一种检测人类Duffy血型基因型的熔链曲线方法和试剂

摘要

本发明涉及一种能够检测人类Duffy血型基因型的熔链曲线方法，以及该方法所涉及的试剂，可以检测人类Duffy血型基因Fy(a)和Fy(b)。它包括下述步骤：引物设计；制备人基因组DNA；常规PCR，初步确认扩增引物的有效性和特异性；单对引物实时荧光定量PCR测定β-actin、Fy(a)以及Fy(b)基因扩增产物的熔链曲线，确定Tm值及峰形；建立实时荧光定量多重PCR反应体系，测定β-actin+Fy(a)，β-actin+Fy(b)混合产物的熔链曲线，通过Tm值及峰形确定Fy(a)，Fy(b)的基因型。本发明所涉及的方法具有成本相对低廉，能实现多重反应，产物分析在计算机上完成而避免了人为偏差、并能最大限度地避免常规PCR产物污染，每一反应孔均设内参照、便于对实验质量的监控等特点，从而实现对红细胞Duffy血型基因型快速、准确的大规模筛查。