一种定性检测动植物油脂中矿物油的方法

摘要

本发明属于油脂类中矿物油检测的技术领域，具体涉及一种定性检测动植物油脂中矿物油的方法。该种定性检测动植物油脂中矿物油的方法，包括以下步骤：（1）中性氧化铝薄层层析板的制备；（2）样品的制备；（3）点样；（4）展样与显色；（5）样品的检测。该方法操作简单，鉴别准确，重复性好。

说明书

技术领域

本发明属于油脂类中矿物油检测的技术领域，具体的涉及一种定性检测动植物油脂中矿物油的方法。 

背景技术

随着商品流通的国际化，动植物油脂的掺伪问题日益突出，动植物油脂中被矿物油污染的事故时有发生。动植物油脂掺杂不仅会影响其纯度，在动植物油脂中掺入矿物油等非食用油，人体食用后会引起食物中毒。

 矿物油中含有重金属、苯并芘、长碳链烷烃、芳香烃等多种有毒物质，食用后刺激人体消化系统，可能导致急性中毒、严重腹泻、昏迷等症状，并可能危机人体神经系统，严重影响儿童发育，增加老年人患老年痴呆的可能性。混入了矿物油的动植物油脂被人体食用后，造成的伤害主要有急性中毒与慢性中毒两种，急性中毒严重时会引发油脂性肺炎；慢性中毒可以引发皮炎、痤疮以及神经衰弱综合征等症状。

对于动植物油脂中混入矿物油的检验，目前国内主要是一下几种定性的检测方法：（1）物理法，如经验法、荧光反应法；（2）化学法，如皂化法；（3）色谱定性法。以上各种方法各有利弊，例如经验法与荧光反应法虽然快速、准确，但是容易导致假阳性误判。目前，虽然气相色谱法，微波皂化法、超声波皂化法在动植物油脂中矿物油定性检测的方面准确度较其他方法的准确度高，但是由于这些方法操作复杂、费用高，其推广程度也受到了限制。

目前，实验室采用的鉴定动植物油脂中混入矿物油的检验方法是气相色谱-质谱法，可以准确的判定是否含有矿物油，但是该方法在时间、金钱上均较大，推广性不大。

随着政府和消费者对食品安全的关注度越来越高，研究动植物油脂中矿物油的快速检测方法显得尤为重要。 

发明内容

本发明的目的在于针对上述存在的缺陷而提供一种定性检测动植物油脂中矿物油的方法，该方法操作简单，鉴别准确，重复性好。

本发明的技术方案为：一种定性检测动植物油脂中矿物油的方法，包括以下步骤：

（1）中性氧化铝薄层层析板的制备：

a.首先量取蒸馏水置于烧杯中，加热至沸腾，然后边搅拌边加入粘合剂，煮沸20～40分钟，冷却至室温，得到粘合剂溶液，其中粘合剂与蒸馏水的重量百分比为0.2～1.0%；

b.取一块玻璃板，先用水洗净晾干，然后用无水乙醇擦洗干净，晾干备用；

c. 称取中性氧化铝放置于步骤a所制备的粘合剂溶液中，搅拌至成为均匀流体，得到流态氧化铝，其中中性氧化铝与粘合剂溶液的重量份比为（0.6～1.2）：1；

d. 将步骤c所制备的流态氧化铝倒于步骤b所备的玻璃板上，然后使流态氧化铝均匀铺在玻璃板上，在室温下放置10～30分钟后，将该玻璃板放置于电热鼓风干燥箱中，在101～105℃条件下进行鼓风活化3～5小时，得到中性氧化铝薄层层析板；

（2）样品的制备：         

分别各取待测样品、已知油脂纯样、矿物油纯样置于不同的试管中，然后分别在每只试管中加入有机溶剂进行溶解，得到待测样品溶液、已知油脂纯样标准溶液、矿物油纯样标准溶液，其中待测样品溶液的浓度为100mg/mL～200mg/mL；

（3）点样:

