一种用于平喘、镇咳、抗炎的中药组方、其制备方法及其用途

摘要

本发明涉及一种由包括麻黄、黄芩、甘草和牡荆油的中药原料制成的中药提取物、包含甘草苷、麻黄总碱、黄芩苷和牡荆油作为活性成分的中药混合物以及包含所述中药提取物或中药混合物的中药组合物，以及它们在临床的应用。本发明的组方具有抗炎、解热、解痉、平喘、镇咳、祛痰、增强免疫、抗细菌或抗病毒作用，可用于治疗和/或预防呼吸系统炎症，诸如支气管炎、气管炎、肺炎等。

说明书

技术领域

本发明涉及一种由包括麻黄、黄芩、甘草和牡荆油的中药原料制成的 中药提取物、包含甘草苷、麻黄总碱、黄芩苷和牡荆油作为活性成分的中 药混合物以及包含所述中药提取物或中药混合物的中药组合物，以及它们 在临床的应用。本发明的中药提取物、中药混合物和中药组合物具有抗炎、 解热、解痉、平喘、镇咳、祛痰、增强免疫、抗菌或抗病毒等作用，可用 于治疗和/或预防呼吸系统炎症，诸如支气管炎、气管炎、肺炎等。

背景技术

呼吸系统炎症是由细菌、病毒以及物理或化学刺激等因素引起的气 管、支气管和肺部炎症。发病季节以冬春多见，发病率与年龄成正比，尤 以我国北方农村为多发。

呼吸系统炎症根据病程的长短，分为急性和慢性两种，其中慢性支气 管炎多见于中老年人，所以又有“老慢支”之称。慢支发病率高、病情反复， 可并发阻塞性肺气肿，甚至肺动脉高压、肺原性心脏病，严重影响患者的 生活和工作。

呼吸系统炎症若反复感染常易导致阻塞性肺气肿，少数患者可并发支 气管扩张。呼吸系统炎症属中医学的“咳嗽”、“痰饮”、“咳喘”等范畴。认 为外邪侵袭以及肺、脾、肾三脏功能失常，是引起本病的主要原因。人体 正气不足，卫外失职，感受外邪，外邪既可以是风寒之邪，也可是风热之 邪，也可风寒之邪化热，侵犯肺脏，使肺失宣肃；或肺气虚弱，卫外不固， 复感外邪；或因年老体弱，脾肺气虚，脾失健运，湿聚成痰，停蓄于肺； 或肺有宿疾，复感外邪；或久病之后，由脾肺损及肾，导致肾气不足，纳 气无权等。

中药种类繁多，不同的配伍，治疗慢支的效果各有差异，如当归六黄 汤可调节机体阴阳平衡，改善和增强机体免疫力，提高治疗率，且无不良 反应；苓桂术甘汤主治心下有痰饮，胸胁支满，为痰饮病而设；桑白皮汤 加减具有清热化痰、肃肺平喘之功；射干麻黄汤主治咳喘不能平卧，喉间 鸣响如水鸡声，痰稀色白，不渴饮，苔白，脉弦紧等；苏子降气汤使气降 痰消，则喘咳自平；宣白承气汤宣肺通腑，脏腑同治，气机升降恢复正常， 则咳嗽、喘促、便秘诸症自可消除；五味沙棘散为蒙古族验方，具有止咳 定喘、清热祛痰功效，临床主要用于肺热久嗽，喘促痰多，胸中满闷，胸 胁作痛。

发明内容

本发明人源于中医理论，总结多方经验，作出了本发明。

传统医学认为肺主气属卫，外合皮毛。外邪侵袭，肺功能失常，是引 起本病的主要原因。人体正气不足，卫外失职，感受外邪，外邪既可以是 风寒之邪，也可是风热之邪，也可风寒之邪化热，侵犯肺脏，使肺失宣肃； 或肺气虚弱，卫外不固，复感外邪，脾失健运，湿聚成痰，停蓄于肺。风 寒之邪外袭肌表，使卫阳被遏，腠理闭塞，影响肺气的宣肃下行，则上逆 为喘。治当宣肺平喘。方中麻黄苦辛性温，归肺与膀胱经，善开腠发汗， 祛在表之风寒；性轻扬，止咳逆上气，宣肺平喘，开闭郁之肺气，发散肺 经郁火，故本方用以为君药。黄芩苦寒，能泻肺经气分之火，兼具利气消 痰之功。与麻黄配伍，用于痰热郁肺，肺失宣降之证，起到清宣肺气，清 肺化痰的作用。牡荆微苦、辛，平。苦能降，辛能散；降则化痰，散则祛 风，风痰之病宜之。甘草甘平，缓肺气之急，和中护正。同时具祛痰止咳 之功，并可防麻黄发汗太过以伤正气。诸药合用，清热祛痰，止咳定喘。

因此，在第一个方面，本发明提供了一种中药提取物，其由包括以 下中药的原料制成：麻黄100-200重量份、黄芩100-200重量份、甘草 100-200重量份、牡荆油0.2-1重量份。

在一个优选实施方案中，本发明的中药提取物主要包含甘草苷、麻 黄总碱、黄芩苷和牡荆油等活性成分。

在第二个方面，本发明提供了一种中药混合物，其包含以下的活性 成分：甘草苷、麻黄总碱、黄芩苷和牡荆油，其中甘草苷、麻黄总碱、黄 芩苷、牡荆油的重量比为2～2.5∶1∶2～2.5∶0.02～0.2，优选2.5∶1∶2.5∶ 0.04。所述甘草苷、麻黄总碱、黄芩苷和牡荆油可以各自由甘草、麻黄、 黄芩和牡荆等药材通过本发明的提取方法制备而成，也可以是市售的成 品。

本发明的中药提取物或中药混合物还可以作为有效成分与一种或多 种药用的辅料、赋形剂、稀释剂或溶剂一起根据本领域公知的方法制成中 药组合物。

在第三个方面，本发明提供了本发明的中药提取物的制备方法，该 方法包括以下步骤：

1)取麻黄药材切段，加10-16倍水煎煮2-4次。每次1-3小时，滤 过，滤液浓缩至干，备用；

2)取黄芩饮片，加6-10倍量水，煎煮2-4次，每次1-2小时，合并 煎液，浓缩至1/3煎液体积，调节pH值至4.0，静置1小时后去除粘膏状 杂质，取上清液，调节pH值至2.0，在4℃静置12-24小时，弃去上清液， 沉淀加水搅拌使其混悬，滤除杂质，沉淀在80℃下减压干燥，备用；

 3)取甘草药材加10-16倍量水煎煮2-4次，每次2-3小时，合并煎 液，滤过，滤液浓缩至1/2体积，调pH值至2.0，静置待无黄色沉淀物析 出时止，弃去上清液，沉淀在60℃下减压干燥，备用；

4)按照牡荆油∶β-环糊精∶水为1∶6～10∶50～100的重量比，取相应量 的β-环糊精，加入水中，加热使之完全溶解，置室温下冷却到50℃以下， 边搅拌，边加入牡荆挥发油，并在恒温下继续搅拌1-3小时，置4℃静置 8-12小时，抽滤沉淀物至干；

5)将步骤1)～步骤4)中获得的产物混合即得。

在上述制备方法中，使用的药材量分别为：麻黄100-200重量份、黄 芩100-200重量份、甘草100-200重量份、牡荆油0.2-1重量份。

在第四个方面，本发明提供了本发明的中药提取物、中药混合物或 包含该中药提取物或该中药混合物的中药组合物的用途，所述中药提取 物、中药混合物和中药组合物具有抗炎、解热、解痉、平喘、镇咳、祛痰、 增强免疫、抗菌或抗病毒中的至少一种作用。所述中药提取物和中药组合 物可用于治疗和/或预防呼吸系统炎症，诸如支气管炎、气管炎、肺炎等。

在第五个方面，本发明提供了本发明的中药提取物、中药混合物或 包含该中药提取物或该中药混合物的中药组合物在制备药物中的用途，所 述药物用于治疗和/或预防下列临床症状中的至少一种：咳嗽、发热、呼 吸困难、咯血、咳痰、气急、哮鸣、喘息、胸痛等。

在第六个方面，本发明提供了本发明的中药提取物、中药混合物或 包含该中药提取物或该中药混合物的中药组合物在制备药物中的用途，所 述药物用于治疗和/或预防下列临床征象中的至少一种：高热不退，汗出 而不解，咳嗽气急，鼻煽气粗，咯痰黄稠或咯铁锈色痰，胸痛，口渴烦躁， 小便黄赤，大便干燥。舌红苔黄，脉滑数或洪数。

本发明得到国家自然科学基金(81073060)资助。

具体实施方式

中药药材概述

本发明中提到的麻黄(Herbal Ephedrae)为麻黄科植物草麻黄(Ephedra  sinica)，中麻黄(Ephedra intermedia)或木贼麻黄(Ephedra equisetina)的草质 茎，是一种发散风寒药，其主要有效化学成分包括有机胺类生物碱(包括 L-麻黄碱(L-ephedrine)，d-伪麻黄碱(d-pseudoephedrine)，L-N-甲基麻 黄碱等；恶唑酮类生物碱：麻黄恶唑酮(ephedroxane)；挥发油：α，α，4-三 甲基-3环己烯-甲醇(α，α-4-trimethyl-3-cyclohexen-1-methanol)，β-松油醇 (β-terpineol)等；黄酮类化合物：芹菜素(apigenin)、小麦黄素(tricin)、 山奈酚(laemplerol)、芹菜素-5-鼠李糖(apigenin-5-rhamnoside)等。麻 黄的主要药理作用包括：发汗；平喘；利尿；抗炎、抗过敏；镇咳、祛痰； 解热、抗菌、抗病毒等。在本发明中上述三种麻黄均可以作为药材使用， 且在本发明中可以直接使用从中提取的麻黄总碱。

本发明中提到的黄芩(Radix Scutellariae)是唇形科植物黄岑 Scutellaria baicalensis Georgi的根，其主要化学成分包括黄芩苷 (baicalin)、黄芩素(baicalein)、汉黄芩甙(wogonoside)、汉黄芩素 (wogonin)、黄芩酮I、II(skullcapflavone I、II)、千层纸黄素A (oroxy-linA)及菜油甾醇。黄芩主要功效清热燥湿，泻火解毒，凉血止血， 除热安胎.黄芩主要含黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素，汉黄芩甙、黄芩新素、 β-谷甾醇等成分，在本发明中可以直接使用从中提取的黄芩苷。它的抗菌 谱较广，对多种细菌、皮肤真菌、钩端螺旋体等都有抑制作用。即使对青 霉素等抗生素产生抗药性的金黄色葡萄球菌，对黄芩仍然很敏感。黄芩还 有降血压、镇静、利尿、保肝、利胆、抗过敏、解除平滑肌痉挛等作用， 与麻黄碱有协同作用。

本发明中提到的甘草为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.、胀 果甘草G.inflata Bat.、或光果甘草G.glabra L.的根及根茎。主要化学成分 包括三萜类(三萜皂苷甘草酸的钾、钙盐为甘草甜素，是甘草的甜味成分)、 黄酮类、生物碱、多糖等，在本发明中可以直接使用从中提取的甘草苷。 甘草有抗心率失常作用；有抗溃疡，抑制胃酸分泌，缓解胃肠平滑肌痉挛 及镇痛作用，并与芍药的有效成分芍药苷有协同作用；能促进胰液分泌； 有明显的镇咳作用，祛痰作用也较显著，还有一定平喘作用；有抗菌、抗 病毒、抗炎、抗过敏作用；能保护发炎的咽喉和气管粘膜；对某些毒物有 类似葡萄糖醛酸的解毒作用；有类似肾上腺皮质激素样作用；还有抗利尿、 降脂、保肝等作用。

本发明中提到的牡荆油为马鞭草科植物牡荆Vitex negundo L.var. cannabifolia(Sieb.et Zucc.)Hand.-Mazz.的新鲜叶经水蒸汽蒸馏得到的 挥发油。牡荆油具有祛痰，止咳，平喘的功效，常用于治疗慢性支气管炎。

