药物组合物及其在制备治疗肥胖、胰岛素抵抗和糖尿病药物中的应用

摘要

本发明公开了一种药物组合物及其在制备治疗肥胖、胰岛素抵抗和糖尿病药物中的应用，糖尿病动物腹腔注射水杨酸钠和齐墩果酸药物组合，可以使血糖水平显著降低，在培养的分化3T3-L1脂肪细胞培养液中加入水杨酸钠和齐墩果酸药物组合可以显著地抑制肿瘤坏死因子诱导的胰岛素信号紊乱，因此，水杨酸钠和齐墩果酸药物组合可用于治疗肥胖、糖尿病、胰岛素抵抗以及和胰岛素抵抗密切相关的代谢综合征的药物中。

说明书

技术领域

本发明涉及水杨酸钠和齐墩果酸药物组合的用途，具体涉及水杨酸钠和齐 墩果酸药物组合在治疗肥胖、胰岛素抵抗和糖尿病药物中的应用。

背景技术

目前，肥胖已经成为一个全球性健康问题。如果继续严重下去，肥胖很快 就会超过吸烟，成为美国过早死的最大单一性危险因素，降低生活质量，增 加社会成本。据美国CDC统计，已经有1/3的美国成年人患上肥胖症，还有 1/3的人超重，而且肥胖程度逐年增加。《美国医学协会杂志》上的一项研究 表明，美国每年有超过16万人因为肥胖“意外”死亡。有科学家称，由于生 产力和医疗费用增加，平均每个肥胖者每年会给社会造成7000多美元的负 担。近年来，由于经济的飞速发展和生活质量的不断提高，中国患肥胖症人 数越来越多，带来的是糖尿病、心血管疾病等严重并发症和经济负担。

肥胖的成因复杂，研究人员对肥胖的发病机制进行了多方面的研究，但结 果还不尽如人意。目前治疗肥胖的方法主要有行为疗法和药物疗法。行为疗 法主要是节食和加大运动量，这种方法可以暂时减少机体脂肪，但是很容易 反弹。药物治疗主要是将脂肪细胞储存的脂肪动员进入血液循环进行代谢， 然而这种方法常常引起血液循环游离脂肪酸甚至引起胰岛素抵抗等副作用。 肥胖的形成主要是由于能量的摄入大于能量的消耗，多余的能量以甘油三酯 形式贮存于机体脂肪组织中，最终导致肥胖的发生。因此，单纯将甘油三酯 从脂肪细胞释放不能从根本上解决肥胖问题，促进甘油三酯的分解是治疗肥 胖的直接、有效的方式。

近年来，随着人们生活方式的转变，尤其是肥胖的流行使糖尿病的发病率 逐年增加。美国糖尿病协会推测，至2030年，全球将有35亿人患有糖尿病 及其并发症。最近，我国的一项调查显示，目前我国糖尿病患病人数已达9200 万，仅次于印度。糖尿病对全球尤其是发展中国家的经济发展产生了巨大的 压力，据统计，发展中国家用于糖尿病方面的费用支出超出了卫生费用预算 的10%。糖尿病患者中90%以上是2型糖尿病患者，胰岛素抵抗是2型糖尿病 的基本特征。胰岛素抵抗是指肝、肌肉、脂肪等胰岛素作用的靶组织，不能 响应胰岛素导致胰岛素的降血糖作用减弱甚至缺失的病理状态。除2型糖尿 病之外，胰岛素抵抗还与高血压、动脉粥样硬化、代谢综合征、卵巢囊肿、 阿尔茨海默症、肿瘤的发生发展密切相关。因此，对胰岛素抵抗的发病机制 及防治研究显得尤为重要。目前，用于治疗胰岛素抵抗和糖尿病的有效药物 主要包括噻唑烷二酮类药物和二甲双胍等，这些药物的肝肾毒性比较大。

在正常的胰岛素信号传导中，胰岛素与其受体结合启动胰岛素信号，激活 受体内源性蛋白酪氨酸激酶活性，导致受体细胞质一侧的酪氨酸磷酸化。激 活的受体，反过来又募集并磷酸化一系列底物分子。进而激活磷脂酰肌醇-3- 激酶（Phosphoinositide-3-kinase，PI3K）/蛋白激酶B（Protein kinase B， Akt）。蛋白激酶B是胰岛素信号传导过程中的一种重要的激酶，胰岛素刺激 条件下其磷酸化水平的高低常被用来作为胰岛素信号传导是否正常的指标。 胰岛素抵抗发生时，胰岛素刺激的蛋白激酶B磷酸化水平明显降低。

