用于治疗与淀粉状蛋白或淀粉状蛋白样蛋白有关的疾病的新型化合物

摘要

本发明涉及新型化合物，所述化合物可以用于治疗与淀粉状蛋白有关的一组病症和异常，例如阿尔茨海默病，也可以用于治疗与淀粉状蛋白有关的疾病或病症。本发明化合物也可以用于治疗与视觉系统组织中病理学异常/改变有关的眼部疾病。本发明还涉及含有这些化合物的药物组合物以及这些化合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗或预防与淀粉状蛋白或淀粉状蛋白样蛋白有关的疾病或病症。本发明也公开了治疗或预防与淀粉状蛋白或淀粉状蛋白样蛋白有关的疾病或病症的方法。

说明书

发明领域

本发明涉及新型化合物，所述化合物可以用于治疗与淀粉状蛋白有关 的一组病症和异常，例如阿尔茨海默病，也可以用于治疗与淀粉状蛋白样 蛋白有关的疾病或病症。本发明还涉及含有这些化合物的药物组合物以及 这些化合物在制备用于治疗与淀粉状蛋白或淀粉状蛋白样蛋白有关的疾病 或病症的药物中的用途。本发明也公开了治疗与淀粉状蛋白或淀粉状蛋白 样蛋白有关的疾病或病症的方法。

本发明化合物也可以用于治疗与视觉系统组织中病理学异常/改变有 关的眼部疾病，特别是与视觉系统组织中β-淀粉状蛋白相关的病理学异常 /改变(例如神经元退化)有关的疾病。所述病理学异常可以产生在例如不同 的眼部组织中，例如：视觉皮层，导致皮层视觉不足；前房和视神经，导 致青光眼；晶状体，导致由于β-淀粉状蛋白沉积而产生的白内障；玻璃 体，导致眼部淀粉样变；视网膜，导致原发性视网膜变性和黄斑变性，例 如年龄相关黄斑变性；视神经，导致视神经玻璃疣、视神经病变和视神经 炎；角膜，导致网格状营养不良。

发明背景

多种老年性疾病是基于或与淀粉状蛋白或淀粉状蛋白样蛋白相关，它 们的特征部分在于淀粉状蛋白或淀粉状蛋白样物质的细胞外沉积的形成， 导致发病以及疾病进展。这些疾病包括但不限于：神经病症，例如阿尔茨 海默病(AD)，特征为认知记忆能力丧失的疾病或病症，例如轻度认知功能 损害(MCI)、路易体痴呆、唐氏综合征、遗传性脑出血伴淀粉样变(荷兰型)； 关岛帕金森痴呆综合征。其它基于淀粉状蛋白样蛋白或者与之有关的疾病 为进行性核上麻痹、多发性硬化症、克-雅氏病、帕金森病、HIV相关性痴 呆、ALS(肌萎缩侧索硬化)、包涵体肌炎(IBM)、成人发病型糖尿病、老年 性心脏淀粉样变、内分泌肿瘤和其它疾病，包括淀粉状蛋白相关的不同眼 组织的眼病，例如视觉皮层、包括皮层视觉不足；前房和视神经，包括青 光眼；晶状体，包括由于β-淀粉状蛋白沉积而导致的白内障；玻璃体，包 括眼部淀粉样变；视网膜，包括原发性视网膜变性和黄斑变性，特别是年 龄相关黄斑变性；视神经，包括视神经玻璃疣、视神经病变和视神经炎； 角膜，包括网格状营养不良。

尽管这些疾病的发病机理不同，但是它们的特征性沉积物通常含有多 种相同的组成。在很大程度上，这可能是由于促炎通路的局部活化从而导 致活化的补体成分、急性相反应物、免疫调节剂和其它炎性介质的同时沉 积。

阿尔茨海默病(AD)为神经性疾病，认为主要是由于脑中淀粉状蛋白斑 块—蛋白异常沉淀物的积聚而引起的。在受累个体的脑中发现的淀粉状蛋 白的最常见类型主要由Aβ原纤维构成。科学证据显示，斑块中β-淀粉状 蛋白产生和集聚的增加导致神经细胞死亡，这有助于AD的生长和发展。 在关键性脑区域中神经细胞的减少依次导致神经递质的减少和记忆损害。 主要负责斑块形成的蛋白包括淀粉状蛋白前体蛋白(APP)以及两种早老蛋 白(presenilin)(早老蛋白I和早老蛋白II)。酶β和γ分泌酶对淀粉状蛋白前 体蛋白(APP)—其在大多数细胞中结构性表达和异化—的连续裂解导致 39-43个氨基酸的Aβ肽的释放。APPs的降解有可能增加其在斑块中集聚 的倾向。特别是Aβ(1-42)片段，由于在其C-末端上具有两个非常疏水的氨 基酸残基，所以它们具有较高的构建集聚物的倾向。因此，Aβ(1-42)片段 被认为主要参与并造成了AD中神经炎斑块形成的启动，因而具有较高的 病理学潜能。因此，需要能够靶向和扩散淀粉状蛋白斑块形成的特异分子。

AD的症状缓慢出现，最初的症状只是轻度健忘。在该阶段，个体可 能忘记近期的事件、活动、熟人的名字或事情，可能无法解决简单的数学 问题。随着疾病的发展，症状很容易被注意到，并且变得足够严重，使得 AD患者或其家庭成员需要寻求医学帮助。AD的中期阶段包括忘记如何完 成简单任务(例如梳洗)并出现说话、理解、阅读或书写的问题。后期阶段 的AD患者可能变得更焦虑或具有进攻性，可能离家出走并最终需要完全 护理。

目前，唯一确定的诊断AD的方法是在个体死亡后尸检鉴别脑组织中 的斑块和缠结。因此，当患者仍然存活时，医生只能诊断为“可能为”或 “大概为”AD。采用目前的方法，医生能在至多90％的时间内采用诊断 “可能为”AD的各种工具正确诊断AD。医生询问个体的一般健康情况、 既往医学问题和个体执行日常活动所遇到的任何困难的历史情况。记忆、 问题解决能力、注意力、计算和语言能力的行为测试提供了认知退化的信 息，医学检验如血液、尿液或脊髓液检测和脑扫描可以提供某些其它信息。

AD的处置包括医学和非医学治疗。旨在改变疾病基本过程的治疗(延 缓或逆转疾病进展)到目前为止基本上是不成功的。能够恢复神经细胞的化 学信使(神经递质)中的不足(缺陷)或机能障碍的药物已经显示能够改善症 状，所述药物特别是胆碱酯酶抑制剂(ChEI)，例如他克林和雷司替明。ChEI 阻止神经递质的酶降解，从而增加能够在脑中传递神经信号的化学信使的 量。

对于患有早期和中期阶段疾病的某些人而言，药物他克林 (，Morris Plains，NJ)、多奈哌齐(，Tokyo，JP)、 雷司替明(，East Hanover，NJ)或加兰他敏(，New Brunswick，NJ)可以在有限时间内有助于预防某些症状变得更为严重。另 一种药物美金刚胺(，New York，NY)已经被批准用于治疗中 度至重度AD。也有药物用于治疗AD的精神症状。同样，某些药物可能 有助于控制AD的行为症状，例如失眠、激动、神志恍惚、焦虑和抑郁。 治疗这些症状通常使得患者更舒适，并使得护理者对其更易护理。不幸的 是，尽管有意义的治疗进展显示该类药物始终较安慰剂好，但疾病持续进 展，并且对精神机能的平均作用只是普通的。在AD药物治疗中使用的多 种药物例如ChEI也具有副作用，包括胃肠道机能障碍、肝毒性和体重减 轻。

基于淀粉状蛋白样蛋白集聚和沉积或与其有关的其它疾病为轻度认知 功能损害、路易体痴呆(LBD)、肌萎缩侧索硬化症(ALS)、包涵体肌炎(IBM) 和黄斑变性，特别是年龄相关黄斑变性(AMD)。

轻度认知功能损害(MCI)为最常定义为轻微但可度量的记忆疾病的通 用术语。MCI患者所经历的记忆问题大于由于年龄老化而通常出现的问 题，但是不会出现其它痴呆症状，例如判断和推理受损。

路易体痴呆(LBD)为在65岁以上老人中可能发生的神经退行性疾病， 它通常会导致认知(思想)受损症状和异常的行为变化。症状可包括认知损 害、神经信号损害、睡眠障碍和自主神经衰竭。认知损害是大多数病例中 呈现的LBD特征。患者具有进展性恶化的精神混乱的周期性发作的特点。 认知能力的波动通常与注意力和警觉性的变化程度有关。认知损害和思想 的波动可以在分钟、小时或天内变化。

肌萎缩侧索硬化症(ALS)的特征在于上和下运动神经元的退化。在某 些ALS患者中，可能出现痴呆或失语(ALS-D)。所述痴呆为最常见的额颞 痴呆(FTD)，许多此类病例在额叶和颞叶的齿状脑回和表层的神经元中含 有遍在蛋白阳性、τ-阴性的包涵物。

包涵体肌炎(IBM)为通常在超过50岁的人中发现的严重疾病，其中肌 肉纤维发展为炎症并开始萎缩，但是其中脑没有受到伤害，患者能够保持 其完整的智力。在患有这种老年人最常见的渐进性肌肉疾病的患者的肌肉 细胞中，发现与淀粉状-β蛋白产生相关的两种酶有所增加，其中淀粉状蛋 白-β也会增加。

黄斑变性为导致黄斑恶化的常见眼病，所述斑为视网膜的中央区域(位 于眼睛后部的纸一样薄的组织，其中感光细胞将视觉信号传递至脑)。锐利、 清晰、“直行”的视觉通过斑处理。对斑的损害导致产生盲点和模糊或扭曲 的视觉。年龄相关黄斑变性(AMD)在美国是视觉损害的主要原因，对于年 龄超过65岁的人而言，它是白种人中法定失明(legal blindness)的主要原 因。约180万年龄40岁或以上的美国人患有晚期AMD，还有730万患有 中期AMD的人处于失明的显著风险中。据政府估计，到2020年将会有 290万人患有晚期AMD。AMD的受害人通常惊奇并受挫地发现所述失明 情况的原因和对其治疗几乎是未知的。

有两种形式的黄斑变性：干性黄斑变性和湿性黄斑变性。其中斑细胞 缓慢开始分解的干性形式在85％的黄斑变性病例中被确诊。两只眼睛通常 都会受到干性AMD的影响，尽管一只眼睛可能失去视力而另一只眼睛保 持不受影响。玻璃疣(Drusen)为视网膜下的黄色沉积物，为干性AMD的 常见早期信号。当玻璃疣的数量和体积增加时，发展为晚期干性AMD或 湿性AMD的风险增加。干性AMD可能发展并引起视力丧失而不会转变 为所述病的湿性形式；然而，早期干性AMD也可能突然转变为湿性形式。

湿性形式尽管只占病例的15％，但却导致90％的失明，被认为是晚期 AMD(无湿性AMD的早期或中期阶段)。湿性AMD总是以所述病的干性 形式为先导。当干性形式加重时，某些人开始在斑后出现异常血管生长。 这些血管非常脆弱，会渗出液体和血液(因此称为“湿性”黄斑变性)，导 致斑的快速损害。

AMD的干性形式在最初时通常引起轻微的视力模糊。然后视觉中心 特别变得模糊，随所述病发展，所述区域变大。当只有一只眼睛受到影响 时可能注意不到症状。在湿性AMD中，直线看起来像曲线，中央视觉损 失可能很快出现。

黄斑变性的诊断通常包括眼睛扩张测试、视敏度测试和眼后部检视， 采用称为眼底镜(fundoscopy)的方法有助于诊断AMD，如果怀疑为湿性 AMD，也可以进行荧光血管造影术。如果干性AMD达到晚期阶段，现在 没有治疗方法能预防视力损害。然而，特别高剂量配方的抗氧剂和锌能够 延缓或防止中期AMD发展为晚期阶段。(哌加他尼钠 (pegaptanib sodium)注射液)、激光凝固和光动力疗法能够控制异常的血管 生长和斑中出血，这对某些患有湿性AMD的人有帮助；然而，已经受损 的视力无法通过这些技术恢复。如果视力已经受损，存在低视力辅助手段 帮助改善生活质量。

年龄相关黄斑变性(AMD)的最初信号之一为视网膜色素上皮组织 (RPE)的基膜和Bruch膜(BM)之间的已知为玻璃疣的细胞外沉积物的集 聚。Anderson等最近开展的研究证实，玻璃疣含有β-淀粉状蛋白 (Experimental Eye Research 78(2004)243-256)。

朊病毒导致神经退行性疾病，例如羊痒病、牛海绵状脑病和人类克- 雅氏病。病毒颗粒的唯一已知成分为蛋白的羊痒病同种型，PrPSc。尽管 朊病毒增加，然而没有证据显示它们含有核酸。PrPSc通过转译后过程衍 生自非感染性细胞蛋白PrPC，在所述过程中PrPC会经历较大的构象改 变。

羊痒病蛋白PrPSc在神经变性中具有关键作用，在疾病的发展过程中 经过如下三个阶段的转变：PrPC(蛋白的正常细胞同种型)-PrPSc：感染型 (蛋白的羊痒病同种型)-蛋白PrP27-30。

此类事件级联在下列疾病过程中发生：克-雅氏病(CJD)、Kuru、格斯 特曼-施特劳斯纳综合征(Gerstmann-Straussler-Scheinker Syndrome)(GSS)、人类致死性家族性失眠症、绵羊和山羊的羊痒病、水貂 脑病和牛海绵状脑病。

细胞无毒蛋白(PrPC)为分子量为33000-35000的唾液酸糖蛋白，它主 要在神经元中表达。在上述疾病中，PrPC转化为改变型(PrPSc)，它不同 于其正常同源物，它对蛋白酶的消化具有相对抗性。PrPSc在受影响的动 物和个体的中枢神经系统中聚集，且其蛋白酶抗性核在细胞外积聚。

淀粉样变并非单一疾病实体，而是一组形形色色的进行性疾病过程， 特征在于蜡样、淀粉状蛋白(称为淀粉状蛋白)在细胞外组织中的沉积，它 在一或多个器官或机体系统中积聚。当淀粉状蛋白沉积物积聚时，它们开 始干扰器官或机体系统的正常机能。存在至少15种不同类型的淀粉样变。 主要形式为没有已知前体的原发性淀粉样变、继发于其他病症的继发性淀 粉样变和遗传性淀粉样变。

继发性淀粉样变发生于患有慢性感染或炎性疾病的人群中，例如结核、 称为家族性地中海热的细菌感染、骨感染(骨髓炎)、类风湿性关节炎、小 肠炎症(肉芽肿性回肠炎)、霍奇金病和麻风。

青光眼为一组视神经疾病，包括视网膜神经节细胞(RGC)损失，其特 征模式为视神经病变。青光眼通常(但不总是)伴有眼压提高，这是由于液 体或其引流阻塞而导致的。

尽管眼内压提高是发展为青光眼的重要风险因素，但是导致青光眼的 决定性的眼压阈值没有被定义。

损害也可能由于重要的视神经纤维的血液供应较差、神经结构的脆弱 和/或神经纤维自身健康问题而引起。

未治疗的青光眼造成视神经的永久损害并随后造成视野损失，这可能 发展为失明。

RGC为将视觉信号自眼睛传递至脑的神经细胞。胱天蛋白酶-3和胱 天蛋白酶-8是细胞凋亡过程中的两种主要的酶，它们在导致RGC凋亡的 过程中被激活。胱天蛋白酶-3裂解淀粉状蛋白前体蛋白(APP)以产生神经 毒片段，包括β-淀粉状蛋白。没有APP的保护作用，淀粉状蛋白β在视 网膜神经节细胞层中的积聚导致RGC的死亡和视觉的不可逆损失。

不同种类的青光眼可以分为开角型青光眼(所述疾病为慢性的)或闭角 型青光眼(如果急性青光眼突然发作)。青光眼通常影响两只眼睛，但是疾 病在一只眼睛中较另一只眼睛中进展可能更迅速。

慢性开角型青光眼(COAG)也称为原发性开角型青光眼(POAG)，是最 常见类型的青光眼。COAG是由小梁网络中微小阻塞而导致，它减少了房 水流出向输淋氏(Schlemm)管的引流，提高了眼内压(IOP)。POAG通常影 响两只眼睛，它与年龄以及阳性家族史密切相关。其发生率在老年人群中 增加，因为眼部引流机制随着年龄增加而可能逐渐阻塞。受慢性开角型青 光眼影响的个体中眼内压增加没有伴发任何症状，直到中枢视觉区域受到 损害。

急性角闭锁青光眼(AACG)或闭角型青光眼是相对少见类型的青光 眼，特征在于眼内压突然增加至35-80mmHg，导致严重疼痛和不可逆的 视力损害。压力的突然增加是由于过滤角的闭塞和引流管的阻塞而引起。 窄角的个体角突然闭塞的风险增加。AACG通常在一只眼睛中产生，但是 风险存在于两只眼中。年龄、白内障和假性剥脱也是风险因素，因为它们 与晶状体的增大以及角的挤塞或狭窄有关。青光眼的突然发作与严重的眼 痛和头痛、眼部发炎、恶心、呕吐以及视力模糊有关。

混合或合并机制青光眼为开角型和闭角型青光眼的混合或合并。它影 响急性ACG患者，他们在激光虹膜切开术后角开放但是仍然继续需要药 物治疗以控制IOP，以及POAG患者或假性剥脱性青光眼患者，后者逐渐 发展为角狭窄。

正常眼压性青光眼(NTG)也称为低眼压性青光眼(LTG)，其特征在于 进行性视神经损害和周边视力损害，类似于在其它类型青光眼中所见到的； 然而，眼内压在正常范围内，或者甚至低于正常。

先天性(婴儿期)青光眼是相对少见的遗传类开角型青光眼。引流区域 的发育不足导致眼压增加，由于视神经损害导致视力受损，并导致眼睛变 大。早期诊断和治疗对于受所述疾病影响的婴儿和儿童的视力保护是至关 重要的。

继发性青光眼可能是由于目外伤、眼虹膜炎症(虹膜炎)、糖尿病、白 内障引起，或者由于在甾体敏感性个体中使用甾体而引起。继发性青光眼 也可能与视网膜剥离或视网膜静脉闭合或阻塞有关。

色素性青光眼特征在于色素颗粒在虹膜剥离。所述颗粒导致眼引流系 统的阻塞，使得眼内压升高并损害视神经。

剥脱性青光眼(假性剥脱)特征在于薄片状物在前囊膜上和眼角中沉 积。薄片状物的积聚阻塞了引流系统并使得眼压升高。

青光眼的诊断可以采用各种实验进行。眼压测量法通过测定眼表面的 紧张性或硬度而确定眼内压力。多种类型的眼压计可以用于所述实验，最 常见的是压平眼压计。角膜厚度测量法测定角膜的厚度，随后测定眼压。 前房角镜检查法检查过滤角和眼部引流区域。如果异常血管能够阻断房水 流出眼睛的引流，则前房角镜检查法也可以检查。检眼镜检查法允许检查 视神经，可以测定神经纤维层下降或视盘改变或所述结构的压痕(杯痕)， 这可能由于眼压升高或轴索脱扣而导致。前房角镜检查法也用于评价由于 血流较差或眼压升高而导致的神经损害。视野检查将视野绘图，它能够测 定青光眼损害对视神经的信号。这可以通过视野损失的特殊模式来代表。 光学相干断层扫描(ocular coherence tomography)是神经纤维层损失的客 观测定，根据光传递通过损害的轴索组织的差异、通过观察视神经纤维层 的厚度(在青光眼中有改变)来进行。

视神经玻璃疣为蛋白和钙盐的球形凝结物，据信它们代表通过先天性 改变的血管结构的分泌，影响轴突神经纤维层。这些积聚在外周神经纤维 层中发生，认为可能会直接通过压缩而损害神经纤维层，或者通过破坏对 神经纤维层的血管供应而间接损害神经纤维层。它们通常在受影响个体的 第一个十年后变得可见。它们常发生在两只眼睛中，但是也可能影响一只 眼睛，且可导致周边视野多年的轻微损失。

视神经病变是特征在于视神经损害的疾病，所述损害由脱髓鞘、血液 供应阻塞、营养不良或毒素导致。脱髓鞘视神经病变(参见下面的视神经炎) 通常是由于潜在的脱髓鞘过程如多发性硬化症而导致。血液供应阻塞被称 为局部缺血性视神经病，可能导致视神经细胞的死亡或功能障碍。非动脉 炎局部缺血性视神经病通常在中年人群中发生。风险因素包括高血压、糖 尿病和动脉粥样硬化。动脉炎局部缺血性视神经病变通常在老年人中发生， 继发于动脉炎症(动脉炎)，特别是颞动脉(颞动脉炎)。视力损失可以是快速 的或者在2-7天内逐渐发展，损害可以是一只眼睛或者是两只眼睛。在由 于暴露于毒素或者营养不良而导致的视神经病变的患者中，两只眼睛通常 都会受到影响。

约40％的非动脉炎局部缺血性视神经病变患者随时间内会自发改善。 非动脉炎局部缺血性视神经病变通过控制血压、糖尿病和胆固醇水平而加 以治疗。动脉炎局部缺血性视神经病变采用高剂量皮质激素类治疗以防止 第二只眼睛的视力损失。

视神经炎与一或二只眼睛中轻微或严重的视力损失有关，它可能由于 下列原因引起：系统性脱髓鞘过程(参见上面)、病毒感染、疫苗接种、脑 膜炎、梅毒、多发性硬化症和眼内炎症(眼色素层炎)。眼动可能会痛，视 力可能由于反复发作而恶化。诊断包括瞳孔反应的检查，确定视盘是否肿 胀。磁共振成像(MRI)可以证实多发性硬化症，或者很少用于证实压迫视 神经的肿瘤，在所述情况下，一旦肿瘤压力减轻，则视力改善。视神经炎 的大多数病例不经治疗可在数月期间改善。在某些情况下，采用静脉内注 射皮质激素类治疗可能是必须的。