药物剂型

本发明的中药提取物可进一步分别与一种或多种辅料、赋形剂、稀释 剂、溶剂、稳定剂、崩解剂、调味剂、着色剂、PH调节剂、分散剂、等 渗剂和/或其他添加剂等药用载体制成适当的药物剂型。在制备包括本发 明的药物的剂型过程中，本发明的中药提取物或中药组合物通常与一种或 多种药用载体通过常规的混合、溶解、制粒、制锭研磨、乳化、封装、包 埋或冻干等工艺进行制备，本发明的有效成分(中药组合物或中药提取物) 稀释或包封在其中(见Remington′s Pharmaceutical Sciences，第十五版， Hoover，J.E.主编，Mack Publishing Co.(2003))。

上述剂型可采取任何合适的给药方式，该方式包括局部、经眼、经 口、全身、经鼻、注射、透皮、直肠、阴道等途径，或吸入或吹入给药的 形式。

对于局部给药，本发明的药物可制成溶液、凝胶、油膏、乳膏、悬浮 液等。

全身制剂包括通过注射给药，例如皮下、静脉内、肌肉内、鞘内或腹 膜内注射的剂型，以及用于透皮、透粘膜口腔或肺部给药的剂型。

可注射剂型包括本发明的药物在水性或油性媒介中的无菌悬浮液、溶 液或乳液。所述剂型还可含有悬浮剂、稳定剂和/或分散剂等。注射剂型 可以单位剂型提供，例如，在安瓿中或多次剂量容器中，可含有防腐剂。

可注射剂型也可选择粉末的形式，在使用前使用合适的媒介物，包括 但不限于无菌无热源水、缓冲液、葡萄糖溶液等重新配制。可注射剂型可 通过直接静脉内注射、静脉快速滴注给药，或通过加入输注溶液如0.9％ 氯化钠注射液或其他相容的输注溶液进行输注给药。

对于口服给药，本发明的药物可使用药用赋形剂和/或添加剂通过常 规的方式制备成例如锭剂、片剂或胶囊的剂型。用于口服给药的液体剂型 可采取例如酏剂、溶液、糖浆剂或悬液的形式，或可以是粉末，在使用前 使用水或其他合适的媒介物进行配制。这种液体剂型可通过常规的方式使 用药用添加剂来进行制备。

口服给药制剂可被配制成为可控释放剂型，其制备工艺和方法在本领 域中是公知的。

本发明的药物剂型优选为口服剂型或胃肠外剂型。口服剂型包括片 剂、胶囊、锭剂、酏剂、糖浆剂、混悬剂和散剂等，优选片剂和胶囊剂型。 胃肠外剂型包括可注射剂型、栓剂和喷雾剂，优选注射针剂、冻干粉针剂 和注射液等。

本发明的药物治疗用途

本发明的中药提取物、中药混合物或中药组合物(下面简称“本发明 的药物”)具有抗炎、解热、解痉、平喘、镇咳、祛痰、增强免疫、抗细 菌或抗病毒中的至少一种作用，其可用于治疗各种病因导致的咳嗽、发热、 呼吸困难、咯血、咳痰、气急、哮鸣、喘息、胸痛等临床症状中的至少一 种或多种。

从中医的角度来看，本发明涉及的临床征象包括高热不退，汗出而不 解，咳嗽气急，鼻煽气粗，咯痰黄稠或咯铁锈色痰，胸痛，口渴烦躁，小 便黄赤，大便干燥。舌红苔黄，脉滑数或洪数。

本发明的药物可以用于制备治疗和/或预防下列炎症中的至少一种的 药物：包括生物病原体包括细菌、真菌、病毒、支原体、衣原体、军团菌、 立克次体、卡氏肺囊虫等引起的炎症，和非生物病原体因子引起的炎症。

在本发明中，细菌选自下列细菌中的至少一种：金黄色葡萄球菌、 表皮葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、卡他球菌、克雷伯杆菌、军团菌、绿 脓杆菌、肺炎球菌和变形杆菌。

在本发明中，病毒选自下列中的至少一种：流感病毒(流行性感冒病 毒(influenza virus)、柯萨奇病毒、冠状病毒(包括引起肺典型肺炎的变种 (SARS病毒))、麻疹病毒、副流感病毒(人类副流感病毒(HPIVs)、呼 吸道合胞病毒、鼻病毒、腺病毒、疱疹病毒、巨细胞病毒。

在本发明的优选实施方案中，所述炎症是呼吸系统炎症，包括肺和 呼吸道(鼻腔、咽、喉、气管、支气管)管等部位的炎症。

按照病程分类，本发明涉及的呼吸系统炎症可以包括急性(支)气管 炎、慢性(支)气管炎、急性肺炎、慢性肺炎等。

按照病因分类，本发明中提及的呼吸系统炎症可以包括：

1.生物病原体引起的呼吸系统炎症，包括：

(1)细菌性炎症如肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、甲型溶血性链球菌、 肺炎克雷白杆菌、流感嗜血杆菌、铜绿假单胞菌等引起的炎症。

(2)非典型病原体所致的炎症如军团菌、支原体和衣原体等引起的炎 症。

(3)病毒性炎症如冠状病毒、腺病毒、流感病毒等引起的炎症。

(4)真菌性炎症如白念珠菌、曲霉、放射菌等引起的炎症。

(5)其它病原体所致的炎症如立克次体、弓形虫、原虫等引起的炎症；

2.非生物病原体因子引起的呼吸系统炎症。包括

(1)理化因素所致的炎症如放射性炎症、胃酸吸入、药物等引起的化 学性炎症等。所述理化因素包括1)化学物质，包括内源性和外源性化学 物质。外源性化学物质如强酸、强碱及松节油、芥子气等；内源性化学物 质包括毒性物质如坏死组织的分解产物及在某些病理条件下堆积于体内 的代谢产物如尿素等；2)物理因子，包括高温、低温、放射性物质及紫 外线等和机械损伤等；3)异物，即通过各种途径进入人体的异物，如各 种金属、木材碎屑、尘埃颗粒、及手术缝线等，由于其抗原性不同，可引 起不同程度的炎症反应。

(2)坏死组织：缺血或缺氧等原因可引起组织坏死，而组织坏死是潜 在的致炎因子，在新鲜梗死灶边缘所出现的充血出血带和炎性细胞的浸润 都是炎症的表现。

(3)变态反应：即当机体免疫反应状态异常时，可引起不适当或过度 的免疫反应，造成组织和细胞损伤而导致炎症。免疫反应所造成的组织损 伤最常见于各种类型的超敏反应：I型变态反应如过敏性鼻炎、荨麻疹， II型变态反应如抗基底膜性肾小球肾炎，III型变态反应如免疫复合物沉 着所致的肾小球肾炎，IV型变态反应如结核、伤寒等；另外，还有许多 自身免疫性疾病如淋巴细胞性甲状腺炎、溃疡性结肠炎。

临床症状和征象

下面简述本发明中涉及的部分临床症状和临床征象：

咳嗽：急性发作的刺激性干咳伴发热、声嘶者，常见于急性喉炎、 气管炎、支气管炎；长年咳嗽，秋冬季加重，多考虑慢性支气管炎；体位 改变时咳嗽、咳痰加剧，在支气管扩张或肺脓肿中多见；咳嗽伴胸痛，多 见于肺炎、胸膜炎；发作性干咳(尤其在夜间规律发作)，提示咳嗽变异型 哮喘；高亢的干咳伴有呼吸困难可能是支气管肺癌累及气管或主支气管； 持续而逐渐加重的刺激性咳嗽伴有气促，则考虑特发性肺间质纤维化或支 气管肺泡癌。

咳痰：痰的性状、量及气味对诊断有一定帮助。一般痰由白色泡沫 或粘液状转为脓性多为细菌性感染；大量黄脓痰常见于肺脓肿或支气管扩 张；铁锈样痰可能是肺炎链球菌感染；红棕色胶冻样痰常提示肺炎克雷白 杆菌感染；伴厌氧菌感染时，脓痰有恶臭味；肺水肿时，咳粉红色稀薄泡 沫痰；肺阿米巴病呈咖啡样痰；肺吸虫病为果酱样痰。痰量的增减，反映 感染的加剧或炎症的缓解。

咯血：痰中经常带血是肺结核.肺癌的常见症状。咯鲜血(特别是24 小时300毫升以上)，多见于支气管扩张.也可见于肺结核；急性支气管 炎、肺炎、肺栓塞、二尖瓣狭窄引起的肺淤血亦可咯血，但都是短期的。

呼吸困难：呼吸困难主要表现在呼吸频率、深度及节律等方面。按 其发作快慢分为急性、慢性和反复发作性。急性气促伴胸痛常提示肺炎、 气胸、胸腔积液；慢性进行性气促见于慢性阻塞性肺疾病、弥漫性肺间质 纤维化；支气管哮喘发作时，常出现呼气性呼吸困难，且伴哮鸣音，缓解 时可完全消失，下次发作时症状再次出现。呼吸困难分为吸气性、呼气性 和混合性三种。喉头水肿、喉气管炎症，肿瘤或异物引起上呼吸道狭窄时， 出现吸气性喘鸣音；哮喘或喘息性支气管炎引起下呼吸道广泛支气管痉 挛，则引起呼气性哮鸣音。带有阳离子的甲壳素，在肠道内与脂肪及胆汁 酸结合，可阻断脂肪消化与吸收，清利胆道，降低中性脂肪及低密度脂蛋 白，溶解血栓，防止动脉硬化及脑中风。

胸痛：肺和脏层胸膜对痛觉不敏感，肺炎、肺结核、肺梗死、肺脓 肿等病变累及壁层胸膜时，可发生胸痛。胸痛伴高热，应考虑肺炎。当癌 侵及壁层胸膜或肋骨时，出现隐痛、持续加剧，乃至刀割样疼痛；胸膜炎 常引起胸廓活动较大的两侧下胸痛，与咳嗽、深吸气有关；自发性气胸可 在剧咳或屏气时突然发生剧痛。

中医临床征象：从中医的角度来看，表邪不解而入里，邪热郁肺， 肺卫郁闭，而见高热不退，汗出不解；邪热壅阻肺气，肺失清肃，故咳嗽 气急，鼻煽气粗，痰黄或铁锈色；热伤肺络则胸痛；热伤津液而见口渴， 小便黄赤，大便干燥；而舌红苔黄，脉滑数或洪数均为邪热壅肺之征。

疾病概述

细菌性炎症：细菌性肺炎(bacterialpneumonia)占成人各类病原体 肺炎的80％。进入抗生素时代以来，细菌性肺炎的预后一度显著改善， 但自60年代以后病死率居高不降。按解剖学分类，肺炎可分为大叶性、 小叶性和间质性。按病因分类，主要有感染性和理化性如放射线、毒气、 药物以及变态反应性如过敏性肺炎等，临床所见绝大多数为细菌、病毒、 衣原体、支原体、立克次体、真菌和寄生虫等引起的感染性肺炎，其中以 细菌最为常见。

肺炎的病原体因宿主年龄、伴随疾病与免疫功能状态、获得方式(社 区获得性肺炎或医院内肺炎)而有较大差异。社区获得性肺炎的常见病原 体为肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、军团 菌、厌氧菌以及病毒、支原体和衣原体等，而医院内肺炎中则以绿脓杆菌 与其他假单胞菌、肺炎杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、耐甲氧西林金葡菌 (mrsa)和真菌等常见。吸入性肺炎大多数为厌氧菌感染。

细菌性肺炎患者常有受寒、劳累等诱因或伴慢性阻塞性肺病、心力 衰竭等基础疾病，三分之一患者病前有上呼吸道感染史。多数起病较急。 部分革兰阴性杆菌肺炎、老年人肺炎、医院内肺炎起病隐匿。发热常见， 多为持续高热，抗生素治疗后热型可不典型。咳嗽、咳痰。显微镜下的金 黄色葡萄球菌甚多，早期为干咳，渐有咳痰，痰量多少不一。痰液多呈脓 性，金葡菌肺炎较典型的痰为黄色脓性；肺炎链球菌肺炎为铁锈色痰；肺 炎杆菌肺炎为砖红色粘冻样；绿脓杆菌肺炎呈淡绿色；厌氧菌感染常伴臭 味。抗菌治疗后发展至上述典型的痰液表现已不多见。咯血少见。部分有 胸痛，累及胸膜时则呈针刺样痛。下叶肺炎刺激膈胸膜，疼痛可放射至肩 部或腹部，后者易误诊为急腹症。全身症状有头痛、肌肉酸痛、乏力，少 数出现恶心、呕吐、腹胀、腹泻等胃肠道症状。重症患者可有嗜睡、意识 障碍、惊厥等神经系统症状。

