鳗鲡拟指环虫寄生病治疗药物及其制备方法

摘要

本发明公开了一种鳗鲡拟指环虫寄生病的治疗药物及其制备方法，其中药材配方为：白头翁10份～30份，细辛3份～9份，桂枝6份～15份，苦参3份～12份，制附子1份～10份，干姜10份～30份，川椒3份～12份，大黄5份～15份，槟榔10份～30份，苦楝根皮10份～30份，山慈姑5份～25份，使君子20份～50份，蛇床子10份～30份。本配方取白头翁的清热解毒、凉血止痢、燥湿杀虫，细辛的活血解毒、止痛，桂枝的助阳化气、平冲降气等药材的药物功效，能有效消除因寄生拟指环虫而导致鳗鲡鳃丝充血浮肿、粘液增多脱落、鳃小片细胞增生，防止继发细菌感染而肝胆肿大、出血等病症，具有配方合理，起效快，安全无毒、疗效稳定等特点。

说明书

技术领域

本发明涉及一种渔药，特别是涉及一种治疗拟指环虫寄生引起鳗鲡鳃丝充血浮肿、粘液增多脱落、鳃小片细胞增生，游动异常和呼吸困难，继发性细菌感染、食欲减退、咬食或绝食，进而引发大规模暴发性疾病的鳗鲡拟指环虫寄生病治疗药物及其制备方法。

背景技术

拟指环虫是鳗鲡养殖中最常见、流行范围较广、危害较大的单殖吸虫类寄生虫，主要寄生于欧洲鳗、日本鳗和美洲鳗的鳃部，周年发生，在鳃上运动、附着，且其后固着器上的几丁质钩插入鳃组织，破坏鳃的表皮细胞，刺激鳃上皮细胞粘液分泌增加，影响呼吸，导致鳃丝充血和继发性细菌感染，尤其在鳗鲡高密度养殖情况下，极易引发大规模的暴发性疾病。患病鳗鲡游动异常、呼吸困难、食欲减退、咬食或绝食，一旦发病，易反复感染，造成大量死亡，经济损失惨重。

在鳗鲡拟指环虫寄生病防治中，以往采用有机磷类如敌百虫、咪唑类如甲苯咪唑、嗪酮类如吡喹酮等可以有效驱除鳗鲡拟指环虫。但随着同类药物的长期使用，造成拟指环虫已对该类药物产生较强的耐药性，即使提高用药浓度也难以驱除。鳗场为了减少经济损失，滥用药物或不断加大用药量，导致水环境严重污染、药物残留超标，形成恶性循环。而且目前国际上严格限制鳗鲡产品中的化学药物残留量，导致鳗鲡养殖生产中出现无药可用的现状，一旦拟指环虫大量寄生，严重损害鳗鲡鳃组织，进而病原菌入侵，将造成鳗鲡大量死亡，经济损失巨大。因此寻找驱杀拟指环虫的新型水产用杀虫剂，显得尤其重要。具有低毒、安全、绿色环保等优势的天然植物杀虫剂是最好的选择，但目前在水产领域研究报道甚少。当前渔药市场上仍未见已研制开发的驱杀鳗鲡拟指环虫的高效、低毒低残、绿色环保的安全药物。

发明内容

本发明的一个目的在于提供一种药用功效发挥充分、起效快、低毒的驱杀鳗鲡拟指环虫的复方药物。

本发明的目的另一个在于提供一种制备操作简单、易行、有利于工业化大规模生产的鳗鲡拟指环虫寄生病治疗药物的制备方法。

为实现上述目的，本发明的技术解决方案是：

本发明是一种鳗鲡拟指环虫寄生病治疗药物，其包括以下重量份的原料药：白头翁10份～30份，细辛3份～9份，桂枝6份～15份，苦参3份～12份，制附子1份～10份，干姜10份～30份，川椒3份～12份，大黄5份～15份，槟榔10份～30份，苦楝根皮10份～30份，山慈姑5份～25份，使君子20份～50份，蛇床子10份～30份。

优选配方范围为：白头翁10份～30份，细辛3份～6份，桂枝6份～10份，苦参6份～9份，制附子3份～6份，干姜15份～25份，川椒5份～10份，大黄6份～10份，槟榔15份～25份，苦楝根皮15份～20份，山慈姑10份～20份，使君子30份～50份，蛇床子15份～30份。