分别将制备好的待测样品溶液、已知油脂纯样标准溶液、矿物油纯样标准溶液用微量注射器在距离中性氧化铝薄层层析板底端1～1.5cm处依次点开，点成长为2～3cm,宽0.2～0.5cm的带子；

（4）展样与显色：

首先将事先配好的展开剂倒入展开槽中，然后将步骤（3）中点过样的中性氧化铝薄层层析板放入展开槽中，待展开剂展开到距离中性氧化铝薄层层析板上边缘0.5～1.5cm时，将中性氧化铝薄层层析板取出，在室温条件下放置10～30分钟后，在该中性氧化铝薄层层析板上均匀喷洒显色剂，放置20～30分钟；

（5）样品的检测：

将步骤（4）中经过显色的中性氧化铝薄层层析板放在紫外分析仪上，在365nm波长下观察，将待测样品色谱带、已知油脂纯样色谱带和矿物油纯样色谱带进行对比，判定结果。

步骤（1）a中粘合剂与蒸馏水的重量百分比为0.2～0.7%。

步骤（1）a中粘合剂与蒸馏水的重量百分比为0.5%。

粘合剂为羧甲基纤维素钠，其中羧甲基纤维素钠为分析纯。

无水乙醇为分析纯，所述中性氧化铝为200～300目。

步骤（1）c中的中性氧化铝与粘合剂溶液的重量份比为1:1。

步骤（2）中的有机溶剂为正己烷。

步骤（4）中展开剂为50～70ml正己烷与25～35ml无水乙醚的混合物。

步骤（4）中展开剂为 65ml正己烷与35ml无水乙醚的混合物。

本发明的有益效果为：本发明的定性检测动植物油脂中矿物油的方法中，在进行定性检测时，样品不需要进行皂化回流等预处理，节省检测时间，是一种快速简单的动植物油脂中矿物油定性检测方法。该检测方法的工作原理为根据动植物油脂与矿物油的极性不同，在展开剂浸湿中性氧化铝薄层层析板的过程中，样品随着流动相被展开，不同的组分随流动相以不同的速度向前移动，最终保留在中性氧化铝薄层层析板上不同的位置，从而达到分离的目的。矿物油的极性大于动植物油脂的极性，因而如果动植物油中含有矿物油的话，在中性氧化铝薄层层析板上会显示两个色谱带。上端的色谱带为矿物油色谱带。与背景技术中所提及的方法相比，该检测方法不仅在工艺步骤上操作简单，而且工艺条件的选择可以将动植物油脂与矿物油的色谱带清晰且明显的呈现在中性氧化铝薄层层析板上，使得鉴别简单明了，鉴别准确，鉴别时间短，鉴别所花费的成本低，提高检测效率，重复性好，易于准确辨认动植物油脂中是否掺入了矿物油。

 附图说明

图1为本发明具体实施方式中实施例1所得的色谱带分布图片；

图2为本发明具体实施方式中实施例2步骤（1）所得中性氧化铝薄层层析板的图片；

图3为本发明具体实施方式中实施例2所得的色谱带分布图片；

图4为本发明具体实施方式中实施例3步骤（1）所得中性氧化铝薄层层析板的图片；

图5为本发明具体实施方式中实施例3所得的色谱带分布图片。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明的技术方案进行详细的描述。

实施例1

定性检测动植物油脂中矿物油的方法，包括以下步骤：

（1）中性氧化铝薄层层析板的制备：

a.首先量取100ml蒸馏水置于烧杯中，加热至沸腾，然后边搅拌边加入0.25g羧甲基纤维素钠（分析纯），加入速度要慢，使其充分溶解在水中，煮沸20分钟，冷却至室温，得到羧甲基纤维素钠溶液；

b.取一块玻璃板，先用水洗净晾干，然后用无水乙醇（分析纯）擦洗干净，晾干备用；

c. 称取20g 300目的中性氧化铝放置于30g步骤a所制备的羧甲基纤维素钠溶液中，用玻璃棒搅拌至成为均匀流体，得到流态氧化铝；由于中性氧化铝颗粒较大，易沉淀，在制备流态氧化铝过程中需要不断的搅拌。

