一种基于超声波辅助提取青枫叶中总黄酮的方法

摘要

本发明公开了一种基于超声波辅助提取青枫叶中总黄酮的方法，青枫叶片经烘干、粉碎为提取原料，提取原料在超声萃取釜中以乙醇为溶剂，气升式搅拌条件下，它激式超声发声方式，提取方式为间隔2min超声一次，每次3min，超声提取30min得到提取液，水相浓缩干燥就从青枫叶得到总黄酮提取物，该提取方法杂质少，提取率高可达97%以上，提取时间短，比传统提取方法可缩短10倍以上时间，操作简单易行，对药材中有效成分具有保护作用，不会破坏热敏性药物的生理活性，同时，可大大降低能耗。

说明书

技术领域

本发明涉及黄酮的提取技术，具体涉及一种基于超声波辅助提取青枫叶中总黄酮的 方法。

背景技术

青枫属于槭树科、槭属植物，产中国、日本和朝鲜；中国分布于长江流域各省，山 东、河南、浙江也有。多生于海拔1200m以下山地、丘陵之林缘或疏林中。黄酮类化合 物（Flavonoids）是一类低分子植物次生代谢物，广泛分布于蔬菜、水果和药用植物中。 这类化合物有共同的母核C₆-C₃-C₆结构，目前已从植物材料中分离得到了几百种黄酮类 化合物，而且新的化合物还在不断地被发现。其中双氢黄酮类（flavonoids）化合物按照 取代基及其位置不同，可将其分为Ⅰ苷元-芹菜素（Apigenin）为主体、Ⅱ苷元-木犀草 素（Luteolin）为主体、Ⅲ苷元-山奈酚（Kaempferol）为主体、Ⅳ苷元-槲皮素（Quercetin） 为主体、Ⅴ柚皮素（Naringin）为主体的共5大类。黄酮类化合物的功效是多方面的， 它是一种很强的抗氧剂，可有效清除体内的氧自由基，可以改善血液循环，可以降低胆 固醇，改善心脑血管疾病的症状等。青枫中也含有双氢黄酮类化合物。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种杂质少、操作简单、提取率高、提取时间短 的基于超声波辅助提取青枫叶中总黄酮的方法。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种基于超声波辅助提取青枫叶中 总黄酮的方法，其步骤如下：

a、将新鲜的青枫叶片，在60℃条件下烘干24h，然后粉碎，过0.45μm筛为提取原料， 将提取原料称重后装入超声萃取釜中；

b、在超声萃取釜中加入质量百分浓度为30-50℃的乙醇，所述提取原料与乙醇的质 量体积比为1g：14-16ml，气升式搅拌条件下，在30-45℃下超声提取30min得到提取液， 提取液减压浓缩去醇相，水相浓缩干燥得到总黄酮提取物；其中超声发生方式为：它激 式超声发声，径向振动柱状换能器，超声波功率为300W，超声频率为22-55kHz，提取 方式为间隔2min超声一次，每次3min。

与现有技术相比，本发明的优点在于一种基于超声波辅助提取青枫叶中总黄酮的方 法，青枫叶片经烘干、粉碎为提取原料，提取原料在超声萃取釜中以乙醇为溶剂，气升 式搅拌条件下，它激式超声发声方式，提取方式为间隔2min超声一次，每次3min，超声 提取30min得到提取液，水相浓缩干燥就从青枫叶得到总黄酮提取物，该提取方法杂质 少，提取率高可达97%以上，提取时间短，比传统提取方法可缩短10倍以上时间，操作 简单易行，对药材中有效成分具有保护作用，不会破坏热敏性药物的生理活性，同时， 可大大降低能耗。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。

实施例1

将新鲜青枫叶片，在60℃下烘干24h，粉碎，过0.45μm筛，得50g提取原料，装 入超声萃取釜中，加入质量百分浓度40%的乙醇750mL，混合，气升式搅拌条件下于 35℃超声提取30min得到提取液，提取液减压浓缩去醇相，水相浓缩干燥得到总黄酮提 取物，提取物中黄酮含量约为72%。其中超声发生方式：它激式超声发声，径向振动 柱状换能器，超声波功率为300W，超声频率为33kHz，提取方式为间隔2min超声一 次，每次3min。

实施例2

与实施例1基本相同，所不同的只是加入质量百分浓度为30%的乙醇800mL，超 声频率为22kHz，提取物中黄酮含量约为65%。

实施例3

与实施例1基本相同，所不同的只是加入质量百分浓度为50%的乙醇700mL，超 声频率为55kHz，提取物中黄酮含量约为70%。

上述黄酮提取物中黄酮类化合物的含量检测是根据Al³⁺-芦丁二元络合物荧光光度 法分析，激发光谱带宽3nm，激发波长λex436nm，发射光谱带宽5nm，λem483nm， 芦丁标准溶液荧光强度对相应浓度作图定量。提取液中4中有效成分含量的测定采用高 效液相色谱法分析，色谱柱为Varian，Microsorb-MV100C18，检测波长360nm，流动 相为甲醇/水＝55∶45，磷酸调pH=2.5；柱温为25℃，流速为1.0ml/min，进样量为10μl， 标准物质外标法定量，黄酮提取物中黄酮类化合物含量约为65-75%，主要成份为Ⅳ苷 元-槲皮素类黄酮单体，如槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷，槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷，槲皮 素，芦丁等。

本发明制得的总黄酮提取物具有改善微循环、抗心律失常等作用。对心脏微循环影 响实验中可以用SD大鼠为实验对象，给予4.0g（生药）/kg的提取物每日灌胃给药，7 天后与对照组（生理盐水等容量灌胃7天）同时静脉取血，以腺苷二磷酸钠盐（ADP） 为诱导剂，按Born比浊法测各组血小板聚集百分率，并同时取心脏血，在血栓形成仪 上形成血栓，结果显示，给药组与对照组比较，1min血小板聚集率有明显减小，差异 有统计学意义（P<0.05），血栓长度也有明显缩短（P<0.05）。对心律失常的影响实验 中，可以用大白鼠为实验对象，每日予1.0ml/kg的提取物饱和液灌胃给药，8天后与对 照组（生理盐水等容量灌胃8天）同时注射肾上腺素和氯化钙诱发心律失常，结果给药 组与对照组相比有明显的拮抗心律失常作用（P<0.05）。