优选配方为：白头翁20，细辛6，桂枝6，苦参6，制附子3，干姜12，川椒6，大黄10，槟榔15，苦楝根皮15，山慈姑10，使君子30，蛇床子15份。

本发明是一种鳗鲡拟指环虫寄生病治疗药物的制备方法，它包括以下步骤：

(1) 按照用量比，将白头翁、大黄、苦参加水10~15倍量微波浸提两次，每次加热至沸腾后维持30分钟，静置、过滤，合并煎液，微波真空浓缩至相对密度60℃的波美度1.25～1.28的清膏备用；

(2) 按照用量比，将细辛、桂枝、制附子、干姜、川椒、槟榔、苦楝根皮、山慈姑、使君子、蛇床子，用重量百分比65%乙醇10~15倍量回流提取二次，每次微波加热至沸腾后维持30分钟，静置、过滤，合并提取液，回收乙醇，滤液微波真空浓缩至相对密度60℃的波美度1.25～1.28的清膏备用；

(3) 将步骤（1）和（2）中的药渣再加65%乙醇水溶液10~15倍量微波提取二次，每次加热至沸腾后维持30分钟，静置、过滤，合并提取液，回收乙醇，滤液浓缩至相对密度60℃的波美度1.25～1.28的清膏备用；

(4)合并步骤（1）、（2）和（3）的三种清膏，浓缩至相对密度为60℃的波美度1.35～1.38的稠膏，微波真空干燥，冷冻粉碎成细粉，制备成治疗鳗鲡拟指环虫寄生病的药物组合物。

本发明是一种鳗鲡拟指环虫寄生病治疗药物的制备方法，它包括以下步骤：

(1)按照用量比，将桂枝、使君子，采用冷冻超微粉碎机进行粉碎，粉碎至300目以上的超微粉，备用；

(2)按照用量比，将白头翁、大黄、苦参、细辛、制附子、干姜、川椒、槟榔、苦楝根皮、山慈姑、蛇床子，用重量百分比65%乙醇10~15倍量回流提取二次，每次微波加热至沸腾后维持30分钟，静置、过滤，合并提取液，回收乙醇，滤液浓缩至相对密度60℃的波美度1.25～1.28的清膏备用；

(3)将步骤（2）的药渣再加水10~15倍量微波提取二次，每次加热至沸腾后维持30分钟，静置、过滤，合并煎液，微波真空浓缩至相对密度60℃的波美度1.25～1.28的清膏备用；

(4) 合并步骤（1）的超微粉、步骤（2）和（3）的两种清膏，经微波真空干燥，冷冻粉碎成细粉，制备成治疗鳗鲡拟指环虫寄生病的药物组合物。

采用上述方案后，本发明具有以下优点：

(1) 本发明以中医学理论为基础，科学合理地配置中药原料中的各组分药物和用量，使各组分的药效能够有机的结合起来，综合发挥药用效果，药物的治疗效果好，毒副反应小。本方取白头翁的清热解毒、凉血止痢、燥湿杀虫；细辛的活血解毒、止痛；桂枝的助阳化气、平冲降气；苦参的清热燥湿，杀虫；附子与干姜同用可回阳救逆，能上助心阳、中温脾阳、下补肾阳；川椒的温中，止痛，杀虫；大黄泻热通肠、凉血解毒，逐瘀生新使肾脏代谢加强；槟榔的驱虫消积、行气利水；苦楝根皮有杀虫之效；山慈姑的消肿、化痰、解毒；使君子的驱虫、扶脾胃；蛇床子的温肾、燥湿杀虫。

(2) 本发明的药物组合物能有效消除因拟指环虫寄生于鳗鲡鳃部而导致鳃丝充血浮肿、粘液增多脱落、鳃小片细胞增生，防止继发细菌感染而肝胆肿大、出血等病症，具有配方合理，起效快（防鳃丝脱粘出血的起效时间5-7天，治愈所需时间23天），安全无毒、疗效稳定等特点。经养殖现场用药观察，病鳗游动和呼吸恢复正常，摄食情况好转，摄食量明显增加，不发生细菌感染死亡，疗效好且无毒副作用。在4-9月份发病季节拌于饲料中喂服，可预防拟指环虫疾病的爆发。

(3) 本发明的药物组合物在制备过程中将微波浸提与冷冻超微粉碎相结合，使药物组合物的有效成分不破坏、含量高，而且经过冷冻超微粉碎，药物的有效成分更有利于鱼体吸收，最大程度地发挥药物作用，而且制备操作易行，有利于工业化大规模生产。

