一种去甲斑蝥素钠注射液及其制备方法

摘要

本发明公开了一种去甲斑蝥素钠注射液及其制备方法。所述去甲斑蝥素钠注射液，包括去甲斑蝥素钠、碱性pH值调节剂和注射用水，其特征在于，所述去甲斑蝥素钠注射液的pH值为大于9.0且小于等于9.5。本发明所述去甲斑蝥素钠注射液稳定性好，并且具有纯度高、外观好的优势，具有较好的临床应用前景。

说明书

技术领域

本发明涉及药物制剂技术领域，尤其涉及一种去甲斑蝥素钠注射液及其制备方法。

背景技术

现有的轨道交通站台门控系统中，中央控制装置采用大型PLC设计门单元控制器；接口编程不方便等缺点。

斑蝥素是从中药斑蝥中提取的一种抗肿瘤活性成份，70年代曾尝试用于原发性肝癌，但因对泌尿系统刺激作用强烈而限制了应用。而去甲斑蝥酸钠则是一种斑蝥素的衍生物，它是将斑蝥素两个甲基去除并水解形成的钠盐。斑蝥素、去甲斑蝥素及去甲斑蝥素钠的分子式分别如下：

去甲斑蝥酸钠作为一种抗肿瘤药，具有疗效显著，毒副作用小且具有一定的促进骨髓细胞作用的特点，与目前常用的化疗药物相比具有一定的优势，并在临床已得到证实。

去甲斑蝥酸钠体外试验，对肝癌、食管癌、喉癌、肺癌、宫颈癌等细胞株的形态或增值有破坏或抑制作用。体内试验，对小鼠艾氏腹水癌、肉癌-180及肝癌实体型有一定的抑制效力，可提高腹水肝癌H22小鼠癌细胞线粒体的呼吸控制率及溶酶体酶活性，干扰癌细胞分裂，阻断与M期，并影响其周围运行速度。本品可使癌细胞骨架破坏(微丝、微管），影响癌细胞超微结构，导致线粒体、微绒毛及纸膜损伤等。能抑制癌细胞DNA形成，但对于正常骨骼细胞不抑制，并能升高白细胞。

目前，去甲斑蝥酸钠主要剂型有水针剂和冻干粉两种。

通常认为适合人体注射用的药物pH值应控制在4～9，但是，经试验证明，该pH值范围的去甲斑蝥酸钠注射液稳定性较差，加速、长期实验结果并不理想。

发明内容

本发明的目的在于提出一种稳定性好的去甲斑蝥素钠注射液及其制备方法；所述去甲斑蝥素钠注射液稳定性好、纯度高、外观好，具有较好的临床应用前景。

为达此目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供了一种去甲斑蝥素钠注射液，包括去甲斑蝥素钠、碱性pH值调节剂和注射用水，所述去甲斑蝥素钠注射液的pH值为大于9.0且小于等于9.5。试验证明，该pH值范围内的去甲斑蝥素钠注射液同样适用于人体注射。

在具体实施方案中，所述去甲斑蝥素钠注射液的pH值为9.1、9.2、9.3、9.4或9.5。

作为优选，按g/ml计，所述去甲斑蝥素钠在注射液中的重量体积百分含量为90%～110%、优选为100%。

在具体实施方案中，按g/ml计，所述去甲斑蝥素钠在注射液中的重量体积百分含量为90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、100%、101%、102%、103%、104%、105%、106%、107%、108%、109%、110%。

作为优选，所述碱性pH值调节剂为氢氧化钠和/或氢氧化钾，优选为氢氧化钠。

第二方面，本发明提供了一种如第一方面所述去甲斑蝥素钠注射液的制备方法，该方法包括如下步骤：

（1）用部分注射用水配置氢氧化钠水溶液；

（2）按去甲斑蝥素与氢氧化钠的重量比为2:（0.6～1.5）、优选2:1的配比，将去甲斑蝥素加入步骤（1）所得氢氧化钠水溶液中，反应得去甲斑蝥素钠；

（3）向步骤（3）所得溶液加入碱性pH值调节剂至溶液pH值大于9.0且小于等于9.5；

（4）加入剩余注射用水。

上述制备方法中，作为优选，步骤（1）中，按g/ml计，所述氢氧化钠水溶液中氢氧化钠的重量体积百分含量为0.1%～0.5%，优选为0.26%。

作为优选，步骤（2）中，所述氢氧化钠水溶液的温度为65～80℃、优选70～75℃、更优选72℃；优选地，所述反应时间为10～15min、优选为12min；更优选地，在搅拌下进行反应。