病毒性炎症：病毒性肺炎(viral pneumonia)是由上呼吸道病毒感染， 向下蔓延所致的肺部炎症。可发生在免疫功能正常或抑制的儿童和成人。 本病大多发生于冬春季节，可暴发或散发流行。病毒性肺炎为吸入性感染， 通过人与人的飞沫传染，主要是由上呼吸道病毒感染向下蔓延所致，常伴 气管-支气管炎。在急性呼吸道感染中，病毒感染占90％，有普通感冒、 咽炎、喉-气管-支气管炎、细支气管炎、婴儿疱疹性咽峡炎(herpangina) 以及流行性胸痛(pleurodynia)等。引起肺炎的病毒以流行性感冒病毒为 常见，其他为副流感病毒、巨细胞病毒、腺病毒、鼻病毒、冠状病毒和某 些肠道病毒，如柯萨奇、埃可病毒等，以及单纯疱疹、水痘-带状疱疹、 风疹、麻疹等病毒。婴幼儿还常由呼吸道合胞病毒感染产生肺炎。患者可 同时受一种以上病毒感染，并常继发细菌感染，免疫抑制宿主还常继发真 菌和原虫感染。

真菌性炎症：引起呼吸系统炎症的真菌例如曲霉、诺卡菌、隐球菌、 荚膜组织胞浆菌；念珠菌，其为口腔、皮肤、肠道及阴道的寄生菌；放线 菌，其为口腔龋齿寄生菌。体内其他部位真菌感染亦可循淋巴或血液到肺 部，例如颈部、膈下病灶中的放线菌，此类均为继发性肺部真菌感染。真 菌性肺炎常继发于婴幼儿肺炎、肺结核、糖尿病、血液病等；应用抗菌素 和激素等是主要诱因，这是因为青霉素有刺激白色念珠菌过度繁殖的作 用；广谱抗生素抑制体内细菌，使念珠菌失去细菌的制约；皮质激素可抑 制体内的免疫功能。其具有支气管肺炎的各种症状和体征，但起病缓慢， 多在应用抗生素治疗中肺炎出现或加剧，可有发热，咳嗽剧烈，痰为无色 胶冻样，偶带血丝。肺部听诊可有中小水泡音。

变应性炎症：过敏性肺炎(hypersensitivitypneumonitis)是一组由不 同致敏原引起的非哮喘性变应性肺疾患，以弥漫性间质炎为其病理特征。 系由于吸入含有真菌孢子、细菌产物、动物蛋白质或昆虫抗原的有机物尘 埃微粒(直径＜10μ)所引起的过敏反应，因此又称为外源性变应性肺泡 炎(extrinsicallergicalveolitis)。变应原为含有真菌孢子、细菌产物、动物 蛋白质或昆虫抗原的有机物尘埃颗粒。在急性者，原来已致敏的病人可有 发热，畏寒，咳嗽和呼吸困难，一般出现于再次接触抗原后4～8小时。 也可出现厌食，恶心和呕吐。肺部听诊有细中吸气相湿性啰音，哮鸣音不 常见。脱离抗原之后，症状一般在几小时内改善，但完全恢复需几周，反 复发作可致肺纤维化。亚急性者可隐袭发病，咳嗽和呼吸困难持续数日至 数周，病情不断发展者需要住院治疗。在慢性者，进行性活动后呼吸困难， 咳嗽，乏力和体重下降可达数月至数年。疾病可发展为呼吸衰竭。

以下通过实施例对本发明做进一步说明。实施例仅用来说明本发明的 实施方法和效果，并不以任何形式限制本发明。下面实施例中所提及的中 药、原料、赋形剂、稀释剂、辅料、试剂或其他药物等，除非另外指明， 均是市售产品。如未具体说明，则其中提到的物质的“％”为重量％，“份” 为重量份。

[制备实施例]

制备实施例1

原料配比：

以上四味，麻黄切段，加12倍水煎煮二次，每次1.5小时，滤过，滤 液浓缩至干，备用。黄芩饮片，加8倍量水，煎煮三次，每次1小时，合 并煎液，浓缩至1/3煎液体积，加2mol/L盐酸溶液调节pH值至4.0，静 置1小时，去除粘膏状的杂质；取上清液，再加2mol/L盐酸溶液调节pH 值至2.0，在80℃下保温30分钟，置4℃静置12小时。弃去上清液，沉 淀加水搅拌使混悬，双层纱布滤除杂质，滤液待沉淀后，再重复用水洗至 pH值5.0以上，滤过，沉淀在80℃下减压干燥，备用。甘草加12倍量水 煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至1/2体积，加入浓 硫酸调pH值至2.0，静置待无黄色沉淀物析出时止，置5℃冷藏过夜，弃 去上清液，沉淀用水搅拌洗涤至pH值近中性，60℃下减压干燥，备用。 牡荆油按照油∶β-环糊精∶水为1∶8∶70的比例，取相应量的β-环糊精，加入 水中，加热使之完全溶解，置室温下冷却到50℃以下，边搅拌，边加入 处方比例的挥发油，并在恒温下继续搅拌1.5小时。置4℃静置8小时， 抽滤沉淀物至干。合并上述提取物，加入辅料，制成颗粒，装入胶囊，即 得。

制备实施例2

原料配比：采用下述中药的提取干粉，按下述比例称量：

甘草苷，     275mg

麻黄总碱，   110mg

黄芩苷，     275mg

牡荆油，     40mg

倍他环糊精， 适量

将牡荆油用倍他环糊精包合，加入其他各原料，混匀，加入辅料，制 成颗粒，装入胶囊，即得。

[试验实施例]

试验1本发明的药物的镇咳作用

1-1对小鼠的止咳作用

摘要用氨水引起小鼠咳嗽，实验通过小鼠咳嗽潜伏期和3分钟内咳 嗽次数，观察本发明的药物的止咳作用。结果表明，本发明的药物小、 中、大剂量组有明显延长咳嗽潜伏期和减少咳嗽次数，与对照组比 较P＜0.05、P＜0.01、P＜0.001。

目的观察本发明的药物对氨水所致小鼠的止咳作用。

试验材料

药物

(1)受试药：制备实施例1中制备的提取物干粉，下面也简称 本发明的药物。

(2)西药阳性对照咳平片，10mg/片，由北京曙光药业有限责 任公司生产，批号：030619；有效期至200606。

(3)中药阳性对照桂龙咳喘宁胶囊，1g(生药)/粒(0.3g粉)， 由山西桂龙医药有限公司生产，批准文号：国药准字Z-11；产品批号： 040112；有效期至2005.12。

(4)麻荆合剂，2.06g(生药)/g(膏)，由中国中医科学院西苑 医院基础研究室药学组提供，批号：030425。

动物昆明种小鼠70只，II级，雌雄各半，体重21.84±1.21g，由中 国医学科学院实验动物研究所提供，许可证编号 SCXK(京)2000-0006。

动物饲料配方及营养成份

大鼠维持饲料，由北京科澳协力饲料有限公司生产，许可证编号：京 动(2000)第015号。

主要成分[北京营卫检字(1997)第083号]：

水分≤9.5％、灰分≤7.8％、蛋白质≥7.8％、脂肪≥4.3％、粗纤维≤11.0％、 赖氨酸≥1.39％、蛋+光氨酸0.3-0.54％、钙：1.0％、磷：0.54％、叶酸21.1mg/kg、 维生素A≥11.4/kg、维生素D≥98ug/kg、维生素B族24.11-164mg/kg，热量： 4.62兆卡/kg。

动物的饲养条件

中国中医研究院西苑医院实验动物中心屏障环境饲养设施，许可证： SYXK(京)2003-0808。室温：22-24℃，相对湿度：40±5％。

试剂氢氧化铵北京世纪红星化工有限责任公司生产，批号：20030310。

试验方法

取健康小鼠70只，随机分为7组，(1)空白对照组，给蒸馏水 (25ml/kg)；(2)咳平片组(12mg/kg)；(3)桂龙咳喘宁组(2g生药 /kg)；(4)本发明的药物小剂量组(125mg生药/kg)；(5)本发明的 药物中剂量组(250mg生药/kg)；(6)本发明的药物大剂量组(500mg 生药/kg)；(7)麻荆合剂(8g生药/kg)。每日以25ml/kg的体积灌胃 给药一次，连续3天，末次给药后30分钟，将小鼠置入500ml烧杯， 内放一棉球，将1ml注射器吸取氨水0.2ml注入棉球，迅速倒置烧杯， 观察记录小鼠的咳嗽潜伏期和3min内咳嗽次数，进行组间比较，t 检验。

试验结果见表1。

表1：对小鼠止咳作用的影响

注：与对照组比较^*P＜0.05；^**P＜0.01；^***P＜0.001。

从表中可见，本发明的药物小、中、大剂量组及阳性药组对氨 水引发小鼠咳嗽，均有明显延长咳嗽潜伏期时间及减少咳嗽次数的 作用，与对照组比较有显著性差异，分别(P＜0.05、P＜0.01、P＜0.001)。

上述实验结果表明，本发明的药物对氨水引发小鼠咳嗽，有明 显延长咳嗽潜伏期及减少咳嗽次数的作用。

1-2对豚鼠的止咳作用

摘要用枸橼酸喷雾引起豚鼠咳嗽，实验通过豚鼠咳嗽潜伏期和5分 钟内咳嗽次数，观察本发明的药物的止咳作用。结果表明，本发明 的药物有延长咳嗽潜伏期和减少咳嗽次数，与对照组比较有显著性 差异，分别为(P＜0.05、P＜0.01、P＜0.001)。

目的用枸橼酸喷雾引起豚鼠咳嗽，观察本发明的药物的止咳作用。

试验材料

药物

(1)受试药：制备实施例1中制备的提取物干粉(下面也简称为“本 发明的药物”)。

(2)中药对照桂龙咳喘宁胶囊，1g(生药)/粒(0.3g粉)，由山西桂龙 医药有限公司生产，批准文号：国药准字Z-11；产品批号：040112；有 效期至2005.12。

(3)西药对照咳平片，10mg/片，由北京曙光药业有限责任公司生 产，生产日期：200306；批号：030619；有效期至200606。

(4)麻荆合剂，2.06g(生药)/g(膏)，由中国中医科学院西苑医院 基础研究室药学组提供，批号：030425。

动物纯种豚鼠70只，I级，雌雄各半，体重235.53±35.88g，由北 京科宇动物养殖中心提供，许可证编号SCXK(京)2002-0005。

试剂枸橼酸(柠檬酸)，北京化工厂生产，批号：960904。

器械气泵，4升容积玻璃钟罩，玻璃喷头。

试验方法

实验前将豚鼠逐只置于4L容器的密闭钟罩内，以(400mmHg) 的压力通过玻璃喷头喷入17.5％枸橼酸溶液，喷雾1分钟，记录5分钟 内豚鼠的咳嗽次数进行筛选，咳嗽次数少于10次者弃用，挑选合格的豚 鼠用于实验。取筛选后合格豚鼠70只，雌雄各半，随机分为7组，(1) 空白对照组给蒸馏水(5ml/kg)；(2)咳平片组(7mg/kg)；(3)桂 龙咳喘宁(1.2g生药/kg)；(4)本发明的药物小剂量组(308mg生药 /kg)；(5)本发明的药物中剂量组(154mg生药/kg)；(6)本发明的 药物大剂量组(77mg生药/kg)；(7)麻荆合剂(5g生药/kg)。每日 以5ml/kg的体积灌胃给药一次，连续3天，对照组给等量生理盐水， 末次给药后30分钟，将豚鼠逐只置入4L容积的密闭钟罩内，以 (600mmHg)的压力通过玻璃喷头喷入17.5％枸橼酸，喷雾1分钟， 观察记录豚鼠的咳嗽潜伏期和5分钟内咳嗽次数，进行组间比较，t检 验。

