一种高DHA低胆固醇禽蛋营养剂的生产方法及营养剂

摘要

本发明属于饲料生产领域，尤其涉及一种生产高DHA低胆固醇禽蛋营养剂的生产方法，营养剂及含有营养剂的饲料。一种生产高DHA低胆固醇禽蛋营养剂的生产方法：其特征在于：包括如下生产步骤：将海藻进行发酵，得到海藻发酵产物，将所述海藻发酵产物与鱼油、亚麻籽油混合均匀，制得营养剂。一种生产高DHA低胆固醇禽蛋营养剂，由海藻发酵产物，鱼油，亚麻籽油组成。本发明的有益效果在于：通过对营养剂原料进行益生菌发酵，利用发酵过程中的生物酶转化，使得营养强化剂中的DHA更高效的富集到禽蛋中；鸡蛋中DHA含量420mg/100g，比普通鸡蛋提高50倍以上；鸡蛋中胆固醇含量≤290mg/100g，比普通鸡蛋（胆固醇含量680mg/100g）低57%。

说明书

技术领域

    本发明属于饲料生产领域，尤其涉及一种生产高DHA低胆固醇禽蛋营养剂的生产方法，营养剂及含有营养剂的饲料。

背景技术

随着人类生活水平的不断提高，人们的保健意识越来越强，对保健食品的需求也越来越多，使得开发绿色功能性保健食品成为现代养殖业研究的重要方向。DHA（Docosahexaenoic acid，即二十二碳六烯酸，俗称“脑黄金”）属于ω-3簇多不饱和脂肪酸中的一员，它是人脑的主要组成物质之一，占人脑脂质的10%左右。

人体不能合成DHA，必须从食物中摄取。陆地生物不含DHA，天然的DHA只存在硅藻类等浮游生物中，通过食物链被海生鱼类吞食消化后吸收贮存在体内，目前人类DHA的主要来源是海鱼/海鱼油/海藻油及其制造品。DHA对保护和提高儿童/学生及脑力劳动者的智力和视力，对孕产妇、胎儿、婴幼儿、学生、中老年人、素食者，对脑功能低减、认知功能衰退、抑郁、高血脂、心脑血管乃至抗癌等均有着广泛的、不可或缺且不可替代的营养调理作用。1999年世界卫生组织（WHO）及国际脂肪酸和类脂研究学会（ISSFAL）正式向全球公布DHA基本补充标准为：成人220mg/天。但是，在人们依靠禽蛋类补充DHA的同时，同样担心吸收过多的胆固醇，因而，开发一种高DHA低胆固醇禽蛋营养剂，是本领域技术人员亟待解决的问题，对于提升人类的健康水平和智力具有十分重要的意义和广阔的应用前景。

目前，国内外相关学者对提高禽蛋中的DHA含量做了一些研发工作，基本上都集中在向饲料中添加高DHA含量的物质，从而使禽类将饲料中的DHA含量富集到蛋中，但是，由于饲料或者添加剂中的DHA转化率难以控制，鸡蛋中的DHA含量提高并不显著。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供了一种生产高DHA低胆固醇禽蛋营养剂的生产方法，营养剂及含有营养剂的饲料，该营养剂能够显著提高禽蛋中DHA的含量。

一种生产高DHA低胆固醇禽蛋营养剂的生产方法：其特征在于：包括如下生产步骤：将海藻进行发酵，得到海藻发酵产物，将所述海藻发酵产物与鱼油、亚麻籽油混合均匀，制得营养剂。

一种生产高DHA低胆固醇禽蛋营养剂的生产方法：其特征在于：所述发酵按照如下步骤进行，得到发酵产物；

（1）制备摇瓶种子液：以酵母菌、枯草芽孢杆菌、双歧杆菌为出发菌株，接种量比例为3:1:1，无菌条件下，将出发菌株接种于液体培养基中，培养16-18h，得到摇瓶种子液；

（2）制备酵母菌种子液：摇瓶种子液按体积以2-5%的接种量，在无菌条件下，接种于50L种子罐中，培养14-16h，发酵得到酵母菌种子液；

（3）发酵培养：将步骤2得到的酵母菌种子液，按体积以5-20%接种于500L发酵罐中，发酵期间不时加入海藻，海藻的添加质量为发酵总体积的10-20%，培养24-30h，停罐放液，得到发酵产物。