白内障是在眼晶状体中或其包膜中发展的浑浊。白内障通常引起渐进 性视力损失，如果不治疗可能导致失明。在Morgagnian白内障中，白内 障皮层渐进性地液化形成奶白色液体，如果晶状体囊破裂和泄漏，可能会 导致严重的炎症。如果不治疗，白内障也可能引起白内障膨胀期继发青光 眼(phacomorphic glaucoma)。白内障可能在性质上是先天的，或者可能由 下列情况引起：遗传因素、老龄化、长期暴露于紫外线、暴露于辐射、糖 尿病、眼伤或身体外伤。

囊外(ECCE)手术是治疗白内障的最有效的治疗方法。在手术中，摘除 晶状体，但是绝大部分晶状体囊保持完整。晶状体乳化法(角膜一侧的小切 开手术)通常在摘除前用于使得晶状体破损。

眼部淀粉样变是与I型家族性淀粉样多发性神经病变(FAP)有关的遗 传性疾病，其特征在于结膜管异常、干燥性角膜结膜炎、瞳孔异常，在某 些情况下，特征还包括玻璃体浑浊和继发性青光眼。I型FAP与运甲状腺 素蛋白(TTR)的突变有关，所述运甲状腺素蛋白是一种在肝脏、视网膜色 素上皮组织2和脑脉络膜丛中合成的四聚体血浆蛋白(前清蛋白)。不同的 突变使得运甲状腺素蛋白聚合为淀粉状蛋白原纤维褶状结构，导致遗传性 淀粉样变。最常见的突变为TTR-met303，其中蛋氨酸在运甲状腺素蛋白 的30位上代替缬氨酸。

IV型FAP与格子状角膜营养不良(LCD)有关。格子状角膜营养不良为 遗传性、原发性、常见双侧角膜淀粉样变，其特征在于角膜基质中存在双 轮廓折射格子线。LCD I型(Biber-Haab-Dimmer)为常染色体显性、双侧 对称的角膜疾病，其特征在于中心基质表层和中层中存在许多具有白点和 模糊阴霾的半透明纤细格子线。所述症状在生命的第一个或第二个十年开 始，引起渐进性视力损失。大多数患者在40岁时需要角膜移植。LCD II 型与系统性淀粉样变(Meretoja综合征)有关，其特征在于缘、角膜中央和 基质中存在厚格子线。视力直到生命后期都不会受到影响。LCD III型对 中年人有影响，其特征在于存在自角膜缘到角膜缘延伸的厚格子线。LCD III型A的特征在于淀粉状蛋白沉积物在基质中的积聚以及在基质和 Bowman层之间存在淀粉状蛋白带，LCD III型A与LCD III型不同，因 为其存在角膜糜烂、出现白带以及常染色体显性遗传模式。

唐氏综合征(DS)或三体性21是最常见的遗传性疾病，在新生婴儿中发 生率约1∶700，通常与各种先天性异常有关。所述疾病由额外染色体21的 存在引起，与斑块形成蛋白β-淀粉状蛋白的过早沉积以及中年阿尔茨海默 病的发展有关。另外，受DS影响的许多人患有从童年期开始的青光眼， 且许多人患有先天性青光眼。因为淀粉状蛋白前体蛋白基因(它裂解形成β- 淀粉状蛋白)位于人染色体21的长臂上，在唐氏综合征中所述基因的过度 表达可能导致淀粉状蛋白前体蛋白和淀粉状蛋白沉积物的水平增加。

青光眼尚无好的治疗方法。治疗青光眼的药物包括：降低眼中房水产 生的药物，例如β阻断剂(噻吗洛尔(Timoptic)、倍他索洛尔(Betoptic))、碳 酸酐酶抑制剂(Trusopt、Azopt)和α激动剂(Alphagan，Iopidine)；引导房 水引流通过眼后部不同途径的药物，例如前列腺素(Xalatan)。激光手术包 括小梁成形术，其是有助于房水更容易地离开眼睛的方法。根据青光眼基 金会的报道，将近80％的患者对延缓或避免进一步手术的方法反应良好。 然而，根据国家眼科研究所(the National Eye Institute)的报道，激光手术 后2年内，一半患者的眼压力再次增加。如果药物和最初的激光治疗无法 成功降低眼压，则可以进行切口手术。一种类型的手术(小梁切除术)在眼 壁上切口以便于房水能够流出。然而，根据青光眼基金会的报道，约三分 之一的小梁切除术患者在5年内形成白内障。如果小梁切除术失败，其它 切口手术包括：将导液管置于眼中角膜和虹膜之间，使用激光或冷冻治疗 以破坏产生房水的眼组织。手术可以挽救患者的剩余视力，但是无法提高 视力。手术后视力实际上可能会变得更糟。

年龄相关黄斑变性(AMD)为年龄超过65岁的白种人失明的主要原因。 尽管黄斑变性研究最近已经有了长足发展，但是尚无避免在所述疾病过程 中发生的神经元细胞死亡的治疗方法。对于与β-淀粉状蛋白相关神经元退 化有关的其它眼病也没有明确的治疗方法，例如皮层视觉不足、视神经玻 璃疣、视神经病变、视神经炎、眼睛淀粉样变和网格状营养不良。

淀粉状蛋白沉积物通常含有三种成分。淀粉状蛋白原纤维，其约占淀 粉状蛋白的90％，包含数种不同类型蛋白的一种。这些蛋白能够折叠成所 谓的“β-折叠”原纤维，一种具有刚果红结合位点的特有蛋白构型，导致 淀粉状蛋白呈现特有的染色性。另外，淀粉状蛋白沉积物与淀粉状蛋白 P(五边形)成分(AP)密切相关，它是一种与正常血清淀粉状蛋白P(SAP)有 关的糖蛋白，还与硫酸化的粘多糖(GAG)、结缔组织的复合碳水合物密切 相关。

对阿尔茨海默病和朊病毒疾病治疗的一项进展是分子设计，所述分子 能够与Aβ和PrP的异常β-折叠构型分别结合，从而防止这些分子的积 聚。肽的β-折叠构型的特征在于相邻氨基酸链之间以正常模式形成氢键。 所述排列产生了稳定的三维结构。H-键受体(C＝O基团)和H-键供体(NH 基团)在天然存在的β-折叠肽中交替出现，被结合的原子基本上在一个链 中。在每个氨基酸链中，相邻H-键供体和H-键受体之间的距离落入特定 范围内。特别的是，在一个氨基酸残基中的H-键供体(NH基团)和H-键受 体(C＝O基团)中间的距离为3.5-4.0一个氨基酸残基的H-键受体(C＝ O基团)和参与链内结合的随后氨基酸残基的H-键供体(NH基团)之间的距 离为2.6-2.9换句话说，在一个氨基酸链中相邻的H-键供体和H-键受 体之间的距离可以在下列范围内交替：

H-键供体(氨基酸1)-H-键受体(氨基酸1)＝3.5-4.0

H-键受体(氨基酸1)-H-键供体2(氨基酸2)＝2.6-2.9

设计用于与β-折叠完美结合的配体具有的H-键供体和H-键接受体的 顺序应当与β-折叠的氨基酸链中H-键供体和H-键接受体的顺序互补。

WO 2007/002433描述了某些吡咯并[2，3-B]吡啶衍生物，据报道可适用 作蛋白激酶抑制剂。

本发明的目的是提供可用于治疗与淀粉状蛋白或淀粉状蛋白样蛋白有 关的疾病或病症、包括淀粉样变的化合物。所述化合物应该能够通过血脑 屏障。而且，它们是可药用的，尤为特别的是，它们不应当具有致突变 性、致癌性并且不应当在代谢上不稳定。

本发明的另一个目的是为受眼病影响的个体提供改良的治疗选择，所 述眼病与视觉系统组织中病理学异常/改变有关，特别是与视觉系统组织中 β-淀粉状蛋白相关病理学异常/改变有关，例如神经元退化。所述病理学异 常可以例如在不同眼组织中发生，例如：发生于视觉皮层，导致皮层视觉 不足；发生于前房和视神经，导致青光眼；发生于晶状体，导致由于β-淀 粉状蛋白沉积而产生的白内障；发生于玻璃体，导致眼部淀粉样变；发生 于视网膜，导致原发性视网膜变性和黄斑变性，例如年龄相关黄斑变性； 发生于视神经，导致视神经玻璃疣、视神经病变和视神经炎；发生于角膜， 导致网格状营养不良。

本发明者已经惊奇地发现这些目的可以通过下文所述的通式(I)化合 物实现。

发明概述

因此，本发明涉及涉及通式(I)化合物。

另一方面，本发明涉及含有通式(I)化合物的药物组合物或放射性药 物制剂。

本发明的另一方面涉及通式(I)化合物在制备用于治疗与淀粉状蛋白 或淀粉状蛋白样蛋白有关的疾病或病症、包括淀粉样变的药物中的用途。

本文也公开了治疗与淀粉状蛋白或淀粉状蛋白样蛋白有关的疾病或病 症的方法，所述方法包括向需要此类治疗的个体施用有效量的通式(I)化 合物。

本发明的另一方面涉及通式(I)化合物在制备药物中的用途，所述药 物用于治疗或缓解与视觉系统组织中病理学异常/改变有关的眼病的影 响。

本文也公开了治疗或缓解与视觉系统组织中病理学异常/改变有关的 眼病的影响的方法，所述方法包括向需要此类治疗的个体施用有效量的通 式(I)化合物。

与视觉系统组织中病理学异常/改变有关的眼病特别与视觉系统组织 中β-淀粉状蛋白相关病理学异常/改变有关，例如神经元退化。所述病理 学异常可以例如在不同眼组织中发生，例如：发生于视觉皮层，导致皮层 视觉不足；发生于前房和视神经，导致青光眼；发生于晶状体，导致由于 β-淀粉状蛋白沉积而产生的白内障；发生于玻璃体，导致眼部淀粉样变； 发生于视网膜，导致原发性视网膜变性和黄斑变性，例如年龄相关黄斑变 性；发生于视神经，导致视神经玻璃疣、视神经病变和视神经炎；发生于 角膜，导致网格状营养不良。

另一方面，本发明涉及混合物(例如药物组合物)，它含有本发明化合 物和任选的至少一种其它生物学活性化合物和/或可药用的载体和/或稀释 剂和/或赋形剂。其它生物学活性物质可以是已知的化合物，所述化合物 用于由淀粉状蛋白或淀粉状蛋白样蛋白导致或与之相关的疾病和病症、包 括淀粉样变的药物治疗，一组与淀粉状蛋白或淀粉状蛋白样蛋白有关的一 组疾病和病症，如阿尔茨海默病中所包含的Aβ蛋白。

其它生物学活性物质或化合物可以通过与本发明化合物相同或相似机 制发挥其生物学作用，或通过无关的作用机制或通过多重相关和/或无关作 用机制发挥其生物学作用。

也公开了在样本或患者中收集用于淀粉状蛋白相关疾病或病症的诊断 的数据的方法，所述方法包括：

(a)使疑似含有淀粉状蛋白的样本或特定机体部分或机体部位与本 发明化合物接触；

(b)使得所述化合物与淀粉状蛋白结合；

(c)检测与蛋白结合的化合物；以及

(d)任选将存在或不存在与淀粉状蛋白结合的化合物与样本或特定 机体部分或部位中存在或不存在淀粉状蛋白相关联。

本发明的另一个实施方案为在组织和/或体液中测定淀粉状蛋白形成 斑块负荷(amyloidogenic plaque burden)的方法，所述方法包括：

(a)提供能够代表待研究组织和/或体液的样本；

(b)用本发明化合物检测样本中是否存在淀粉状蛋白；

(c)测定与淀粉状蛋白结合的化合物的量；以及

(d)计算组织和/或体液中斑块负荷。

另一方面涉及在患者中收集用于测定淀粉状蛋白相关疾病或病症的倾 向的数据的方法，其包括在样本中或原位测定本发明化合物与淀粉状蛋白 的特异结合，包括下列步骤：

(a)使疑似含有淀粉状蛋白的样本或特定机体部分或机体部位与本 发明化合物接触，所述化合物特异性地与淀粉状蛋白结合；

(b)使所述化合物与淀粉状蛋白结合以形成化合物/蛋白复合物；

(c)检测化合物/蛋白复合物的形成；

(d)任选将存在或不存在化合物/蛋白复合物与样本或特定机体部分 或部位中存在或不存在淀粉状蛋白相关联；以及

(e)任选将化合物/蛋白复合物的量与正常对照值比较。

本发明的另一方面是在患者中收集用于监测采用抗体或疫苗组合物治 疗后最小残留疾病的数据的方法，其中所述方法包括：

(a)使疑似含有淀粉状蛋白的样本或特定机体部分或机体部位与本 发明化合物接触，所述化合物特异性地与淀粉状蛋白结合；

(b)使所述化合物与淀粉状蛋白结合以形成化合物/蛋白复合物；

(c)检测化合物/蛋白复合物的形成；

(d)任选将存在或不存在化合物/蛋白复合物与样本或特定机体部分 或部位中存在或不存在淀粉状蛋白相关联；以及

(e)任选将化合物/蛋白复合物的量与正常对照值比较。

也描述了收集用于预测采用抗体或疫苗组合物治疗的患者的响应性的 数据的方法，所述方法包括：

(a)使疑似含有淀粉状蛋白的样本或特定机体部分或机体部位与本 发明化合物接触，所述化合物特异性地与淀粉状蛋白结合；

(b)使所述化合物与淀粉状蛋白结合以形成化合物/蛋白复合物；

(c)检测化合物/蛋白复合物的形成；

(d)任选将存在或不存在化合物/蛋白复合物与样本或特定机体部分 或部位中存在或不存在淀粉状蛋白相关联；以及

(e)任选将化合物/蛋白复合物的量与正常对照值比较。

本发明的另一方面为检测和诊断淀粉状蛋白相关疾病或病症的检验试 剂盒，它含有本发明化合物。

在本发明的另一方面，本发明化合物用于抑制蛋白质积聚，特别用于 抑制Aβ1-42积聚、τ积聚或α-突触核蛋白(synuclein)积聚。

在本发明的一方面，公开了本发明化合物在制备药物中的用途，所述 药物用于(a)减少β-淀粉状蛋白斑块负荷，和/或(b)抑制β-淀粉状蛋白斑块 形成和/或(c)延缓患者脑中淀粉状蛋白负荷的增加。

本发明的另一实施方案提供了(a)减少β-淀粉状蛋白斑块负荷，和/或(b) 抑制β-淀粉状蛋白斑块形成和/或(c)延缓个体脑中淀粉状蛋白负荷增加的 方法，所述方法包括向需要此类治疗的个体施用有效量的本发明化合物。

在又一实施方案中，本发明化合物用于(a)减少β-淀粉状蛋白斑块负 荷，和/或(b)抑制β-淀粉状蛋白斑块形成和/或(c)延缓患者脑中淀粉状蛋白 负荷的增加。

根据另一方面，本发明涉及本发明化合物在制备用于在遭受记忆损害 的个体中保留或增加认知记忆能力的药物中的用途。

根据另一方面，本发明提供了在遭受记忆损害的个体中保留或增加认 知记忆能力的方法，所述方法包括向需要此类治疗的个体施用有效量的本 发明化合物。

根据又一方面，本发明涉及用于在遭受记忆损害的个体中保留或增加 认知记忆能力的本发明化合物。

本发明的优选实施方案总结于所附权利要求中。

由WO 2007/002433已知的个别化合物未被包括在涉及化合物或药物 组合物的权利要求的范围之内。所述化合物例如在下面列出：

这些化合物可被包括在其它权利要求的范围中或它们可从其它权利要 求的范围排除。所述化合物可单独或以两种或更多种的组合被排除或所有 所述化合物可从任何其它权利要求排除。

附图简述

图1示出皮层(a和b)和海马(c和d)6E10免疫荧光的定量。

在图2A和2B中，分析了已经用PBS和ACI-636处理的APPV171I 转基因小鼠。

图3示出通过手性HPLC分离化合物26的Boc-保护的前体。

图4示出分离后的早期对映体。

图5示出分离后的晚期对映体。

图6示出结晶前的外消旋混合物(二盐酸盐)。

图7示出结晶后的早期洗脱对映体A(二盐酸盐)。

图8示出结晶后的晚期洗脱对映体B(二盐酸盐)。

图9示出由晚期非对映体衍生的化合物214b的Boc-保护的前体。

图10示出由早期非对映体衍生的214a的Boc-保护的前体。

图11示出早期非对映体的¹H-NMR数据(仅芳族区域，杂质存在于区 域7.1-7.3ppm中)。

图12示出晚期非对映体的¹H-NMR数据(仅芳族区域，杂质存在于区 域7.1-7.3ppm中)。

定义

在本申请的含义之内，下列定义适用：

“烷基”是指由碳和氢原子组成的饱和有机部分。合适烷基基团的实 例具有1至6个碳原子、优选1至4个碳原子，且包括甲基、乙基、丙基 和丁基。

“环烷基”是指由碳和氢原子组成的环状有机部分。合适烷基基团的 实例具有5至10个碳原子、优选5或6个碳原子，且包括环戊基和环己基。

“杂环烷基”是指如上定义的环烷基，其中至少一个碳原子已被例如 选自N、O或S的杂原子或含杂原子(例如N、O和/或S)部分替代。可能 的杂环烷基基团的实例包括吡咯烷、四氢呋喃、哌啶等。

“链烯基”是指由碳和氢原子组成的有机部分，其包括至少一个双键。 合适链烯基基团的实例含有2至6个碳原子、优选2至4个碳原子，且包 括丙烯基和丁烯基。

“炔基”是指由碳和氢原子组成的有机部分，其包括至少一个三键。 合适炔基基团的实例具有2至6个碳原子、优选2至4个碳原子，且包括 丙炔基和丁炔基。

“芳基”是指由碳和氢原子组成的芳族有机部分，其优选具有5至10 个碳原子、更优选5或6个碳原子。实例是苯基环。

“杂芳基”是指如上定义的芳基，其中至少一个碳原子已被例如选自 N、O或S的杂原子或含杂原子(例如N、O和/或S)部分替代。可能的杂 芳基基团的实例包括吡啶等。

“烷氧基”是指基团-O-烷基。

“氨基烷基”是指基团-烷基-NR¹R²。

“Hal”或“卤素”是指F、Cl、Br和I。优选的Hal是F和Cl、更 优选F。

“芳基烷基”是指基团芳基-烷基-。

“环烷基烷基”是指基团环烷基-烷基-。

“氟烷基”是指其中一个或多个氢原子已被氟原子替代的烷基基团。

“卤代烷基”是指其中一个或多个氢原子已被卤素原子替代的烷基基 团。

“杂芳基烷基”是指基团杂芳基-烷基-。

“杂环烷基烷基”是指基团杂环烷基-烷基-。

“含杂原子部分”是含有例如N、O和/或S的部分。此类部分的实例 包括-C(O)-、-C(O)O-和-N(R⁵⁰)-，其中R⁵⁰在每次出现时独立地选自下 组：R²⁰、S(O)_tNR²⁰R²¹、S(O)_tR²⁰、C(O)OR²⁰、C(O)R²⁰C(＝NR^a)NR²⁰R²¹、 C(＝NR²⁰)NR²¹R^a、C(＝NOR²⁰)R²¹和C(O)NR²⁰R²¹。特定实例包括-C(O)-、 -C(O)O-和-N(R⁵⁰)-，其中R⁵⁰在每次出现时独立地选自下组：H或C_1-4烷基。

如果基团被定义为“任选取代的”，则其可以具有一个或多个选自以下 的取代基：Hal、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、-SO₂-烷基、-NH₂、-NH(C_1-6烷基)或-N(C_1-6烷基)₂。

具有一个或多个旋光性碳的本发明化合物可以以外消旋物和外消旋混 合物、立体异构体(包括非对映体混合物和单个非对映体、对映体混合物和 单一对映体、构象异构体混合物和单一构象异构体)、互变异构体、阻转异 构体和旋转异构体的形式存在。所有异构形式包括在本发明中。本发明中 所述的含有烯属双键的化合物包括E和Z几何异构体。还包括在本发明中 的是所有盐形式、多晶型物、水合物和溶剂化物。

溶剂化物中所包含的溶剂并未特别限制并且可以是任何可药用的溶 剂。实例包括水和C_1-4醇(例如甲醇或乙醇)。

本发明中可被治疗的患者或个体通常是动物，特别是哺乳动物，更特 别是人。

除另有指明外，“定义”部分中给出的优选定义适用于所有下文所述 的实施方案。

发明详述

本发明涉及式(I)化合物：

A-L₁-B    (I) 及其所有立体异构体、外消旋混合物、可药用的盐、水合物、溶剂化物和 多晶型物。

A选自下组：

L₁定向地选自下组：

术语“定向地”表示示于式(a)左侧的键和示于式(b)左侧的两个键与A 结合，而示于式(a)右侧的键和示于式(b)右侧的键与B结合。如对于技术 人员而言直接明了的那样，式(b)仅与A部分的式(vii)组合。在优选的实施 方案中，L₁是(a)。

B选自下组：

R¹各自独立地选自下组：氢、卤素、CN、CF₃、-CONR³⁰R³¹、 -N(R³⁰)-C(O)-R³¹、烷基、-O-烷基、-C(O)O-烷基、环烷基、环烷基烷基、 杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基 烷基和杂芳基烷基，其中烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、 杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基可 被任选地取代。在优选的实施方案中，R¹各自独立地选自：氢、卤素(例 如F)、CN、CF₃、-CONR³⁰R³¹、-N(R³⁰)-C(O)-R³¹、-O-烷基、杂环烷基 (例 如)。更优选R¹各自独立地选 自：氢、F、CN、CF₃、

R²各自独立地选自下组：氢、卤素、CN、CF₃、-CONR³⁰R³¹、 -N(R³⁰)-C(O)-R³¹、烷基、-O-烷基、-C(O)O-烷基、环烷基、环烷基烷基、 杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基 烷基和杂芳基烷基，其中烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、 杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基可 被任选地取代。在优选的实施方案中，R²各自独立地选自：氢、卤素(例 如F)、CN、CF₃、-CONR³⁰R³¹、-N(R³⁰)-C(O)-R³¹、-O-烷基、杂环烷基 (例 如)。在优选的实施方案中， R²各自独立地选自：氢、F、CN、CF₃、CONR³⁰R³¹、-O-烷基、

