基于颜色的环介导逆转录等温扩增技术检测GII型诺如病毒

摘要

本发明属于生物技术应用领域，涉及各级疾病预防控制机构，腹泻病毒检测网络实验室，哨点医院等用于对以腹泻、呕吐为主要症状的疑似诺如病毒感染病人的粪便、呕吐物等标本的诺如病毒GII型RNA依赖RNA聚合酶和衣壳蛋白基因的检测和监测。具体是应用基于HNB颜色的环介导逆转录等温扩增技术(RT-LAMP)，通过生物信息学专业软件分析诺如病毒GII型RNA依赖RNA聚合酶和衣壳蛋白基因的保守序列，设计出六条引物识别靶序列，并完全与靶序列中八个结合区匹配，省略了单独的逆转录和巢式PCR的二次扩增步骤，反应前加入HNB(羟基萘酚蓝)染料，只需一步就可完成在65℃等温环境中扩增1小时，最后用肉眼观察颜色变化和管底的白色沉淀判定检测结果，与传统的RT-PCR方法比较，它具有更特异、灵敏、便捷的优势。