其中，所述海藻优选富含DHA的藻类；所述海藻为20-60目粉末，发酵前经过巴氏消毒。

其中，所述海藻优选为小球藻、鼠尾藻、金藻类中的任意一种或几种。

其中，步骤（1）中，接种量为液体培养基体积的4-10%，摇瓶种子培养基优选配方为：葡萄糖0.5%，20目玉米粉1.0%，磷酸氢二钾0.3%，20%NaOH溶液调节pH=7.5；摇瓶种子培养条件优选为：温度32-37℃，120-200rpm，装液量为140-200mL；

步骤（2）中，培养基优选配方为：葡萄糖0.5%，20目玉米粉1.0%，20目豆粕粉3%，磷酸氢二钾0.3%，消泡剂0.07%，20%NaOH溶液调节pH=7.5；酵母菌种子液培养条件为：37℃，搅拌速度200-250rpm，装液量为30L-50L，通气量2.0-2.5L/h；

步骤（3）中，培养基优选配方为：葡萄糖0.5%，20目玉米粉1.0%，20目豆粕粉3%，磷酸氢二钾0.3%，硫酸锰0.05%，消泡剂0.07%，20%NaOH溶液调节pH=7.5；发酵条件优选为：温度32-37℃，搅拌速度100-150rpm，装液量为300-500L，通气量2.0-3.0 L/h。

其中，其特征在于：所述培养基均经过湿热灭菌，灭菌条件优选121℃，高压灭菌20-30min。

一种生产高DHA低胆固醇禽蛋营养剂：其特征在于：所述营养剂由海藻发酵产物，鱼油，亚麻籽油组成。

其中，所述海藻发酵产物占总营养剂重量的10-30%，鱼油占总营养剂重量的20-50%、亚麻籽油的占总营养剂重量的20-50%，营养剂总重量为100份。

一种含有生产高DHA低胆固醇禽蛋营养剂的饲料：其特征在于：所述饲料优选配方如下：玉米粉占饲料总重量的60-70%，豆粕占饲料总重量的20-30%，贝壳粉占饲料总重量的5-10%，磷酸氢钙占饲料总重量的1-2%，维生素占饲料总重量的1-2%，矿物质占饲料总重量的1-2%，营养剂占饲料总重量的0.5-2%。

其中，所述饲料优选饲喂的禽类为鸡、鸭、鹅中的任意一种。

本发明中的出发菌株如发现活性减退，可以进行菌种复壮，条件如下：培养基：葡萄糖0.5%，牛肉膏0.5%，酵母膏0.2%，蛋白胨1.0%，磷酸氢二钾0.3%，琼脂0.18%，20%NaOH溶液调节pH=7.5；培养条件： 37℃培养24h。

本发明的有益效果在于：1、通过对营养剂原料进行益生菌发酵，利用发酵过程中的生物酶转化，使得营养强化剂中的DHA更高效的富集到禽蛋中；2、饲料营养剂无害、无残、无污染，使用简便、易于推广；3、生产出符合NY5039-2005标准无公害鸡蛋，鸡蛋中（含蛋清与蛋黄）DHA含量≥420mg/100g，比普通鸡蛋提高50倍以上；4、鸡蛋中胆固醇含量≤290mg/100g，比普通鸡蛋（胆固醇含量680mg/100g）低57%。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步详细的说明。

本发明选用的菌株购于中科院微生物所，酵母菌（菌种编号 2.540），枯草芽孢杆菌（菌种编号 1.1413），双歧杆菌（菌种编号 1.1852）

实施例1：

一种生产高DHA低胆固醇禽蛋营养剂的生产方法：将海藻进行发酵，得到海藻发酵产物，将所述海藻发酵产物与鱼油、亚麻籽油混合均匀，制得营养剂。

发酵按照如下步骤进行，得到发酵产物；

（1）制备摇瓶种子液：以酵母菌、枯草芽孢杆菌、双歧杆菌为出发菌株，接种量比例为3:1:1，无菌条件下，将出发菌株接种于液体培养基中，培养16h，得到摇瓶种子液；

（2）制备酵母菌种子液：摇瓶种子液按体积以2%的接种量，在无菌条件下，接种于50L种子罐中，培养14h，发酵得到酵母菌种子液；

（3）发酵培养：将步骤3得到的酵母菌种子液，按体积以5%接种于500L发酵罐中，发酵期间不时加入海藻，海藻的添加质量为发酵总体积的10%，培养24h，停罐放液，得到发酵产物。

