一种无物种限制无生物安全性问题的真核生物基因打靶方法及螺旋结构DNA序列

摘要

本发明公开了一种无物种限制无生物安全性问题的真核生物基因打靶方法及螺旋结构DNA序列，属于基因工程领域。该方法的步骤为：（1）CRISPR/Cas9和嵌合RNA的设计与构建；（2）Cas9mRNA体内翻译后形成Cas9核酸酶与嵌合RNA结合，实现定点剪切，剪切后产生DNA双链断裂，通过诱导细胞自身天然的DNA修复过程“非同源末端连接”来引入外源DNA，从而修改细胞内源基因。该方法步骤简单，识别位点灵活且消耗低。