d. 将步骤c所制备的流态氧化铝快速倒于步骤b所备的玻璃板中央，用手捏住玻璃板的两角在操作台上震荡，然后再捏住玻璃板另外两个角震荡，不断交替轮换震荡，最终使流态氧化铝均匀铺在玻璃板上，流态氧化铝在玻璃板边缘处流动性不好，可以适当的用手指引流。当流态氧化铝均匀铺在玻璃板上后，室温下放置15分钟后，将该玻璃板放置于电热鼓风干燥箱中，在101℃条件下进行鼓风活化5小时，得到中性氧化铝薄层层析板；

（2）样品的制备：         

取待测样品0.06g置于试管中，加入0.6ml正己烷进行溶解，制备成浓度为100mg/ml的待测样品溶液；取已知油酯纯样0.06g置于试管中，加入0.6ml正己烷进行溶解，制备成浓度为100mg/ml的已知油脂纯样标准样品溶液；取0.06g矿物油纯样置于试管中，加入0.6ml正己烷进行溶解，制备成浓度为100mg/ml的矿物油纯样标准溶液。

（3）点样:

分别将制备好的待测样品溶液、已知油脂纯样标准溶液、矿物油纯样标准溶液用微量注射器在距离中性氧化铝薄层层析板底端1.5cm处自左向右依次点开，点成长为2cm,宽0.4cm的带子，其中所述的中性氧化铝薄层层析板底端为中性氧化铝薄层层析板浸入展开槽中展开剂的一端；

（4）展样与显色：

首先将事先配好的展开剂倒入展开槽中，其中展开剂为65ml正己烷与35ml无水乙醚的混合物，然后将步骤（3）中点过样的中性氧化铝薄层层析板放入展开槽中，待展开剂展开到距离中性氧化铝薄层层析板上边缘1.5cm时，将中性氧化铝薄层层析板取出，在室温条件下放置25分钟后，在该中性氧化铝薄层层析板上均匀喷洒显色剂，放置30分钟，其中所述的中性氧化铝薄层层析板上边缘为远离展开槽未浸入展开剂的一端；

（5）样品的检测：

将步骤（4）中经过显色的中性氧化铝薄层层析板放在紫外分析仪上，在365nm波长下观察，将待测样品色谱带、已知油脂纯样色谱带和矿物油纯样色谱带进行对比，判定结果。由于动植物油脂与矿物油的极性不同，在展开剂浸湿中性氧化铝薄层层析板的过程中，样品随着展开剂被展开，不同的组分随展开剂以不同的速度向前移动，最终保留在中性氧化铝薄层层析板上不同的位置，从而达到分离的目的。将待测样品的色谱带与已知油脂纯样色谱带以及矿物油纯样色谱带相结合比对对照，得出待测样品中是否含有矿物油以及含有何种矿物油。

     根据本实施例所述方法得出的色谱带分布见图1，自左向右依次为待测样品溶液、已知油脂纯样标准溶液、矿物油纯样标准溶液的色谱带。

 实施例2

定性检测动植物油脂中矿物油的方法，包括以下步骤：

（1）中性氧化铝薄层层析板的制备：

a.首先量取100ml蒸馏水置于烧杯中，加热至沸腾，然后边搅拌边加入0.5g羧甲基纤维素钠（分析纯），加入速度要慢，使其充分溶解在水中，煮沸20分钟，冷却至室温，得到羧甲基纤维素钠溶液；

b.取一块玻璃板，先用水洗净晾干，然后用无水乙醇（分析纯）擦洗干净，晾干备用；

c. 称取30g260目的中性氧化铝放置于30g步骤a所制备的羧甲基纤维素钠溶液中，用玻璃棒搅拌至成为均匀流体，得到流态氧化铝；由于中性氧化铝颗粒较大，易沉淀，在制备流态氧化铝过程中需要不断的搅拌。