海藻优选小球藻；为20目粉末，发酵前经过巴氏消毒。

步骤（1）中，接种量为液体培养基体积的4%，摇瓶种子培养基优选配方为：葡萄糖0.5%，20目玉米粉1.0%，磷酸氢二钾0.3%，20%NaOH溶液调节pH=7.5；摇瓶种子培养条件优选为：温度32℃，120rpm，装液量为140mL；

步骤（2）中，培养基优选配方为：葡萄糖0.5%，20目玉米粉1.0%，20目豆粕粉3%，磷酸氢二钾0.3%，消泡剂0.07%，20%NaOH溶液调节pH=7.5；酵母菌种子液培养条件为：37℃，搅拌速度200rpm，装液量为30L，通气量2.0L/h；

步骤（3）中，培养基优选配方为：葡萄糖0.5%，20目玉米粉1.0%，20目豆粕粉3%，磷酸氢二钾0.3%，硫酸锰0.05%，消泡剂0.07%，20%NaOH溶液调节pH=7.5；发酵条件为：温度32℃，搅拌速度100rpm，装液量为300L，通气量2.0L/h。

所述培养基均经过湿热灭菌，灭菌条件优选121℃，高压灭菌20-30min。

一种生产高DHA低胆固醇禽蛋营养剂由海藻发酵产物，鱼油，亚麻籽油组成；所述海藻发酵产物占总营养剂重量的10%，鱼油占总营养剂重量的50%、亚麻籽油的占总营养剂重量的40%，营养剂总重量为100份。

一种生产高DHA低胆固醇禽蛋饲料：其特征在于：所述饲料优选配方如下：玉米粉占饲料总重量的60%，豆粕占饲料总重量的22%，贝壳粉占饲料总重量的10%，磷酸氢钙占饲料总重量的2%，维生素占饲料总重量的2%，矿物质占饲料总重量的2%，营养剂占饲料总重量的2%。

所述维生素优选为：维生素A，维生素B2，维生素B12，维生素D，维生素E，叶酸；所述矿物质优选为：各种微量元素的复合物，包括钙、铁、锌、锰、硒等。

检测鸡蛋中DHA含量420mg/100g，胆固醇含量DHA含量290mg/100g。

实施例2：

一种生产高DHA低胆固醇禽蛋营养剂的生产方法：将海藻进行发酵，得到海藻发酵产物，将所述海藻发酵产物与鱼油、亚麻籽油混合均匀，制得营养剂。

发酵按照如下步骤进行，得到发酵产物；

（1）制备摇瓶种子液：以酵母菌、枯草芽孢杆菌、双歧杆菌为出发菌株，接种量比例为3:1:1，无菌条件下，将出发菌株接种于液体培养基中，培养18h，得到摇瓶种子液；

（2）制备酵母菌种子液：摇瓶种子液按体积以5%的接种量，在无菌条件下，接种于50L种子罐中，培养16h，发酵得到酵母菌种子液；

（3）发酵培养：将步骤3得到的酵母菌种子液，按体积以20%接种于500L发酵罐中，发酵期间不时加入海藻，海藻的添加质量为发酵总体积的20%，培养30h，停罐放液，得到发酵产物。

海藻优选鼠尾藻；为60目粉末，发酵前经过巴氏消毒。

步骤（1）中，接种量为液体培养基体积的10%，摇瓶种子培养基优选配方为：葡萄糖0.5%，20目玉米粉1.0%，磷酸氢二钾0.3%，20%NaOH溶液调节pH=7.5；摇瓶种子培养条件优选为：温37℃，200rpm，装液量为200mL；