R³各自独立地选自下组：氢、卤素、CN、CF₃、-CONR³⁰R³¹、 -N(R³⁰)-C(O)-R³¹、烷基、-O-烷基、-C(O)O-烷基、环烷基、环烷基烷基、 杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基 烷基和杂芳基烷基，其中烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、 杂环烷基烷基、链烯基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳 基烷基可被任选地取代。在优选的实施方案中，R³各自独立地选自：氢、 卤素(例如F)、CN、CF₃、-CONR³⁰R³¹、-N(R³⁰)-C(O)-R³¹、-O-烷基、 杂环 烷基(例如)。更优选R³各自独 立地选自：氢、F、-O-烷基、CF₃、

R⁴各自独立地选自下组：氢、卤素、CN、CF₃、-CONR³⁰R³¹、 -N(R³⁰)-C(O)-R³¹、烷基、-O-烷基、-C(O)O-烷基、环烷基、环烷基烷基、 杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基 烷基和杂芳基烷基，其中烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、 杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基可 被任选地取代。在优选的实施方案中，R⁴各自独立地选自：氢、卤素(例 如F)、CN、CF₃、-CONR³⁰R³¹、-N(R³⁰)-C(O)-R³¹、-O-烷基、杂环烷基 (例 如)。更优选R⁴是氢。

在另一实施方案中，如果任意基团R¹/R²/R³/R⁴毗邻，则它们可任选地 合在一起并且可形成含有碳原子和任选的一个或多个选自O、S或N的杂 原子或含杂原子(N、O和/或S)部分的5-至8-元环，其中所述5-至8-元环 可被NR²⁰R²¹或-O-烷基取代，其中所述烷基可被任选地取代，或被 取代。在一个实施方案中，R¹和R²当合在一起时可形成含有 碳原子的5-至8-元环例如6-元碳环。所述环可以是饱和的或包括一个或多 个双键(包括芳族环)。形成环的基团的实例是-(CH₂)₃-(即饱和5-元环)、 -(CH₂)₄-、-O-(CH₂)-O-。这些环可被任选地取代。

5-至8-元环的任选取代基的实例包括-O-烷基、-O-烷基-Hal、-O- 烷基-O-烷基、-NH-烷基-O-烷基和-烷基-SO₂烷基。

R^a各自独立地选自下组：氢、烷基、卤代烷基、S(O)_tNR³⁰R³¹、S(O)_tR³⁰、 C(O)OR³⁰、C(O)R³⁰和C(O)NR³⁰R³¹。在优选的实施方案中，R^a是氢或烷 基。

在每次出现时R^b各自独立地选自下组：氢、卤素、CN、CF₃、 CONR³⁰R³¹、烷基、-O-烷基、-C(O)O-烷基、环烷基、环烷基烷基、杂 环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基烷 基和杂芳基烷基，其中烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、 杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基和 氨基烷基可被任选地取代。在优选的实施方案中，R^b是氢、卤素(例如F)、 CONR³⁰R³¹或烷基。

在每次出现时R²⁰各自独立地选自下组：氢、烷基、环烷基、环烷基 烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、 芳基烷基、杂芳基烷基和氨基烷基，其中烷基、环烷基、环烷基烷基、杂 环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基烷 基、杂芳基烷基和氨基烷基可被任选地取代。在优选的实施方案中，R²⁰是氢或烷基。

在每次出现时R²¹各自独立地选自下组：氢、烷基、环烷基、环烷基 烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、 芳基烷基、杂芳基烷基和氨基烷基，其中烷基、环烷基、环烷基烷基、杂 环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基烷 基、杂芳基烷基和氨基烷基可被任选地取代。在优选的实施方案中，R²¹是氢或烷基。

在一个实施方案中，R²⁰和R²¹当与它们所连接的氮合在一起时可形成 含有碳原子和任选的一个或多个其它选自O、S或N的杂原子或含杂原子 (N、O和/或S)部分的3-至8-元环，且其中所述3-至8-元环可被任选地取 代。所述环可以是饱和的或包括一个或多个双键(包括芳族环)。在一个实 施方案中，所述环除R²⁰和R²¹连接的氮原子之外是碳环。在不同的实施 方案中，所述环除R²⁰和R²¹连接的氮原子之外还包括一个其它杂原子(例 如N或O)。

在每次出现时R³⁰各自独立地选自下组：氢、烷基、环烷基、环烷基 烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、 芳基烷基、杂芳基烷基和氨基烷基，其中烷基、环烷基、环烷基烷基、杂 环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基烷 基、杂芳基烷基和氨基烷基可被任选地取代。在优选的实施方案中，R³⁰是氢或烷基。

在每次出现时R³¹各自独立地选自下组：氢、烷基、环烷基、环烷基 烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、 芳基烷基、杂芳基烷基和氨基烷基，其中烷基、环烷基、环烷基烷基、杂 环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基烷 基、杂芳基烷基和氨基烷基可被任选地取代。在优选的实施方案中，R³¹是氢或烷基。

当氮原子存在于由R¹/R²/R³/R⁴形成的环或由R²⁰和R²¹形式的环中时， 其可以呈任何适合的形式。可能的形式包括-N(R⁵⁰)-和-N＝。

X各自独立地选自下组：CR^b和N。

Y各自独立地选自下组：CR^b和N。

t是1或2。

p是0、1或2。在一个实施方案中，p是0。

在优选的实施方案中，A选自下组：

L₁是

B选自下组：

其中：

R¹、R²、R³、R⁴、R^a、R²⁰、X和Y具有如上所述的相同含义；

V缺失或是NR²⁰R²¹且

z是1或2。

在本说明书中还涵盖上述定义的任何组合。

在一个实施方案中，A具有式(i)

式(i)的优选实施方案包括

在一个优选的实施方案 中，式(i)是在另一个优选的实施方案中，式(i)是

在该实施方案中，R¹、R²、R³和R^b如上所定义。

在一个实施方案中，A具有式(ii)

式(ii)的优选实施方案包括其中R^a是氢或C_1-4烷基的实施方案。在其 它优选实施方案中，R¹和R²是氢或优选地R¹和R²一起形成-(CH₂)₄-。在 替代实施方案中，R²和R^a是氢和R¹是优选R²和R^a是氢且R¹是

在一个实施方案中，A具有式(iii)

式(iii)的优选实施方案包括其中R^a是氢或C_1-4烷基的实施方案。在其 它优选实施方案中，R¹和R²是氢或优选R²是氢和R¹是在一个优选的实施方案中，优选R²是氢 且R¹是

在一个实施方案中，A具有式(iv)

式(iv)的优选实施方案包括其中R^a是氢或C_1-4烷基的实施方案。在其 它优选实施方案中，R¹和R²是氢或优选R²是氢且R¹是在一个优选的实施方案中，优选R²是氢 且R¹是

在一个实施方案中，A具有式(v)

式(v)的优选实施方案包括其中R^a是氢或C_1-4烷基的实施方案。在其 它优选实施方案中，R¹和R²是氢或优选R²是氢且R¹是在一个优选的实施方案中，优选R²是氢 且R¹是

在一个实施方案中，A具有式(vi)

式(vi)的优选实施方案包括其中R^a是氢或C_1-4烷基的实施方案。在其 它优选实施方案中，R¹和R²是氢或优选R²是氢且R¹是在一个优选的实施方案中，优选R²是氢 且R¹是

在一个实施方案中，A具有式(vii)

式(vii)的优选实施方案包括其中R¹、R²、R³和R⁴是氢的实施方案。 式(vii)的其它优选实施方案包括

在一个实施方案中，A具有式(viii)

式(viii)的优选实施方案包括其中R³是F且R^a是氢的实施方案或其中 R³和R^a是氢的实施方案。

在一个实施方案中，L₁具有式(a)

(a)。在优选的实施方案中，p＝0。

在一个实施方案中，B具有式(ix)

(ix)的优选实施方案包括其中R^a是氢或C_1-4烷基的实施方案。在其它 优选实施方案中，R¹和R²是氢。在其它优选实施方案中，R¹如在上述一 般定义中定义(实例为CN、-COO(C_1-4烷基)、更优选CN、) 和R²是氢。在其它优选实施方案中，R¹和R²可形成被任选地取代的环。 形成环的R¹和R²的实例是-(CH₂)₃-和-(CH₂)₄-，其可以被任选地取代。

在一个实施方案中，B具有式(x)

(x)的优选实施方案包括其中R^a是氢或C_1-4烷基的实施方案。在其它 优选实施方案中，R¹和R²是氢。在其它优选实施方案中，R¹如在上述一 般定义中定义(实例为CN、-COO(C_1-4烷基)、更优选CN、)和R²是氢。在其它优选实施方案中，R¹和R²可形成被 任选地取代的环。形成环的R¹和R²的实例是-(CH₂)₃-和-(CH₂)₄-，其可被 任选地取代。

在一个实施方案中，B具有式(xi)

(xi)的优选实施方案包括其中R^a是氢或C_1-4烷基的实施方案。在其它 优选实施方案中，R¹和R²是氢。在其它优选实施方案中，R¹如在上述一 般定义中定义(实例为CN、-COO(C_1-4烷基)、更优选CN、)且R²是氢。在其它优选实施方案中，R¹和R²可形成被 任选地取代的环。形成环的R¹和R²的实例是-(CH₂)₃-和-(CH₂)₄-，其可被 任选地取代。

在一个实施方案中，B具有式(xii)

(xii)的优选实施方案包括其中R^a是氢或C_1-4烷基的实施方案。在其它 优选实施方案中，R¹和R²是氢。在其它优选实施方案中，R¹如在上述一 般定义中定义(实例是CN、-COO(C_1-4烷基)、更优选CN、)且R²是氢。在其它优选实施方案中，R¹和R²可形成被 任选地取代的环。形成环的R¹和R²的实例是-(CH₂)₃-和-(CH₂)₄-，其可 被任选地取代。

在一个实施方案中，B具有式(xiii)

(xiii)的优选实施方案包括其中R^a是氢或C_1-4烷基的实施方案。在其 它优选实施方案中，R¹和R²是氢。在其它优选实施方案中，R¹如在上述 一般定义中定义(实例是CN、-COO(C_1-4烷基)、更优选CN、)和R²是氢。在其它优选实施方案中，R¹和R²可形成被 任选地取代的环。形成环的R¹和R²的实例是-(CH₂)₃-和-(CH₂)₄-，其可 被任选地取代。

在一个实施方案中，本发明化合物优选具有式(I)：

A-L₁-B    (I)

及其所有立体异构体、外消旋混合物、可药用的盐、水合物、溶剂化物和 多晶型物；

其中A是：

L₁是：

B是：

其中

R¹和R²各自独立地选自下组：氢、卤素、CN、CF₃、CONR³⁰R³¹、 烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、 炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基，其中烷基、环烷基、环烷 基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳 基、芳基烷基和杂芳基烷基可被任选地取代，或如果R¹和R²毗邻，则它 们可任选地合在一起并且可形成含有碳原子和任选的一个或两个选自O、 S或N的杂原子或含杂原子部分NR⁵⁰的5-或6-元环；

R³是氢或卤素；

R^a是氢或烷基；

在每次出现时，R^b独立地选自下组：氢、卤素、CN、CF₃、CONR³⁰R³¹、 烷基、-O-烷基、-C(O)O-烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷 基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷 基，其中烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、 链烯基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基和氨基烷 基可被任选地取代；

在每次出现时，R³⁰、R³¹、R²⁰和R²¹各自独立地选自下组：氢、烷基、 环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、 芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基和氨基烷基，其中烷基、环烷基、 环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、 杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基和氨基烷基可被任选地取代；

R⁵⁰在每次出现时为R²⁰、S(O)_tNR²⁰R²¹、S(O)_tR²⁰、C(O)OR²⁰、 C(O)R²⁰C(＝NR^a)NR²⁰R²¹、C(＝NR²⁰)NR²¹R^a  、C(＝NOR²⁰)R²¹或 C(O)NR²⁰R²¹；

Y各自独立地是CH或N

t是1或2；且

z是1或2。

在另一实施方案中，本发明化合物优选具有式(I)：

A-L₁-B    (I)

及其所有立体异构体、外消旋混合物、可药用的盐、水合物、溶剂化物和 多晶型物；

其中A是：

L₁是：

B是：

其中

R¹和R²各自独立地选自下组：氢、卤素、CN、CF₃、CONR³⁰R³¹、 烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、 炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基，其中烷基、环烷基、环烷 基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳 基、芳基烷基和杂芳基烷基可被任选地取代，或如果R¹和R²毗邻，则它 们可任选地合在一起并且可形成含有碳原子和任选的一个或两个选自O、 S或N的杂原子或含杂原子部分NR⁵⁰的5-或6-元环；

R³是氢或卤素；

R^a是氢或烷基；

在每次出现时，R^b独立地选自下组：氢、卤素、CN、CF₃、CONR³⁰R³¹、 烷基、-O-烷基、-C(O)O-烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷 基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷 基，其中烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、 链烯基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基和氨基烷 基可被任选地取代；

在每次出现时，R³⁰、R³¹、R²⁰和R²¹各自独立地选自下组：氢、烷基、 环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、 芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基和氨基烷基，其中烷基、环烷基、 环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、 杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基和氨基烷基可被任选地取代；

R⁵⁰在每次出现时为R²⁰、S(O)_tNR²⁰R²¹、S(O)_tR²⁰、C(O)OR²⁰、 C(O)R²⁰C(＝NR^a)NR²⁰R²¹、C(＝NR²⁰)NR²¹R^a  、C(＝NOR²⁰)R²¹或 C(O)NR²⁰R²¹；

Y各自独立地是CH或N；

t是1或2；且

z是1或2。

在另一实施方案中，本发明化合物优选具有式(I)：

A-L₁-B    (I)

及其所有立体异构体、外消旋混合物、可药用的盐、水合物、溶剂化物和 多晶型物；

其中A是：

L₁是：

B是：

其中

R¹和R²各自独立地选自下组：氢、卤素、CN、CF₃、CONR³⁰R³¹、 烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、 炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基，其中烷基、环烷基、环烷 基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳 基、芳基烷基和杂芳基烷基可被任选地取代，或如果R¹和R²毗邻，则它 们可任选地合在一起并且可形成含有碳原子和任选的一个或两个选自O、 S或N的杂原子或含杂原子部分NR⁵⁰的5-或6-元环；

R³是氢或卤素；

R^a是氢或烷基；

在每次出现时，R^b独立地选自下组：氢、卤素、CN、CF₃、CONR³⁰R³¹、 烷基、-O-烷基、-C(O)O-烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷 基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷 基，其中烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、 链烯基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基和氨基烷 基可被任选地取代；

在每次出现时，R³⁰、R³¹、R²⁰和R²¹各自独立地选自下组：氢、烷基、 环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、 芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基和氨基烷基，其中烷基、环烷基、 环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、 杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基和氨基烷基可被任选地取代；

R⁵⁰在每次出现时为R²⁰、S(O)_tNR²⁰R²¹、S(O)_tR²⁰、C(O)OR²⁰、 C(O)R²⁰C(＝NR^a)NR²⁰R²¹、C(＝NR²⁰)NR²¹R^a、C(＝NOR²⁰)R²¹或 C(O)NR²⁰R²¹；

Y各自独立地是CH或N；且

t是1或2。

还在本说明书中涵盖上述实施方案的任何组合。

优选化合物总结于表6中。

本发明化合物可通过流程1至20中所示的一般方法之一合成。这些方 法仅以示例性目的给出且为非限制性的。

用于制备6-氨基-或6-溴-7-氮杂吲哚构建单元的一般合成流程示于下 列中。

流程1

将市售可得的7-氮杂吲哚或适当取代的7-氮杂吲哚衍生物用间氯过苯 甲酸在适合的溶剂中处理以产生相应的N-氧化物/间氯苯甲酸盐。N-氧化 物/盐用硫酸二甲酯在适合的溶剂中处理，然后所述中间体与氨在适合的溶 剂中反应，产生所需6-氨基7-氮杂吲哚构建单元。

N-氧化物盐用碱在适合的溶剂中处理，在纯化后产生N-氧化物。N- 氧化物与六甲基二甲硅烷胺(hexamethyldisilazane)和苯甲酰溴在适合的溶 剂中反应，获得相应的N¹-苯甲酰基保护的6-溴7-氮杂吲哚衍生物。保护 基用氢氧化钠在适合的溶剂中皂化，在纯化后产生相应的6-溴7-氮杂吲哚 衍生物。用三异丙基甲硅烷基部分保护N¹-位，在纯化后获得所需N¹-保护 的6-溴7-氮杂吲哚衍生物。

用于3-取代的6-溴4-氮杂吲哚和6-溴吲哚构建单元(其中R＝Boc、CH₃和X＝CH、N)的一般合成流程。

流程2

将市售可得的6-溴4-吲哚(X＝CH)用氢化钠在适合的溶剂中处理，然 后加入三异丙基甲硅烷基氯，在纯化后产生N¹-保护的衍生物。

将市售可得的6-溴4-吲哚(X＝CH)或6-溴4-氮杂吲哚(X＝N)用N-Boc- 哌啶-4-酮或N-甲基-哌啶-4-酮和适合碱在适合的溶剂中处理，在纯化后产 生缩合产物。双键使用适合的催化剂和溶剂氢化，在纯化后产生相应的还 原产物。N¹-位用三异丙基甲硅烷基部分保护，在纯化后获得所需3-取代的 和N¹-保护的衍生物。

用于制备3-取代的5-溴7-氮杂吲哚和5-溴7-吲哚构建单元的一般合成 流程(其中R＝Boc、CH₃)。

流程3

将市售可得的5-溴吲哚(X＝CH)或5-溴7-氮杂吲哚(X＝N)用N-Boc-哌 啶-4-酮或N-甲基-哌啶-4-酮和适合碱在适合的溶剂中处理，在纯化后产生 缩合产物。N¹-位用三异丙基甲硅烷基部分保护，产生相应的化合物。双键 使用适合的催化剂和溶剂氢化，在纯化后产生所需N¹-保护的衍生物。

用于制备本发明的3-取代的6-氨基吲哚构建单元(R＝Boc、CH₃)的一 般合成流程

流程4

将市售可得的6-硝基吲哚用N-Boc-哌啶-4-酮或N-甲基-哌啶-4-酮和适 合碱在适合的溶剂中处理，在纯化后产生缩合产物。硝基基团和双键使用 适合的催化剂和溶剂还原，在纯化后产生所需6-氨基吲哚衍生物。来自最 初缩合的硝基衍生物的N¹-位用三异丙基甲硅烷基部分保护，产生相应的 化合物，其未经纯化即用于氢化。硝基基团和双键使用适合的催化剂和溶 剂还原，在纯化后产生所需N¹-TIPS保护的6-氨基吲哚衍生物。来自最初 缩合的含有N-Boc保护的哌啶部分的硝基衍生物的N¹-位用甲基基团保护， 在纯化后产生所需化合物。硝基基团和双键使用适合的催化剂和溶剂催化 还原，在纯化后产生所需N¹-甲基保护的6-氨基吲哚衍生物，其中哌啶部 分的氮用Boc-部分保护。

用于制备三环2-溴或2-氨基四氢-吡啶并[2，3-b]吲哚构建单元(当合在 一起的R¹和R²形成含有碳原子的5-或6-元环时)的一般合成流程

流程5

将市售可得的2，6-二溴吡啶用水合肼在适合的溶剂中处理，产生单肼 衍生物。与适当的环状酮在适合的溶剂中缩合，产生所需腙化合物。热 Fischer-吲哚合成，在纯化后产生三环环化产物。铜(I)-氧化物介导溴衍生 物与氨的交换，在纯化后获得所需三环2-氨基吡啶并[2，3-b]吲哚衍生物。

用于制备三环2-溴四氢-吡啶并[2，3-b]吲哚(X＝N，Y＝Br，Z＝H)或6- 溴四氢-咔唑(X＝CH，Y＝h，Z＝Br)或7-溴四氢-咔唑(X＝CH，Y＝Br，Z＝H) 构建单元(当合在一起的R¹和R²形成含有碳原子的6-元环且6-元环用 NCH₃Boc取代)的一般合成流程。

用于制备保护的4-氨基-和4-羟基环己酮衍生物和未保护的4-羟基环 己酮衍生物的一般合成流程

流程6

将市售可得的4-氨基-环己醇盐酸盐使用邻苯二甲酰亚胺试剂和碳酸 钾在适当的溶剂中转化成相应的邻苯二甲酰亚胺-保护的4-氨基-环己醇。 用氯铬酸吡啶鎓在适当的溶剂中将所述醇氧化成酮，在纯化后产生邻苯二 甲酰亚胺-保护的4-氨基-环己酮。将市售可得的1，4-环己二酮单乙烯乙缩 醛(1，4-Cyclohexanedione monoethylene acetal)用硼氢化钠在适当的溶剂中 处理，产生相应的醇。所述醇用邻苯二甲酰亚胺、采用Mitsunobu反应条 件处理，在纯化后产生所需化合物。用痕量的对甲苯磺酸在适当的溶剂混 合物中回流起始物质，实现缩醛的断裂，以产生相应的邻苯二甲酰亚胺- 保护的4-氨基-环己酮。醇还原产物用苯甲醛氯处理，然后使用痕量的对甲 苯磺酸在适当的溶剂混合物中在回流下断裂缩醛，产生相应的苯甲酰基- 保护的4-羟基-环己酮。醇还原产物使用痕量的对甲苯磺酸在适当的溶剂混 合物中在回流下处理，产生相应的4-羟基-环己酮。

用于制备三环2-溴四氢-吡啶并[2，3-b]吲哚(X＝N，Y＝Br，Z＝H)或3- 溴四氢-吡啶并[2，3-b]吲哚(X＝N，Y＝h，Z＝Br)或6-溴四氢-咔唑(X＝CH，Y ＝h，Z＝Br)或7-溴四氢-咔唑(X＝CH，Y＝Br，Z＝H)构建单元(当合在一起的 R¹和R²形成含有碳原子的6-元环且6-元环用NR²⁰Boc取代时)的一般合成 流程