试验结果见表2。

表2：对豚鼠止咳作用的影响

注：与对照组比较^*P＜0.05；^**P＜0.01；^***P＜0.001。

实验结果表明，本发明的药物小、中、大剂量组及阳性药组均 有明显延长咳嗽潜伏期时间和减少咳嗽次数的作用，与对照组比较 有显著性差异，分别为(P＜0.05、P＜0.01、P＜0.001)。

上述结果表明，本发明的药物可明显延长咳嗽潜伏期时间及减 少咳嗽次数的作用。

试验2本发明的药物的祛痰作用

2-1对小鼠酚红排痰量的影响

摘要实验通过用小鼠酚红排痰法的方法，观察本发明的药物的排痰 作用。结果，本发明的药物小、中、大剂量组及阳性药组均有明显 促进分泌量增加的作用，与对照组比较有显著性差异(P＜0.05、 P＜0.01、P＜0.001)。表明，本发明的药物对小鼠酚红排出量有明显促 进分泌量增加的作用。

目的用小鼠酚红祛痰法，观察本发明的药物对小鼠酚红的排出量有 无促进作用。

试验材料

药物

(1)受试药：制备实施例1中制备的提取物干粉，简称本发明 的药物。

(2)中药对照桂龙咳喘宁胶囊，1g(生药)/粒(0.3g粉)，由山 西桂龙医药有限公司生产，批准文号：国药准字Z-11；产品批号：040112； 有效期至2005.12。

(3)西药对照沐舒坦，30mg/片，德国勃林格殷格翰国际有限 公司产品，生产批号：206362，分装批号：030307。

(4)麻荆合剂，2.06g(生药)/g(膏)，由中国中医科学院西苑 医院基础研究室药学组提供，批号：030425。

试剂

(1)苯酚红25克/瓶，由北京化工厂生产，批号：20001017。

(2)NaOH北京化学试剂公司出品，批号：040901。

动物ICR种小鼠70只，SPF级，雌雄各半，体重19.03±1.18g，由 北京维通利华实验动物技术有限公司提供，许可证编号 SCXK(京)2002-0003。

仪器紫外可见分光光度计，型号UV-120-02，日本岛津公司产品。

试验方法

取健康小鼠70只，随机分为7组，(1)空白对照组，给蒸馏水 (25ml/kg)；(2)沐舒坦组(16mg/kg)；(3)桂龙咳喘宁胶囊组(2g 生药/kg)；(4)本发明的药物小剂量组(125mg生药/kg)；(5)本发 明的药物中剂量组(250mg生药/kg)；(6)本发明的药物大剂量组 (500mg生药/kg)：(7)麻荆合剂(8g生药/kg)。每日以25ml/kg体 积灌胃给药一次，连续3天，实验前禁食不禁水，末次给药后给小 鼠腹腔注射5％酚红生理盐水溶液500mg/kg，30分钟后将小鼠处死， 背位固定，剪开颈部正中皮肤，分离气管，气管上切一小口，将磨 平的7号针头插入气管内约0.3cm，用丝线结扎固定后，将1ml注射 器吸取0.5ml生理盐水反复冲洗气道3次，将冲洗液吸入试管内， 以上方法重复3遍，以0.1ml1mol/L NaOH加入冲洗液试管内，使液 体呈碱性，在波长为546nm的UV-120-02型紫外可见分光光度计测 定光密度(OD)值，用酚红作标准曲线，根据标准曲线计算酚红含 量(μg/ml)，进行组间比较，t检验。

试验结果见表3。

表3：对小鼠酚红排出量的影响

注：与对照组比较；^*P＜0.05；^**P＜0.01；^***P＜0.001。

从表中可见，本发明的药物本发明的药物小、中、大剂量组及 阳性药组均有明显促进分泌量的增加，与对照组比较有显著性差异 (P＜0.05、P＜0.01、P＜0.001)。

小结上述结果表明，本发明的药物对小鼠酚红排出量痰有明显促 进分泌量增加的作用。

2-2对大鼠毛细管排痰量的影响

摘要实验通过用毛细管排痰法，观察本发明的药物对大鼠的排痰作 用。结果表明，该药对大鼠毛细管排痰量有明显促进分泌量增加的 作用，分别为P＜0.05、P＜0.01、P＜0.001。

目的用毛细管排痰法，观察本发明的药物有无促进对大鼠的排痰 量。

试验材料

药物

(1)受试药：制备实施例1制备的提取物干粉，简称本发明的药物。

(2)中药对照桂龙咳喘宁胶囊，1g(生药)/粒(0.3g粉)，由山西桂龙 医药有限公司生产，批准文号：国药准字Z-11；产品批号：040112；有 效期至2005.12。

(3)西药对照沐舒坦，30mg/片，德国勃林格殷格翰国际有限公司 产品，生产批号：206362，分装批号：030307。

(4)麻荆合剂，2.06g(生药)/g(膏)，由中国中医科学院西苑医院 基础研究室药学组提供，批号：030425。

动物Wistar种大鼠70只，SPF级，雌雄各半，体重171.17±21.66g， 由中国医学科学院实验动物研究所提供，许可证编号：SCXK(京) 2000-0006。

试验方法

取健康大鼠70只，随机分为7组，(1)空白对照组，给蒸馏水 (10ml/kg)；(2)沐舒坦组(11mg/kg)；(3)桂龙咳喘宁胶囊组(1.5g 生药/kg)；(4)本发明的药物小剂量组(87.5mg/kg)；(5)本发明的 药物中剂量组(175mg/kg)；(6)本发明的药物大剂量组(350mg /kg)；(7)麻荆合剂(5.7g生药/kg)。实验时用3.5％水合氯醛 (10ml/kg)大鼠腹腔麻醉，仰位固定平放，切开颈部皮肤，分离气 管，在甲状软骨下缘正中处两软骨之间用注射针头扎一小孔，然后 插入玻璃毛细管一根，玻璃毛细管长5cm，内经0.8mm，使毛细管 插到刚好接触气管内壁，当毛细管充满时，立即再换一根，先测定 给药前1hr毛细管排痰量，1hr后由十二指肠以10ml/kg体积给予药 物，对照组给等量生理盐水，观察给药后1、2hr平均每小时分泌量， 以给药前1hr平均分泌量作为正常值，进行组间比较，t检验。

试验结果见表4。

表4：对大鼠毛细管排痰法排痰量的影响(n＝10)

注：与对照组比较；^*P＜0.05，^**P＜0.01，^***P＜0.001。

从表中可见，本发明的药物小、中、大剂量组及阳性药组给药 后1h、2h均有明显促进大鼠呼吸道分泌量的增加，与对照组比较有 显著性差异，分别P＜0.05、P＜0.01、P＜0.001。

小结上述结果表明，本发明的药物对大鼠呼吸道有明显促进分泌量 增加的作用。

试验3本发明的药物的平喘作用

3-1对组织胺+乙酰胆碱所致豚鼠喘息性平喘的作用

摘要通过支气管收缩作用的药物组织胺+乙酰胆碱以气雾法使豚鼠 吸入，引起豚鼠呼吸急促，喘息、甚至窒息，从而导致豚鼠抽搐、 跌倒。利用此模型，观察本发明的药物对豚鼠的平喘作用。结果， 本发明的药物小、中、大剂量组及阳性药组对氯化乙酰胆碱+磷酸组 织氨所致豚鼠喘息可明显延长喘息潜伏期及跌倒时间，与对照组比较 (P＜0.05、P＜0.01、P＜0.001)。表明，本发明的药物对组织胺诱发引 起豚鼠喘息有明显平喘作用。

目的观察本发明的药物对组织胺所致引起豚鼠喘息的平喘作用。

试验材料

药物

(1)受试药：制备实施例1制备的提取物干粉，简称本发明的药 物。

(2)中药对照桂龙咳喘宁胶囊，1g(生药)/粒(0.3g粉)，由山西桂 龙医药有限公司生产，批准文号：国药准字Z-11；产品批号：040112； 有效期至2005.12。

(3)西药对照氨茶碱，0.1g/片，北京紫竹药业有限公司产品，批 号：20031202。

(4)麻荆合剂，2.06g(生药)/g(膏)，由中国中医科学院西苑医 院基础研究室药学组提供，批号：030425。

动物纯种白色豚鼠，I级，雌雄各半，体重169.37±22.79g，由北京 科宇动物养殖中心提供，许可证编号：SCXK(京)2002-0005。

试剂

(1)氯化乙酰胆碱1g/瓶，北京化学试剂公司，批号：030211。

(2)磷酸组织胺5g/瓶，中国科学院上海生物研究所，生产编号： 1702。

仪器引喘装置：空气压缩机、玻璃气雾喷头，4L玻璃钟罩。

试验方法

取健康豚鼠，雌雄各半，预先筛选。将豚鼠逐只放入4L玻璃钟 罩内，以(400mmHg)的压力喷入2％氯化乙酰胆碱和0.1％磷酸组 织胺等量混合液，喷雾20秒钟。喷雾停止后，观察6分钟内豚鼠出 现喘息性抽搐的潜伏期(即从喷雾停止后出现喘息性抽搐的时间)， 喘息性抽搐潜伏期＞120秒者不选用。取筛选合格的豚鼠70只，随机 分为7组，每组10只，(1)对照组给蒸馏水(5ml/kg)；(2)氨茶碱 组(0.05g/kg)；(3)桂龙咳喘宁胶囊组(1.2g生药/kg)；(4)本发明 的药物小剂量组(77mg生药/kg)；(5)本发明的药物中剂量组 (154mg生药/kg)；(6)本发明的药物大剂量组(308mg生药/kg)； (7)麻荆合剂(5g生药/kg)。每日以5ml/kg体积灌胃给药一次，连 续3天，对照组给等量生理盐水，末次给药后30分钟，进行引喘 实验。将豚鼠逐只放入4L玻璃钟罩内，以(400mmHg)的压力喷入 2％氯化乙酰胆碱+0.1％磷酸组织胺等量混合液喷雾20秒钟，观察6 分钟内(360秒)豚鼠出现喘息性抽搐的潜伏期(亦称引喘潜伏期)， 即从喷雾停止后，出现喘息性抽搐的时间及跌到时间，超过6分钟 以360秒计算，实验结果进行组间比较，t检验。

试验结果见表5。

表5：对乙酰胆碱+磷酸组织胺所致豚鼠喘息作用的影响(n＝10，

注：与对照组比较：^*P＜0.05；^**P＜0.01；^***P＜0.001。

从上表结果可见，本发明的药物小、中、大剂量组及阳性药组 对氯化乙酰胆碱+磷酸组织氨所致豚鼠喘息可明显延长喘息潜伏期 及跌倒时间，与对照组比较P＜0.05、P＜0.01、P＜0.001。其作用强于麻 荆合剂组。

小结实验结果表明，本发明的药物对氯化乙酰胆碱+磷酸组织氨所 致引起的豚鼠喘息有明显平喘作用。

试验4本发明的药物的解痉作用

4-1对豚鼠过敏性支气管痉挛试验

摘要通过肌肉注射卵白蛋白及腹腔注射百日咳疫苗致敏14天后， 以卵白蛋白喷雾法使豚鼠吸入，形成豚鼠支气管痉挛，造成呼吸困 难、抽搐跌倒，从而导致豚鼠死亡。利用此模型，观察本发明的药 物对豚鼠过敏性支气管痉挛的解痉作用。结果表明，本发明的药物 小、中、大剂量组及阳性药组可延长过敏性支气管痉挛潜伏期、呼 吸困难及抽搐跌倒时间，减少动物死亡数，与对照组比较有显著性 差异(分别P＜0.05、P＜0.01、P＜0.001)，大剂量组及阳性药组动物死 亡数与对照组比较有显著性差异(分别P＜0.05、P＜0.001)。