d. 将步骤c所制备的流态氧化铝快速倒于步骤b所备的玻璃板中央，用手捏住玻璃板的两角在操作台上震荡，然后再捏住玻璃板另外两个角震荡，不断交替轮换震荡，最终使流态氧化铝均匀铺在玻璃板上，流态氧化铝在玻璃板边缘处流动性不好，可以适当的用手指引流。当流态氧化铝均匀铺在玻璃板上后，室温下放置30分钟后，将该玻璃板放置于电热鼓风干燥箱中，在105℃条件下进行鼓风活化4小时，得到中性氧化铝薄层层析板；

（2）样品的制备：         

取待测样品0.06g置于试管中，加入0.3ml正己烷进行溶解，制备成浓度为200mg/ml的待测样品溶液；取已知油酯纯样0.06g置于试管中，加入0.3ml正己烷进行溶解，制备成浓度为200mg/ml的已知油脂纯样标准样品溶液；取0.06g矿物油纯样置于试管中，加入0.3ml正己烷进行溶解，制备成浓度为200mg/ml的矿物油纯样标准溶液。

（3）点样:

分别将制备好的待测样品溶液、已知油脂纯样标准溶液、矿物油纯样标准溶液用微量注射器在距离中性氧化铝薄层层析板底端1.5cm处自左向右依次点开，点成长为2cm,宽0.4cm的带子，其中所述的中性氧化铝薄层层析板底端为中性氧化铝薄层层析板浸入展开槽中展开剂的一端；

（4）展样与显色：

首先将事先配好的展开剂倒入展开槽中，其中展开剂为65ml正己烷与35ml无水乙醚的混合物，然后将步骤（3）中点过样的中性氧化铝薄层层析板放入展开槽中，待展开剂展开到距离中性氧化铝薄层层析板上边缘1.5cm时，将中性氧化铝薄层层析板取出，在室温条件下放置25分钟后，在该中性氧化铝薄层层析板上均匀喷洒显色剂，放置30分钟，其中所述的中性氧化铝薄层层析板上边缘为远离展开槽未浸入展开剂的一端；

（5）样品的检测：

将步骤（4）中经过显色的中性氧化铝薄层层析板放在紫外分析仪上，在365nm波长下观察，将待测样品色谱带、已知油脂纯样色谱带和矿物油纯样色谱带进行对比，判定结果。由于动植物油脂与矿物油的极性不同，在展开剂浸湿中性氧化铝薄层层析板的过程中，样品随着展开剂被展开，不同的组分随展开剂以不同的速度向前移动，最终保留在中性氧化铝薄层层析板上不同的位置，从而达到分离的目的。将待测样品的色谱带与已知油脂纯样色谱带以及矿物油纯样色谱带相结合比对对照，得出待测样品中是否含有矿物油以及含有何种矿物油。

实施例2为本发明的最优选技术方案。

根据本实施例步骤（1）所述方法制备所得的中性氧化铝薄层层析板见图2，由图2可明显看出所制备的中性氧化铝薄层层析板板面十分均匀，无气泡鼓面，并且中性氧化铝与玻璃板面的粘合性十分良好。本发明所述定性检测动植物油脂中矿物油的方法，在对中性氧化铝薄层层析板的制备上进行了处理，相比于传统制备中性氧化铝薄层层析板的方法，本发明粘合剂与蒸馏水的重量百分比，同时结合了中性氧化铝与粘合剂溶液的重量份比，使得所制备的中性氧化铝薄层层析板板面均匀，中性氧化铝与玻璃板面的粘合性更好，不容易发生氧化铝掉落的情况，可以更好的观察检测结果。同时采用该方法，可以节省中性氧化铝的使用量。

