明书

技术领域

本发明属于食品安全技术领域，具体涉及一种苹果中福美胂农药残留的检测方 法。

背景技术

福美胂是一种二硫代氨基甲酸酯类杀菌剂，化学名称为三-N-二甲基二硫代氨 基甲酸胂，其抗菌性强，并且具有持效期长、在树皮死组织部位渗透力强的特点， 对多种农作物的多种病害均有防治效果，尤其对苹果腐烂病有较好的防治作用，因 此曾有过比较广泛的使用，尤其是在北方果树生产上有广泛应用。福美胂为中等毒 性，可通过呼吸道、胃肠道和皮肤吸收，排泄出体外的过程长，还会在体内转化成 毒性可能更大的无机三价砷及其衍生物，产生无机砷中毒症状，对皮肤、粘膜亦有 刺激作用，一旦发生福美胂中毒，其诊断、治疗均较困难。由于果园中使用福美胂， 造成果树、环境甚至生态系统严重污染，所以早在2007年以前，中国就已禁止砷 制剂在果树生产中的使用。但近年有报道，在中国某苹果主产区，一种无任何标志、 小作坊式生产的药袋被部分果农使用，这种药袋内部涂布福美胂和退菌特，并包裹 在幼果上直至其成熟，而对于苹果中是否确实存在福美胂，国内多家检测机构都表 示无法检测。福美胂作为“药袋事件”的元凶之一，理应受到严格的监管。但目前国 际上福美胂的药物残留检测尚属空白，因此福美胂残留检测方法的建立，尤其是确 定苹果中福美胂残留的检测方法成为保证苹果产业安全的关键环节。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于针对当前苹果中福美胂无法检测的问题，提供 一种检测苹果中残留福美胂含量的方法。

解决上述技术问题所采用的方案由下述步骤组成：

1、绘制标准曲线

将体积分数为0.1%的三氟乙酸水溶液与色谱级乙腈按体积比为9:1混合均匀， 配制成A相，以纯度为100%的乙腈为B相，将A相与B相按体积比为60:40混合 均匀作为流动相，采用C₁₈色谱柱，在流速1.00mL/分钟、柱温30℃、检测波长247nm 条件下，用液相色谱分别对0.53mg/L、1.06mg/L、2.12mg/L、21.2mg/L、53.6mg/L、 106.20mg/L的福美胂标准溶液进行检测，统计不同浓度福美胂对应的峰面积，以 福美胂浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，由计算机绘制曲线，并得出标准曲线的线 性回归方程为：

y=0.3780x-0.1232    （1）

式中x为福美胂浓度，单位mg/L；y为峰面积，单位mAU×分钟；相关系数r²=0.9997。

2、测定苹果中福美胂的加标回收率

将不含砷元素的苹果去梗后粉碎成果泥状，向10g苹果泥中加入0.53～265.5mg/L 福美胂标准溶液1mL，混匀后按每克苹果泥加入1～3mL分析纯级苯，常温搅拌 萃取，静置，倒出萃取上清液，下层萍果泥再重复搅拌萃取3～5次，合并萃取上 清液，用乙腈定容至100mL，取10mL定容后的溶液，用氮气浴吹干，用2mL色 谱级乙腈完全溶解，过0.45μm有机滤膜，得到福美胂测试液，用液相色谱按照步 骤1的方法对福美胂测试液进行检测，根据福美胂测试液对应的峰面积，按照公式 （1）计算福美胂测试液的浓度，再按照下述公式（2）计算不同福美胂标准样品加 入量对应的加标回收率：

式中m_测代表苹果中福美胂含量的测定值，单位μg/g；m_标代表苹果中福美胂标准样 品的加入量，单位μg/g。

3、检测待测苹果中的福美胂含量

将待测苹果样品粉碎成果泥状，取10g苹果泥，将苹果泥与分析纯级苯按质量 体积比为1g:1～3mL混合均匀，常温搅拌萃取，静置，倒出萃取上清液，下层萍 果泥再重复搅拌萃取3～5次，合并萃取上清液，用乙腈定容至100mL，取10mL 定容后的溶液，用氮气浴吹干，用2mL色谱级乙腈完全溶解，过0.45μm有机滤 膜，得到福美胂待测样品溶液，用液相色谱按照步骤1的方法对福美胂待测样品溶 液进行检测，根据福美胂待测样品溶液对应的峰面积，按照公式（1）计算福美胂 待测样品溶液的浓度，再按照下述公式（3）计算待测苹果样品中福美胂的含量，

式中Y代表待测苹果样品中福美胂含量，单位μg/g；m_样代表待测苹果样品中福美 胂含量的测定值，单位μg/g；X代表加标回收率，其取值是与m_样最接近的m_测对 应的加标回收率。

本发明的步骤（2）和（3）中，最佳将苹果泥与分析纯级苯按质量体积比为1g:2mL 混合均匀，进行福美胂的萃取。

本发明采用苯作为萃取溶剂，可将苹果中残留的福美胂萃取得率控制在 80.87%～84.38%之间，采用C₁₈色谱柱，以体积分数为0.1%的三氟乙酸水溶液为溶 剂配制乙腈含量为10%的溶液作为A相，100%乙腈为B相，以A相与B相体积比 为60:40的混合液为流动相，在流速1.00mL/分钟、柱温30℃、检测波长247nm 条件下，进行福美胂的色谱分析，10分钟左右福美胂被分离和检测。本发明方法在 准确度、精密度以及加标回收率等方面均能满足国家对农药残留分析质量控制要 求，可以用于准确检测苹果中福美胂农药的残留量。