流程7

将2-溴-6-肼基吡啶(X＝N，Y＝Br，Z＝H)或3-溴-6-肼基吡啶(X＝N，Y＝H， Z＝Br)或4-溴-苯基肼(X＝CH，Y＝H，Z＝Br)或3-溴-苯基肼(X＝CH，Y＝Br， Z＝H)用邻苯二甲酰亚胺保护的4-氨基-环己酮衍生物在适合的溶剂中缩 合，产生所需腙缩合产物。腙的热Fischer-吲哚合成，在纯化后产生三环 环化产物。邻苯二甲酰亚胺保护基通过用水合肼在适当的溶剂中处理来去 除，以产生伯胺。游离胺用Boc-酸酐和适合的碱在适当的溶剂中处理，在 纯化后产生单-Boc和二-Boc保护的衍生物。单-Boc衍生物用氢化钠在适 合的溶剂中处理，然后用甲基碘处理，在纯化后产生所需二-甲基三环衍生 物。二-Boc-保护的化合物用氢化钠在适合的溶剂中处理，然后加入合适烷 化剂，在纯化后产生单-烷基化产物(X＝CH)。取决于烷化剂的反应性，反 应在室温继续进行或需要升高的温度。通过在适当的溶剂中加入适合的碱 来实现与吡咯环连接的Boc保护基(X＝N)的选择性断裂，以产生所需化合 物。吡咯环的NH-部分用三异丙基甲硅烷基部分保护，在纯化后产生所需 三环衍生物(X＝N)。

用于制备三环2-溴四氢-吡啶并[2，3-b]吲哚(X＝N，Y＝Br，Z＝H)或3- 溴四氢-吡啶并[2，3-b]吲哚(X＝N，Y＝H，Z＝Br)构建单元(当合在一起的R¹和R²形成含有碳原子的6-元环且6-元环用NR²⁰Boc取代时)的一般合成流 程

流程8

将市售可得的2，6-二-溴吡啶(X＝N，Y＝Br，Z＝H)或2，5-二-溴吡啶(X＝N， Y＝H，Z＝Br)与适合的肼衍生物在适当的溶剂中加热，在纯化后产生相应 的2-溴-6-肼基吡啶或3-溴-6-肼基吡啶衍生物。肼衍生物用市售可得的 4-(甲基氨基)环己酮2，2-二甲基三亚甲基缩酮盐酸盐在适合的溶剂中、在对 于Fischer-吲哚合成所采用的酸性条件下缩合，产生三环环化产物。用碱 处理，产生相应的为游离碱形式的三环环化产物。游离胺用Boc-酸酐和适 合的碱在适当的溶剂中处理，在纯化后产生单-Boc保护的衍生物。

用于制备三环2-溴-6，9-二甲基-四氢-吡啶并[2，3-b]吲哚(X＝N，Y＝Br， Z＝H)(当合在一起的R¹和R²形成含有碳原子的6-元环且6-元环在相同位 置用-CH₃和NR²⁰Boc取代时)的一般合成流程。

流程9

将市售可得的4-羟基环己烷羧酸乙酯用三异丙基甲硅烷基氯在具有适 当碱的适合溶剂中处理，产生甲硅烷基-保护的化合物。酯部分用碱在适合 的溶剂中皂化，产生相应的羧酸。羧酸用过量二异丙胺锂(通过正丁基锂对 二异丙胺的作用原位制备)处理，产生阴离子，其通过加入甲基碘淬灭，以 在纯化后产生C-1甲基化羧酸。该羧酸然后通过Curtius-重排反应转化成 保护的胺。Curtius重排的异氰酸酯中间体用适当亲核试剂即叔丁醇钾在 适合的溶剂中处理，在纯化后产生所需保护的胺。保护的胺用四丁基氟化 铵在适合的溶剂中处理，在纯化后产生所需4-羟基-衍生物。羟基部分用氯 铬酸吡啶鎓在适合的溶剂中氧化，在纯化后产生相应的环己酮衍生物。酮 与适合的肼衍生物的缩合，产生腙化合物。腙化合物然后在热Fischer-吲 哚合成条件下、在适合的溶剂中处理，以产生环化产物，所述环化产物直 接用二碳酸二叔丁酯在适合的溶剂中处理。反应产生单-和二-Boc-保护的 产物的混合物，其通过色谱法分离。二-Boc衍生物通过用碱在适合的溶剂 中处理而转化成单-Boc衍生物。单-Boc衍生物用氢化钠在适合的溶剂中处 理，产生相应的钠盐，其用烷化剂处理，在纯化后产生所需产物。取决于 烷化剂的反应性，反应在室温继续进行或需要升高的温度。

用于制备三环2-溴四氢-吡啶并[2，3-b]吲哚(X＝N，Y＝Br，Z＝H)或3- 溴四氢-吡啶并[2，3-b]吲哚(X＝N，Y＝H，Z＝Br)或6-溴四氢-咔唑(X＝CH， Y＝H，Z＝Br)或7-溴四氢-咔唑(X＝CH，Y＝Br，Z＝H)构建单元(当合在一 起的R¹和R²形成含有碳原子的6-元环且6-元环用OR²⁰取代时)的一般合 成流程

流程10

将苯甲酰基保护的4-羟基环己酮用适合的肼-衍生物在适当的溶剂中 处理，产生缩合产物。将腙-衍生物在热Fischer-吲哚合成条件下使用微波 处理，在纯化后产生三环环化产物。三环产物用氢化钠在适合的溶剂中处 理，然后加入甲基碘，在纯化后产生所需产物。通过与碱在适合的溶剂中 使用微波加热，实现酯保护基的断裂，以得到所需羟基-化合物。在使用氢 化钠将羟基活化为其钠盐后，用合适烷基化剂在适当的溶剂中实现羟基- 基团的烷基化。取决于烷化剂的反应性，反应在室温或需要升高的温度继 续进行。在纯化后获得所需产物。

用于制备三环2-溴四氢-吡啶并[2，3-b]吲哚(X＝N，Y＝Br，Z＝H)或3- 溴四氢-吡啶并[2，3-b]吲哚(X＝N，Y＝H，Z＝Br)或6-溴四氢-咔唑(X＝CH， Y＝H，Z＝Br)或7-溴四氢-咔唑(X＝CH，Y＝Br，Z＝H)构建单元(当合在一 起的R¹和R²形成含有碳原子的6-元环且6-元环用OCH₃取代时)的一般合 成流程

流程11

将未保护的4-羟基环己酮用适合的甲基-肼-衍生物在适当的溶剂中处 理，产生缩合产物。将甲基-腙-衍生物在热Fischer-吲哚合成条件下使用微 波处理，在纯化后产生三环环化产物。三环产物用氢化钠在适合的溶剂中 处理，然后加入甲基碘，在纯化后产生所需产物。

用于制备本发明化合物的一般合成流程

流程12

将具有(X＝CH，Y＝N，Z＝N，W＝CH₃或TIPS)或(X＝N，Y＝CH，Z＝CH， W＝CH₃或TIPS)或(X、Z＝CH，Y＝N，W＝CH₃或TIPS)或(X、Y、Z＝CH， W＝CH₃或Boc)的N-保护的溴构建单元与具有(X、Y＝CH，s＝0)或(X＝N， Y＝CH，s＝0)或(X＝CH，Y＝N，s＝0，1，2)的适合胺或胺构建单元利用Pd- 偶联化学、用适当的Pd-催化剂和适当的配体、在适合的溶剂中反应，在 纯化后产生所需胺化产物。N-TIPS保护的化合物用四正丁基氟化铵在适 合的溶剂中脱保护，在纯化后获得所需化合物。N-未保护的化合物用氯化 氢在适合的溶剂中处理，产生最终化合物。对于具有W＝CH₃或Boc的化 合物，用氯化氢在适合的溶剂中处理，产生最终化合物。

用于制备本发明化合物的一般合成流程。

流程13

将N-保护的溴构建单元(Y＝CH，W＝CH₃，TIPS或Boc或Y＝N，W＝CH₃或TIPS)与具有(X、Z＝CH)或(X＝N，Z＝CH)的适合胺或胺构建单元利用 Pd-偶联化学、用适当的Pd-催化剂和适当的配体、在适合的溶剂中反应， 在纯化后产生所需胺化产物。用N-TIPS保护的化合物用四正丁基氟化铵 在适合的溶剂中脱保护，在纯化后获得所需化合物。N-未保护的化合物用 氯化氢在适合的溶剂中处理，产生最终化合物。对于具有W＝CH₃或Boc 的化合物，用氯化氢在适合的溶剂中处理，产生最终化合物。

用于制备本发明化合物的一般合成流程。

流程14

将具有(X＝CH，Y＝N，W＝CH₃或TIPS)或(X＝N，Y＝CH，W＝CH₃或 TIPS)或(X、Y＝CH，W＝CH₃或TIPS)的N-保护的溴构建单元与具有 (Z＝CH，W＝H或CH₃或TIPS)或(Z＝N，W＝H或CH₃或TIPS)的适合胺 构建单元利用Pd-偶联化学、用适当的Pd-催化剂和适当的配体、在适合的 溶剂中反应，在纯化后产生所需胺化产物。N-TIPS保护的化合物用四正 丁基氟化铵在适合的溶剂中脱保护，在纯化后获得所需化合物。N-未保护 的化合物用氯化氢在适合的溶剂中处理，产生最终化合物。对于具有(W＝H 或CH₃)的化合物，用氯化氢在适合的溶剂中处理，产生最终化合物。

用于制备本发明化合物的一般合成流程。

流程15

将具有(X＝CH，W＝CH₃或TIPS)或(X＝N，W＝CH₃或TIPS)的N-保护 的溴构建单元与具有(Z＝CH，W＝H或CH₃或TIPS)或(Z＝N，W＝H或CH₃或TIPS)的适合胺构建单元利用Pd-偶联化学、用适当的Pd-催化剂和适当 的配体、在适合的溶剂中反应，在纯化后产生所需胺化产物。N-TIPS保 护的化合物用四正丁基氟化铵在适合的溶剂中脱保护，在纯化后获得所需 化合物。N-未保护的化合物用氯化氢在适合的溶剂中处理，产生最终化合 物。对于具有(W＝H或CH₃)的化合物，用氯化氢在适合的溶剂中处理，产 生最终化合物。

用于制备2-溴-四氢-吡啶并[2，3-b]吲哚构建单元(当合在一起的R¹和 R²形成含有碳原子的(n+4)-元环时)的一般流程

流程16

将市售可得的2，6-二溴吡啶用肼衍生物(R＝H，CH₃)在适合的溶剂中处 理，产生单肼衍生物。与适当的环状酮在适合的溶剂中缩合，产生所需腙 化合物。热Fischer-吲哚合成，在纯化后产生三环环化产物。

用于制备三环7-溴四氢-吡啶并[4，3-b]吲哚(X＝Br，Y＝H)或8-溴四氢- 吡啶并[4，3-b]吲哚(X＝H，Y＝Br)构建单元(当合在一起的R¹和R²形成含有 碳原子和NR²⁰的(n+4)-元环时)的一般合成流程

流程17

将市售可得的苯基肼衍生物用适当的环状酮在适合的溶剂中处理，产 生所需腙化合物。Fischer-吲哚合成，在纯化后产生三环环化产物。三环衍 生物用氢化钠在适合的溶剂中处理，然后用适当的卤化烷基处理，产生相 应的N-烷基化产物。随后通过在适当的溶剂中在回流条件下加入氢氧化钠 而实现氨基甲酸酯衍生物的脱保护，以产生所需化合物。最后，通过用氢 化钠处理脂族NH衍生物、然后加入适当的卤化烷基、在适合的溶剂中对 它们衍生化，以产生所需三环衍生物。

用于制备三环2-溴-四氢-吡咯并[2，3-b：4，5-c′]二吡啶(X＝N，Y＝H， Z＝Br)、3-溴-四氢-吡咯并[2，3-b：4，5-c′]二吡啶(X＝N，Y＝Br，Z＝H)、7-溴四 氢-吡啶并[4，3-b]吲哚(X＝CH，Y＝H，Z＝Br)或8-溴四氢-吡啶并[4，3-b]吲哚 (X＝CH，Y＝Br，Z＝H)构建单元(当合在一起的R¹和R²形成含有碳原子和 NR²⁰的(n+4)-元环时)的一般合成流程

流程18

市售可得的肼衍生物用适当的环状酮在适合酸的存在下、在适合的溶 剂中处理，通过酸性Fischer-吲哚合成，在纯化后产生所需化合物。

用于制备三环2-溴-四氢噻喃并[3′，4′：4，5]-吡咯并[2，3-b]吡啶-6，6-二氧 化物(X＝Br，Y＝H)或3-溴-四氢噻喃并[3′，4′：4，5]-吡咯并[2，3-b]吡啶-6，6-二 氧化物(X＝H，Y＝Br)构建单元(当合在一起的R¹和R²形成含有碳原子和 SO₂的(n+4)-元环时)的一般合成流程

流程19

市售可得的苯基肼衍生物用适合的环状酮在适合的溶剂中处理，产生 所需腙化合物。Fischer-吲哚合成，在纯化后产生三环环化产物。三环衍生 物用氢化钠在适合的溶剂中处理，然后用适当的卤化烷处理，产生相应的 N-烷基化产物。随后硫衍生物使用适当的氧化剂氧化，产生所需砜化合物。

用于制备卤化烷基砜的一般合成流程

流程20

市售可得的甲硫基醇衍生物用适当的氧化剂在适合的溶剂中处理，产 生所需羟基砜衍生物。伯醇化合物使用Appel条件在适合的溶剂中转化成 相应的卤素衍生物。

所有试剂和溶剂均获自商业来源且不经进一步纯化即使用。经400 MHz NMR光谱仪在氘化溶剂中记录质子(¹H)光谱。经Finnigan MAT TSQ 7000光谱仪记录质谱(MS)。借助Biotage Isolera One快速纯化系统、利用 HP-Sil SNAP柱(Biotage)和特定实施例中所示的溶剂梯度进行快速纯化。 用UV检测、经硅胶板进行薄层色谱法(TLC)。利用0.5mm或1mm硅胶 板(Analtech：Uniplate，F₂₅₄)和特定实施例中所示的溶剂进行制备型薄层色 谱法(Prep-TLC)。

尽管本发明化合物能够单独施用，但是优选根据标准制药法将其制备 为药物组合物。因此，本发明也提供了药物组合物，它含有治疗有效量的 式(I)化合物与可药用赋形剂的混合物。

所述可药用的赋形剂是制药领域中众所周知的，描述于例如 Remington′s Pharmaceutical Sciences，第15版，Mack Publishing Co.， New Jersey(1991)。所述药用赋形剂可以根据预期施用途径以及标准制药准 则选择。所述赋形剂在对其受者无害的意义上一定是可接受的。

在本发明药物组合物的制剂中可以使用的可药用赋形剂可以包括例如 载体、媒介物、稀释剂、溶剂(例如一元醇类如乙醇、异丙醇和多元醇类如 二元醇)以及可食用油类(例如大豆油、椰子油、橄榄油、红花油、棉籽油)， 油性酯类(例如油酸乙酯、豆蔻酸异丙基酯)、粘合剂、辅助剂、增溶剂、 增稠剂、稳定剂、崩解剂、助流剂、润滑剂、缓冲剂、乳化剂、润湿剂、 混悬剂、甜味剂、着色剂、矫味剂、包衣剂、防腐剂、抗氧剂、加工助剂、 药物传递改良剂以及增强剂，例如磷酸钙、硬脂酸镁、滑石粉、寡糖类、 二糖类、淀粉、明胶、纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、葡萄糖、 羟丙基-β-环糊精、聚乙烯吡咯烷酮、低熔点蜡类和离子交换树脂。

本发明化合物的施用(传递)途径包括但不限于下列一种或多种：口服 (例如以片剂、胶囊或可摄食溶液形式)、局部、粘膜(例如以鼻用喷雾剂或 吸入用气溶胶)、鼻腔、肠胃外(例如通过可注射用形式)、胃肠道、脊柱内、 腹膜内、肌肉内、静脉内、子宫内、眼内、皮内、颅内、气管内、阴道内、 脑室内、大脑内、皮下、眼睛(包括玻璃体内或前房内(intracameral))、透 皮、直肠、颊内、硬膜外和舌下。

例如，化合物可以以片剂、胶囊、胚珠(ovules)、酏剂、溶液剂或混悬 剂形式施用，它们可以含有矫味剂或着色剂，用于速释、延释、调释、缓 释、脉冲释放或控释应用。

片剂可以含有赋形剂，如微晶纤维素、乳糖、柠檬酸钠、碳酸钙、磷 酸二钙和甘氨酸，崩解剂，例如淀粉(优选玉米淀粉、马铃薯淀粉或木薯淀 粉)、羟乙酸淀粉钠、交联羧甲纤维素钠和某些硅酸复合物，和制粒粘合剂， 例如聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、羟丙基纤维素(HPC)、 蔗糖、明胶和阿拉伯胶。另外，还可以包括润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂 酸、山嵛酸甘油酯和滑石粉。相似类型的固体组分也可以用作明胶胶囊的 填充剂。这方面的优选赋形剂包括乳糖、淀粉、纤维素、乳糖(milk sugar) 或高分子量聚乙二醇。对于水性混悬液和/或酏剂而言，活性剂可以与下列 成分混合使用：各种甜味剂或矫味剂、着色剂或染料，乳化剂和/或混悬剂 以及稀释剂如水、乙醇、丙二醇和甘油及其组合。

如果本发明化合物经胃肠外施用，则此类施用的实例包括下列一种或 多种：静脉内、动脉内、腹膜内、鞘内、心室内、尿道内、胸骨内 (intrasternally)、颅内、肌内或皮下给于化合物；和/或输注技术。对于肠 胃外施用而言，化合物最好以无菌水溶液的形式使用，所述水溶液可以含 有其它物质，例如足量的盐或葡萄糖以使得所述溶液与血液等渗。如果需 要，所述水溶液可以经过适当缓冲(优选至pH为3-9)。无菌条件下适当的 胃肠外制剂的制备通过本领域技术人员熟知的标准制药准则可以容易地完 成。

如上所述，本发明化合物可以经鼻腔施用或者通过吸入施用，可以以 干粉吸入器的形式方便传递，或者使用适宜的抛射剂自加压容器、泵、喷 雾器或雾化器中以气溶胶喷雾形式传递，所述抛射剂例如二氯二氟甲烷、 三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、氢氟烷烃(例如1，1，1，2-四氟乙烷(HFA134AT) 或1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷(HFA 227EA))、二氧化碳或其它适当的气体。在 加压气溶胶的情况下，剂量单位可以通过阀门所传递的计量的量而确定。 加压容器、泵、喷雾器或雾化器可以含有活性化合物的溶液或混悬液，例 如采用作为溶剂的乙醇和抛射剂的混合物，它们可以另外含有润滑剂，例 如脱水山梨醇三油酸酯。在吸入器或吹入器中使用的胶囊和药筒 (cartridge)(例如由明胶制备)可以制备为含有化合物和适当粉末基质如乳 糖或淀粉的粉末混合物。

或者，本发明化合物可以以栓剂或阴道栓的形式施用，或者它可以以 凝胶、水凝胶、洗剂、溶液剂、霜剂、软膏或粉剂(dusting powder)的形式 局部应用。本发明化合物也可以经皮或透皮施用，例如通过使用皮肤贴剂 施用。

它们也可以通过肺部或直肠途径施用。它们也可以通过眼睛途径施用。 对于眼部使用，化合物可以在等渗、pH调节的无菌盐水中制备为微粉化 混悬液，或者优选在等渗、pH调节的无菌盐水中制备为溶液，任选其还 含有防腐剂如苯扎氯铵。或者，它们可以制备为软膏，例如凡士林。

对于皮肤局部应用而言，本发明化合物可以制备为适当的软膏，它含 有混悬于或溶于例如由下列一或多种成分组成的混合物中的活性化合物： 矿物油、液体石蜡、白石蜡、丙二醇、乳化的蜡和水。或者，它们可以制 备为适当的洗剂或霜剂，混悬于或溶于例如由下列一或多种成分组成的混 合物中：矿物油、脱水山梨醇单硬脂酸酯、聚乙二醇、液体石蜡、吐温60、 十六烷基酯蜡、十六烷醇、2-辛基十二醇、苄醇和水。

通常，医师可以确定最适合个体患者的实际剂量。任何特定个体的特 殊剂量水平和施用频率可以改变，且取决于多种因素，包括：所用特定化 合物的活性、化合物的代谢稳定性和作用时间长短、年龄、体重、一般健 康情况、性别、饮食、施用模式和时间、排泄频率、药物组合、特定病症 的严重程度以及个体所经过的治疗。

对于人类(体重约70Kg)施用而言，本发明化合物的建议剂量是每单位 剂量为0.1mg至1g、优选1mg至500mg活性成分。所述单位剂量可以每 天施用例如1-4次。剂量取决于施用的途径。可以理解的是，必须根据患 者的年龄和体重以及待治疗疾病的严重程度对剂量进行日常调节。精确的 剂量和施用途径最好要由主治医师或兽医师判断。

本发明化合物也可以与其它治疗成分组合应用。当本发明化合物与第 二种对抗相同疾病的治疗活性成分组合应用时，每一化合物的剂量可以与 所述化合物单独使用的剂量有所不同。

上述组合应用可以方便地以药物制剂的形式使用。此类组合的各个成 分可以通过任何便利的途径顺序施用，或在分别或组合的药物制剂中同时 施用。当顺序施用时，本发明化合物或第二种治疗成分均可以首先施用。 当同时施用时，所述组合可以以相同或不同的药物组合物施用。当在相同 制剂中组合时，可以理解，两种化合物必须是稳定的并且彼此以及与制剂 中其它成分相容。当分别制成制剂时，它们可以以现有技术中这类化合物 已知的方式方便地以任何适当的制剂形式提供。

本发明药物组合物可以根据本领域技术人员已知的方法制备，例如描 述于Remington′s Pharmaceutical Sciences，第15版，Mack Publishing Co.， New Jersey(1991)。

可以采用本发明化合物治疗的疾病可能与异常蛋白结构的形成有关， 特别是异常β-折叠结构有关。在本发明的范围内，异常蛋白结构为当蛋白 或肽自健康个体中通常存在的三维结构再摺起形成与病理状况有关的不同 的三维结构时而产生的蛋白结构。同样，本发明范围内的异常β-折叠结构 为当蛋白或肽自健康个体中通常存在的三维结构再摺起形成与病理状况有 关的β-折叠结构时产生的β-折叠结构。