根据本实施例所述方法得出的色谱带分布见图3，自左向右依次为待测样品溶液、已知油脂纯样标准溶液、矿物油纯样标准溶液的色谱带。

实施例3

定性检测动植物油脂中矿物油的方法，包括以下步骤：

（1）中性氧化铝薄层层析板的制备：

a.首先量取100ml蒸馏水置于烧杯中，加热至沸腾，然后边搅拌边加入1.0g羧甲基纤维素钠（分析纯），加入速度要慢，使其充分溶解在水中，煮沸20分钟，冷却至室温，得到羧甲基纤维素钠溶液；

b.取一块玻璃板，先用水洗净晾干，然后用无水乙醇（分析纯）擦洗干净，晾干备用；

c. 称取35g 200目的中性氧化铝放置于30g步骤a所制备的羧甲基纤维素钠溶液中，用玻璃棒搅拌至成为均匀流体，得到流态氧化铝；由于中性氧化铝颗粒较大，易沉淀，在制备流态氧化铝过程中需要不断的搅拌。

d. 将步骤c所制备的流态氧化铝快速倒于步骤b所备的玻璃板中央，用手捏住玻璃板的两角在操作台上震荡，然后再捏住玻璃板另外两个角震荡，不断交替轮换震荡，最终使流态氧化铝均匀铺在玻璃板上，流态氧化铝在玻璃板边缘处流动性不好，可以适当的用手指引流。当流态氧化铝均匀铺在玻璃板上后，室温下放置15分钟后，将该玻璃板放置于电热鼓风干燥箱中，在101℃条件下进行鼓风活化5小时，得到中性氧化铝薄层层析板；

（2）样品的制备：         

取待测样品0.04g置于试管中，加入0.4ml正己烷进行溶解，制备成浓度为100mg/ml的待测样品溶液；取已知油酯纯样0.04g置于试管中，加入0.4ml正己烷进行溶解，制备成浓度为100mg/ml的已知油脂纯样标准样品溶液；取0.04g矿物油纯样置于试管中，加入0.4ml正己烷进行溶解，制备成浓度为100mg/ml的矿物油纯样标准溶液。

（3）点样:

分别将制备好的待测样品溶液、已知油脂纯样标准溶液、矿物油纯样标准溶液用微量注射器在距离中性氧化铝薄层层析板底端1.5cm处自左向右依次点开，点成长为2cm,宽0.4cm的带子，其中所述的中性氧化铝薄层层析板底端为中性氧化铝薄层层析板浸入展开槽中展开剂的一端；

（4）展样与显色：

首先将事先配好的展开剂倒入展开槽中，其中展开剂为55ml正己烷与30ml无水乙醚的混合物，然后将步骤（3）中点过样的中性氧化铝薄层层析板放入展开槽中，待展开剂展开到距离中性氧化铝薄层层析板上边缘1.5cm时，将中性氧化铝薄层层析板取出，在室温条件下放置25分钟后，在该中性氧化铝薄层层析板上均匀喷洒显色剂，放置30分钟，其中所述的中性氧化铝薄层层析板上边缘为远离展开槽未浸入展开剂的一端；

（5）样品的检测：

将步骤（4）中经过显色的中性氧化铝薄层层析板放在紫外分析仪上，在365nm波长下观察，将待测样品色谱带、已知油脂纯样色谱带和矿物油纯样色谱带进行对比，判定结果。由于动植物油脂与矿物油的极性不同，在展开剂浸湿中性氧化铝薄层层析板的过程中，样品随着展开剂被展开，不同的组分随展开剂以不同的速度向前移动，最终保留在中性氧化铝薄层层析板上不同的位置，从而达到分离的目的。将待测样品的色谱带与已知油脂纯样色谱带以及矿物油纯样色谱带相结合比对对照，得出待测样品中是否含有矿物油以及含有何种矿物油。

根据本实施例步骤（1）所述方法制备所得的中性氧化铝薄层层析板见图4，由图4可看出所制备的中性氧化铝薄层层析板板面较为均匀，中性氧化铝与玻璃板面的粘合性良好。

根据本实施例所述方法得出的色谱带分布见图5，自左向右依次为待测样品溶液、已知油脂纯样标准溶液、矿物油纯样标准溶液的色谱带。