目的观察本发明的药物对卵白蛋白引起豚鼠过敏性支气管痉挛的 改善作用。

试验材料

药物

(1)受试药：制备实施例1制备的提取物，实验用其浸膏粉，稀 释至所需浓度，下称本发明的药物。

(2)中药对照桂龙咳喘宁胶囊，1g(生药)/粒(0.3g粉)，由山西桂 龙医药有限公司生产，批准文号：国药准字Z-11；生产日期：2004.01.01； 产品批号：040112；有效期至2005.12。

(3)西药对照氨茶碱，0.1g/片，北京紫竹药业有限公司产品， 批号：20031202。

(4)麻荆合剂，2.06g(生药)/g(膏)，由中国中医科学院西苑医 院基础研究室药学组提供，批号：030425。

动物纯种白色豚鼠，I级，雌雄各半，体重202.99±12.98g，由北京 科宇动物养殖中心提供，许可证编号：SCXK(京)2002-0005。

试剂

(1)抗原：卵白蛋白50g/瓶，Sigma(分)，Cat；A5253，北京惠 泽奥科贸有限公司。

(2)佐剂：百日咳疫苗300亿/ml/2ml/支，中国药品生物制品检 定所，批号：04-1。

仪器引喘装置：空气压缩机、玻璃气雾喷头，4L玻璃钟罩。

试验方法

实验分两步进行，先将豚鼠致敏。取健康白色纯种豚鼠70只， 每只豚鼠后腿肌肉注射卵白蛋白4mg(4％卵白蛋白生理盐水0.1ml)， 同时腹腔注射百日咳疫苗2×1010菌体致敏，注射后14天用于实验。 致敏第10天时将动物随机分为7组，每组10只，(1)空白对照组， 给蒸馏水(5ml/kg)；(2)氨茶碱组(0.05g/kg)；(3)桂龙咳喘宁胶 囊组(1.2g生药/kg)；(4)本发明的药物小剂量组(77mg生药/kg)； (5)本发明的药物中剂量组(154mg生药/kg)；(6)本发明的药物 大剂量组(308mg生药/kg)；(7)麻荆合剂(5g生药/kg)。同时以 5ml/kg体积灌胃给药，每天一次，连续5天，对照组给等量生理盐 水，末次给药后30分钟，将豚鼠逐只置于4L密闭玻璃钟罩内，用 恒压(400mmHg)喷入5％卵白蛋白溶液半分钟，观察并记录6分钟 内(360秒)豚鼠出现喘息性抽搐的潜伏期、呼吸困难、抽搐跌倒及 死亡动物数。无呼吸困难及无抽搐跌倒者，以360秒计算。实验结果 进行组间比较，t检验。死亡动物数用卡方X²检验。

试验结果见表6。

表6：对卵白蛋白所致豚鼠支气管痉挛的影响(n＝10

注：与对照组比较：^*P＜0.05；^**P＜0.01；^***P＜0.001。

从上表结果可见，本发明的药物小、中、大剂量组及阳性药组 可延长过敏性支气管痉挛潜伏期、呼吸困难及抽搐跌倒时间，减少 动物死亡数，与对照组比较有显著性差异(分别P＜0.05、P＜0.01、 P＜0.001)，大剂量组及阳性药组动物死亡数与对照组比较有显著性差 异(分别P＜0.05、P＜0.001)。

小结实验结果表明，本发明的药物小、中、大剂量组有延长过敏 性支气管痉挛潜伏期、呼吸困难及抽搐跌倒时间的作用，减少动物 死亡数，对卵白蛋白引起过敏性支气管痉挛有明显改善作用。

试验5本发明的药物的抗炎作用

本实验观察了本发明的药物对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀炎症模 型，结果表明，本发明的药物小、中、大剂量组在致炎后0.5、1、2、4、 6小时不同时间点均有明显抑制炎症肿胀的作用，与对照组比较有显著性 差异(P＜0.05、P＜0.01、P＜0.001)。

5-1对二甲苯诱发小鼠耳肿的影响

摘要本实验观察了本发明的药物对二甲苯诱发小鼠耳部红肿炎症 模型，实验结果，本发明的药物小、中、大剂量组及阳性药组对二 甲苯所致小鼠耳部炎症有明显抑制作用，小鼠右耳肿胀明显减轻， 与对照组比较有显著性差异(分别P＜0.05、P＜0.01、P＜0.001)。实验 结果表明，本发明的药物各给药组对二甲苯诱发小鼠耳部红肿模型 有较好的抗炎作用。

目的观察本发明的药物对二甲苯诱发小鼠耳肿模型的抗炎作用。

试验材料

动物昆明种雄性小鼠70只，体重25.06±1.14克，II级，由中国医学科 学院实验动物研究所繁育场提供，许可证编号：SCXK(京)2000-0006。 药物

(1)受试药：制备实施例1制备的提取物干粉，下称本发明的药 物。

(2)中药对照桂龙咳喘宁胶囊，1g(生药)/粒(0.3g粉)，由山西桂 龙医药有限公司生产，批准文号：国药准字Z-11；产品批号：040112； 有效期至2005.12。

(3)西药对照阿司匹林肠溶片，每片0.3g，由烟台第二制药厂生 产，批号：011102。上述药物实验时用蒸馏水配至成所需浓度。

(4)麻荆合剂，2.06g(生药)/g(膏)，由中国中医科学院西苑医 院基础研究室药学组提供，批号：030425。

试验方法

取健康小鼠70只，随机分为7组，每组10只。(1)对照生 理盐水组(25ml/kg)；(2)阿斯匹林组(0.2g/kg)；(3)桂龙咳 喘宁胶囊组(2g生药/kg)；(4)本发明的药物小剂量组(125mg /kg)；(5)本发明的药物中剂量组(250mg/kg)；(6)本发明的药 物大剂量组(500mg/kg)；(7)麻荆合剂(8g生药/kg)。每天以 25ml/kg体积灌胃给药一次，连续给药3天，对照组给等量生理盐 水。于第3天给药后30分钟将二甲苯0.05ml滴于小鼠右耳，15 分钟后脱臼处死动物，用6mm打孔器沿左右耳廓相同部位打孔， 两侧耳片用电子秤分别称重，每鼠的右耳片重减去左耳片重即为肿胀 度(mg)，进行组间耳肿胀度(mg)比较，t检验。

试验结果见表7。

表7：本发明的药物对二甲苯所致小鼠耳肿的影响(n＝10

注：与对照组比较^*P＜0.05；^**P＜0.01；^***P＜0.001。

如表所示，对照组小鼠右耳明显肿胀，厚度增加，两耳片差异 明显。本发明的药物小、中、大剂量组及阳性药组对二甲苯所致小 鼠耳部炎症有明显抑制作用，小鼠右耳肿胀明显减轻，与对照组比 较有显著性差异(分别P＜0.05、P＜0.01、P＜0.001)。实验结果表明， 本发明的药物各给药组对二甲苯诱发小鼠耳部红肿模型有较好的抗 炎作用。

小结

实验结果表明，本发明的药物中、大剂量组对二甲苯诱发小鼠 耳部红肿炎症模型有明显抑制作用。

5-2对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀的影响

摘要本实验观察了本发明的药物对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀炎 症模型，结果表明，本发明的药物小、中、大剂量组在致炎后0.5、 1、2、4、6小时不同时间点均有明显抑制炎症肿胀的作用，与对照 组比较有显著性差异(P＜0.05、P＜0.01、P＜0.001)。

目的观察本发明的药物对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀模型的抗炎作 用。

试验材料

药物

(1)受试药：制备实施例1制备的提取物干粉，简称本发明的药 物。

(2)中药对照桂龙咳喘宁胶囊，1g(生药)/粒(0.3g粉)，由山西桂 龙医药有限公司生产，批准文号：国药准字Z-11；产品批号：040112； 有效期至2005.12。

(3)西药对照阿司匹林肠溶片，每片0.3g，由烟台第二制药厂生 产，批号：011102。上述药物实验时用蒸馏水配至所需浓度。

(4)麻荆合剂，2.06g(生药)/g(膏)，由中国中医科学院西苑医 院基础研究室药学组提供，批号：030425。

(5)角叉菜胶(CARRAGEENAN)，SIGMA，批号：117H0151， 实验时配制成所需浓度。

动物Wistar种雄性大白鼠70只，体重157.05±8.49克，一级，由中国医 学科学院实验动物研究所提供，许可证编号：SCXK(京)2000-0006。

试验方法

取健康大鼠70只，随机分为7组，(1)空白对照组，给蒸馏水 (10ml/kg)；(2)阿斯匹林组(150mg/kg)；(3)桂龙咳喘宁胶囊组 (1.5g生药/kg)；(4)本发明的药物小剂量组(87.5mg/kg)；(5)本 发明的药物中剂量组(175mg/kg)；(6)本发明的药物大剂量组 (350mg/kg)；(7)麻荆合剂(5.7g生药/kg)。用毛细管放大测量法测 定每只动物左后足容积(ml)作为药前值。每天以10ml/kg体积灌胃给 药，每日一次，连续给药3天，对照组给予等体积生理盐水，于末次 给药后30分钟将1％角叉菜在大鼠左足跖部皮下注射0.05ml/只致 炎，测定致炎后0.5、1、2、4、6hr大鼠左后足的容积(ml)，以致炎前 后差值进行组间比较，t检验。

试验结果见表8。

表8：对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀的影响(n＝10，

注：与对照组比较：^*P＜0.05；^**P＜0.01；^***P＜0.001。

如表所示，本发明的药物小、中、大剂量组及阳性药组在致炎 后0.5、1、2、4、6小时不同时间点均有明显抑制大鼠足跖部位肿 胀的作用，与对照组比较有显著性差异(P＜0.05、P＜0.01、P＜0.001)。 小结

结果表明，本发明的药物小、中、大剂量组对角叉菜胶所致大 鼠足跖肿胀炎症有明显的抑制作用。

试验6本发明的药物的解热作用

6-1本发明的药物对大肠杆菌内毒素所致家兔发热的影响

摘要实验采用大肠杆菌内毒素致热法，用250ng/ml/kg内毒素注入 家兔耳缘静脉引起发热。结果，3小时达高峰，6小时逐渐下降。阿 斯匹林组退热作用最明显，致热后1-6小时与对照组比较均有显著性 差异(P＜0.01～P＜0.001)；大剂量组致热后2-6小时退热作用明显，4 小时作用较强，与对照组比较差异显(P＜0.05～P＜0.01)；中、小剂量 组退热作用不明显。实验结果表明，本发明的药物大剂量组对家兔 大肠杆菌内毒素致热有明显解热作用。

目的经耳缘静脉注射大肠杆菌内毒素致热后，观察本发明的药物对 家兔的解热作用。

试验材料

药物

(1)本发明的药物：制备实施例1制备的提取物干粉，实验时配制 所需浓度。

(2)阿司匹林肠溶片，0.3g/片，由湖南制药厂生产，批号：980808。

(3)中药对照桂龙咳喘宁胶囊，1g(生药)/粒(0.3g粉)，由山西桂龙 医药有限公司生产，批准文号：国药准字Z-11；产品批号：040112；有 效期至2005.12。

(4)麻荆合剂，2.06g(生药)/g(膏)，由中国中医科学院西苑医院 基础研究室药学组提供，批号：030425。

致热源大肠杆菌内毒素，500微克/支，卫生部生物制品研究所，批 号：891-2。

动物大耳白兔56只，雌、雄各半，体重1.95±0.19kg，由北京市海 淀区学院路通利实验动物养殖场提供，合格证号：京动许字(2000) 第024号总069号。

试验方法

将大耳白兔分为7组，每组8只，雌雄各半。(1)模型对照组 给生理水(3ml/kg)，(2)阿司匹林组(100mg/kg)，(3)桂龙咳喘宁 胶囊(0.7g生药/kg)，(4)本发明的药物大剂量组(185mg/kg)，(5) 本发明的药物中剂量组(92.5mg/kg)，(6)本发明的药物小剂量组 (46.25mg/kg)；(7)麻荆合剂(3g生药/kg)。试验采用大肠杆菌内 毒素致热法，实验前一天将兔逐只测定肛门体温两次，取平均体温 作为药前体温。次日灌胃给药，每日一次，连续给药3天，模型对 照组给以灌服等体积生理盐水，阿斯匹林组在注射内毒素前灌胃给 药一次。各给药组于末次给药后30分钟，经耳缘静脉注射大肠杆菌 内毒素250ng/ml/kg，测定1、2、3、4、5、6hr体温，计算各时间点 体温的变化(Δ℃)，进行组间比较，t检验。