附图说明

图1是福美胂标准溶液的色谱图。

图2是苹果空白样品色谱图。

图3是添加福美胂的苹果样品色谱图。

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本发明进一步详细说明，但本发明不限于这些实施 例。

实施例1

1、绘制标准曲线

将体积分数为0.1%的三氟乙酸水溶液与色谱级乙腈按体积比为9:1混合均匀， 配制成A相，以纯度为100%的乙腈为B相，将A相与B相按体积比为60:40混合 均匀作为流动相，采用C₁₈色谱柱（250mm×4.6mm ID，5.0μm），在流速1.00mL/ 分钟、柱温30℃、检测波长247nm条件下，用液相色谱分别对0.53mg/L、1.06mg/L、 2.12mg/L、21.2mg/L、53.6mg/L、106.20mg/L的福美胂标准溶液进行检测，统计 不同浓度福美胂对应的峰面积，以福美胂浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，由计算 机绘制曲线，并得出标准曲线的线性回归方程为：

y=0.3780x-0.1232    （1）

式中x为福美胂浓度，单位mg/L；y为峰面积，单位mAU×分钟；相关系数r²=0.9997。

2、测定苹果中福美胂的加标回收率

将不含砷元素的苹果去梗后粉碎成果泥状，分别取10g苹果泥置于100mL磨 口三角瓶中，依次加入0.53mg/L、1.06mg/L、2.12mg/L、21.2mg/L、53.6mg/L、 106.2mg/L、159.3mg/L、265.5mg/L福美胂标准溶液1mL，混匀后加入20mL分 析纯级苯，2000转/分钟常温搅拌萃取30分钟，静置5分钟，倒出萃取上清液，下 层萍果泥在相同条件下再重复搅拌萃取4次，合并5次萃取上清液于100mL容量 瓶中，用乙腈定容，取10mL定容后的溶液于试管中，用氮气浴60℃吹干，向试 管中加入2mL色谱级乙腈，用混匀器混匀1分钟，超声处理30秒，过0.45μm有 机滤膜，得到福美胂测试液，用液相色谱按照步骤1的方法对福美胂测试液进行检 测，将福美胂测试液对应的峰面积代入公式（1），计算福美胂测试液的浓度，再按 照下述公式（2）计算不同福美胂标准样品加入量对应的加标回收率：

式中m_测代表苹果中福美胂含量的测定值，单位μg/g；m_标代表苹果中福美胂标准样 品的加入量，单位μg/g。每组实验平行做3次，实验结果取3次实验的平均值。

3、检测待测苹果中的福美胂含量

将待测苹果粉碎成果泥状，取10g苹果泥置于100mL磨口三角瓶中，加入 20mL分析纯级苯，2000转/分钟常温搅拌萃取30分钟，静置5分钟，倒出萃取上 清液，下层萍果泥在相同条件下再重复搅拌萃取4次，合并5次萃取上清液于100mL 容量瓶中，用乙腈定容，取10mL定容后的溶液于试管中，用氮气浴60℃吹干， 向试管中加入2mL色谱级乙腈，用混匀器混匀1分钟，超声处理30秒，过0.45μm 有机滤膜，得到福美胂待测样品溶液，用液相色谱按照步骤1的方法对福美胂待测 样品溶液进行检测，将福美胂待测样品溶液对应的峰面积代入公式（1），计算福美 胂待测样品溶液的浓度，再按照下述公式（3）计算待测苹果样品中福美胂的含量，

式中Y代表待测苹果样品中福美胂含量，单位μg/g；m_样代表待测苹果样品中福美 胂含量的测定值，单位μg/g；X代表加标回收率，其取值是与m_样最接近的m_测对 应的加标回收率。

为了证明本发明的有益效果，发明人进行了大量的实验室研究试验，各种试 验情况如下：

1、本发明检测方法的加标回收率

对福美胂标准溶液、不含砷元素的苹果样品以及添加福美胂标准溶液的苹果 样品中进行色谱分析，试验结果见图1～3。由图可以看出，10.65分钟目标组分福 美胂得到了良好的分离与检测。

在10g不含砷元素的苹果样品中分别加入106.2mg/L、159.3mg/L、265.5mg/L 福美胂标准溶液1mL，按照实施例1步骤2的方法进行加标回收率测定，试验结 果见表1。

表1加标回收率试验结果

由表1可知，10g苹果泥中加入1mL106.2mg/L福美胂标准溶液时，苹果中 福美胂含量的测定值为8.714μg/g，即加标回收率为82.05%；10g苹果泥中加入1mL 159.3mg/L福美胂标准溶液时，苹果中福美胂含量的测定值为12.883μg/g，即加标 回收率为80.24%；10g苹果泥中加入1mL265.5mg/L福美胂标准溶液时，苹果中 福美胂含量的测定值为22.403μg/g，即加标回收率为84.38%。试验结果说明，采 用本发明方法福美胂的加标回收率为80.24%～84.38%，变异系数为2.83%～3.15%， 即本发明检测方法对于苹果中福美胂残留的分析是准确、可靠的。

2、本发明检测方法的检出限和定量限

在不含砷元素的苹果样品中加入不同浓度的福美胂标准溶液，按照实施例 1步骤2的方法进行检测，以S/N=3定为检出限，以S/N=10定为定量限，试验 结果显示，本发明方法测定苹果中福美胂的检出限为0.2953mg/kg，定量限为 1.2067mg/kg。

综合上述试验结果可见，本发明方法在准确度、精密度以及加标回收率等方 面均能满足国家对农药残留分析质量控制要求，可以用于苹果中福美胂残留的检 测。