作为优选，上述制备方法还包括除杂、除菌和包装入库的步骤。

更优选地，所述制备方法还包括：向步骤（5）所得溶液中加入药用活性炭，至其终浓度以g/ml计为0.01%～0.02%、优选0.01%；20～30℃下、优选25℃下搅拌20～40分钟、优选20分钟，过滤除炭；所得滤液再经0.22μm微孔滤膜过滤，所得滤液经检测合格后分装、压全盖、包装入库。

第三方面，本发明提供了如第二方面所述制备方法所制备的去甲斑蝥素钠注射液。

本发明的具体实施方案公开了2000ml的所述去甲斑蝥素钠注射液的制备方法，可以在此基础上通过调整各原料的配比制备任意规格的去甲斑蝥素钠注射液；2000ml的所述去甲斑蝥素钠注射液的制备方法包括如下步骤：

（1）将5g氢氧化钠加入1500ml注射用水中配置氢氧化钠水溶液；

（2）加入去甲斑蝥素10g，搅拌溶解，氢氧化钠调解pH至大于9小于等于9.5；

（3）加入注射用水2000ml，向所配制溶液中加入0.01%～0.02%药用活性碳，室温搅拌20分钟，过滤除摊，滤液再经0.22um微孔滤膜精滤，精滤滤液检测合格后分装，压全盖、包装入库。

发明人通过加速及长期稳定性试验考察所述去甲斑蝥素钠注射液的稳定性，结果发现，本发明所述去甲斑蝥素钠注射液稳定性好，并且具有纯度高、外观好的优势，适合于人体注射，具有较好的临床应用前景。

具体实施方式

下面的实施例将对本发明作更具体的解释,但本发明并不仅仅局限于这些实施例,同样这些实施例也不以任何方式限制本发明。

实施例1

将5g氢氧化钠加入1500ml注射用水中配制溶液，加入去甲斑蝥素10g搅拌溶解用氢氧化钠调节pH至9.1～9.5，加入注射用水到溶液体积为2000ml，向所配制溶液中加入0.01%药用活性碳，室温搅拌20分钟，过滤除碳，滤液再经0.22μm微孔滤膜精滤，精滤滤液检测合格后分装，压全盖、包装入库。

实施例2

将5g氢氧化钠加入1500ml注射用水中配制溶液,加入去甲斑蝥素10g搅拌溶解,用氢氧化钾调节pH至9.3，加入注射用水至溶液体积为2000ml,向所配制溶液中加入0.01%要用活性碳,室温搅拌20分钟,过滤除碳,滤液再经0.22μm微孔滤膜精滤,精滤滤液检测合格后分装,压全盖、包装入库。

实施例3

将5g氢氧化钠加入1500ml注射用水中配制溶液，加入去甲斑蝥素10g搅拌溶解，用氢氧化钠调节PH至9.5，加入注射用水至溶液体积为2000ml，向所配制溶液中加入0.01%药用活性炭，室温搅拌20分钟，过滤除碳，滤液再经0.22μm微孔滤膜精滤，精滤滤液检测合格后分装，压全盖、包装入库。

实施例4

将5g氢氧化钠加入1500ml注射用水中配制溶液，加入去甲斑蝥素10g搅拌溶解，用氢氧化钠调节PH至9.1，加入注射用水至溶液体积为2000ml，向所配制溶液中加入0.01%药用活性炭，室温搅拌20分钟，过滤除碳，滤液再经0.22μm微孔滤膜精滤，精滤滤液检测合格后分装，压全盖、包装入库。

实施例5

将5g氢氧化钠加入1500ml注射用水中配制溶液，加入去甲斑蝥素10g搅拌溶解，用氢氧化钠调节PH至9.2，加入注射用水至溶液体积为2000ml，向所配制溶液中加入0.01%药用活性炭，室温搅拌20分钟，过滤除碳，滤液再经0.22μm微孔滤膜精滤，精滤滤液检测合格后分装，压全盖、包装入库。

实施例6本发明去甲斑蝥素钠注射液的稳定性考察

参照中国药典2000年版二部附录X IX C药物稳定性试验指导原则，对制备的本发明去甲斑蝥素钠注射液进行稳定性考察，以便为药品的生产、包装、贮存、运输条件提供科学依据，同时通过试验建立药品的有效期。