步骤（2）中，培养基优选配方为：葡萄糖0.5%，20目玉米粉1.0%，20目豆粕粉3%，磷酸氢二钾0.3%，消泡剂0.07%，20%NaOH溶液调节pH=7.5；酵母菌种子液培养条件为：37℃，搅拌速度250rpm，装液量为50L，通气量2.5L/h；

步骤（3）中，培养基优选配方为：葡萄糖0.5%，20目玉米粉1.0%，20目豆粕粉3%，磷酸氢二钾0.3%，硫酸锰0.05%，消泡剂0.07%，20%NaOH溶液调节pH=7.5；发酵条件为：温度37℃，搅拌速度150rpm，装液量为500L，通气量3.0 L/h。

所述培养基均经过湿热灭菌，灭菌条件优选121℃，高压灭菌20-30min。

一种生产高DHA低胆固醇禽蛋营养剂由海藻发酵产物，鱼油，亚麻籽油组成；所述海藻发酵产物占总营养剂重量的30%，鱼油占总营养剂重量的50%、亚麻籽油的占总营养剂重量的20%，营养剂总重量为100份。

一种生产高DHA低胆固醇禽蛋饲料：其特征在于：所述饲料优选配方如下：玉米粉占饲料总重量的70%，豆粕占饲料总重量的20%，贝壳粉占饲料总重量的5%，磷酸氢钙占饲料总重量的1.5%，维生素占饲料总重量的1.5%，矿物质占饲料总重量的1.5%，营养剂占饲料总重量的0.5%。

所述维生素优选为：维生素A，维生素B2，维生素B12，维生素D，维生素E，叶酸；所述矿物质优选为：各种微量元素的复合物，包括钙、铁、锌、锰、硒等。

检测鸡蛋中DHA含量430mg/100g，胆固醇含量DHA含量220mg/100g。

实施例3：

一种生产高DHA低胆固醇禽蛋营养剂的生产方法：将海藻进行发酵，得到海藻发酵产物，将所述海藻发酵产物与鱼油、亚麻籽油混合均匀，制得营养剂。

发酵按照如下步骤进行，得到发酵产物；

（1）制备摇瓶种子液：以酵母菌、枯草芽孢杆菌、双歧杆菌为出发菌株，接种量比例为3:1:1，无菌条件下，将出发菌株接种于液体培养基中，培养17h，得到摇瓶种子液；

（2）制备酵母菌种子液：摇瓶种子液按体积以4%的接种量，在无菌条件下，接种于50L种子罐中，培养15h，发酵得到酵母菌种子液；

（3）发酵培养：将步骤3得到的酵母菌种子液，按体积以10%接种于500L发酵罐中，发酵期间不时加入海藻，海藻的添加质量为发酵总体积的15%，培养25h，停罐放液，得到发酵产物。

海藻优选金藻；为40目粉末，发酵前经过巴氏消毒。

步骤（1）中，接种量为液体培养基体积的5%，摇瓶种子培养基优选配方为：葡萄糖0.5%，20目玉米粉1.0%，磷酸氢二钾0.3%，20%NaOH溶液调节pH=7.5；摇瓶种子培养条件优选为：温度35℃，150rpm，装液量为180mL；

步骤（2）中，培养基优选配方为：葡萄糖0.5%，20目玉米粉1.0%，20目豆粕粉3%，磷酸氢二钾0.3%，消泡剂0.07%，20%NaOH溶液调节pH=7.5；酵母菌种子液培养条件为：37℃，搅拌速度220rpm，装液量为40L，通气量2.2L/h；

步骤（3）中，培养基优选配方为：葡萄糖0.5%，20目玉米粉1.0%，20目豆粕粉3%，磷酸氢二钾0.3%，硫酸锰0.05%，消泡剂0.07%，20%NaOH溶液调节pH=7.5；发酵条件为：温度35℃，搅拌速度120rpm，装液量为400L，通气量2.5L/h。