特别是，在一个实施方案中，可以采用本发明化合物治疗的疾病为与 淀粉状蛋白或淀粉状蛋白样蛋白有关的疾病或病症。

该组疾病和病症包括神经病症如阿尔茨海默病(AD)，特征在于认知记 忆能力损伤的疾病或病症如轻度认知功能损害(MCI)，路易体痴呆，唐氏 综合征，遗传性脑出血伴淀粉样变(荷兰型)；关岛帕金森痴呆综合征。基 于或与淀粉状蛋白样蛋白有关的其它疾病为进行性核上麻痹、多发性硬化 症、克-雅氏病、帕金森病、HTV-相关痴呆、ALS(肌萎缩侧索硬化)、包涵 体肌炎(IBM)、成人发病型糖尿病；老年性心脏淀粉样变；内分泌肿瘤及 其它疾病，包括在眼睛不同组织中发生的淀粉状蛋白-相关眼病，例如在视 觉皮层中，包括皮层视觉不足；在前房和视神经中，包括青光眼；在晶状 体中，包括由于β-淀粉状蛋白沉积而导致的白内障；在玻璃体中，包括眼 部淀粉样变；在视网膜中，包括原发性视网膜变性和黄斑变性，特别是年 龄相关黄斑变性；在视神经中，包括视神经玻璃疣、视神经病变和视神经 炎；在角膜中，包括网格状营养不良。

在优选的实施方案中，本发明化合物可以用于治疗阿尔茨海默病、轻 度认知功能损害(MCI)、路易体痴呆(LBD)、肌萎缩侧索硬化(ALS)、包涵 体肌炎(IBM)和年龄相关黄斑变性(AMD)。在特别优选的实施方案中，本 发明化合物可以用于治疗阿尔茨海默病。

化合物抑制Aβ积聚的性能可以例如采用描述于下列文献中的荧光相 关光谱测定：Rzepecki等，J.Biol.Chem.，2004，279(46)，47497-47505， 或者通过采用硫黄素(thiaflavin)T荧光分析法测定。

在另一个实施方案中，本发明化合物可以用于治疗或减轻与视觉系统 组织中病理异常/改变有关的眼病的作用，特别是与视觉系统组织中β-淀粉 状蛋白相关病理异常/改变有关的眼病，例如，神经元退化。所述病理异常 可以发生例如在不同的眼组织中，例如发生在视觉皮层中导致皮层视觉不 足；发生在前房和视神经中导致青光眼；发生在晶状体中导致由于β-淀粉 状蛋白沉积而产生的白内障；发生在玻璃体中导致眼部淀粉样变；发生在 视网膜中导致原发性视网膜变性和黄斑变性，例如年龄相关黄斑变性；发 生在视神经中导致视神经玻璃疣、视神经病变和视神经炎；发生在角膜中 导致网格状营养不良。

本发明化合物也可以以混合物的形式提供，所述混合物含有至少一种 其它生物学活性化合物和/或可药用的载体和/或稀释剂和/或赋形剂。化合 物和/或其它生物学活性化合物优选以治疗有效量存在。

其它生物学活性化合物的性能取决于所述混合物的预期使用。其它生 物学活性物质或化合物可以通过与本发明化合物相同或相似的作用机制发 挥其生物学作用，或者通过无关的作用机制或通过多重相关和/或无关作用 机制而发挥作用。

通常，其它生物学活性化合物可以包括神经传递促进剂、精神治疗药 物、乙酰胆碱酯酶抑制剂、钙-通道阻断剂、生物胺类、苯并二氮杂镇静 剂、乙酰胆碱合成、储存或释放促进剂、乙酰胆碱突触后受体激动剂、单 胺氧化酶-A或-B抑制剂、N-甲基-D-天冬氨酸谷氨酸受体拮抗剂、非甾体 抗炎药、抗氧剂和5-羟色胺能受体拮抗剂。特别的是，其它生物学活性化 合物可以选自下组：用于治疗淀粉样变的化合物、对抗氧化应激的化合物、 抗凋亡化合物、金属螯合剂、DNA修复抑制剂(例如哌仑西平和代谢产物)， 3-氨基-1-丙磺酸(3APS)，1，3-丙二磺酸盐(1，3PDS)、α-分泌酶激活剂、β-和 γ-分泌酶抑制剂、τ蛋白、神经递质、β-折叠分裂剂、β-淀粉状蛋白清除/ 消耗细胞成分诱导剂、N-末端截去β-淀粉状蛋白(包括焦谷氨酸盐化的β 淀粉状蛋白3-42)的抑制剂、抗炎分子或胆碱酯酶抑制剂(ChEI)(如他克林、 雷司替明(rivastigmine)、多奈哌齐和/或加兰他敏)、M1激动剂、其它药物， 包括任何淀粉状蛋白或τ调节药物以及营养性补充剂、抗体(包括任何功能 性等同抗体或其功能部分)、由源自Aβ肽N-末端部分的多个相邻氨基酸残 基的单链或重复链组成的Aβ抗原肽片段。

在另一个实施方案中，本发明混合物可以含有烟酸或美金刚胺以及本 发明化合物，还含有任选的可药用载体和/或稀释剂和/或赋形剂。

在另一个实施方案中，提供了本发明混合物，它含有其它生物学活性 化合物“非典型抗精神病药”，例如氯氮平(clozapine)、齐拉西酮 (ziprasidone)、利培酮(risperidone)、阿立哌唑(aripiprazole)或奥氮平 (olanzapine)，用于治疗阳性和阴性精神病症状，包括幻觉、妄想、思想疾 病(明显的语无伦次、游离、词不达义)和怪异或行为紊乱以及兴致缺乏、 情感冷漠、情感淡漠和社交退缩，它还含有本发明化合物以及任选的可药 用载体和/或稀释剂和/或赋形剂。

可以适合用于与本发明化合物组合的混合物中的其它化合物描述于例 如WO 2004/058258(特别参见第16和17页)，包括治疗药物靶(第36-39页)、 链烷磺酸和链烷醇硫酸(第39-51页)、胆碱酯酶抑制剂(第51-56页)、NMDA 受体拮抗剂(第56-58页)、雌激素类(第58-59页)、非甾体抗炎药(第60和 61页)、抗氧剂(第61和62页)、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)激动 剂(第63-67页)、降胆固醇药物(第68-75页)、淀粉状蛋白抑制剂(第75-77 页)、淀粉状蛋白形成抑制剂(第77-78页)、金属螯合剂(第78和79页)、抗 精神病和抗抑郁药物(第80-82页)、营养补充剂(第83-89页)和提高脑内生 物学活性物质利用度的化合物(参见第89-3页)和前药(第93和94页)，这 些文献均通过引用并入本文。

在一个优选的实施方案中，其它生物学活性化合物为抗体，包括任何 功能性等同抗体或其功能部分。所述抗体可以优选为单克隆抗体、嵌合抗 体或人源化抗体。

本发明的另一方面，提供了混合物，除了本发明化合物外，混合物还 含有抗体，包括其功能部分，或者更具体地，还含有单克隆抗体，包括其 功能部分，它能够识别并结合β-淀粉状蛋白(Aβ)，特别是天然构象的β-淀 粉状蛋白，即淀粉状蛋白低聚物和纤维，但是不与非线性化的淀粉状蛋白 种类结合。

特别是，所述抗体能够在体外和体内抑制产生淀粉状蛋白的单体肽积 聚为高分子聚合淀粉状蛋白原纤维或丝状体，所述产生淀粉状蛋白的单体 肽特别是β-淀粉状蛋白单体肽，例如Aβ单体肽1-39、1-40、1-41、1-42 或1-43，但是特别是Aβ1-42单体肽。通过抑制产生淀粉状蛋白的单体肽 的积聚，这些抗体能够防止或减缓淀粉状蛋白斑块的形成，特别是淀粉状 蛋白形式(1-42)的形成，已知其通过二级构象的改变而变得不溶，是患病动 物或人类脑中淀粉状蛋白斑块的主要部分。

在本发明的另一方面，所述混合物含有抗体，当与预成型的高分子聚 合淀粉状蛋白原纤维或丝状物(由淀粉状蛋白单体肽的积聚形成，特别是β- 淀粉状蛋白单体肽，例如Aβ单体肽1-39、1-40、1-41、1-42或1-43，但 是特别是Aβ1-42单体肽)共同温育时，它们能够解聚所述高分子聚合淀粉 状蛋白原纤维或丝状物。通过解聚产生淀粉状蛋白的聚合原纤维或丝状体， 这些抗体能够防止或减缓淀粉状蛋白斑块的形成，这能够使得与疾病相关 的症状缓解并能够延迟或逆转其进展。

在本发明的另一方面，所述混合物含有抗体，但是特别是单克隆抗体 或其功能部分，所述抗体为双功能化的或者双特异性的，从而其具有本文 中前面所定义的积聚抑制特性以及解聚特性，特别是伴有高度构象敏感性。

在一个实施方案中，所述混合物含有抗体，它能够识别并结合构象表 位，特别是在β淀粉样肽的N-末端部分中存在的构象表位，尤其是嵌入β 淀粉样肽的N-末端部分的下列核芯区域的那些：

Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-

12  13  14  15  16  17  18  19  20  21  22  23

特别地，表位位于氨基酸残基12-24之间、特别是残基14-23之间、 更特别在氨基酸残基14-20之间的β-淀粉状蛋白区域，包含3个明显的识 别和结合位点，所述残基以绝对优势参与β-淀粉状蛋白的结合，分别位于 16、17位，19和20位以及14位。

在具体的实施方案中，本发明的混合物除了本发明化合物外还含有抗 体，特别是双功能抗体，特别是单克隆抗体，尤其是双功能单克隆抗体， 包括任何功能性等同抗体或其功能部分，所述抗体具有由杂交瘤细胞系产 生的抗体特性，所述细胞系分别选自：2005年12月1日和2005年12月9 日以DSM ACC2752、DSM ACC 2750和DSM ACC2751保藏的FP 12H3、 FP 12H3-C2和FP 12H3-G2，2005年12月8日以DSM ACC2755保藏的 ET 7E3，2005年12月8日以DSM ACC2756保藏的EJ 7H3。

更特别的是，本发明涉及抗体，包括任何功能等同的抗体或其功能部 分，由杂交瘤细胞系产生，所述细胞系分别选自：2005年12月1日和2005 年12月9日以DSM ACC2752、DSMACC 2750和DSM ACC2751保藏的 FP 12H3、FP 12H3-C2和FP 12H3-G2，2005年12月8日以DSM ACC2755 保藏的ET 7E3，2005年12月8日以DSM ACC2756保藏的EJ 7H3。

上述抗体描述于公开的国际申请WO 2007/068412，它通过引用并入 本文。

另一方面，本发明混合物中含有的抗体为嵌合抗体或其片段，或者为 人源化抗体或其片段。适用于本发明混合物的这些和其它抗体描述于例如 2007年7月13日提交的国际申请PCT/US2007/073504。

如果抗体为人源化抗体，它优选具有国际申请No. PCT/US2007/073504的SEQ ID No.2和SEQ ID No.4中所描述的轻链和重 链，或具有国际申请No.PCT/US2007/073504的SEQ ID No.1和SEQ ID No.3中所描述的轻链可变区以及重链可变区。这些序列也列示于随附的序 列表中。

在本发明的另一方面，提供了混合物，其除了本发明化合物以及本文 中前面所述的化合物外，还含有源自Aβ肽的N-末端部分的肽片段，特别 是由源自Aβ肽的N-末端部分的13-15个相邻氨基酸残基的单链或重复链 组成的Aβ肽片段，特别是由选自下列的氨基酸残基组成的Aβ肽片段：源 自Aβ肽的N-末端部分的残基1-15、1-14和1-13，更特别是残基1-15，包 括其功能性等同片段，尤其是本文中前面所述的Aβ肽片段，它附着于、 掺入或重构于载体颗粒/辅助剂如脂质体。所述肽片段可以包含在疫苗组合 物中。特别是，所述肽抗原经过亲脂性部分或疏水性部分的修饰，这有助 于插入脂质体载体/免疫辅助剂的脂质双层，特别是经过这样的亲脂性部分 或疏水性部分的修饰，其作为肽在脂质体双层中的锚钩且其大小能够使得 所述肽被定位并稳定在紧邻脂质体的表面。

在本发明的另一个实施方案中，所述亲脂性部分或疏水性部分为脂肪 酸、甘油三酯或磷脂，特别是脂肪酸、甘油三酯或磷脂。特别的是，疏水 性部分为棕榈酸，脂质体制剂可以另外含有辅助剂，例如脂质A、明矾、 磷酸钙、白介素1和/或多糖和蛋白的微囊，特别是脱毒类脂A，例如单磷 酰基或二磷酰基类脂A或明矾。

可以适用于本发明混合物中的这些和其他组分描述于例如公开的国际 申请WO 2007/068411。

患者中淀粉状蛋白相关疾病或病症的诊断或者患者中淀粉状蛋白相关 疾病或病症倾向性的诊断，可以通过测定本发明化合物与淀粉状蛋白在样 本中或原位的特异结合而实现，它包括使疑似含有淀粉状蛋白抗原的样本 或特定机体部分或机体区域与结合淀粉状蛋白的本发明化合物接触，使得 本发明化合物与淀粉状蛋白结合以形成化合物/蛋白复合物，测定化合物/ 蛋白复合物的形成，将存在或不存在化合物/蛋白复合物与样本或特定机体 部分或区域中存在或不存在淀粉状蛋白相关联，任选将所述化合物/蛋白复 合物的量与正常对照值进行比较，其中与正常对照值相比较的所述积聚体 的量的增加可以说明所述患者患有或处危发展淀粉状蛋白相关疾病或病 症。

采用本发明化合物或混合物治疗后患者中最小残留疾病的监测可以通 过测定本发明化合物与淀粉状蛋白在样本中或原位的特异结合而实现，它 包括使疑似含有淀粉状蛋白抗原的样本或特定机体部分或机体区域与结合 淀粉状蛋白的本发明化合物接触，使得所述化合物与淀粉状蛋白结合以形 成化合物/蛋白复合物，测定化合物/蛋白复合物的形成，将存在或不存在 化合物/蛋白复合物与样本或特定机体部分或区域中存在或不存在淀粉状 蛋白相关联，任选将所述化合物/蛋白复合物的量与正常对照值进行比较， 其中与正常对照值相比较的所述积聚体的量的增加可以说明所述患者可能 仍然患有最小残留疾病。

患者对于本发明化合物或组合物或混合物的响应性的预测可以通过测 定本发明化合物与淀粉状蛋白在样本中或原位的特异结合而实现，它包括 使疑似含有淀粉状蛋白的样本或特定机体部分或机体区域与结合淀粉状蛋 白的本发明化合物接触，使得所述化合物与淀粉状蛋白结合以形成化合物/ 蛋白复合物，测定化合物/蛋白复合物的形成，将存在或不存在化合物/蛋 白复合物与样本或特定机体部分或区域中存在或不存在淀粉状蛋白相关 联，任选比较治疗前和治疗开始后所述化合物/蛋白复合物的量，其中所述 积聚体的量的降低可以说明所述患者对治疗具有高响应性。

在本发明的另一方面，式(I)化合物可含有放射性核素(例如¹²⁵I、¹²⁴I、 ¹²³I或¹⁸F)。这些化合物可以用于体内诊断或成像淀粉状蛋白相关疾病，优 选阿尔茨海默病，例如在如单光子发射计算机断层摄影术(SPECT成像)或 正电子发射断层摄影术(PET)的方法中。

在放射性药物应用中，本发明化合物优选以含有本发明化合物的放射 性药物制剂施用。“放射性药物制剂”在本发明中被定义为适用于向哺乳动 物例如人施用的形式的含有本发明化合物(例如式(I)化合物或其盐)的制 剂。优选放射性药物制剂还含有生理上可接受的赋形剂。优选通过注射水 溶液形式的制剂进行施用。这种制剂可任选地含有其它成分例如缓冲剂； 可药用增溶剂(例如环糊精或表面活性剂，例如普郎尼克(Pluronic)、吐温 (Tween)或磷脂)；可药用的稳定剂或抗氧化剂(例如抗坏血酸、龙胆酸或对 氨基苯甲酸)。本发明化合物的剂量将根据待施用的精确化合物、患者体重、 和对本领域熟练医师而言是显而易见的其它变量而变化。一般而言，剂量 将在0.001μg/kg至10μg/kg、优选0.01μg/kg至1.0μg/kg的范围内。

用于淀粉状蛋白相关疾病或病症诊断或者用于淀粉状蛋白相关疾病或 病症倾向性诊断或者用于患者最小残留疾病监测或者用于预测患者对本发 明及如本文中前面所述的化合物或组合物或混合物治疗应答性的生物学样 本为例如：体液，例如血清、血浆、唾液、胃分泌液、粘液、脑脊液、淋 巴液等或获自有机体的组织或细胞样本，例如神经、脑、心脏或血管组织。 为了测定样本中淀粉状蛋白的存在与否，可以采用本领域技术人员已知的 任何免疫测定方法(参见Harlow和Lane，Antibodies：A Laboratory Manual(Cold Spring Harbor Laboratory，纽约，1988，555-612)，例如， 利用间接检验方法、采用第二种试剂测定的分析方法，ELISA分析方法以 及免疫沉淀和凝聚分析方法。这些分析方法的详细描述例如参见Maertens 和Stuyver的WO96/13590、Zrein等(1998)和WO96/29605。

对于原位诊断而言，本发明以及如上所述的化合物或组合物或混合物 可以通过本领域已知方法施用于待诊断的有机体，例如，可以采用静脉内、 鼻腔内、腹膜内、脑内、动脉内注射施用，从而使得本发明化合物与淀粉 状蛋白抗原之间的特异性结合可以发生。化合物/蛋白复合物可以通过与化 合物结合的标记物测定。

在诊断应用中使用的或者或者在淀粉状蛋白相关疾病或病症倾向性诊 断应用中使用的或者在监测患者最小残留疾病中使用的或者在预测患者对 本发明及上述化合物或组合物或混合物治疗应答性中使用的免疫分析方法 通常有赖于用于测定的标记的抗原、抗体或第二种试剂。这些蛋白或试剂 可以采用本领域技术人员通常已知的化合物标记，所述化合物包括酶、放 射性同位素以及荧光性、发光性和发色物质，包括染色的颗粒，例如胶体 金和乳胶珠。其中，放射活性标记可以用于几乎所有类型的分析，并且可 以进行最大化的变通。当必须避免放射活性时，或者当需要快速获得结果 时，酶-缀合的标记物特别适用。尽管它们使用时需要昂贵的设备，但是荧 光染料提供了非常敏感的测定方法。在这些分析中使用的抗体包括单克隆 抗体、多克隆抗体和亲和性纯化的多克隆抗体。

或者，本发明化合物可以通过与标记物反应而间接标记，所述标记物 对免疫球蛋白具有亲和性，例如蛋白A或G或第二抗体。抗体可以与第二 种物质缀合，采用对与抗体缀合的第二种物质具有亲和性的标记的第三种 物质进行测定。例如，所述抗体可以与生物素缀合，所述抗体-生物素缀合 物可以采用标记的抗生物素蛋白或链霉抗生物素蛋白测定。类似地，所述 抗体可以与半抗原缀合，所述抗体-半抗原缀合物可以采用标记的抗-半抗 原抗体测定。

本领域技术人员了解这些和其它适当的本发明中可使用的标记物。这 些标记物与抗体或其片段的结合可以采用本领域技术人员所熟知的标准技 术完成。典型技术描述于Kennedy，J.H.等1976(Clin.Chim.Acta 70：1-31) 和Schurs，A.H.W.M.等1977(Clin.Chim Acta 81：1-40)。后面所述偶合技 术为戊二醛方法、高碘酸盐方法、二马来酰亚胺法等，所有这些方法通过 引用并入本文。

目前的免疫测定方法采用双抗体方法测定分析物的存在，其中抗体通 过与第二种抗体的反应性而间接标记，所述第二种抗体已标记有检测标记 物。第二种抗体优选能够与动物抗体结合的抗体，单克隆抗体衍生自所述 动物抗体。换句话说，如果所述单克隆抗体为鼠抗体，则标记的、第二种 抗体为抗-鼠抗体。对于下述分析中使用的单克隆抗体而言，所述标记物优 选为抗体包被的珠，特别是磁珠。对于本文中所述的免疫测定方法中使用 的多克隆抗体而言，标记物优选为可检测的分子，例如放射活性物质、荧 光物质或电化学发光物质。

可供选择的双抗体系统通常是指快速格式系统(fast format system)， 因为它们适合于快速测定分析物的存在，所述系统也可以应用在本发明的 范围内。所述系统要求抗体和分析物之间存在高亲和性。根据本发明的一 个实施方案，淀粉状蛋白抗原的存在可以采用抗体对测定，每一个均对淀 粉状蛋白抗原具有特异性。所述抗体对中的一个在本文中称为“检测抗体”， 所述抗体对中的另一个在本文中称为“捕获抗体”。所述单克隆抗体可以用 作捕获抗体或者用作检测抗体。所述单克隆抗体在单一分析中既可以用作 捕获抗体也可以用作检测抗体。因此，本发明的一个实施方案使用双抗体 夹层法测定生物体液样本中的淀粉状蛋白抗原。在所述方法中，分析物(淀 粉状蛋白抗原)被夹于检测抗体和捕获抗体之间，捕获抗体不可逆地固定在 固体载体上。检测抗体含有可检测的标记，从而可以鉴别抗体-分析物夹层 的存在，因而可以测定分析物的存在。

示例性的固相物质包括但不限于微量板、聚苯乙烯试管、磁珠、塑料 珠或玻璃珠以及载玻片，它们在放射免疫分析和酶免疫分析中是众所周知 的。将抗体偶合至固相的方法也是本领域技术人员所熟知的。近来，多种 多孔材料已经被用作固体载体，例如尼龙、硝基纤维素、乙酸纤维素、玻 璃纤维和其它多孔聚合物。

在组织和/或体液(例如患有眼病的动物特别是哺乳动物尤其是人类的 视网膜神经节细胞层，所述眼病与视觉系统组织中的病理异常/改变有关， 特别是与视觉系统组织中的β-淀粉状蛋白相关病理异常/改变有关)中的斑 的量可以根据本领域已知方法计算，所述方法例如公开于Ding，J.-D.等， “Targeting age-related macular degeneration with Alzheimer’s disease based immunotherapies：Anti-amyloid-b antibody attenuates pathologies in an age-related maculardegeneration mouse model”，Vision Research(2007)，doi：10.1016/j.visres.2007.07.025。