齐墩果酸（Oleanolic acid，OA）是一种天然三萜系化合物，并且是许多 皂苷的苷配基。齐墩果酸大量存在于各种食物（菜子油）中，并且是许多植 物叶子和根茎的成分，包括Olea europaea、Viscum album L.、Aralia  chinensis L和其它超过120种天然植物。齐墩果酸作为中药的有效成分已 经有20多年的使用历史，主要用于治疗病毒性肝炎。有研究发现齐墩果酸可 以保护小鼠免受各种肝毒物和亲电子物，包括四氯化碳、对乙酰氨基酚、溴 化苯和硫代乙酰胺等的损伤。给予齐墩果酸后，齐墩果酸主要分布于肝脏并 在肝脏代谢。小鼠预先给予齐墩果酸，可以降低肝毒物引起的转氨酶的升高 并抑制肝小叶中心坏死。此外，有大量的研究报道富含齐墩果酸的天然药物 和齐墩果酸的合成衍生物表现出一系列的药理学功能，包括抗炎、抗肿瘤、 促进凋亡等作用。水杨酸钠为白色鳞片或粉末，无气味，溶于水、甘油，不 溶于醚、氯仿、苯等有机溶剂，主要用于止痛药和风湿药。

发明内容

本发明的目的在于提供一种药物组合物及其在制备治疗肥胖、胰岛素抵抗 和糖尿病药物中的应用。

为实现上述发明目的，本发明采用了以下技术方案：

一种药物组合物，该药物组合物由水杨酸钠和齐墩果酸组成。

所述齐墩果酸在药物组合物中的质量百分比为40-60%，水杨酸钠在药物 组合物中的质量百分比为40-60%。

所述齐墩果酸以及水杨酸钠在药物组合物中的质量百分比均为50%。

上述药物组合物在制备用于治疗肥胖的药物中的应用。

上述药物组合物在制备用于治疗胰岛素抵抗的药物中的应用。

上述药物组合物在制备用于治疗糖尿病的药物中的应用。

上述药物组合物在制备用于治疗由肥胖引起的并发症的药物中的应用。

所述并发症为糖尿病。

上述药物组合物在制备用于治疗与胰岛素抵抗密切相关的代谢综合症的 药物中的应用。

本发明的有益效果为：联合应用齐墩果酸和水杨酸钠的组合物作为治疗肥 胖、胰岛素抵抗和糖尿病药物，与现有药物相比，本发明所述药物组合物既 保证了改善胰岛素抵抗和降血糖的有效性，又可发挥保肝、降脂效用，达到 治疗肥胖的效果。

附图说明

图1是齐墩果酸结构式。

图2是水杨酸钠结构式。

图3是齐墩果酸和水杨酸钠联合应用减轻体重效果。

图4是齐墩果酸和水杨酸钠联合应用减轻内脏脂肪重量效果。

图5是齐墩果酸和水杨酸钠联合应用降血糖效果。

图6是齐墩果酸和水杨酸钠联合应用增强蛋白激酶B磷酸化效果。

具体实施方式

下面结合附图对本发明做进一步说明，其目的在于更好的理解本发明的内 容，而非限制本发明的保护范围。

1.实验仪器

血糖测定仪（美国强生公司）、精密电子天平、1mL注射器、动物秤等。

2.实验动物与材料

2.1实验动物

C57小鼠，清洁级，雄性，体重16±20g，由第四军医大学实验动物中 心提供。

SD大鼠，清洁级，雄性，体重180±220g，由第四军医大学实验动物 中心提供。

3T3-L1前脂肪细胞系，购于上海复祥生物。

2.2实验材料

生理盐水、苦味酸、血糖试纸、胰岛素、高脂饲料等。

3.实验方法

40只C57小鼠，清洁级、雄性、体重16±20g，给予高脂饮食10周后， 按体重随机分为4组：对照组（10只）、齐墩果酸治疗组（10只）、水杨酸钠 治疗组（10只）和齐墩果酸和水杨酸钠联合治疗组（10只），齐墩果酸治疗 组动物每天腹腔注射20mg/kg齐墩果酸，水杨酸钠治疗组动物每天腹腔注射 20mg/kg水杨酸钠，齐墩果酸和水杨酸钠联合治疗组每天腹腔注射10mg/kg 齐墩果酸和10mg/kg水杨酸钠，持续4周。对照组动物注射同样体积的给药 溶剂。4周后，测定体重和内脏脂肪重量。