下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。

具体实施方式

一、配方：

本发明是一种鳗鲡拟指环虫寄生病治疗药物，其包括以下重量份的原料药：白头翁10份～30份，细辛3份～9份，桂枝6份～15份，苦参3份～12份，制附子1份～10份，干姜10份～30份，川椒3份～12份，大黄5份～15份，槟榔10份～30份，苦楝根皮10份～30份，山慈姑5份～25份，使君子20份～50份，蛇床子10份～30份。

实施例1

最佳配方：其按照重量份数，白头翁20，细辛6，桂枝6，苦参6，制附子3，干姜12，川椒6，大黄10，槟榔15，苦楝根皮15，山慈姑10，使君子30，蛇床子15份。

实施例2

其按照重量份数，白头翁20，细辛3，桂枝9，苦参9，制附子5，干姜10，川椒6，大黄5，槟榔20，苦楝根皮10，山慈姑5，使君子30，蛇床子20份。

实施例3

其按照重量份数，白头翁15，细辛6，桂枝15，苦参12，制附子5，干姜15，川椒9，大黄5，槟榔30，苦楝根皮20，山慈姑5，使君子25，蛇床子25份。

实施例4

其按照重量份数，白头翁10，细辛9，桂枝15，苦参9，制附子10，干姜20，川椒9，大黄10，槟榔25，苦楝根皮25，山慈姑10，使君子50，蛇床子20份。

实施例5

其按照重量份数，白头翁25，细辛6，桂枝12，苦参3，制附子5，干姜20，川椒12，大黄15，槟榔10，苦楝根皮20，山慈姑15，使君子30，蛇床子15份。

实施例6

其按照重量份数，白头翁30，细辛6，桂枝9，苦参6，制附子10，干姜15，川椒3，大黄10，槟榔10，苦楝根皮15，山慈姑20，使君子20，蛇床子10份。

实施例7

其按照重量份数，白头翁25，细辛3，桂枝6，苦参3，制附子1，干姜12，川椒6，大黄5，槟榔15，苦楝根皮30，山慈姑25，使君子25，蛇床子15份。

实施例8

其按照重量份数，白头翁10，细辛9，桂枝12，苦参12，制附子1，干姜30，川椒9，大黄15，槟榔20，苦楝根皮30，山慈姑25，使君子40，蛇床子30份。

实施例9

其按照重量份数，白头翁15，细辛3，桂枝6，苦参6，制附子3，干姜25，川椒12，大黄15，槟榔30，苦楝根皮10，山慈姑15，使君子25，蛇床子25份。

本发明所用的中药材原料：

白头翁：本品为毛茛科植物白头翁Pulsatilla chinensis (Bge.) Regel的干燥根。

细  辛：本品为马兜铃科植物北细辛 Asarum heterotropoides Fr. Schmidt var. mandshuricum (Maxim.) Kitag.、汉城细辛 Asarum sieboldii Miq. f.seoulense (Nak.) C.Y. Cheng et C.S. Yang 或华细辛 Asarum sieboldii Miq. 的干燥全草。

桂  枝：本品为樟科植物肉桂 Cinnamomum cassia Presl 的干燥嫩枝。

苦  参：本品为豆科植物苦参 Sophora flavescens Ait. 的干燥根。

制附子：本品为毛茛科植物乌头Aconitum carmichaeli Debx. 的子根的加工品。

干  姜：本品为姜科植物姜 Zingiber officinale Rosc. 的干燥根茎。

川  椒：本品为芸香科Rutaceae花椒属Zanthoxylum的干燥成熟果实。

大  黄：本品为蓼科大黄属Polygonaceae Rheu植物掌叶大黄、唐古特大黄或药用大黄等的干燥根和根茎。

槟  榔:本品为棕榈科植物槟榔 Areca catechu L. 的干燥成熟种子.

苦楝根皮:本品为楝科植物楝和川楝Melia azedarach L.的树皮及根皮。

山慈姑：本品为百合科植物老鸦瓣及伊犁郁金香Tulipa iliensis Regel.的干燥鳞茎。

使君子：本品为使君子科植物使君子 Quisqualis indica L. 的干燥成熟果实。

蛇床子：本品为伞形科植物蛇床 Cnidium monnieri (L.) Cuss. 的干燥成熟果实。

二、制备方法：

实施例1：一种鳗鲡拟指环虫寄生病治疗药物的制备方法：

(1)按照用量比，将白头翁、大黄、苦参加水10~15倍量微波浸提两次，每次加热至沸腾后维持30分钟，静置、过滤，合并煎液，微波真空浓缩至相对密度60℃的波美度1.25～1.28的清膏备用；

