规模化高效快速繁殖空气凤梨-斯垂科特试管苗的方法

摘要

本发明公开了一种规模化高效快速繁殖空气凤梨-斯垂科特试管苗的方法：将空气凤梨斯垂科特的蒴果消毒，漂洗，切开，取种子；将种子播种于固体培养基中培养，种子萌发形成具三片叶子的幼弱小苗；将小苗置于装有增殖继代培养基中继续培养3~4个月，小苗从基部分蘖增殖，增殖系数达3~4；将增殖小苗上的丛生小苗分开，转接到装有壮苗培养基的膜袋中，移至有外遮荫的大棚温室苗床上，利用光源培养3~4个月得到成苗；将成苗洗净，移置无培养基质的平底穴盘并放温室大棚内培养24~36个月即可。本发明可直接用于工厂化规模化的种苗生产，具有污染少，种子萌发率高，变异率低，种苗健壮，生产成本低，运输方便，移栽成活率高等优势。

说明书

技术领域

本发明属于植物的栽培技术领域，具体涉及一种繁殖空气凤梨-斯垂科特试管苗的 方法。

背景技术

空气凤梨（Tillandsia）属于CAM类植物，夜间吸收二氧化碳，相对增加了局部环境的 氧气浓度，而且还可以吸收居室内甲醛、苯系物等有毒有害物质，净化居室空气，利于 身心健康。同时，空气凤梨具有较高的观赏价值。其种类繁多，形态各异，生长在空气 中，无需泥土，干净、轻便，且能绽放出鲜艳的花朵，既能赏叶，又可观花，具有装饰 效果好、适应性强等特点。在室内可以任意摆放、垂挂，可粘在古树桩、假山石、墙壁 上，放在竹篮里、贝壳上，也可将其吊挂起来，做成窗帘等，点缀居室、客厅、阳台等 处，时尚清新，富于自然野趣，既可作为室内装饰美化环境，又能够净化室内空气，开 发前景广阔，而斯垂科特是其中最具开发价值的品种。

发明内容

本发明所要解决的技术问题，是提供一种规模化高效快速繁殖空气凤梨-斯垂科特 试管苗的方法。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：

一种规模化高效快速繁殖空气凤梨-斯垂科特试管苗的方法，该方法包括以下步骤：

（1）将斯垂科特蒴果先用酒精浸泡45～60s，再放置于氯化汞水溶液中浸泡 15-20min；

（2）将步骤（1）得到的斯垂科特种子播种于固体培养基中，在22～25℃、光照度 500～1000勒克斯、光照时间11～13h/d的条件下，培养40～50d，种子萌发形成2～4mm 大小并具有三片叶子幼弱的小苗，取小苗备用；其中，所述的固体培养基组成为：吲哚 乙酸（IAA）0.5～1.0mg/L+土豆汁60～80g/L+蔗糖25～30g/L+1/2MS培养基+pH5.4～5.6；

（3）将步骤（2）得到的小苗置于增殖继代培养基中，在25～28℃、光照度1000～2000 勒克斯、光照时间11～13h/d的条件下培养3～4个月，斯垂科特从基部分蘖增殖，增殖 系数达3-4；其中，所述的继代增殖培养基组成为：吲哚乙酸0.5～1.0mg/L+6-苄氨基嘌 呤0.2～0.3mg/L+土豆汁60～80g/L+蔗糖25～30g/L+1/2MS培养基+琼脂4.5～6g/L+pH 5.6～5.8；

（4）将步骤（3）中得到的丛生的小苗在超净工作台上分离成单株，转移到封装于 膜袋中的壮苗培养基中，在25～28℃、光照度1000～2000勒克斯、光照时间11～13h/d的 条件下培养3～4个月，移至有外遮荫的大棚温室苗床上，温度控制在25～30℃，利用太 阳光或自然光作为光源进行驯化培养，培养20～30天得到成苗；其中，所述的壮苗培养 基组成为：吲哚乙酸1.0～1.5mg/L+蔗糖25～30g/L+1/4MS培养基+琼脂4.5～6g/L+pH 5.6～5.8；

（5）将步骤（4）得到的成苗从瓶内取出用清水冲洗去除培养基后，移置无基质的 穴盘内上，移入温室大棚内培养24～30个月，即可用于各种室内多装饰。

步骤（1）中，所述的酒精，体积百分浓度为70%～75%。

步骤（1）中，所述的氯化汞水溶液中，氯化汞的质量百分含量为0.1%～0.15%。

步骤（2）中，所述的固体培养基组成为：吲哚乙酸1.0mg/L+土豆汁80g/L+蔗糖 30g/L+1/2MS培养基+琼脂6g/L+pH5.6。

步骤（3）中，所述的继代增殖培养基组成为：吲哚乙酸1.0mg/L+6-苄氨基嘌呤 0.2mg/L+土豆汁80g/L+蔗糖30g/L+1/2MS培养基+琼脂4.5～6g/L+pH5.8。