40只SD大鼠，清洁级、雄性、体重180±220g，随机分为正常对照组 （8只）和模型组（32），分别标记。模型组动物腹腔注射链脲佐菌素构建糖 尿病动物模型。待模型组动物血糖升高，达到糖尿病诊断标准后，将模型组 动物随机分为阳性对照组（8只）、齐墩果酸治疗组（8只）、水杨酸钠治疗组 （8只）和齐墩果酸和水杨酸钠联合治疗组（8只），齐墩果酸治疗组动物每 天腹腔注射20mg/kg齐墩果酸，水杨酸钠治疗组动物每天腹腔注射20mg/kg 水杨酸钠，齐墩果酸和水杨酸钠联合治疗组每天腹腔注射10mg/kg齐墩果酸 和10mg/kg水杨酸钠，持续4周。阳性对照组动物注射同样体积的给药溶剂。 4周后，测定空腹血糖水平。

用DMEM培养基在6孔板里培养小鼠3T3-L1前脂肪细胞，MDI诱导分化成 熟，以TNFα和齐墩果酸和水杨酸钠培养细胞48小时，培养结束后，用100nM 胰岛素刺激15分钟，加入细胞裂解缓冲液，收集裂解细胞，进行蛋白检测 （Western blot），测定蛋白激酶B的磷酸化水平。

4.实验结果

4.1如图3所示，对照组动物体重为37±1.58g，齐墩果酸治疗组动物 体重为27.6±1.14g，水杨酸钠治疗组动物体重为32.2±1.48g，齐墩果 酸和水杨酸钠联合治疗组动物体重为24.2±4.09g。相比单独使用齐墩果 酸或水杨酸钠，联合应用齐墩果酸和水杨酸钠使体重降低得更为明显（与单 独使用齐墩果酸或水杨酸钠相比，p<0.05）。

4.2如图4所示，对照组动物内脏脂肪重为1.82±0.08g，齐墩果酸治 疗组动物内脏脂肪重为1.28±0.08g，水杨酸钠治疗组动物内脏脂肪重为 1.68±0.08g，齐墩果酸和水杨酸钠联合治疗组动物内脏脂肪重为1.14± 0.11g。相比单独使用齐墩果酸或水杨酸钠，联合应用齐墩果酸和水杨酸钠使 动物内脏脂肪重降低得更为明显（与单独使用齐墩果酸或水杨酸钠相比， p<0.05）。

4.3如图5所示，阳性组动物平均空腹血糖值为25.6±1.67mmol/L， 齐墩果酸治疗组动物平均空腹血糖值为20.8±0.84mmol/L，水杨酸钠治 疗组动物平均空腹血糖值为21.6±1.14mmol/L，齐墩果酸和水杨酸钠联合 治疗组动物平均空腹血糖值为19.6±1.25mmol/L。相比单独使用齐墩果 酸或水杨酸钠，联合应用齐墩果酸和水杨酸钠使血糖值降低得更为明显（与 单独使用齐墩果酸或水杨酸钠相比，p<0.05）。

4.4如图6所示，与TNFα处理组相比，齐墩果酸和水杨酸钠联合处理组 胰岛素刺激的蛋白激酶B磷酸化水平明显增高。（“-”代表未加处理；“+”代 表加入相应处理）。

本发明的实验测定结果表明：在高脂饮食诱导肥胖小鼠中，水杨酸钠和齐 墩果酸可以使体重明显减轻。在链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠中，水 杨酸钠和齐墩果酸都可以使血糖降低，水杨酸钠和齐墩果酸联合应用使血糖 降低更为明显。水杨酸钠和齐墩果酸培养细胞中，明显抑制肿瘤坏死因子（TNF α）诱导的蛋白激酶B磷酸化水平的降低，从而验证了水杨酸钠和齐墩果酸 联合应用在治疗肥胖、胰岛素抵抗和糖尿病中的有效性。

可见，本发明利用齐墩果酸和水杨酸钠联合用于治疗肥胖、胰岛素抵抗和 糖尿病的药物中是可行的。