稳定试验重点考察项目包括性状、碱度、溶液的澄清度与颜色、澄明度、无菌、热原、水分、有关物质含量、主药含量等。检验依据为生产用质量标准草案。

其中，有关物质含量采用高效液相色谱法进行检测。色谱柱选用ShimadzuODS—C18键合硅胶柱（5μm，250mm×4.6mm），以磷酸缓冲液（2.72g磷酸二氢钾，加10ml三乙胺，加水至1000ml，用磷酸调节pH值至3.5）—甲醇（83：17）为流动相，以210nm作为本品的检测波长。流速1.0ml/min。本品经系统适应性试验和酸、碱、氧化、高温、光照破坏性试验，证明各降解产物与主峰均能有效分离，该色谱条件适用。去甲斑蝥素定量限为10ng，最小检出量为2ng。去甲斑蝥素在60.12～140.28μg/ml浓度范围内其浓度与峰面积呈良好线性关系，有关物质检查对照溶液精密度RSD为0.48%，且对照溶液在室温（25℃）条件下，8小时内稳定。

同样地，去甲斑蝥酸钠含量也采用高效液相色谱法进行测定，色谱条件同有关物质检测。线性关系试验结果表明，去甲斑蝥素在0.63～1.47mg/ml浓度范围内其浓度与峰面积呈良好线性关系。对同意批样品的含量测定重复性试验中RSD=0.56%（n=6），中间精密度试验中RSD=0.21%(n=6)，表明本法精密度好。回收率试验中平均回收率为99.4%、RSD为0.91%，表明本法回收率良好。供试品溶液在室温（25℃）条件下，8小时内稳定。对照品溶液在室温（25℃）条件下，4小时内基本稳定。根据各批样品及稳定性试验含量测定结果，规定本品去甲斑蝥素（C₈H₈O₄）含量限度为：含去甲斑蝥酸钠以去甲斑蝥素（C₈H₈O₄）计算，应为标示量的90.0%～110.0%。

试验内容包括：

（1）加速稳定性试验：

将待试样品（分别为实施例2、3、5所制备去甲斑蝥素钠注射液）在温度40℃±2℃、湿度75%±5%的条件下放置6个月，然后检测各项指标；试验结果如表1所示。

表1、本发明去甲斑蝥素钠注射液的加速稳定性试验结果

表1结果表明：各项指标与0月份比较，有关物质稍有升高，主药含量略有下降；其他指标无明显变化（未显示）；说明本发明去甲斑蝥素钠注射液质量稳定。

（2）长期稳定性试验：

将待试样品（分别为实施例2、3、5所制备去甲斑蝥素钠注射液）在温度25℃±2℃、湿度60%±10%条件下放置12个月，然后检测各项指标；试验结果如表2所示。

表2、本发明去甲斑蝥素钠注射液的长期稳定性试验结果

表2结果表明：各项指标与0月份比较，有关物质略有升高，主药含量略有下降；其他指标无明显变化（未显示）；说明本发明去甲斑蝥素钠注射液质量稳定。

依照所测得的各项结果，可暂定本发明去甲斑蝥素钠注射液的有效期为2年。

（3）配伍性试验：

将本发明去甲斑蝥素钠注射液置于5%葡萄糖溶液中，结果发现：8小时内各项指标均无明显变化，完全符合静脉给药要求。

为严格控制本品长期贮存过程中质量稳定，参考本品制剂工艺研究过程中影响因素试验结果，确定本品的贮存条件为遮光，密闭保存。

对比例1

（1）待试样品

试验品：实施例3所制备的pH值为9.5的去甲斑蝥素钠注射液

对照品：pH值分别为8.5、10.5的去甲斑蝥素钠注射液作为对照品，所述对照品除pH值外，其余完全同本发明去甲斑蝥素钠注射液。

（2）加速及长期稳定性试验

将待试样品分别进行实施例6所述加速稳定性试验和长期稳定性试验，考察注射液的杂质含量（见表3）及主药含量（见表4）。

表3、去甲斑蝥素钠注射液的杂质含量对比

表4、去甲斑蝥素钠注射液的主药含量对比

由表3、表4结果可得，经加速试验及长期试验后，本发明去甲斑蝥素钠注射液的杂质含量远低于对照品，主药含量明显高于对照品，表明：本发明去甲斑蝥素钠注射液的稳定性远远好于其它pH值的去甲斑蝥素钠注射液。

申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的，但本发明并不局限于上述，即不意味着本发明必须依赖上述才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明所选用原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。