步骤（4）中，所述的壮苗培养基组成为：吲哚乙酸1.0mg/L+蔗糖30g/L+1/4MS培 养基+琼脂6g/L+pH5.8。

步骤（4）中，所述的封装培养基的膜袋为聚丙烯膜袋。

有益效果：本发明与现有技术相比，具有如下优点：

1、空气凤梨-斯垂科特蒴果消毒后，将种子播散到步骤（2）中的固体培养基中，采 用1/2MS并配以适当的激素和天然附加物，与现有的种子萌发培养基相比，该方法种子 萌发时间大大缩短20～25d，并且萌发率高达90%以上，变异率小于1%，出芽整齐。

2、步骤（3）所述的继代增殖培养基中，采用1/2MS并配以适当的激素，与传统的 继代增殖培养基相比，该方法能更好更快的促进小苗的分蘖，增殖系数可达到3-4。

3、步骤（4）将小苗接种于膜袋中，接种后移入温室大棚中，利用太阳光或自然光 进行培养，能充分利用太阳光光谱广、光谱段能量分布均匀等优势促进小苗的生长，与 常规的方法相比，该方法可以提高小苗的生长速度、健壮度，减少能耗，降低污染，便 于运输，成苗后，移栽适应性好，成活率高95%以上，是一种低碳高效的培养模式。

具体实施方式

根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实 施例所描述的具体的内容仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细 描述的本发明。

实施例1：一种规模化高效快速繁殖空气凤梨-斯垂科特试管苗的方法，该方法包括以下 步骤：

（1）在接种室超净工作台上，将未开裂的空气凤梨-斯垂科特的蒴果，放置于广口 瓶中，往瓶内倒入70%(v/v)酒精，浸泡50s左右，将酒精滤出，再用0.1%(w/w)的氯化 汞水溶液浸泡约12～15min，浸泡过程中反复水平振荡，使蒴果表面消毒彻底，再用无 菌水反复漂洗3～4次，将消毒后的蒴果切开，取种子备用。

（2）将空气凤梨-斯垂科特种子播种于吲哚乙酸1.0mg/L+土豆汁80g/L+蔗糖 30g/L+1/2MS培养基+琼脂6g/L，pH5.6的固体培养基中；培养条件设置为温度25℃、 光照度500～1000勒克斯、光照时间12h/d，培养40～50d，种子萌发形成2-4mm并具有 3叶的小苗。

（3）将得到的小芽转接到吲哚乙酸1.0mg/L+6-苄氨基嘌呤0.2mg/L+土豆汁80g/L+ 蔗糖30g/L+1/2MS培养基+琼脂6g/L，pH5.8的继代增殖培养基中；培养室环境设置 为温度25～28℃、光照度950～1200勒克斯、光照时间12h/d的条件下，培养3～4个月， 小苗的增殖系数达到3-4。

（4）将得到的小苗接种到装有壮苗培养基的聚丙烯膜袋中，培养基配方为吲哚乙酸 1.0mg/L+蔗糖30g/L+1/4MS培养基+琼脂6g/L，pH5.8，接种完毕后，用封口机将膜 袋封口，封口后移至有外遮荫的大棚温室苗床，温度控制在25～30℃，利用太阳光或自 然光作为光源进行培养，温室中继续培养3～4个月，由于膜袋已用封口机封口，密封效 果好，能有效的降低组培苗在温室大棚外界环境下污染的问题。

（5）将得到的成苗从膜袋内取出，用清水冲洗去除培养基后，直接放置于温室大棚 内无培养基质的平底穴盘上培养24～36个月，待期垂科特长至10～20cm大，便可用于 各种室内外的装饰。

实施例2：

与实施例1基本相同，所不同的是：步骤（5）温室大棚自然光和太阳光培养改为 培养室日光灯培养外；步骤（2）、步骤（3）、步骤（4）中种子萌发，继代增殖培养、 壮苗培养三个阶段分别以表1所列培养基组合进行筛选，以优选最适培养基组合配方。 表1说明如下：

①培养基配方优化主要是设计不同的基础培养基、激素浓度、天然添加物、活性炭浓度 等对培养基进行了优化设计,本实例中均设计成固体培养基，每种配方中琼脂浓度均为 5g/L,蔗糖为25g/L，培养环境为温度25℃、光照度1000～2000勒克斯、光照时间12h/d 培养室内。②针对生产，不同的培养阶段设计了三组培养基配方，种子播种阶段主要观 察种子萌发的快慢、长势、颜色（翠绿为佳）等指标判断配方是否合理；继代增殖阶段 主要观察小苗分蘖增殖（越多越好）、玻璃化程度等指标判断配方是否合理；壮苗培养 阶段，主要通关观察苗的生长势、玻璃化程度（越低越好）、颜色等指标来判断配方的 好坏。通过观察和各项指标的测定，并用“★”和“☆”的多少代表配方的好坏，★越多表 示越好，☆比★要低一个等次。