试验结果

表9：本发明的药物对兔体温的影响(n＝8，

注：与对照组比较^*P＜0.05，^**P＜0.01，^***P＜0.001。

自身比较：^#P＜0.05；^##P＜0.01；^###P＜0.001。

由上表可见，对照组致热后1小时体温开始上升，3小时达高峰， 6小时逐渐下降。阿斯匹林组退热作用最明显，致热后1-6小时与对 照组比较均有显著性差异(P＜0.01～P＜0.001)；大剂量组致热后2-6 小时退热作用明显，4小时作用较强，与对照组比较差异显著 (P＜0.05～P＜0.01)；中、小剂量组退热作用不明显。

小结

本发明的药物大剂量组对大肠杆菌内毒素引起家兔发热模型有 明显解热作用。

6-2本发明的药物对大鼠酵母致热的影响

摘要本实验采用大鼠酵母致热法，观察本发明的药物的解热作用。 实验结果，模型对照组致热后2小时体温下降，3小时开始上升，4～5 达高峰，6小时逐渐下降。阿斯匹林组退热作用明显，致热后2-9小 时与对照组比较均有显著性差异(P＜0.01～P＜0.001)；大剂量组致热 后3-7小时退热作用明显，与对照组比较有显著性差异(P＜0.05)； 中剂量组致热后3-5小时与对照组比较(P＜0.05)；小剂量组退热作 用不明显；桂龙咳喘宁胶囊组致热后3-5小时与对照组比较(P＜0.05)； 实验结果表明，阿斯匹林组、桂龙咳喘宁胶囊组及本发明的药物大、 中剂量组对酵母所致大鼠发热有明显解热作用，本发明的药物大剂 量组退热作用时间长于麻荆合剂组。结果表明，本发明的药物大、 中剂量组可明显降低酵母引起的大鼠体温升高，有较好的解热作用。 目的给大鼠皮下注射酵母混悬液诱发致热，观察本发明的药物对大 鼠的解热作用。

试验材料

药物

(1)本发明的药物：制备实施例1制备的提取物干粉，实验时配制 成所需浓度。

(2)阿司匹林肠溶片，0.3g/片，由湖南制药厂生产，批号：980808。

(3)中药对照桂龙咳喘宁胶囊，1g(生药)/粒(0.3g粉)，由山西桂龙 医药有限公司生产，批准文号：国药准字Z-11；产品批号：040112；有 效期至2005.12。

(4)麻荆合剂，2.06g(生药)/g(膏)，由中国中医科学院西苑医院 基础研究室药学组提供，批号：030425。

动物SD种大鼠70只，SPF级，体重189.5±5.57g，雌雄各半，由北 京维通利华实验动物技术有限公司提供，许可证编号 SCXK(京)2002-0003。

试验方法

动物随机分为7组，每组10只，雌雄各半。(1)模型对照组给 生理盐(10ml/kg)；(2)阿斯匹林组(0.15g/kg)；(3)桂龙咳喘宁胶 囊组(1.5g生药/kg)；(4)本发明的药物大剂量组(350mg/kg)；(5) 本发明的药物中剂量组(175mg/kg)；(6)本发明的药物小剂量组 (87.5mg/kg)；(7)麻荆合剂(5.7g生药/kg)。试验前一天测定大鼠 肛门体温两次，取平均体温作为药前体温。每日灌胃给药一次，连 续3天，模型对照组给灌服等体积生理盐水，各给药组于末次给药 后30分钟，在大鼠背部皮下注射15％酵母混悬液(10ml/kg)，阿斯 匹林组在注射酵母混悬液前灌胃给药一次。测定各给药组2、3、4、 5、6、7、8、9hr大鼠体温，在致热后4hr，各给药组再灌胃给药一 次(剂量同前)，计算各时间点体温的变化(Δ℃)，进行组间比较， t检验。

试验结果

表10：本发明的药物对大鼠体温的影响(n＝10，

注：与模型对照组比较：^*P＜0.05；^**P＜0.01；^***P＜0.001。

自身比较：^##P＜0.01；^###P＜0.001。

由表可见，模型对照组致热后2小时体温下降，3小时开始上升， 4～5达高峰，6小时逐渐下降。阿斯匹林组退热作用明显，致热后2-9 小时与对照组比较均有显著性差异(P＜0.01～P＜0.001)；大剂量组致 热后3-7小时退热作用明显，与对照组比较有显著性差异(P＜0.05)； 中剂量组致热后3-5小时与对照组比较(P＜0.05)；小剂量组退热作 用不明显；桂龙咳喘宁胶囊组致热后3-5小时与对照组比较(P＜0.05)； 实验结果表明，阿斯匹林组、桂龙咳喘宁胶囊组及本发明的药物大、 中剂量组对酵母所致大鼠发热有明显解热作用，本发明的药物大剂 量组退热作用时间长于麻荆合剂组。

小结本实验采用酵母大鼠发热模型，观察本发明的药物的解热作 用。结果表明，本发明的药物大、中剂量组可明显降低酵母引起的 大鼠体温升高，有较好的解热作用。

试验7本发明的中药提取物的增强免疫作用

7-1对小鼠吞噬功能的影响(非特异性免疫)

摘要用碳粒廓清法观察本发明的药物对小鼠单核细胞吞噬功能的影 响。结果显示，阳性对照药左旋咪唑及桂龙咳喘宁胶囊组碳粒廓清指数明 显高于对照组，与对照组比较P＜0.05、P＜0.01，本发明的药物大剂量、 中剂量组小鼠碳粒廓清指数高于对照组，有显著性差异P＜0.05、P＜0.01， 表明该药大、中剂量组及阳性对照药对小鼠非特异性免疫功能有明显增强 作用，其作用强于麻荆合剂组。

目的利用碳粒廓清法观察本发明的药物对小鼠单核细胞吞噬功能的 作用。

试验材料

药物

(1)受试药：制备实施例1制备的提取物干粉，实验用蒸馏水将浸膏 粉配至所需浓度。

(2)中药对照桂龙咳喘宁胶囊，1g(生药)/粒(0.3g粉)，由山西桂 龙医药有限公司生产，批准文号：国药准字Z-11；产品批号：040112； 有效期至2005.12，实验时配至所需浓度。

(3)西药对照盐酸左旋咪唑，25mg/片，北京制药厂产品，批号：9608228。 实验时配至所需浓度。

(4)麻荆合剂，2.06g(生药)/g(膏)，由中国中医科学院西苑医 院基础研究室药学组提供，批号：030425。

(5)印度墨水，北京西中化工厂，批号：820501。

动物健康ICR种小鼠70只，SPF级，雌雄各半，体重19.21±1.24克， 由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，许可证号 SCXK(京)2002-0003。

仪器紫外可见分光光度计，型号UV-120-02，日本岛津公司产品。

试验方法

取小鼠70只，随机分为7组，每组10只，(1)对照组给蒸馏水 (25ml/kg)；(2)左旋咪唑组(30mg/kg)；(3)桂龙咳喘宁胶囊组(2g 生药/kg)：(4)本发明的药物小剂量组(125mg/kg)；(5)本发明的药 物中剂量组(250mg/kg)；(6)本发明的药物大剂量组(500mg/kg)； (7)麻荆合剂(8g生药/kg)。每日以25ml/kg体积灌胃给药一次，连 续给7天，对照组给同体积生理盐水，末次给药后30分钟用10％印度墨 汁0.2ml/只给小鼠尾静脉注射。在注射后2分钟和10分钟分别眼球后静 脉丛取血0.02ml，加入到装有4ml蒸馏水的试管中溶解红细胞，然后在 波长为600nm的UV-120-02型分光光度计测定光密度(OD)值，按下 列公式计算在单位时间内血清中碳粒廓清的速度K。

OD2和OD10分别注射印度墨汁后2分钟和10分钟所取血样的OD值， t2和t10为取血时间。试验结果进行组间比较，t检验。

试验结果结果见表11。

表11：本发明的药物对小鼠吞噬功能的影响(n＝10

如表所示，阳性对照药左旋咪唑及桂龙咳喘宁胶囊组碳粒廓清指数明 显高于对照组，与对照组比较P＜0.05、P＜0.01，本发明的药物大剂量、 中剂量组小鼠碳粒廓清指数高于对照组，有显著性差异P＜0.05、P＜0.01， 表明该药大、中剂量组及阳性对照药对小鼠非特异性免疫功能有明显增强 作用，其作用强于麻荆合剂组。

小结

以碳粒廓清试验方法，观察本发明的药物对小鼠血清碳粒廓清速度 的影响。实验结果，该药对小鼠非特异性免疫功能有明显增强作用。

7-2对小鼠迟发性变态反应的影响(细胞免疫)

摘要实验用2，4-二硝基氟苯造成小鼠迟发性变态反应模型，观察本 发明的药物对小鼠迟发性变态反应(DTH)的作用。本发明的药物各剂 量组对2，4-二硝基氟苯造成小鼠迟发性变态反应模型小鼠耳肿胀不明 显，对脾脏、胸腺指数变化不明显，与对照组比较无明显差异。结果表明， 该药对小鼠迟发性变态反应无明显抑制或增强作用。

目的以2，4-二硝基氟苯为抗原给小鼠致敏，观察本发明的药物对接 受此抗原攻击所引起的迟发性变态反应(DTH)的作用，以探讨该药对 小鼠细胞免疫功能的影响。

试验材料

药物

(1)受试药：制备实施例1制备的提取物干粉，实验用蒸馏水将浸膏 粉配至所需浓度。

(2)中药对照桂龙咳喘宁胶囊，1g(生药)/粒(0.3g粉)，由山西桂 龙医药有限公司生产，批准文号：国药准字Z-11；产品批号：040112； 有效期至2005.12，实验时配至所需浓度。

(3)西药对照盐酸左旋咪唑：25mg/片，北京制药厂产品，批 号：9608228。实验时配至所需浓度。

(4)麻荆合剂，2.06g(生药)/g(膏)，由中国中医科学院西苑医 院基础研究室药学组提供，批号：030425。

动物健康ICR种小鼠70只，SPF级，雌雄各半，体重19.9±0.84g，由 北京维通利华实验动物技术有限公司提供，许可证号 SCXK(京)2002-0003。

试验方法

取小鼠70只，随机分为7组，每组10只，(1)对照组给蒸馏水 (25ml/kg)；(2)左旋咪唑组(30mg/kg)；(3)桂龙咳喘宁胶囊组(2g 生药kg)；(4)本发明的药物小剂量组(125mg/kg)；(5)本发明的药 物中剂量组(250mg/kg)；(6)本发明的药物大剂量组(500mg/kg)；(7) 麻荆合剂(8g生药/kg)。每日以25ml/kg体积灌胃给药一次，连续8天， 对照组给同体积生理盐水，于给药第3天除对照组外，各给药组小鼠用 1％DNFB丙酮橄榄油溶液50μl均匀涂抹于腹部脱毛处致敏1次，面积约 3×3(cm)2，于致敏后第5天各组动物用同上抗原10μl涂抹于小鼠右耳 两面进行攻击。攻击后24h，将小鼠颈椎脱臼处死，剪下左右耳壳，用打 孔器取下直径8mm的耳片，称重。左右耳片重量之差即为肿胀度(FPR)， 以表示迟发性变态反应(DTH)的程度，同时取胸腺、脾脏称重，计算脏器 mg/10g体重，结果进行组间比较，t检验。

试验结果结果见表12。

表12：对小鼠细胞免疫功能的影响(n＝10

注：与对照组比较^*P＜0.05；^**P＜0.01。

如表所示，本发明的药物各剂量组对用2，4-二硝基氟苯造成小鼠 迟发性变态反应模型小鼠耳肿胀不明显，对脾脏、胸腺指数变化不明显， 与对照组比较无明显差异。结果表明，该药对小鼠迟发性变态反应无明显 抑制或增强作用。