(2)按所述用量比，将细辛、桂枝、制附子、干姜、川椒、槟榔、苦楝根皮、山慈姑、使君子、蛇床子，用重量百分比65%乙醇10~15倍量回流提取二次，每次微波加热至沸腾后维持30分钟，静置、过滤，合并提取液，回收乙醇，滤液微波真空浓缩至相对密度60℃的波美度1.25～1.28的清膏备用；

(3) 将步骤（1）和（2）中的药渣再加65%乙醇水溶液10~15倍量微波提取二次，每次加热至沸腾后维持30分钟，静置、过滤，合并提取液，回收乙醇，滤液浓缩至相对密度60℃的波美度1.25～1.28的清膏备用；

(4) 合并步骤（1）、（2）和（3）的三种清膏，浓缩至相对密度为60℃的波美度1.35～1.38的稠膏，微波真空干燥，冷冻粉碎成细粉，制备成治疗鳗鲡拟指环虫寄生病的药物组合物。

实施例2：一种鳗鲡拟指环虫寄生病治疗药物的制备方法：

(1)按照用量比，将桂枝、使君子,采用冷冻超微粉碎机进行粉碎，粉碎至300目以上的超微粉，备用；

(2)按所述用量比，将白头翁、大黄、苦参、细辛、制附子、干姜、川椒、槟榔、苦楝根皮、山慈姑、蛇床子，用重量百分比65%乙醇10~15倍量回流提取二次，每次微波加热至沸腾后维持30分钟，静置、过滤，合并提取液，回收乙醇，滤液浓缩至相对密度60℃的波美度1.25～1.28的清膏备用；

(3)将步骤（2）的药渣再加水10~15倍量微波提取二次，每次加热至沸腾后维持30分钟，静置、过滤，合并煎液，微波真空浓缩至相对密度60℃的波美度1.25～1.28的清膏备用；

(4) 合并步骤（1）的超微粉、步骤（2）和（3）的两种清膏，经微波真空干燥，冷冻粉碎成细粉，制备成治疗鳗鲡拟指环虫寄生病的药物组合物。

三、本发明的药物组合物药效试验

1、长期毒性试验

试验目的：观察健康鳗鲡长期服用治疗拟指环虫寄生病的药物组合物所发生的毒性反应及程度，为客观评价其用药安全性提供科学依据。

试验结果：

长期给予本发明的药物组合物对鳗鲡行为外观无明显的毒性影响。

长期给予本发明的药物组合物，在试验中对鳗鲡的心、肝、脾、肺、肾的生长过程无影响。

病理组织学试验

病理组织学检查表明试验中鳗鲡鳃部拟指环虫寄生数量逐步减少，鳃丝充血逐渐消退，粘液分泌恢复正常，受损鳃小片逐渐修复，而肝肾胆等脏器组织无病理学变化。

目的：研究本发明的药物组合物的驱杀虫、抗炎、消肿作用。

方法：选用寄生拟指环虫导致游动异常和呼吸频率加快、鳃丝充血浮肿和鳃上粘液增多等症状的病鳗饲服给药，研究本发明的药物组合物的驱杀虫、抗炎、消肿作用。

结果：本发明的药物组合物能显著祛除鳃部拟指环虫，大大减少拟指环虫对鳃的破坏，5-7天鳃部粘液分泌恢复正常；15-17天鳃丝充血开始消退，未发生细菌感染溃烂；20-23天严重感染者的鳃小片上皮细胞和粘液细胞增生情况得到修复，鳃小片明显消肿；免疫球蛋白G水平有所升高。

结论：本发明的药物组合物具有明显的驱杀虫、抗炎、消肿作用。

治疗有效性试验

养殖生产中投喂药饵试验验证，连续给药30天后观察本发明的药物组合物对寄生拟指环虫病鳗的影响。

结论：对三种鳗鲡投喂药饵试验组，病鳗的游动和呼吸逐渐恢复正常，摄食情况逐步好转，每尾平均重量均有明显增加，存活率亦显著高于对照组。

对美洲鳗的疗效总有效率为54.53%。

对欧洲鳗的疗效总有效率为49.66%。

对日本鳗的疗效总有效率为65.38%。

以上所述，仅为本发明较佳实施例而已，配方的组合形式可有多种，故不能以此限定本发明实施的范围，即依本发明申请专利范围及说明书内容所作的等效变化与修饰，皆应仍属本发明专利涵盖的范围内。