本发明化合物也可以掺入检测试剂盒用于检测淀粉状蛋白。所述检测 试剂盒通常包括盛放一或多种本发明化合物的容器以及如何使所述化合物 与淀粉状蛋白结合形成化合物/蛋白复合物结合并检测化合物/蛋白复合物 的形成的说明书，从而将化合物/蛋白的存在与否与淀粉状蛋白的存在与否 相关联。

术语“检测试剂盒”通常是指本领域中已知的任何诊断试剂盒。更具 体地讲，后面的术语是指Zrein等(1998)所述的诊断试剂盒。

可以使用本领域中已知的任何适合测定来测量本发明化合物对Aβ_1-42积聚的抑制。描述了用于测量对积聚的抑制的标准体外测定。

在下面实施例中描述了抑制Aβ_1-42积聚的本发明化合物的合成及其生 物活性测定，这些实施例决不意指为限制性的。

实施例

所有试剂和溶剂均获自商业来源且不经进一步纯化即可使用。经400 MHz NMR光谱仪在氘化溶剂中记录质子(¹H)光谱。经Finnigan MAT TSQ 7000光谱仪记录质谱(MS)。使用硅胶(Fluka：Silica gel 60，0.063-0.2mm) 和在特定实施例中所示的适合溶剂进行色谱法。利用HP-Sil SNAP柱 (Biotage)和特定实施例中所示的溶剂梯度、使用Biotage Isolera One快速 纯化系统进行快速纯化。在UV检测下经硅胶板进行薄层色谱法(TLC)。 利用0.5mm或1mm硅胶板(Analtech：Uniplate，F₂₅₄)和特定实施例中所示 的溶剂进行制备型薄层色谱法(Prep-TLC)。

制备实施例1

步骤A

将市售可得的7-氮杂吲哚(1.98g，16.8mmol)溶解于1，2-二甲氧基乙烷 和正庚烷(30mL，1∶2)的混合物中并将混合物置于冷水浴中。然后在搅拌下 分批加入间氯过氧苯甲酸(5.1g，19.5.mmol，～77％)。在加入半数间氯过氧 苯甲酸后形成沉淀。添加结束后，将混合物在室温搅拌过夜。过滤收集沉 淀，用1，2-二甲氧基乙烷/正庚烷(10mL，1∶2)洗涤并空气干燥，产生标题 化合物的间氯过氧苯甲酸盐，为白色固体(4.41g，91％)。将盐悬浮于水 (45mL)中并加入碳酸钾水溶液直到pH～9。除去溶剂，通过二氧化硅色谱 法、使用二氯甲烷/甲醇(9/1)作为流动相纯化残余物，产生标题化合物，为 类白色固体(2g，91％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝6.60(d，1H)，7.07(dd，1H)，7.45(d， 1H)，7.64(d，1H)，8.12(d，1H)。

步骤B

将来自上述步骤A的标题化合物(1g，7.46mmol)溶解于甲苯(150mL) 中。向该溶液同时滴加六甲基二甲硅烷胺(1.56mL，7.46mmol)在甲苯(75mL) 中的溶液和苯甲酰溴(2.24mL，18.64mmol)在甲苯(75mL)中的溶液。同时 添加结束后，将混合物在室温搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠 (30mL)、盐水(30mL)洗涤并分离有机相。将有机相经Na₂SO₄干燥，过滤 并除去溶剂。通过二氧化硅色谱法使用乙酸乙酯/正庚烷(10/90)纯化残余 物，产生标题化合物，为白色固体(1.48g，65％)，其直接用于下一步骤。

步骤C

将来自上述步骤B的标题化合物(1.48g，4.9mmol)溶解于甲醇(90mL) 中并加入1M氢氧化钠溶液。将混合物在室温搅拌过夜并过滤以除去不可 溶材料。蒸发滤液并将残余物悬浮于二氯甲烷(100mL)中。将混合物超声 处理，接着在室温搅拌30min。过滤混合物并蒸发滤液。通过二氧化硅色 谱法使用二氯甲烷/甲醇(9/1)作为流动相纯化残余物，产生标题化合物，为 白色固体(0.59g，60％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝6.53-6.56(m，1H)，7.26(d，1H)， 7.39-7.42(m，1H)，7.84(d，1H)，10.5(br-s，1H)。

步骤D

将来自上述步骤C的标题化合物(0.59g，2.99mmol)溶解于四氢呋喃 (10mL)中并将溶液冷却至0℃。在0℃分批加入氢化钠(0.08g，3.3mmol)。 添加结束后，将混合物在室温搅拌15min。然后加入三异丙基甲硅烷基氯 (0.4mL，3mmol)并将混合物在沙浴中在～85℃加热3h。将混合物用乙酸乙 酯(50mL)和盐水(15mL)稀释。将有机相分离，经Na₂SO₄干燥，过滤并除 去溶剂。通过二氧化硅色谱法使用乙酸乙酯/正庚烷(10/90)纯化残余物，产 生标题化合物，为无色油状物(0.53g，50％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.10-1.12(m，18H)，1.73-1.82(m，3H)， 6.51(d，1H)，7.17(d，1H)，7.23(d，1H)，7.70(d，1H)。

步骤E

将来自上述步骤D的标题化合物(0.045g，0.127mmol)和市售可得的 2-(2-氨基乙基)-吡啶(0.015g，0.127mmol)溶解于甲苯(2mL)中并用2，2-二 -(二苯基膦基)-1，1-萘(0.016g，0.025mmol)和叔丁酸钠(0.031g，0.33mmol) 处理。接着通过将氩气通入反应混合物鼓泡使反应混合物脱气，之后加入 三(二亚苄基丙酮)二钯氯仿络合物(0.011g，0.0126mmol)。将反应容器密封 并将混合物在沙浴中在～115℃加热45分钟。将反应混合物用乙酸乙酯 (20mL)、饱和碳酸氢钠(5mL)和盐水(5mL)稀释。将有机相分离，经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂。通过二氧化硅色谱法、使用乙酸乙酯/正庚烷(20/80) 洗脱极性较小的副产物、之后乙酸乙酯/正庚烷(40/60)洗脱纯化残余物，产 生标题化合物，为浅橙色油状物(0.04g，80％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.10-1.12(m，18H)，1.81-1.88(m，3H)， 3.10(t，2H)，3.78(t，2H)，4.45-4.67(br-s，1H)，6.20(d，1H)，6.37(d，1H)，6.94(d， 1H)，7.10-7.14(m，2H)，7.56(d，1H)，7.58(dt，1H)，8.56(d，1H)。

制备实施例2

步骤A

将来自制备实施例1步骤D的标题化合物(0.045g，0.127mmol)和市售 可得的2-(氨基甲基)-吡啶(0.015g，0.127mmol)溶解于甲苯(2mL)中并用2，2- 二-(二苯基膦基)-1，1-萘(0.016g，0.025mmol)和叔丁酸钠(0.031g，0.33mmol) 处理。接着通过将氩气通入反应混合物鼓泡使反应混合物脱气，之后加入 三(二亚苄基丙酮)二钯氯仿络合物(0.011g，0.0126mmol)。将反应容器密封 并将混合物在沙浴中在～115℃加热45分钟。将反应混合物用乙酸乙酯 (20mL)、饱和碳酸氢钠(5mL)和盐水(5mL)稀释。将有机相分离，经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂。通过二氧化硅色谱法使用乙酸乙酯/正庚烷(20/80) 洗脱极性较小的副产物、之后乙酸乙酯/正庚烷(40/60)洗脱纯化残余物，产 生标题化合物，为浅橙色油状物(0.044g，90％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.10-1.12(m，18H)，1.62-1.76(m，3H)， 4.71(s，2H)，5.02-5.08(br-s，1H)，6.33-6.37(m，2H)，6.92(d，1H)，7.10-7.14(m， 1H)，7.30(d，1H)，7.56(dt，1H)，7.61(d，1H)，8.53(d，1H)。

制备实施例3

步骤A

在室温向市售可得的7-氮杂吲哚(5g，42.3mmol)在乙醚(350mL)中的 溶液分批加入间氯过苯甲酸(11g，63.4mmol)。将反应混合物在室温搅拌 5h。将沉淀的产物滤出并用乙醚(50mL)洗涤。收集固体并在加热下溶解于 水/丙酮(50mL/10mL)的混合物。将混合物冷却至5℃，将结晶的产物过滤 并空气干燥，产生标题化合物(11.7g，96％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝6.59(d，1H)，7.07(dd，1H)，7.46(d，1H)， 7.66(d，1H)，8.14(d，1H)，12.4(s，1H)。

步骤B

向来自上述步骤A的标题化合物(2g，6.92mmol)在干燥乙腈(15mL) 中的悬液加入硫酸二甲酯(0.885g，6.92mmol)。将反应混合物在70℃加热 8h。然后将澄清溶液冷却至室温。在氩气气氛下将溶液分配于三个密封的 管中并冷却至0℃。然后将氨在甲醇(5mL)中的7M溶液加至各管。将密封 的管在50-60℃加热48h。除去溶剂并将残余物溶解于乙酸乙酯(200mL)中， 将有机相用稀Na₂CO₃溶液、水和盐水洗涤。将有机相经Na₂SO₄干燥。蒸 发溶剂并通过二氧化硅色谱法使用乙酸乙酯纯化粗产物，产生标题化合物 (0.5g，54％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝4.33(m，2H)，6.35(dd，1H)，6.38(d，1H)， 6.99(dd，1H)，7.71(d，1H)。

制备实施例4

步骤A

向市售可得的3-氰基-7-氮杂吲哚(2g，13.9mmol)在四氢呋喃(150mL) 中的溶液加入间氯过苯甲酸。将反应混合物在室温搅拌16h。将沉淀滤出 并干燥，产生标题化合物(1.89g，86％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝7.26(d，1H)，7.74(d，1H)，8.30(d，1H)， 8.40(s，1H)。

步骤B

向来自上述步骤A的标题化合物(1.89g，11.8mmol)在干燥乙腈(15mL) 中的悬液加入硫酸二甲酯(1.5g，11.8mmol)并将反应混合物在80℃加热过 夜。将澄清溶液冷却至室温并转移至3个5mL管中。然后将氨在甲醇(5mL) 中的7M溶液加至各管。将密封的管在70℃加热48h。将反应混合物在减 压下浓缩，将残余物从乙酸乙酯和正庚烷结晶，产生标题化合物(0.9g， 48％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝3.33(br-s，2H)，6.00(s，1H)，6.42(d，1H)， 7.64(d，1H)，7.83(s，1H)。

制备实施例5

步骤A

在室温向市售可得的6-溴吲哚(0.5g，2.55mmol)在四氢呋喃(20mL)中 的溶液分批加入氢化钠(0.095g，3.22mmol)。将悬液在室温搅拌10分钟并 缓慢加入三异丙基甲硅烷基氯(0.489g，2.55mmol)。将反应混合物在室温 搅拌30分钟。将反应混合物用水淬灭并在减压下除去溶剂。将残余物溶解 于乙酸乙酯(150mL)并用水、盐水洗涤，然后经Na₂SO₄干燥。在减压下除 去溶剂以得到残余物，其然后通过硅胶柱色谱法(乙酸乙酯/正庚烷25/75) 纯化，产生标题化合物(0.890g，99％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.17(d，18H)，1.68-1.71(m，3H)，6.61(d， 1H)，7.22-7.24(m，2H)，7.51(d，1H)，7.65(s，1H)。

制备实施例6

步骤A

向市售可得的6-溴吲哚(2.5g，12.7mmol)在甲醇(15mL)中的溶液加入 25％甲醇钠在甲醇(2mL)中的溶液并将反应混合物在80℃加热2天。然后， 将反应混合物浓缩至1/3其体积并倒入冰水(100mL)中，用乙酸乙酯萃取(3 x 100mL)。将有机相用水、盐水洗涤并经Na₂SO₄干燥。在减压下除去溶 剂以得到粗产物，其然后通过二氧化硅柱色谱法(乙酸乙酯/正庚烷(20/80)) 纯化，产生标题化合物(3.5g，72％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.50(s，9H)，2.56(m，2H)，3.67(t，2H)， 4.13(d，2H)，6.11(s，1H)，7.15(d，1H)，7.24(d，1H)，7.53(d，1H)，7.73(d，1H)， 8.16(s，1H)。

步骤B

向来自步骤A的标题化合物(1.5g，3.97mmol)在甲醇(25mL)中的溶液 加入三乙胺(0.8g，7.94mmol)并将混合物脱气。然后，将氧化铂(IV)(0.18g， 0.79mmol)加至反应混合物，之后抽真空并用氢气回填充。将该过程重复 2-3次并将反应混合物保持在氢气气氛下过夜。然后，将反应混合物通过 硅藻土衬垫滤出。将滤液浓缩并溶解于乙酸乙酯(200mL)中，将有机相用 水、盐水洗涤并经Na₂SO₄干燥。在减压下除去溶剂以得到粗产物，其然 后通过硅胶柱纯化，产生标题化合物(0.95g，63％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.48(s，9H)，1.64(m，2H)，1.99-2.02(m， 2H)，2.86-2.91(m，3H)，4.11-4.22(m，2H)，6.93(d，1H)，7.21(dd，1H)，7.48(d， 1H)，7.51(d，1H)，8.09(s，1H)。

步骤C

向来自上述步骤B的标题化合物(0.7g，1.84mmol)在四氢呋喃(10mL) 中的溶液加入氢化钠(0.088g，3.68mmol)并将悬液搅拌10分钟。然后加入 三异丙基甲硅烷基氯(0.353g，1.84mmol)。将反应混合物搅拌30分钟。将 反应混合物倒入乙酸乙酯(200mL)中，用水、盐水洗涤并经Na₂SO₄干燥。 在减压下除去溶剂以获得粗产物，其然后通过硅胶柱、使用乙酸乙酯/正庚 烷(5/95至50/50)纯化，产生标题化合物(0.9g，91％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.13(d，18H)，1.48(s，9H)，1.62-1.66(m， 5H)，1.99-2.04(m，2H)，2.88-2.92(m，3H)，4.21-4.23(m，2H)，6.92(s，1H)， 7.18(dd，1H)，7.45(d，1H)，7.58(d，1H)。

制备实施例7

步骤A

向市售可得的6-溴-4-氮杂-吲哚(3g，15.3mmol)和1-Boc-4-哌啶酮 (3.8g，19mmol)在甲醇(30mL)中的溶液加入25％甲醇钠在甲醇中的溶液 (4mL，18.5mmol)。将反应混合物然后在80℃搅拌3h。此时将反应混合物 冷却至室温，倒入冰水(20mL)中并用乙酸乙酯(350mL)萃取。将有机相用 水和盐水溶液洗涤。将有机相经Na₂SO₄干燥并在减压下除去溶剂以获得 粗产物，其然后通过硅胶柱纯化，产生标题化合物(3g，52％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.60(s，9H)，2.55(t，1H)，2.66(m，2H)， 3.81(m，2H)，4.27(d，2H)，7.22(s，1H)，7.44(d，1H)，7.91(d，1H)，8.63(d，1H)， 8.97(s，1H)。

步骤B

向来自上述步骤A的标题化合物(0.45g，1.19mmol)在甲醇(15mL)中的 溶液加入三乙胺(54mg，0.53mmol)并将混合物脱气。添加氧化铂(IV) (0.062g，0.185mmol)后，将反应混合物抽成真空并用氢气回填充(再重复两 次)。将反应混合物在氢气气氛下搅拌16h。将反应混合物通过硅藻土过滤 掉并浓缩滤液。然后通过硅胶柱、使用乙酸乙酯/正庚烷(10/90)纯化残余物， 产生标题化合物(0.185g，42％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.50(s，9H)，1.69(m，2H)，2.15(m，2H)， 2.97(m，2H)，3.23(m，1H)，4.22(m，2H)，7.18(d，1H)，7.82(d，1H)，8.26(brs， 1H)，8.51(d，1H)。

步骤C

向来自上述步骤B的标题化合物(0.110g，0.28mmol)在四氢呋喃(5mL) 中的溶液加入氢化钠(0.014g，0.56mmol)。将悬液在室温搅拌10分钟。在 添加三异丙基甲硅烷基氯(0.055g，0.28mmol)后，将反应混合物在室温搅 拌30分钟。此时，将反应混合物用水淬灭，倒入乙酸乙酯(150mL)中，用 水和盐水溶液洗涤。将有机相分离，经Na₂SO₄干燥并在减压下蒸发溶剂。 通过硅胶柱纯化粗产物，产生标题化合物(0.105g，70％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.13(d，18H)，1.47(s，9H)，1.63-1.64(m， 5H)，2.04-2.12(m，2H)，2.90-2.95(m，2H)，3.16-3.20(m，1H)，4.20-4.21(m，2H)， 7.15(s，1H)，7.82(d，1H)，8.45(d，1H)。

制备实施例8

步骤A

向市售可得的5-溴-7-氮杂吲哚(3g，15.2mmol)和1-Boc-4-哌啶酮(4.2g， 21.1mmol)在甲醇(25mL)中的溶液加入25％甲醇钠在甲醇中的溶液(4mL， 18.5mmol)。然后，将反应混合物在80℃搅拌2天。将反应混合物倒入乙 酸乙酯(350mL)中并用水和盐水溶液洗涤。将有机相经Na₂SO₄干燥并在减 压下除去溶剂，获得粗产物，其然后从乙酸乙酯/正庚烷混合物结晶，产生 标题化合物(4.2g，73％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.52(s，9H)，2.55(s，2H)，3.70(t，2H)， 4.16(m，2H)，6.11(s，1H)，7.32(s，1H)，8.32(d，1H)，8.38(d，1H)，9.40(brs， 1H)。

步骤B

向来自上述步骤A的标题化合物(3.2g，8.4mmol)在四氢呋喃中的溶液 加入氢化钠(0.3g，12.6mmol)并将悬液在室温搅拌10分钟。然后缓慢加入 三异丙基甲硅烷基氯(1.62g，8.4mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h。此 时，将反应混合物用水淬灭并在减压下浓缩。将残余物溶解于乙酸乙酯 (250mL)中并用水和盐水溶液洗涤。将有机相经Na₂SO₄干燥。除去溶剂获 得粗产物，其通过硅胶柱纯化，产生标题化合物(3.3g，75％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.13(d，18H)，1.52(s，9H)，1.83(m，2H)， 2.56(s，2H)，3.51(s，2H)，3.71(m，2H)，4.16(s，2H)，7.04(s，1H)，7.26(s，1H)， 8.22(s，1H)，8.30(dd，1H)。

步骤C

向来自上述步骤B的标题化合物(1.63g，3.0mmol)在甲醇(20mL)中的 溶液加入三乙胺(0.6g，6.0mmol)。将混合物脱气并加入氧化铂(IV)(0.14g， 0.6mmol。然后将烧瓶抽真空两次并用氢气回填充。将反应混合物在氢气 气氛下搅拌16h。将非均相反应混合物通过硅藻土过滤掉。将滤液在减压 下浓缩以得到粗产物，其通过硅胶柱纯化，产生标题化合物(0.240g，50％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.11(d，18H)，1.49(s，9H)，1.76-1.86(m， 7H)，2.17-2.22(m，2H)，3.23(m，2H)，3.88-3.90(m，2H)，7.07(s，1H)，8.21(d， 1H)，8.27(d，1H)。

制备实施例9

步骤A

向市售可得的5-溴吲哚(3.5g，17.9mmol)在甲醇(50mL)中的溶液加入 1-Boc-4-哌啶酮(5.1g，25.6mmol)和25％甲醇钠在甲醇中的溶液(8mL， 37mmol)并将反应混合物在80℃加热2天。将反应混合物过滤掉。将固体 用乙酸乙酯洗涤两次，真空下干燥，得到标题化合物(3g)。将滤液用乙酸 乙酯(250mL)稀释，用水、盐水洗涤并经Na₂SO₄干燥。在减压下除去溶剂 以获得粗产物，其通过硅胶柱纯化，产生额外的标题化合物(2.9g)。组合收 率为5.9g，86％.