小结

以迟发性变态反应的方法，观察本发明的药物对小鼠迟发性变态反 应的作用，结果显示，该药对小鼠迟发性变态反应无明显抑制或增强作用。

7-3对小鼠血清凝集素的影响(体液免疫)

摘要用凝集素测定的方法，观察本发明的药物对小鼠体液免疫功能的 影响。结果，本发明的药物大剂量组均显著地提高小鼠血清中抗羊红细 胞抗体的水平与对照组比较P＜0.05、P＜0.01，且显示明显的量效关系。 提示，本发明的药物大剂量组有提高小鼠体液免疫功能的作用。

目的通过对小鼠血清凝集素的作用，观察本发明的药物对小鼠体液免 疫功能的影响。

试验材料

药物

(1)受试药：制备实施例1制备的提取物干粉，实验用蒸馏水将浸 膏粉配制所需浓度。

(2)中药对照桂龙咳喘宁胶囊，1g(生药)/粒(0.3g粉)，由山西桂 龙医药有限公司生产，批准文号：国药准字Z-11；产品批号：040112； 有效期至2005.12，实验时配至所需浓度。

(3)西药对照盐酸左旋咪唑片：25mg/片，北京制药厂产品，批号： 9608228。

(4)麻荆合剂，2.06g(生药)/g(膏)，由中国中医科学院西苑医 院基础研究室药学组提供，批号：030425。

动物ICR种小鼠，雌雄各半，SPF级，体重19.80±0.79g，由北京维通利 华实验动物技术有限公司提供，许可证号：SCXK(京)2002-0003。

试验方法

取小鼠84只，随机分为7组，每组12只，(1)对照组给蒸馏水 (25ml/kg)；(2)左旋咪唑组(30mg/kg)；(3)桂龙咳喘宁胶囊组(2g 生药/kg)；(4)本发明的药物小剂量组(125mg/kg)；(5)本发明的 药物中剂量组(250mg/kg)；(6)本发明的药物大剂量组(500mg/kg)； (7)麻荆合剂(8g生药/kg)。每日以25ml/kg体积灌胃给药一次，连 续给药7天，给药48小时后，小鼠腹腔注射5％羊红细胞(SRBC)0.25ml/ 只进行免疫，免疫后的第6天由眼球后静脉丛取血，离心，分离血清，以 微量凝集法测定血清中抗SRBC抗体滴度。

微量血凝试验方法：用生理盐水将血清对倍稀释，把不同浓度的血清 分别吸取25μl置于微量血凝板孔内，再加入0.5％SRBC 25μl，振荡混匀， 置于湿润的平盘内加盖，放入37℃恒温箱内孵育，3小时后观察凝集程度， 分5级(0～4)，按下列公式计算抗体积数，试验结果t检验。

抗体积数＝∑(S₁+2S₂+3S₃+......nS_n)

式中1、2、3......n代表对倍稀释的指数，S代表凝集程度的级别， 抗体积数越大，表示抗体效价越高，组间T检验。

试验结果结果见表13。

表13：本发明的药物对小鼠血清凝集素的作用(n＝12

注：与对照组比较。

如表所示，本发明的药物大剂量组均显著地提高了小鼠血清中抗羊 红细胞抗体的水平，与对照组比较(P＜0.05)，阳性对照药左旋咪唑及桂 龙咳喘宁胶囊组亦显著提高了小鼠对羊红细胞的抗体反应(P＜0.05)。提 示，本发明的药物大剂量组可提高小鼠体液免疫功能。

小结

本试验用凝集素测定的方法，观察本发明的药物对小鼠体液免疫反 应的影响，结果表明，本发明的药物中、大剂量组均能显著地提高小鼠对 羊红细胞的抗体反应(P＜0.05～P＜0.01)。表明本发明的药物中、大剂量 组有提高体液免疫功能的作用。

试验8本发明的药物的抗病毒作用

8-1对感染FM1病毒小鼠的保护作用

摘要：本发明的药物灌胃给药，观察该药对感染FM1病毒小鼠的保护作 用，结果表明：本发明的药物大、中、小剂量均能降低感染FM₁动物的 死亡率均(P＜0.01)，延长生存时间均(P＜0.001)，大剂量组病毒感染小鼠肺 指数及肺内病毒含量降低，与模型组比较差异显著(P＜0.05)。提示该药 能减轻感染小鼠肺部病变。

目的：本文用流感病毒鼠肺适应株FM1滴鼻感染小鼠，建立病毒性肺部 感染小鼠模型，以肺指数、死亡率和延长生存时间为指标，观察该药对病 毒性肺部感染小鼠的保护作用。

材料与方法

药物

1、受试药：制备实施例1制备的提取物干粉，小鼠给药剂量为500、 250、125mg/kg/日，用蒸馏水配成50、25、12.5mg/ml的药液备用。

2、对照用药：(1)桂龙咳喘宁胶囊，由山西桂龙医药有限公司生产。 批准文号：(89)卫药准字Z-11号，生产批号：030101。给药剂量为2g 生药/kg/日，用蒸馏水配成0.2g/ml药液备用。(2)西药对照药利巴韦林注 射液，100mg/ml，由北京市永康制药厂生产，批准文号：国药准字 H19993335，生产批号：03020137。给药剂量为70mg/kg/日，用蒸馏水配 成7mg/ml药液备用。

病毒流感病毒亚甲型鼠肺适应株(FM1)：由中国预防医学科学院病毒所 提供，本室夜氮保存。鸡胚传代2次增毒后血凝滴度为1∶640，对小鼠 LD₅₀为10^-4.44。

鸡胚：9日龄，由上庄鸡厂购进。

动物KM种小鼠，二级，体重12～14克，雌雄各半，由北京维通利华实 验动物技术有限公司购进，合格证号：SCXK(京)2002-0003。

实验方法：

1.小鼠肺指数及肺指数抑制率测定：健康小鼠84只，随机分7组，即正 常对照(给水)、病毒对照(给水)、桂龙咳喘宁胶囊(560mg/kg)、利巴韦林 (70mg/kg)及受试药大(500mg/kg)、中(250mg/kg)、小(125mg/kg)剂量组， 各组12只，雌雄各半。各组动物自感染前二天至感染后第五天，分别以 10ml/kg灌胃给药或给水共7天。除正常组外，各组小鼠均在乙醚轻度麻 醉下，分别以15LD₅₀的病毒50ul滴鼻感染，正常对照组同法滴鼻生理盐 水50ul。最后1次给药后24小时，小鼠称重，摘眼球放血致死，以无菌 操作取出全肺称重，计算肺指数及肺指数抑制率。小鼠肺经组织匀浆器匀 浆，用生理盐水配成10％的悬液，2000转/分，离心10分钟，取上清液 用生理盐水稀释10^-1～10^-7，接种9日龄鸡胚尿囊腔内，0.1ml/胚，每稀释 度接种5枚，33℃培养48小时，测定鸡胚尿囊液中血凝效价，按Reed 和Muench方法计算半数感染浓度(EID₅₀)。

2.病毒感染小鼠死亡保护和延长生命试验：把健康小鼠随机分7个组， 模型组30只，其余各组20只，既正常对照、病毒对照、桂龙咳喘宁胶囊、 利巴韦林及受试药大、中、小剂量组。给药方法同试验1，除正常对照组 外各组小鼠分别以10LD₅₀的病毒滴鼻感染后，逐日观察动物发病情况并 记录死亡数，共14天，计算死亡保护率和延长生命率。

结果

1.对感染小鼠肺指数及肺内病毒含量的影响

(1)对感染小鼠肺指数及肺内病毒含量的影响，结果见表14-1。

表14-1：对感染小鼠肺指数的作用

如表所示，病毒感染小鼠肺肿大，肺指数(1.31±0.25)显著地大于正常 组(0.91±0.07)(P＜0.001)。本发明的药物大剂量组肺指数明显降低，肺指 数(1.1±0.14)与摸型组比较差异显著(P＜0.05)，肺指数抑制率为16.03％。 利巴韦林组明显降低了肺指数(1.08±0.09)，与摸型组比较差异显著 (P＜0.01)，肺指数抑制率为17.56％。桂龙咳喘宁胶囊没有明显的作用。

(2)对感染小鼠肺内病毒含量的影响，结果见表14-2。

表14-2：肺内病毒含量测定(血凝)

如表所示，小鼠感染FM₁病毒后，模型组肺内病毒含量EID₅₀为10^-5.85， 而大剂量组EID₅₀为10^-4.17，较模型组大4.5倍，与西药对照利巴韦林组 相似。

2.病毒死亡保护和延长生命作用

表14-3：病毒感染小鼠死亡保护和延长生命作用

注：^**P＜0.01^***P＜0.001

如表所示，病毒感染各组小鼠均有死亡，病毒对照组死亡率为90％， 平均生存时间为7.53±2.52天.受试药大、中、小剂量组死亡率为35～45％， 与模型组比较死亡数显著降低(P＜0.01)，平均生存时间10.9～11.7天及 延长生命率44.75～55.37％与病毒对照组比较均有显著差异(P＜0.001)。西 药对照组死亡率为10％，平均生存时间13.5±1.57天及延长生命率79.28％ 与病毒对照组比较均有显著差异(P＜0.001)。桂龙咳喘宁胶囊不及本发明 的药物。

小结

把本发明的药物按不同浓度灌胃给感染流感病毒FM1的小鼠，观察 该药对感染小鼠的死亡保护作用和肺部病变的抑制作用。结果显示，该药 大、中、小剂量组均能降低感染动物的死亡数均(P＜0.01)，延长生存时 间均(P＜0.001)，大剂量组肺指数与模型组比较差异显著(P＜0.05)，肺指 数抑制率16.03％，肺内病毒含量比模型组降低，说明该药在小鼠体内能 抑制FM₁病毒复制，减轻肺部病变。

8-2本发明的药物抑制流感病毒作用的实验研究

摘要：本发明的药物采用不同给药方法，观察该药对流感病毒甲3、乙 型感染鸡胚的保护作用，结果表明该药对流感病毒有直接灭活作用。

目的：本文用流感病毒甲3、乙型感染鸡胚，建立病毒感染摸型，以鸡胚 尿囊液中病毒含量为指标观察该药对流感病毒的抑制作用。

材料与方法

药物

1.试验用药：中药提取干粉甘草苷、麻黄总碱、黄芩苷、牡荆油按2.5∶ 1∶2.5∶0.04的重量比混合制备。

实验用药制备：将牡荆油在二甲基亚砜中溶解之后加入各干粉溶解， 总量4.5ml，相当于257mg/ml，放4℃冰箱备用(下称本发明的药物)。

2.对照用药：桂龙咳喘宁胶囊，3g生药/g药粉，由山西桂龙医药有限公 司生产。批准文号：(89)卫药准字Z-11号，生产批号：030101。

实验用药制备，取桂龙咳喘宁胶囊3g药粉，加20ml蒸馏水溶解， 水浴煮沸20分钟，凉后2000转/分，离心10分钟，取上清液14ml，相 当于0.7g生药/ml，4℃保存，实验前用5.6％NaHCO₃调PH＝7.2。

病毒

1、流感甲3型：汉防95-359鸡胚尿囊液。

2、流感乙型：京防93-184鸡胚尿囊液。

由中国预防医学科学院病毒所提供，实验时用50～100EID₅₀/0.1ml。

3、鸡胚：9～10日龄鸡胚，由上庄鸡厂提供。

实验方法：

1.药物对鸡胚的毒性实验：将稀释好的药液0.1ml行鸡胚尿囊腔接 种，于33℃温箱培养72小时，每日观察鸡胚死活。

2.药与病毒等量中和法：将稀释好的药液与病毒在试管中等量中和； 放33℃温箱1小时，行鸡胚尿囊腔接种0.2ml。于33℃温箱培养。

3.先接种病毒后给药法：0.1ml病毒接种于鸡胚尿囊腔中，置33℃温 箱1小时，再采用同途径注射稀释好的药液0.1ml，于33℃温箱培养。

以上实验同时做病毒对照，每日观察鸡胚，遇死则去除。甲3型培养 48小时，乙型培养72小时，放4℃冰箱过夜后，取尿囊液测血凝效价 (HA)，比较实验组与病毒对照组的差异。按Reed及muench法计算半数 毒性浓度和半数保护浓度(中和浓度)。公式如下：