所述培养基均经过湿热灭菌，灭菌条件优选121℃，高压灭菌20-30min。

一种生产高DHA低胆固醇禽蛋营养剂由海藻发酵产物，鱼油，亚麻籽油组成；所述海藻发酵产物占总营养剂重量的30%，鱼油占总营养剂重量的20%、亚麻籽油的占总营养剂重量的50%，营养剂总重量为100份。

一种生产高DHA低胆固醇禽蛋饲料：其特征在于：所述饲料优选配方如下：玉米粉占饲料总重量的60%，豆粕占饲料总重量的30%，贝壳粉占饲料总重量的6%，磷酸氢钙占饲料总重量的1%，维生素占饲料总重量的1%，矿物质占饲料总重量的1%，营养剂占饲料总重量的1%。

所述维生素优选为：维生素A，维生素B2，维生素B12，维生素D，维生素E，叶酸；所述矿物质优选为：各种微量元素的复合物，包括钙、铁、锌、锰、硒等。

检测鸡蛋中DHA含量440mg/100g，胆固醇含量DHA含量210mg/100g。

实施例4：

一种生产高DHA低胆固醇禽蛋营养剂的生产方法：将海藻进行发酵，得到海藻发酵产物，将所述海藻发酵产物与鱼油、亚麻籽油混合均匀，制得营养剂。

发酵按照如下步骤进行，得到发酵产物；

（1）制备摇瓶种子液：以酵母菌、枯草芽孢杆菌、双歧杆菌为出发菌株，接种量比例为3:1:1，无菌条件下，将出发菌株接种于液体培养基中，培养16.5h，得到摇瓶种子液；

（2）制备酵母菌种子液：摇瓶种子液按体积以3%的接种量，在无菌条件下，接种于50L种子罐中，培养15.5h，发酵得到酵母菌种子液；

（3）发酵培养：将步骤3得到的酵母菌种子液，按体积以12%接种于500L发酵罐中，发酵期间不时加入海藻，海藻的添加质量为发酵总体积的18%，培养27h，停罐放液，得到发酵产物。

海藻优选金藻与小球藻混合；为30目粉末，发酵前经过巴氏消毒。

步骤（1）中，接种量为液体培养基体积的5%，摇瓶种子培养基优选配方为：葡萄糖0.5%，20目玉米粉1.0%，磷酸氢二钾0.3%，20%NaOH溶液调节pH=7.5；摇瓶种子培养条件优选为：温度36℃，145rpm，装液量为160mL；

步骤（2）中，培养基优选配方为：葡萄糖0.5%，20目玉米粉1.0%，20目豆粕粉3%，磷酸氢二钾0.3%，消泡剂0.07%，20%NaOH溶液调节pH=7.5；酵母菌种子液培养条件为：37℃，搅拌速度240rpm，装液量为35L，通气量2.4L/h；

步骤（3）中，培养基优选配方为：葡萄糖0.5%，20目玉米粉1.0%，20目豆粕粉3%，磷酸氢二钾0.3%，硫酸锰0.05%，消泡剂0.07%，20%NaOH溶液调节pH=7.5；发酵条件为：温度36℃，搅拌速度115rpm，装液量为350L，通气量2.8L/h。

所述培养基均经过湿热灭菌，灭菌条件优选121℃，高压灭菌20-30min。

一种生产高DHA低胆固醇禽蛋营养剂由海藻发酵产物，鱼油，亚麻籽油组成；所述海藻发酵产物占总营养剂重量的20%，鱼油占总营养剂重量的45%、亚麻籽油的占总营养剂重量的35%，营养剂总重量为100份。

一种生产高DHA低胆固醇禽蛋饲料：其特征在于：所述饲料优选配方如下：玉米粉占饲料总重量的66%，豆粕占饲料总重量的21%，贝壳粉占饲料总重量的8%，磷酸氢钙占饲料总重量的1%，维生素占饲料总重量的1%，矿物质占饲料总重量的1%，营养剂占饲料总重量的2%。

所述维生素优选为：维生素A，维生素B2，维生素B12，维生素D，维生素E，叶酸；所述矿物质优选为：各种微量元素的复合物，包括钙、铁、锌、锰、硒等。

检测鸡蛋中DHA含量445mg/100g，胆固醇含量DHA含量275mg/100g。