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.52(s，9H)，2.55(m，2H)，3.69(t，2H)， 4.16(s，2H)，6.12(s，1H)，7.19(s，1H)，7.26-7.33(m，2H)，8.01(s，1H)，8.29(br-s， 1H)。

步骤B

向来自上述步骤A的标题化合物(1.8g，4.7mmol)在乙酸乙酯(50mL) 中的经脱气溶液加入氧化铂(IV)(0.2g，0.88mmol)。将反应混合物抽成真 空并用氢气回填充。将过程重复两次并将反应混合物在室温保持在氢气气 氛下过夜。将反应混合物通过硅藻土过滤掉，并浓缩滤液。通过硅胶柱、 使用乙酸乙酯/正庚烷(10/90至50/50)纯化粗产物，产生标题化合物(0.75g， 42％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.52(s，9H)，2.04(m，2H)，2.91(m，3H)， 3.75(m，2H)，4.23-4.29(m，2H)，6.98(s，1H)，7.28(m，2H)，7.76(s，1H)，8.11(s， 1H)。

步骤C

向来自上述步骤B的标题化合物(0.6g，1.58mmol)在四氢呋喃(20mL) 中的溶液加入氢化钠(0.056g，2.37mmol)，并将悬液在室温搅拌10分钟。 然后缓慢加入三异丙基甲硅烷基氯(0.34g，1.58mmol)并将混合物在室温搅 拌1h。将反应混合物用水淬灭并浓缩。将残余物溶解于乙酸乙酯(100mL) 中，用水和盐水溶液洗涤。将有机相经Na₂SO₄干燥并在减压下除去溶剂 以获得粗产物，其通过硅胶柱、使用乙酸乙酯/正庚烷(10/90)纯化，产生标 题化合物(0.6g，70％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.13(d，18H)，1.51(s，9H)，1.65-1.66(m， 5H)，2.01-2.05(m，2H)，2.89-2.94(m，3H)，4.25-4.26(m，2H)，6.98(s，1H)， 7.23(dd，1H)，7.34(s，1H)，7.36(s，1H)，7.72(s，1H)。

制备实施例10

步骤A

向来自制备实施例9步骤B的标题化合物(0.625g，1.64mmol)在 THF(10ml)中的溶液加入NaH(0.059g，2.4mmol)。将悬液搅拌5分钟。然 后缓慢加入甲基碘(0.346g，2.46mmol)。将反应混合物在室温搅拌1h。然 后，将反应混合物倒入乙酸乙酯(150mL)中并用水和盐水洗涤。将有机相 经Na₂SO₄干燥。在减压下浓缩溶剂，并通过硅胶柱(20-50％；EtOAC至 庚烷)纯化粗产物，得到标题化合物(0.485g，75％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.51(s，9H)，1.61-1.65(m，2H)， 1.99-2.02(m，2H)，2.87-2.95(m，3H)，3.74(s，3H)，4.24-4.25(m，2H)，6.82(s， 1H)，7.16(d，1H)，7.32(d，1H)，7.74(s，1H)。

制备实施例11

向标题化合物(500mg，0.1.31mmol)在THF(10ml)中的溶液加入 NaH(63mg，2.6mmol)并将悬液搅拌5min。加入甲基碘(185mg，0.1.31mmol) 并将反应混合物搅拌30min。然后，将反应混合物用水淬灭并用乙酸乙酯 萃取(50ml x 3)。将有机相用盐水洗涤并经Na₂SO₄干燥，在减压下除去溶 剂。通过硅胶柱(EtOAc∶庚烷；20∶30)纯化粗产物，得到标题化合物(485mg， 94％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.50-7.46(m，2H)，7.21(dd，J＝8.4，1.7Hz， 1H)，6.80(s，1H)，4.25(s，2H)，3.73(s，3H)，2.99-2.87(m，3H)，2.03-1.99(m， 2H)，1.67-1.63(m，2H)，1.51(s，9H)。

制备实施例12

步骤A

向5-溴吲哚(5g，25.3mmol)和1-甲基哌啶-4-酮(4.3g，38.2mmol)在甲醇 (50mL)中的溶液加入(28％)NaOMe在甲醇(10mL)中的溶液并将反应混合 物在90℃加热2天。使产物沉淀，滤出并真空下干燥，得到标题化合物(6.3g， 85％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：2.28(s，3H)，2.55(m，2H)，3.04(d，2H)， 3.34(m，2H)，6.07(s，1H)，7.21(d，1H)，7.35(d，1H)，7.45(s，1H)，7.92(s，1H)。

步骤B

向来自上述步骤A的标题化合物(0.5g，1.72mmol)在THF(100mL)中 的溶液分批加入氢化钠(0.1g，4.28mmol)并将悬液在室温搅拌10分钟。然 后缓慢加入三异丙基甲硅烷基氯(0.33g，1.72mmol)，将反应混合物在室温 搅拌10分钟。将反应混合物用水淬灭并除去溶剂。将残余物溶解于乙酸乙 酯(150mL)。将有机相用水和盐水洗涤并经Na₂SO₄干燥。除去溶剂并通过 硅胶柱(甲醇至EtOAc 10％至20％)纯化残余物，得到标题化合物(0.498g， 65％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.13(d，18H)，1.67-1.69(m，3H)，2.45(s， 3H)，2.64(brs，2H)，2.72(t，2H)，3.19(s，2H)，6.12(s，1H)，7.18(s，1H)，7.23(d， 1H)，7.34(d，1H)，7.98(s，1H)。

步骤C

将来自上述步骤B的标题化合物(0.490g，1.09mmol)在乙酸乙酯(50mL) 中的溶液脱气并加入氧化铂(IV)(0.150g，0.67mmol)。将反应混合物抽成真 空并用氢气回填充。将该过程重复2-3次并将反应混合物在氢气气氛下搅 拌过夜。将反应混合物通过硅藻土衬垫过滤。将滤液浓缩并溶解于乙酸乙 酯(200mL)。将有机相用水和盐水洗涤并经Na₂SO₄干燥。在减压下除去溶 剂以得到粗产物，其然后通过硅胶柱(MeOH至乙酸乙酯5％至12％)纯化， 产生标题化合物(0.15g，30％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.12(d，18H)，1.62-1.69(m，3H)， 2.0-2.12(m，4H)，2.47(t，2H)，2.56(s，3H)，2.81-2.89(m，1H)，3.24(d，2H)， 7.03(s，1H)，7.23(d，1H)，7.34(d，1H)，7.70(s，1H)。

制备实施例13

步骤A

向6-溴吲哚(3g，15.3mmol)和1-甲基哌啶-4-酮(3.4g，30.6mmol)在甲 醇(50mL)中的溶液加入(28％)NaOMe在甲醇(10mL)中的溶液并将反应混 合物在90℃加热2天。将沉淀的产物滤出并真空下干燥，产生标题化合物 (4.1g，91％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝2.28(s，3H)，2.51-2.56(m，4H)，3.03(s， 2H)，6.1(s，1H)，7.14(d，1H)，7.41(s，1H)，7.56(s，1H)，7.74(d，1H)。

步骤B

向来自上述步骤A的标题化合物(2g，6.8mmol)在THF/二噁烷 (100mL/10mL)中的溶液分批加入氢化钠(0.25g，10.3mmol)并将悬液在室温 搅拌10分钟。然后缓慢引入三异丙基甲硅烷基氯(1.3g，6.8mmol)并将反 应混合物在室温搅拌10分钟。将反应混合物用水淬灭并除去溶剂，并将残 余物溶解于乙酸乙酯(200mL)。将有机相用水和盐水洗涤并经Na₂SO₄干 燥。除去溶剂并通过硅胶柱(甲醇至EtOAc 5％至20％)纯化残余物，产生 标题化合物(2.9g，95％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.12(d，18H)，1.61-1.69(m，3H)，2.41(s， 3H)，2.61(brs，2H)，2.69(t，2H)，3.15(d，2H)，6.11(s，1H)，7.13(s，1H)，7.21(d， 1H)，7.58(s，1H)，7.69(d，1H)。

步骤C

将来自上述步骤B的标题化合物(2.8g，6.2mmol)在乙酸乙酯(50mL) 中的溶液脱气并加入氧化铂(IV)(0.18g，0.79mmol)。然后，将反应混合物 抽成真空并用氢气回填充。将该过程重复2-3次并将反应混合物在氢气气 氛下搅拌过夜。然后，将反应混合物通过硅藻土垫滤出。将滤液浓缩并将 残余物溶解于乙酸乙酯(200mL)中。将有机相用水和盐水洗涤并经Na₂SO₄干燥。在减压下除去溶剂以得到粗产物，其然后通过硅胶柱(甲醇至乙酸乙 酯5％至12％)纯化，产生标题化合物(2.3g，85％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.13(d，18H)，1.61-1.69(m，3H)， 1.84-1.88(m，2H)，2.03-2.06(m，2H)，2.16(t，2H)，2.37(s，3H)，2.78(tt，1H)， 2.99(d，2H)，6.97(s，1H)，7.19(d，1H)，7.47(d，1H)，7.59(s，1H)。

制备实施例14

步骤A

向市售可得的7-氮杂吲哚(2g，16.8mmol)在甲醇(20mL)中的溶液加入 1-(叔丁氧基羰基)-4-哌啶酮(6.75g，34mmol)和甲醇钠的25％甲醇溶液 (21.6mL，100mmol)并将溶液在回流下加热2.5h。将反应溶液倒入50ml冰 水，用乙酸乙酯萃取并将有机层用水洗涤，干燥并浓缩。将所得残余物从 正己烷/乙酸乙酯结晶，得到化合物(3.4g，67％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.46(s，9H)，2.56(brs，2H)，3.68(t，2H)， 4.13(d，2H)，6.13(s，1H)，7.12(dd，1H)，7.34(s，1H)，8.20(dd，1H)，8.31(dd， 1H)，11.28(brs，1H)。

MS(ESI)；m/z＝299.94(MH⁺)

步骤B

向来自上述步骤A的标题化合物(1g，3.34mmol)在65ml甲醇中的溶 液加入1ml乙酸，然后加入500mg 10％Pd/C。将混合物在氢气气氛下搅 拌48h。将催化剂通过硅藻土过滤并在减压下除去溶剂。将所得残余物溶 解于乙酸乙酯并用NaHCO₃的水溶液洗涤。蒸发有机相以得到微黄色化合 物，其使用Biotage快速色谱法系统(乙酸乙酯/正庚烷：20至66％)纯化， 产生微黄色化合物(0.92g，91％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.47(s，9H)，1.63-1.75(m，3H)， 1.99-2.04(m，2H)，2.86-2.99(m，3H)，4.24(brs，2H)，7.07(m，2H)，7.95(d，1H)， 8.32(brs，1H)，9.57(brs，1H)。

MS(ESI)；m/z＝301.97(MH⁺)

步骤C

将间氯过苯甲酸(0.568g，1.69mmol)加至来自上述步骤B的标题化合 物(0.51g，1.69mmol)在20mL二氯甲烷中的冷溶液(0℃)。将反应混合物升 温至室温，然后搅拌12h。将碳酸氢钠饱和水溶液加至反应混合物并用二 氯甲烷萃取。将有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，然后浓缩。使用Biotage 快速色谱法系统(甲醇/二氯甲烷：3至10％)纯化所得残余物，产生白色化 合物(0.4g，74％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.47(s，9H)，1.61-1.65(m，2H)，1.96(d， 2H)，2.86-2.90(m，3H)，4.21(brs，2H)，7.02(t，1H)，7.16(s，1H)，7.68(d，1H)， 8.18(d，1H)。

MS(ESI)；m/z＝317.96(MH⁺)

步骤D

向来自上述步骤C的标题化合物(0.38g，1.19mmol)在24ml甲苯中的 溶液同时加入溶解于12mL甲苯中的六甲基二甲硅烷胺(0.25mL，1.19mmol) 和14ml甲苯中的苯甲酰溴(0.42mL，3.59mmol)。将反应混合物在室温搅 拌12h。将蒸发溶剂后所得的残余物溶解于10mL甲醇并用3.5mL 1M氢 氧化钠溶液处理。搅拌2小时后，加入柠檬酸饱和水溶液(10mL)。将水相 用乙酸乙酯(100mL)萃取。将有机相用碳酸氢钠和水洗涤，然后干燥。使 用Biotage快速色谱法系统(甲醇/二氯甲烷：1至5％)纯化除去溶剂后所得 的残余物，得到白色化合物(0.185g，两步收率40％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.48(s，9H)，1.63-1.67(m，2H)，1.97(d， 2H)，2.84-2.90(m，3H)，4.22(d，2H)，6.96(s，1H)，7.14(d，1H)，7.69(d，1H)。

MS(ESI)；m/z＝381.85(MH⁺)。

步骤E

将来自上述步骤D的标题化合物(0.1g，0.263mmol)溶解于N，N’-二甲 基甲酰胺(6mL)中并将溶液冷却至0℃。在0℃分批加入氢化钠 95％(0.007g，0.289mmol)。添加结束后，将混合物在室温搅拌1小时。然 后加入三异丙基甲硅烷氯(0.06mL，0.289mmol)并将混合物在室温搅拌 19h。将混合物用水(50mL)稀释。将水相用乙酸乙酯萃取。将有机相分离， 经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂。通过二氧化硅色谱法、使用甲醇/二氯 甲烷：1至5％纯化残余物，产生标题化合物，为白色固体(0.1g，71％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.10-1.11(m，18H)，1.66(s，9H)， 1.67-1.63(m，2H)，1.80-1.73(m，3H)，1.97(d，2H)，2.90-2.84(m，3H)，4.22(d， 2H)，6.96(s，1H)，7.14(d，1H)，7.69(d，1H)。

MS(ESI)；m/z＝537.95(MH⁺)。

制备实施例15

步骤A

向来自制备实施例14步骤D的标题化合物(1g，2.63mmol)在干燥四氢 呋喃(25ml)中的溶液在0℃分批加入氢化钠60％(0.111g，2.89mmol)。将混 合物在室温搅拌30min，然后加入甲基碘(0.491mL，7.89mmol)。结束(通 过TLC板检查)后，将溶液浓缩至干。通过快速色谱法以乙酸乙酯/正庚烷 15％至40％纯化残余物，得到为白色固体的化合物(0.984g，95％)。

MS(ESI)；m/z＝394.48/396.48(MH⁺)。

步骤B

向来自上述步骤A的标题化合物(0.688g，1.745mmol)在二氯甲烷(50ml) 中的溶液加入2M氯化氢的乙醚溶液(8.72mL，17.45mmol)。将所得混合物 在室温搅拌12h。将反应混合物浓缩至干，产生米色固体化合物(0.654g， 99％)。

MS(ESI)；m/z＝294.60/296.60(MH⁺)。

步骤C

向来自上述步骤B的标题化合物(0.654g，2.223mmol)在MeOH(50ml) 中的溶液相继加入三乙胺(0.781mL，5.56mmol)、甲醛溶液(0.196mL， 2.445mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.565g，2.67mmol)。将所得混合物在 室温搅拌12h。将混合物浓缩至干，然后将残余物用水和乙酸乙酯稀释。 用1M NaOH和盐水进行萃取。收集有机层，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩 至干，产生期望化合物，为微黄色固体(0.411g，60％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.81(t，J＝11.6Hz，2H)；1.96(d， J＝11.6Hz，2H)；2.08(t，J＝11.2Hz，2H)；2.33(s，3H)；2.71(t，J＝11.2Hz，2H)； 2.96(d，J＝9.6Hz，2H)；3.80(s，3H)；6.88(s，1H)；7.08-7.19(m，2H)；7.69-7.83(m， 1H)。

MS(ESI)；m/z＝308.59/310.59(MH⁺)。

制备实施例16

步骤A

向标题化合物(220mg，0.55mmol)在MeOH(3mL)中的溶液加入3N HCl在MeOH(0.5mL)中的溶液并将反应混合物搅拌过夜。在减压下除去 溶剂，得到标题化合物(180mg，98％)。

步骤B

向化合物(220mg，0.75mmol)在MeOH(5ml)中的溶液加入 NaCNBH₃(200mg，3.1mmol)。将反应混合物搅拌过夜。除去溶剂并通过 硅胶柱、使用Biotage Isolera One纯化系统、采用MeOH/DCM梯度(1/99 ＝＞5/95)纯化粗产物，产生标题化合物(92mg，30％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：7.46(m，2H)，7.20(s，1H)，6.89(s，1H)， 3.72(s，3H)，3.48(s，3H)，2.94(m，1H)，2.68-2.63(m，3H)，2.21-2.04(m，5H)。

MS(ESI)：m/z＝307.6(M+H)。

制备实施例17

步骤A

向来自制备实施例14步骤D的标题化合物(0.500g，1.315mmol)在二氯 甲烷(10ml)中的溶液加入2M氯化氢的乙醚溶液(3.29mL，6.57mmol)。将所 得混合物在室温搅拌12h。结束后，将浆液浓缩至干，得到为米色固体的 化合物(0.443g，95％)。

MS(ESI)；m/z＝280.53/282.52(MH⁺)。

步骤B

向来自上述步骤A的标题化合物(0.443g，1.255mmol)和三乙胺 (0.353mL，2.509mmol)在甲醇(5ml)中的溶液加入甲醛溶液(0.121mL， 1.506mmol)，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(30.99g，1.882mmol)。将所得 混合物在室温搅拌12h。将混合物浓缩至干，然后将残余物用水和乙酸乙 酯稀释。用1M NaOH和盐水进行萃取。收集有机层，经Na₂SO₄干燥，过 滤并浓缩至干，产生期望化合物，为白色固体(0.328g，89％)。

MS(ESI)；m/z＝294.59/296.59(MH⁺)。

步骤C

向来自上述步骤B的标题化合物(0.328g，1.115mmol)在干燥四氢呋喃 (10ml)中的溶液分批加入氢化钠60％(0.045g，1.171mmol)。将所得混合物 在室温搅拌30min，然后加入三异丙基甲硅烷基氯(0.255mL，1.204mmol)。 将反应混合物进一步在室温搅拌3h。将反应混合物浓缩至干，然后通过快 速色谱法以DCM/MeOH 97∶3至90∶10纯化残余物，产生期望化合物，为白 色无定形固体(0.184g，37％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.00-1.23(s，18H)；1.69-1.87(m，3H)； 1.95-2.12(m，4H)；2.25-2.40(m，2H)；2.47(s，3H)；2.70-2.89(m，1H)； 3.08-3.23(m，2H)；6.99(sl，1H)；7.08-7.17(m，1H)；7.67-7.79(m，1H)。

MS(ESI)；m/z＝450.63/452.63(MH⁺)。

制备实施例18

步骤A

将市售可得的6-硝基吲哚(2.15g，13.27mmol)溶解于甲醇(10mL)中并 加入市售可得的N-Boc-4-哌啶酮(3.93g，19.8mmol)。添加25％甲醇钠的甲 醇溶液(8.22mL，38mmol)后，将混合物在沙浴中在～100℃加热过夜。将混 合物用乙酸乙酯(150mL)稀释并用饱和碳酸氢钠(40mL)和盐水(40mL)洗 涤。将有机相分离，经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂。通过二氧化硅色 谱法、使用乙酸乙酯/正庚烷(40/60)以洗脱初始材料、然后用乙酸乙酯/正庚 烷(60/40)，纯化残余物，产生标题化合物，为黄色固体(2.56g，56％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO₆)：δ＝1.39(s，9H)，2.48-2.51(m，2H)，3.54(t， 2H)，4.00-4.04(m，2H)，6.16-6.19(m，1H)，7.84-7.90(m，2H)，7.98(d，1H)， 8.31(s，1H)，11.8(br-s，1H)。

步骤B

向来自上述步骤A的标题化合物(2.2g，6.3mmol)在四氢呋喃(50mL) 中的溶液加入氢化钠(0.18g，7.56mmol)。将黑色悬液搅拌10分钟，然后 加入三异丙基甲硅烷基氯(1.24g，6.3mmol)。将反应混合物在室温搅拌1h。 此时，将反应混合物用水淬灭并浓缩。将所得残余物溶解于EtOAc(300mL) 中并用水和盐水洗涤。将有机相经Na₂SO₄干燥并在减压下蒸发溶剂，产 生粗产物，其然后通过硅胶柱纯化，产生标题化合物(1.5g，46％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.17(d，18H)，1.52(s，9H)，1.73-1.79(m， 3H)，2.59(s，2H)，3.72(t，2H)，4.17(s，2H)，6.16(s，1H)，7.46(s，1H)，7.88(d， 1H)，8.06(d，1H)，8.47(s，1H)。

MS(ESI)m/z：500(MH)501(M+2H)。

步骤C

向来自上述步骤B的标题化合物(1.5g，3.0mmol)在乙酸乙酯(50mL) 中的溶液加入10％Pd/C。将混合物在真空下脱气并用氢气回填充。将反 应混合物在氢气气氛下搅拌过夜。将反应混合物滤出并蒸发溶剂。然后通 过二氧化硅色谱法、使用乙酸乙酯/正庚烷梯度(20/80-＞50/50)纯化残余物， 产生为固体的标题化合物(0.51g，36％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.16(d，18H)，1.50(s，9H)，1.65-1.69(m， 5H)，2.02-2.05(m，2H)，)，2.87-2.93(m，3H)，4.22-4.23(m，2H)，6.59(d，1H)， 6.61(d，1H)，6.78(s，1H)，6.83(s，1H)，7.39(d，1H)。

制备实施例19

步骤A

来自制备实施例17步骤A的标题化合物(0.93g，2.71mmol)溶解于 N，N’-二甲基乙酰胺(10mL)并将混合物冷却至0℃。在0℃加入氢化钠 (0.085g，3.45mmol)并将混合物在0℃搅拌5分钟，然后在室温搅拌15分 钟。添加甲基碘(0.175mL，2.72mmol)后，将混合物在室温搅拌18h。将混 合物用乙酸乙酯(100mL)和水(30mL)稀释。将有机相分离，经Na₂SO₄干燥， 过滤并除去溶剂。使用Biotage系统、采用乙酸乙酯/正庚烷梯度(5/95-＞ 40/60)纯化残余物，产生标题化合物，为黄色固体(0.87g，90％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.54(s，9H)，2.55-2.60(m，2H)，3.70(t， 2H)，3.90(s，3H)，4.14.4.17(m，2H)，6.15(s，1H)，7.30(s，1H)，7.90(d，1H)， 8.04(dd，1H)，8.31(d，1H)。

步骤B

向来自上述步骤A的标题化合物(0.87g，2.44mmol)在乙醇(50mL)中的 溶液加入10％Pd/C催化剂(0.4g)。将混合物在真空下脱气并用氢气回填 充。将反应混合物搅拌在氢气气氛下过夜。将反应混合物滤出并蒸发溶剂。 使用Biotage系统、采用乙酸乙酯/正庚烷梯度(5/95-＞100/0)纯化残余物， 产生标题化合物，为淡粉红色泡沫状物(0.3g，38％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.52(s，9H)，1.58-1.66(m，3H)，2.00(d， 2H)，2.85-2.91(m，3H)，3.64(s，3H)，4.15-4.27(br-s，2H)，6.56-6.62(3H)， 7.40(d，1H)。

制备实施例20

步骤A

将市售可得的6-硝基吲哚(2.15g，13.27mmol)溶解于甲醇(15mL)中并 加入市售可得的N-甲基-4-哌啶酮(2.19mL，19.8mmol)。添加25％甲醇钠 的甲醇溶液(8.22mL，38mmol)后，将混合物在沙浴中在～100℃加热30h。 将混合物用水(100mL)稀释并在室温搅拌10分钟。过滤收集沉淀，用甲醇 (25mL)洗涤并空气干燥，产生标题化合物，为橙色固体(2.47g，72％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO₆)：δ＝2.25(s，3H)，2.52-2.59(m，4H)，3.04(s， 2H)，6.17(s，1H)，7.82(s，1H)，7.88(d，1H)，7.97(d，1H)，8.31(s，1H)，11.9(br-s， 1H)。