结果

1.药物对鸡胚的毒性实验

结果见表15-1。

表15-1：药物对鸡胚的毒性实验结果

如表15-1所示，本发明的药物的最大无毒浓度为32.125mg/ml，桂龙 咳喘宁胶囊最大无毒浓度为700mg/ml。

2.药物与流感病毒甲3型等量中和作用

结果见表15-2。

表15-2：药物与流感病毒甲3型等量中和作用结果(HA)

如表15-2所示，本发明的药物对甲3型病毒的平均半数中和浓度为 0.011mg/ml，中和指数为6617.69。桂龙咳喘宁胶囊平均半数中和浓度为 9.47mg/ml，中和指数为99.81。可以完全中和流感甲3型病毒。

3.药物与流感病毒乙型等量中和作用

结果见表15-3。

表15-3：药物与流感病毒乙型等量中和作用结果

如表15-3所示，本发明的药物对流感乙型病毒平均半数中和浓度为 0.018mg/ml，中和指数为4022.2。桂龙咳喘宁胶囊平均半数中和浓度为 236.46mg/ml，中和指数为3.99。可以完全中和流感乙型病毒。

4.药物对流感病毒感染鸡胚的保护作用

结果见表15-4。

表15-4：药物对流感病毒感染鸡胚的保护作用结果

表15-4如表所示，本发明的药物浓度为32.125mg/ml时对流感病毒 感染鸡胚没有保护作用。

小结

用药物直接灭活病毒法和药物抗病毒活性测定法，观察该药对流感病 毒甲3型、乙型的作用。结果显示，该药对甲3型的平均半数中和浓度 0.011mg/ml，对乙型的平均半数中和浓度0.018mg/ml，对流感病毒感染鸡胚 没有保护作用。结果提示，该药对流感病毒有中和作用，没有治疗作用。

试验9本发明的药物的抗细菌作用

9-1本发明的药物对常见致病菌的体外抑制作用

摘要用试管液体稀释法测定本发明的药物对8种53株常见致病菌的抑 制作用。结果显示，该药对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、链球菌、大 肠杆菌、卡他球菌、肺炎杆菌及变形杆菌的抑制率均为100％，对绿脓杆 菌的抑制率为75％，总抑制率为98.1％，MIC₅₀为2.59mg/ml。

目的用体外试管稀释法测定该药对常见致病菌的抑菌作用。

材料和方法

菌种

本试验用了临床分离的致病菌株，包括金黄色葡萄球菌9株、表皮葡 萄球菌10株、链球菌8株、卡他球菌3株、肺炎杆菌6株、绿脓杆菌3 株、变形杆菌5株、致病性大肠杆菌6株及金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和 大肠杆菌质控株各1株，共53株，均由中国医学科学院医药生物技术研 究所提供。

药物

实验用药(下面简称本发明的药物)由甘草苷，麻黄总碱，黄芩苷， 牡荆油，按2.5∶1∶2.5∶0.04的重量比例混合组成。对照药双黄连口服 液，1.5g生药/ml，河南竹林众生制药股份有限公司，批号：03051611。 用蒸馏水配成1g生药/ml浓度的药液，100℃30分钟消毒后备用。

培养基

营养肉汤干粉，北京弗仑德科技发展中心进口分装(美国ATCC)，批 号：20010210。M-H液体培养基干粉，中国卫生部药品生物制品检定所 产品，批号：000104，用于抑菌试验。

以上两种干粉按照使用说明书配制成培养基后放冰箱备用。

5％马血清肉汤：上述两种培养基中加入灭活的无菌马血清至5％浓 度甲、乙型链球菌的培养和抑菌试验。

马血清：北京军医兽医防治中心产品，批号：950520。

4.助溶剂：二甲基亚砜，北京益利化学试剂有限公司产品，批号： 20041110。

方法

将上述药物配制成终浓度为32mg/ml，依次稀释为16、8、4、2、1 及0.5mg/ml 7个浓度的药液；对照药双黄连口服液稀释为100、50、25、 12.5、6.25、3.125、1.56mg/ml的7个浓度，将各浓度的药液分别依次加 入已备好的无菌小试管内，1ml/管，各54排，最后1排为不加细菌的药 物对照。另外设2％和4％浓度的二甲基亚砜为基质对照，各分装54个管。

把1∶1000稀释的新鲜的细菌培养物加入到上述各排稀释好的含药 试管中0.1ml/管，另设不加药的各菌株对照管。甲、乙链球菌放5％CO₂、 37℃恒温箱内培养20小时，其它各菌置37℃培养箱内培养20小时后观 察结果。无细菌生长的最小稀释度的药物浓度即为最小抑菌浓度(MIC)。 在本试验中将IC＞I00mg/ml定为无抑菌作用，计算总抑制率和MIC₅₀。

结果

试验用各菌株在相应的培养基中生长良好，2％和4％浓度的二甲基亚 砜对照管对各菌株的生长没有影响，菌株生长良好。含药的培养基均无细 菌生长。试验结果见表16-1。

表16-1：本发明的药物对细菌的抑制作用结果

如表所示，本发明的药物除对绿脓杆菌抑制率为75％，其他菌种抑 制率均为100％，本发明的药物的总抑制率为98.1％，MIC₅₀为2.59mg/ml。

表16-2：双黄连口服液对细菌的抑制作用结果

如表所示，双黄连口服液对金黄色葡萄球菌(100％)、表皮葡萄球菌 (60％)、链球菌(50％)、卡他球菌(100％)、肺炎杆菌(16.7％)、大肠杆菌 (71.4％)、变形杆菌(60％)有抑制作用，而对绿脓杆菌没有抑制作用， 总抑制率为60.4％，MIC₅₀为20.61mg/ml。结果显示，本发明的药物体 外抑菌作用优于对照药双黄连口服液。

小结

本文用液体试管稀释法，测定了本发明的药物对8种53株菌株的抑 制作用，结果显示，总抑制率为98.1％，LD₅₀浓度为2.59mg生药/ml。该 药体外抑菌作用优于对照药双黄连口服液。

9-2本发明的药物对金黄色葡萄球菌感染小鼠的保护作用

摘要用金黄色葡萄球菌以95％的致死剂量给小鼠腹腔注射感染后，观察 该药对被感染小鼠的保护作用。结果显示，该药大剂量对金黄色葡萄球菌 感染小鼠有明显的保护作用(P＜0.05)。

目的将金黄色葡萄球菌给小鼠腹腔注射感染后观察该药对感染动物的保 护作用。

材料和方法

药品受试药为制备实施例1中制备的中药提取干粉(下称本发明的药物)。 小鼠给药剂量为500、250、125mg/kg/日、中药对照桂龙咳喘宁胶囊，由山 西桂龙医药有限公司生产。批准文号：(89)卫药准字Z-11号，生产批号： 030101，小鼠给药剂量为2g(生药)/kg/日。西药对照头孢拉定胶囊，批 准文号：国药准字H11221429，生产批号：041003，成人剂量1.5g/70kg/ 日，小鼠剂量0.2g/kg。

菌种从临床病人分离培养的致病性金黄色葡萄球菌(1044)，由北京医科 大学第一临床医院检验科提供。将接种于M-H培养基中培养18小时的新 鲜培养物在临用前用5％胃膜素稀释。对小鼠的LD₉₅为10^-1.4。

培养基肉汤培养基干粉，北京弗仑德科技发展中心产品，批号：20010210， 按说明书配制后放冰箱备用。

胃膜素胶囊：为提高菌株的毒力而用，重庆荣高生化制药有限公司产 品，批号：04201。用生理盐水配成5％浓度的胃膜素，经10磅20分钟 消毒备用。

动物健康ICR小鼠90只，雌雄各半，体重18～22g，由北京维通利华实 验动物中心提供。许可证编号：SCXK11-00-0008。

方法将试验动物随机分6组，即细菌感染对照组(简称感染组)20只、 西药对照头孢拉定胶囊、中药对照桂龙咳喘宁胶囊、本发明的药物大、 中及小剂量组各14只，雌雄各半。感染前7天开始以10ml/kg的体积灌 胃给药，1日1次，连续7日。于末次给药后1小时分别以0.6ml/只的剂 量腹腔注射金黄色葡萄球菌菌液感染，逐日观察动物死亡，经x2检验比 较给药组与感染组之间的差异，并计算死亡率。

结果

结果见表16-3。

表16-3：本发明的药物对金黄色葡萄球菌感染动物的保护作用

从表16-3结果可见，动物因感染而死亡的时间均在72小时内，72 小时内未死亡的动物继续观察1周未再出现死亡。感染对照组在72小时 内95％动物死亡。阳性对照药头孢拉定胶囊显著降低感染动物的死亡率 (7.1％、P＜0.01)。本发明的药物大剂量组显著降低感染动物的死亡率 (64.3％、P＜0.05)。中药对照桂龙咳喘宁胶囊感染动物的死亡率与感染组 比较无明显差异。

小结

本实验用致病性金黄色葡萄球菌，以95％致死剂量腹腔注射感染动 物，观察本发明的药物对被感染小鼠的保护作用。结果显示，该药大剂 量对金黄色葡萄球菌感染的动物有明显的保护作用。

9-3本发明的药物对绿脓杆菌感染小鼠的保护作用

摘要用绿脓杆菌以95％的致死剂量给小鼠腹腔注射感染后，观察该药对 被感染小鼠的保护作用。结果显示，该药对绿脓杆菌感染小鼠没有明显的 保护作用。

目的将金绿脓杆菌给小鼠腹腔注射感染后观察该药对感染动物的保护作 用。

材料

药品受试药、中药对照桂龙咳喘宁胶囊、西药对照组头孢拉定胶囊，的 制剂、来源、剂量、批号及药物的配制方法同前试验。

菌种从临床病人分离培养的致病性绿脓杆菌(J27)，由北京医科大学第 一临床医院检验科提供。将接种于M-H培养基中培养18小时的新鲜培养 物在临用前用5％胃膜素稀释。对小鼠的LD₉₅为10^-4.0。

培养基肉汤培养基干粉，北京弗仑德科技发展中心产品，批号：20010210， 按说明书配制后放冰箱备用。

胃膜素胶囊：为提高菌株的毒力而用，重庆荣高生化制药有限公司产品， 批号：04201。用生理盐水配成5％浓度的胃膜素，经10磅20分钟消毒 备用。

动物健康ICR小鼠94只，雌雄各半，体重18～22g，由北京维通利华实 验动物中心提供。许可证编号：SCXK11-00-0008。

方法将试验动物随机分6组，即细菌感染对照组(简称感染组)24只、 西药对照头孢拉定胶囊组、中药对照桂龙咳喘宁胶囊组、本发明的药物 大、中及小剂量组各14只，雌雄各半。细菌感染前7天开始以10ml/kg 的体积灌胃给药，1日1次，连续7日。于末次给药后1小时分别以0.6ml/ 只的剂量腹腔注射绿脓杆菌菌液感染，逐日观察动物死亡，经x²检验比 较给药组与感染组之间的差异，并计算死亡率。

结果

结果见16-4。

表16-4：本发明的药物对绿脓杆菌感染动物的保护作用

由表16-4结果可见，动物因感染而死亡的时间均在48小时内，48 小时内未死亡的动物继续观察1周未再出现死亡。感染对照组在48小时 内91.7％动物死亡。阳性对照药头孢拉定胶囊显著降低感染动物的死亡 率(28.6％、P＜0.01)。本发明的药物大剂量降低了感染动物的死亡率 (78.6％)，但与感染对照组比较无显著差异(P＞0.05)。中药对照桂龙咳喘 宁胶囊组感染动物的死亡率与感染组比较无明显差异。

小结

本实验用致病性绿脓杆菌，以95％致死剂量腹腔注射感染动物，观 察本发明的药物对被感染小鼠的保护作用。结果显示，该药对绿脓杆菌 感染的动物没有明显的保护作用。