表1培养基配方筛选

试验表明，种子萌发阶段（步骤2）18种配方组合中，基础培养基、激素及天然添 加物组合范围为1/2MS+吲哚乙酸0.5～1.0mg/L+土豆汁60～80g/L培养基范围内，种子 萌发率高，生长快，是较适宜的组合配方组合，种子播种后45d左右即可分化成小苗； 继代增殖阶段（步骤3）18种配方组合中，基础培养基、激素及天然添加物组合范围为 1/2MS+6-苄氨基嘌呤0.2～0.3mg/L+土豆汁60～80g/L培养基范围内，苗的生长势良好、 增殖速度快、玻璃化程度低，3～4个月，苗的增殖系数可达3～4；壮苗阶段（步骤4）， 结果表明，1/4MS+吲哚乙酸1.0～1.5mg/L为优选培养基配方组合。在试验中还发现土豆 对种子萌芽及小苗的增殖发有较好的促进作用。

实施例3：

与实施例1基本相同，所不同的是：将步骤（4）转接小苗后分别采取以下4种不 同的培养环境：①将小苗转接组培瓶中，移至有外遮荫的大棚温室苗床上，通过湿帘和 风机将温度控制在25～30℃，利用太阳光或自然光作为光源进行培养；②将小苗转接膜 袋中，移至有外遮荫的大棚温室苗床上，通过湿帘和风机将温度控制在25～30℃，利用 太阳光和自然光作为光源进行培养；③将小苗转接组培瓶中，放置于培养室内，培养室 环境设置为温度25～28℃、光照度1000～1200勒克斯、光照时间12h/d的条件下进行培 养；④将小苗转接膜袋中，放置于培养室内，培养室环境设置为温度25～28℃、光照度 1000～1200勒克斯、光照时间12h/d的条件下进行培养。

四种培养方式同时进行。结果在4种培养方式中②和④培养三个月左右，小苗叶 片翠绿、健壮，长2～3cm的成苗，特别是②，由于温室内光照充足，叶色成深绿色，更 加健壮，②与①相比，污染率方面具有明显的优势；由于外界条件复杂，因②在接种后 直接用封口机封口，密封性好，污染率只有5%左右，而①的污染率达到50%以上，比 ②5%左右的污染率明显要高，四种培养模式中④的污染率最低，在1%左右。因③这种 培养模式能耗高，生产成本大，而采用②的模式，污染率也在可接受的范围之内，同时 因以太阳光和自然光为光源，成苗后，可直接移栽，不需经过练苗环节，成活率可高达 95%以上，因此综合效果高于④。

实施例4：一种规模化高效快速繁殖空气凤梨-斯垂科特试管苗的方法，该方法包括 以下步骤：

（1）在接种室超净工作台上，将未开裂的空气凤梨-斯垂科特的蒴果，放置于广口 瓶中，往瓶内倒入75%(v/v)酒精，浸泡45～60s，将酒精滤出，再用0.15%(w/w)的氯化 汞水溶液浸泡约12～15min，浸泡过程中反复水平振荡，使蒴果表面消毒彻底，再用无 菌水反复漂洗3～4次，将消毒后的蒴果切开，取种子备用。

（2）将空气凤梨-斯垂科特种子播种于吲哚乙酸0.5mg/L+土豆汁60g/L+蔗糖 25g/L+1/2MS培养基+琼脂4.5g/L，pH5.4的固体培养基中；培养条件设置为温度25℃、 光照度500～1000勒克斯、光照时间12h/d，培养40～50d，种子萌发形成2-4mm并具有 3叶的小苗。

（3）将得到的小芽转接到吲哚乙酸0.5mg/L+6-苄氨基嘌呤0.3mg/L+土豆汁60g/L+ 蔗糖25g/L+1/2MS培养基+琼脂4.5g/L，pH5.6的继代增殖培养基中；培养室环境设置 为温度25～28℃、光照度1000～1200勒克斯、光照时间11～13h/d的条件下，培养3～4个 月，小苗的增殖系数达到3-4。

（4）将得到的小苗接种到装有壮苗培养基的聚丙烯膜袋中，培养基配方为吲哚乙酸 1.5mg/L+蔗糖25g/L+1/4MS培养基+琼脂4.5g/L，pH5.6，接种完毕后，用封口机将膜 袋封口，封口后移至有外遮荫的大棚温室苗床，温度控制在25～30℃，利用太阳光或自 然光作为光源进行培养，温室中继续培养3～4个月，由于膜袋已用封口机封口，密封效 果好，能有效的降低组培苗在温室大棚外界环境下污染的问题。

（5）将得到的成苗从膜袋内取出，用清水冲洗去除培养基后，直接放置于温室大 棚内无培养基质的平底穴盘上培养24～36个月，待期垂科特长至10～20cm大，便可用 于各种室内外的装饰。