步骤B

在0℃向来自上述步骤A的标题化合物(1.1g，4.32mmol)在四氢呋喃 (25mL)中的溶液加入氢化钠(0.136g，5.5mmol)。将黑色悬液在0℃搅拌5 分钟并在室温搅拌15分钟。然后加入三异丙基甲硅烷基氯(0.58mL， 4.35mmol)。将反应混合物在沙浴中在～85℃搅拌2h。将反应混合物用乙酸 乙酯(50mL)稀释并用饱和碳酸氢盐(25mL)和盐水(25mL)洗涤。将有机相分 离，经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂，产生标题化合物和起始材料的混 合物。将混合物直接用于下一步骤。

步骤C

向上述步骤B的混合物在乙醇(30mL)中的溶液加入10％Pd/C催化剂 (0.4g)。将混合物在真空下脱气并用氢气回填充。将反应混合物在氢气气氛 下搅拌过夜。将反应混合物滤出并蒸发溶剂。然后通过二氧化硅色谱法使 用二氯甲烷/甲醇(9/1)纯化残余物，产生标题化合物和双键未被还原的化合 物的混合物(0.22g)。如上所述，将混合物在乙醇(15mL)中使用10％Pd/C 催化剂(0.11g)再次氢化。过滤溶液并蒸发溶剂，产生标题化合物为无色玻 璃状物(0.2g，2步收率为19％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO₆)：δ＝1.04-1.07(m，18H)，1.59-1.69(m 5H)， 1.88(d，1H)，2.13-2.18(m，2H)，2.26(s，3H)，2.57-2.66(m，2H)，2.90(d，2H)， 4.58-4.67(br-s，2H)，6.38(d，1H)，6.69-6.72(m 2H)，7.17(d，1H)。

制备实施例21

步骤A

将市售可得的4-氨基苯甲酸(5g，36mmol)溶解于1M氢氧化钠溶液 (40mL，40mmol)和1，4二噁烷(30mL)中。添加二碳酸二叔丁酯(7.85g， 36mmol)后，将混合物在室温搅拌整个周末。将二噁烷真空除去并将残余 物用水(100mL)稀释。然后加入浓盐酸(～37％)直至pH～3。过滤收集沉淀， 用水(100mL)洗涤并空气干燥，产生标题化合物，为白色固体(6.3g，72％)。

步骤B

将来自上述步骤A的标题化合物(0.43g，1.8mmol)悬浮于四氢呋喃 (10mL)中并用羰基二咪唑(0.37g，2.26mmol)处理。将混合物在室温搅拌1h。 然后向澄清溶液加入2M二甲胺的四氢呋喃溶液(2.25mL，4.5mmol)。继 续搅拌过夜并除去溶剂。将残余物溶解于乙酸乙酯(50mL)中，用10％柠檬 酸的水溶液(15mL)和盐水(15ml)洗涤。将有机相分离，经Na₂SO₄干燥， 过滤并除去溶剂，产生标题化合物，为白色泡沫状物(0.46g，96％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.54(s，9H)，3.00-3.12(m，6H)，6.63(br-s， 1H)，7.39-7.41(m，4H)。

步骤C

将来自上述步骤B的标题化合物(0.46g，1.75mmol)溶解于二氯甲烷 (2.2mL)中并用4M盐酸的1，4-二噁烷溶液(2.2mL，8.8mmol)处理。将混合 物在室温搅拌3h并用乙酸乙酯(20mL)稀释。然后加入饱和碳酸钠溶液直 至pH～10。将有机相分离，经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂。通过二氧 化硅色谱法、使用乙酸乙酯纯化残余物，产生标题化合物，为类白色固体 (0.16g，55％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝3.04(s，6H)，3.80(br-s，2H)，6.67(m，2H)， 7.31(m，2H)。

制备实施例22

步骤A

将市售可得的3-氨基苯甲酸(5g，36mmol)溶解于1M氢氧化钠溶液 (40mL，40mmol)和1，4-二噁烷(30mL)中。添加二碳酸二叔丁酯(7.85g， 36mmol)后，将混合物在室温搅拌整个周末。将二噁烷真空除去并将残余 物用水(100mL)稀释。然后加入浓盐酸(～37％)直至pH～3。过滤收集沉淀， 用水(100mL)洗涤并空气干燥，产生标题化合物，为白色固体(7.3g，84％)。

步骤B

将来自上述步骤A的标题化合物(0.43g，1.8mmol)悬浮于四氢呋喃 (10mL)中并用羰基二咪唑(0.37g，2.26mmol)处理。将混合物在室温搅拌1h。 然后向澄清溶液加入2M二甲胺的四氢呋喃溶液(2.25mL，4.5mmol)。继 续搅拌过夜并除去溶剂。将残余物溶解于乙酸乙酯(50mL)中、用10％柠檬 酸的水溶液(15mL)和盐水(15ml)洗涤。将有机相分离，经Na₂SO₄干燥， 过滤并除去溶剂，产生标题化合物，为无色泡沫状物(0.36g，75％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.55(s，9H)，3.00(s，3H)，3.13(s，3H)， 6.67(br-s，1H)，7.08(dt，1H)，7.32(t，1H)，7.40-7.48(m，2H)。

步骤C

将来自上述步骤B的标题化合物(0.36g，1.37mmol)溶解于二氯甲烷 (2mL)中并用4M盐酸的1，4-二噁烷溶液(2mL，8mmol)处理。将混合物在 室温搅拌3h并用乙酸乙酯(20mL)稀释。然后加入饱和碳酸钠水溶液直至 pH～10。将有机相分离，经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂。通过二氧化硅 色谱法、使用乙酸乙酯纯化残余物，产生标题化合物，为类白色固体(0.08g， 36％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝3.00(s，3H)，3.11(s，3H)，6.70-6.74(m， 2H)，6.77(dt，1H)，7.18(t，1H)。

制备实施例23

步骤A

向来自制备实施例3步骤A的标题化合物(2g，6.92mmol)在干燥乙腈 (15mL)中的悬液加入硫酸二甲酯(0.885g，6.92mmol)。将反应混合物在70℃ 加热8h。然后，将澄清溶液冷却至室温。将溶液分配于三个密封的管中并 在氩气气氛下冷却至0℃。然后将4-氨基哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.1g)在甲醇 (5mL)中的溶液加至每一个密封的管中并在50-60℃加热2天。除去溶剂并 将残余物溶解于乙酸乙酯(200mL)中。将有机相用稀Na₂CO₃溶液、水和盐 水洗涤并经Na₂SO₄干燥。蒸发溶剂并通过硅胶(EtOAc)纯化粗产物，得到 标题化合物(0.130g)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.59(s，9H)，2.23(m，2H)，3.09(m，2H)， 3.81(m，1H)，4.23(m，2H)，4.44(d，1H)，6.37(d，1H)，6.47(d，1H)，7.24(d，1H)， 7.38(s，1H)，8.16(d，1H)。

制备实施例24

步骤A

将市售可得的2，6-二溴吡啶(4.12g，16.6mmol)悬浮于乙醇(40mL)中并 加入水合肼(10mL，97.6mmol)的水溶液(～50-60％)。将混合物在沙浴中在 ～115℃加热18h。除去溶剂并通过二氧化硅色谱法、使用乙酸乙酯/正庚烷 (60/40)纯化残余物，产生标题化合物，为类白色固体(3.05g，93％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝3.00-3.33(br-s，2H)，6.00(br-s，1H)， 6.67(d，1H)，6.83(d，1H)，7.33(t，1H)。

步骤B

将来自上述步骤A的标题化合物(0.84g，4.49mmol)溶解于乙醇(16mL) 和水(4mL)中。添加环己酮(0.54mL，5.1mmol)后，将混合物在室温搅拌1h。 过滤收集沉淀，用乙醇(5mL)洗涤并空气干燥，产生标题化合物，为白色 固体(0.88mg，73％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.50-1.64(m，6H)，2.20-2.23(m，2H)， 2.39-2.41(m，2H)，6.80(d，1H)，7.00(d，1H)，7.42(t，1H)，9.83(s，1H)。

步骤C

将来自上述步骤B的标题化合物(0.2g，0.75mmol)悬浮于二甘醇(2mL) 中并使用Biotage Initiator微波在250℃加热30分钟。将混合物用乙酸乙 酯(40mL)和水(15mL)稀释。将有机相分离，用盐水(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂。采用Biotage Isolera One系统、使用乙酸乙酯/ 正庚烷(5/95-＞30/70)梯度纯化残余物，产生标题化合物，为类白色固体 (0.096mg，51％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.73-1.85(m，4H)，2.57(t，2H)，2.68(t， 2H)，7.05(d，1H)，7.63(d，1H)，11.40(s，1H)。

步骤D

将来自上述步骤C的标题化合物(0.06g，0.24mmol)悬浮于乙二醇(2mL) 和30％氢氧化铵溶液(3mL)中。添加氧化铜(I)(0.005g，0.035mmol)后， 使用Biotage Initiator微波将混合物在150℃加热45分钟。将反应混合物 用乙酸乙酯(30mL)和水/氢氧化铵的混合物(10mL，1/1)稀释。将有机相分 离，经Na₂SO₄干燥，过滤并蒸发溶剂。通过PREP-TLC、使用二氯甲烷/ 甲醇(95/5)纯化残余物，产生标题化合物，为褐色固体(0.022g，50％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.67-1.78(m，4H)，2.46(t，2H)，2.55(t， 2H)，5.26(s，2H)，6.12(d，1H)，7.34(d，1H)，10.30(s，1H)。

制备实施例25

步骤A

向来自制备实施例23步骤A的标题化合物(1g，5.37mmol)在乙醇 (50mL)中的溶液加入环戊酮(0.45g，5.37mmol)并将反应混合物在室温搅拌 3h。此时，在减压下蒸发溶剂，得到标题化合物(1.36g，定量)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.74-1.80(m，2H)，1.85-1.92(m，2H)， 2.24(t，2H)，2.46(t，2H)，6.86(d，1H)，7.10(d，1H)，7.37(t，1H)，7.54(s，1H)。

步骤B

将来自上述步骤B的标题化合物(0.65g，2.55mmol)在二甘醇(11mL) 中的溶液密封于微波玻璃管(20mL)中。然后，使用微波将反应混合物在 250℃加热90分钟。将反应混合物冷却并倒入乙酸乙酯(120mL)，用水和 盐水洗涤。将有机相经Na₂SO₄干燥并在减压下除去溶剂，得到粗产物， 其通过硅胶柱(二氯甲烷)纯化，得到标题化合物(0.120g，20％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝2.48-2.55(m，2H)，2.82(t，2H)，2.99(t， 2H)，7.18(d，1H)，7.60(d，1H)，10.1(s，1H)。

步骤C

将来自上述步骤C的标题化合物(0.1g，0.42mmol)溶解于二甘醇(2mL) 中并加入25％氢氧化铵溶液(3mL)和氧化铜(I)(0.008g，0.058mmol)。然 后，使用Biotage Initiator微波将反应混合物在150℃加热90分钟。将反 应混合物用二氯甲烷(200mL)稀释，用水和盐水溶液洗涤。将有机相分离， 并经Na₂SO₄干燥。通过硅胶柱(1/10，甲醇/二氯甲烷)纯化残余物，产生标 题化合物(0.06g，83％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝2.46-2.49(m，2H)，2.78(t，2H)，2.87(t， 2H)，6.36(d，1H)，7.55(d，1H)，8.35(s，1H)。

制备实施例26

步骤A

向2-6-二溴吡啶(5g，21.11mmol)在乙醇(50mL)中的悬液加入甲基肼 (3.33mL，63.3mmol)。将所得混合物升温至100℃，持续20h。将反应混合 物浓缩至干，将残余物通过快速色谱法(2x)、使用乙酸乙酯/正庚烷(15％ 至35％)纯化。获得产物，为淡红色液体(2.1g，49％)。

步骤B

向来自上述步骤A的标题化合物(0.500g，2.475mmol)和环己酮 (0.256mL，2.475mmol)的混合物加入乙醇(比率：1.000，体积：10.00mL)。 将所得溶液在室温搅拌2h，然后在真空下除去溶剂。用二甘醇(比率：1.000， 体积：10ml)稀释油状物并将所得混合物通过微波在250℃加热35min。将 深色溶液倒入水中并过滤。通过快速色谱法、以乙酸乙酯/正庚烷(10％至 30％)纯化固体，产生期望化合物，为白色固体(0.307g，47％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.76-2.05(m，4H)；2.54-2.80(m，4H)； 3.67(s，3H)；7.10(d，J＝8.0Hz，1H)；7.54(d，J＝8.0Hz，1H)。

MS(ESI)；m/z＝265.69/267.69(MH⁺)

制备实施例27

步骤A

向来自制备实施例25步骤A的标题化合物(0.500g，2.475mmol)和环戊 酮(0.208g，2.475mmol)的混合物加入乙醇(比率：1.000，体积：10.00mL)。 将所得溶液在室温搅拌2h。然后在真空下除去溶剂。用二甘醇(比率：1.000， 体积：10ml)稀释油状物，将所得混合物通过微波在250℃加热35min。

将深色溶液倒入水中中并过滤。通过快速色谱法以乙酸乙酯/正庚烷 (10％至30％)纯化固体，产生期望化合物，为微黄色固体(0.264g，42％)。

MS(ESI)；m/z＝251.66/253.67(MH⁺)

制备实施例28

步骤A

将市售可得的1，4-环己二酮单乙烯乙缩醛(5g，32mmol)溶解于甲醇 (65mL)中并将混合物置于冷-水浴中。分小份加入硼氢化钠(1.9g， 50mmol)(放热)。添加结束后，将混合物在室温搅拌2h。除去溶剂并将残 余物溶解于乙酸乙酯(150mL)、水(40mL)和1M NaOH(10mL)中。将有机 相分离并将水相用乙酸乙酯萃取(4x 75mL)。将合并的有机相经Na₂SO₄干 燥，过滤并除去溶剂，产生标题化合物，为无色液体(4.8g，94％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.53-1.70(m，4H)，1.78-1.95(m，4H)， 3.77-3.83(m，1H)，3.94-3.97(m，4H)。

步骤B

将三苯基膦(12.57g，48.6mmol)和邻苯二甲酰亚胺(3.56g，24.22mmol) 溶解于四氢呋喃(90mL)中并将混合物冷却至0℃。在0℃加入来自上述步 骤A的标题化合物(3.84g，24.2mmol)在四氢呋喃(90mL)中的溶液，之后加 入～40％偶氮二羧酸二乙酯在甲苯中的溶液(19.9mL，48.6mmol)。将混合 物在0℃搅拌10分钟，然后在室温过夜。除去溶剂并通过二氧化硅色谱法、 使用乙酸乙酯/正庚烷(20/80)作为流动相纯化残余物，产生标题化合物，为 类白色固体(3.5g，50％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.61-1.76(m，4H)，1.85-1.90(m，2H)， 2.50-2.62(m，2H)，3.93-4.02(m，4H)，4.18(tt，1H)，7.66-7.71(m，2H)， 7.80-7.83(m，2H)。

步骤C

将来自上述步骤B的标题化合物(3.5g，12.1mmol)悬浮于四氢呋喃 (30mL)和水(20mL)中。添加对甲苯磺酸(0.13g，0.67mmol)后，将混合物在 沙浴中在～115℃加热2h。将混合物用乙酸乙酯(200mL)稀释并加入碳酸氢 钠水溶液直至pH～8-9。将有机相分离并将水相用乙酸乙酯萃取(3x 50mL)。 将合并的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂，产生标题化合物，为 类白色固体(3g，定量)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝2.17-2.24(m，2H)，2.60-2.71(m，4H)， 2.80-2.90(m，2H)，4.78(tt，1H)，7.84-7.88(m，2H)，7.97-8.02(m，2H)。

步骤D

将来自制备实施例23步骤A的标题化合物(1.54g，8.23mmol)溶解于 乙醇(50mL)中并加入来自上述步骤C的标题化合物(2g，8.23mmol)。将混 合物在室温搅拌1h以形成悬液。除去溶剂，产生标题化合物，为类白色 固体(3.3g，定量)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝2.00-2.18(m，3H)，2.27-2.43(m，2H)， 2.50-2.63(m，2H)，3.30-3.38(m，1H)，4.46(tt，1H)，7.00(d，1H)，7.18(d，1H)， 7.62(t，1H)，7.93-8.00(m，4H)，10.1(s，1H)。

步骤E

将来自上述步骤D的标题化合物(1g，2.42mmol)悬浮于二甘醇(10mL) 中并使用Biotage Initiator微波在250℃加热35分钟。将反应混合物用乙 酸乙酯(100mL)和盐水(20mL)稀释。将有机相分离，经Na₂SO₄干燥，过滤 并除去溶剂。将反应如上所述运行2次，将合并的粗产物用甲醇(15mL)处 理。过滤收集沉淀，用甲醇(5mL)洗涤并空气干燥，产生标题化合物，为 米色固体(1.57g，49％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝2.20-2.24(m，1H)，2.71-2.82(m，1H)， 2.96-3.10(m，3H)，3.32-3.46(m，1H)，4.54-4.61(m，1H)，7.27(d，1H)，7.80(d， 1H)，7.97-8.03(m，4H)，11.70(s，1H)。

步骤F

将来自上述步骤E的标题化合物(1.57g，3.96mmol)悬浮于乙醇(50mL) 中并用50-60％肼水合物的水溶液(12mL，119mmol)处理。将混合物在室 温搅拌过夜以形成澄清溶液。除去溶剂并将残余物用二氯甲烷(150mL)处 理。将混合物超声处理5分钟，接着在室温搅拌30分钟。过滤收集沉淀并 用二氯甲烷(15mL)洗涤。蒸发合并的滤液，产生标题化合物，为米色固体 (0.74g，70％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.53-1.62(m，1H)，1.90-1.95(m，1H)， 2.20-2.28(m，1H)，2.69-2.73(m，2H)，2.80(dd，1H)，3.00-3.06(m，1H)，7.10(d， 1H)，7.68(d，1H)，11.33-11.41(br-s，1H)。

步骤G

将来自上述步骤F的标题化合物(0.87g，3.28mmol)溶解于四氢呋喃 (60mL)中并用三乙胺(1.1mL)和二碳酸二叔丁酯(2.7g，12.4mmol)处理。将 混合物在沙浴中在～40℃加热过夜。除去溶剂并将残余物用乙醚(20mL)处 理。过滤收集沉淀并用乙醚(10mL)洗涤固体，产生单-Boc保护的中间体， 为白色固体(0.86g)。蒸发滤液，产生粗标题化合物。将单-Boc中间体(0.86g) 溶解于四氢呋喃(60mL)中并用三乙胺(2.2mL)和二碳酸二叔丁酯(5.4g， 24.8mmol)处理。将混合物在室温搅拌过夜，除去溶剂并将粗产物与来自 初次运行的材料合并。通过硅胶使用Biotage Isolera One系统、采用乙酸 乙酯/正庚烷梯度(5/95-＞30/75)纯化粗产物，产生标题化合物，为白色固体 /泡沫状物(1.16g，76％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.44(s，9H)，1.69(s，9H)，1.84-1.92(m， 1H)，2.07-2.15(m，1H)，2.50(dd，1H)，3.00(dd，1H)，3.10(t，2H)，4.00-4.08(m， 1H)，4.62-4.66(m，1H)，7.31(d，1H)，7.51(d，1H)。

单-Boc  中间体：¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.38(s，9H)， 1.69-1.75(m，1h)，1.93-2.00(m，1H)，2.41(dd，1H)，2.72-2.79(m，2H)，2.87(dd， 1H)，3.66-3.72(m，1H)，7.00(d，1H)，7.11(d，1H)，7.70(d，1H)，11.47(s，1H)。

步骤H

将来自上述步骤G的标题化合物(1.16g，2.5mmol)溶解于N，N’-二甲基 乙酰胺(8mL)中并将混合物冷却至0℃。在0℃加入氢化钠(0.07g，3mmol) 并将混合物在0℃搅拌1h。在0℃加入甲基碘(0.2mL，3.32mmol)并将混合 物在室温搅拌2h。将混合物用乙酸乙酯(80mL)和盐水(20mL)稀释。将有 机相分离，经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂。通过二氧化硅色谱法、使 用Biotage Isolera One系统、采用乙酸乙酯/正庚烷梯度(5/95-＞15/85)纯化 残余物，产生为无色泡沫状物的标题化合物(0.73g，61％)，以及初始材料 (0.23g，20％)和相应的N¹-甲基-衍生物(0.053g，5％，白色固体)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.46(s，9H)，1.69(s，9H)，1.91-2.04(m， 2H)，2.62-2.77(m，2H)，2.84(s，3H)，3.00-3.10(m，1H)，3.22(dd，1H)， 4.24-4.46(br-m，1H)，7.31(d，1H)，7.50(d，1H)。

N¹-甲基-衍生物：¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.46(s，9H)， 2.00-2.10(m，2H)，2.70-2.90(m，7H)，3.70(s，3H)，4.21-4.50(br-m，1H)，7.12(d， 1H)，7.54(d，1H)。

步骤I

将来自上述步骤H的标题化合物(0.88g，1.83mmol)溶解于四氢呋喃 (15mL)和甲醇(15mL)中。添加1M氢氧化钠溶液(15mL，15mmol)后，将 混合物在室温搅拌过夜。除去有机溶剂并将残余物用水(20mL)稀释。过滤 收集沉淀，用水(5mL)洗涤并空气干燥，产生标题化合物，为白色固体 (0.67g，96％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.40(s，9H)，1.86-1.90(m，1H)， 1.95-2.04(m，1H)，2.66-2.71(m，2H)，2.78(s，3H)，2.80-2.85(m，2H)， 4.13-4.27(br-m，1H)，7.18(d，1H)，7.75(d，1H)，11.55(s，1H)。

步骤J

将来自上述步骤I的标题化合物(0.38g，0.89mmol)悬浮于四氢呋喃 (5mL)中并将混合物冷却至0℃。在0℃加入氢化钠(0.028g，1.15mmol)并 将混合物在0℃搅拌5分钟，然后在室温搅拌15分钟以形成澄清溶液。添 加三异丙基甲硅烷基氯(0.12mL，0.9mmol)后，将混合物在沙浴中在～85℃ 加热1h。将混合物用乙酸乙酯(50mL)和盐水(15mL)稀释。将有机相分离， 经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂。通过二氧化硅色谱法、使用Biotage Isolera One系统、采用乙酸乙酯/正庚烷梯度(5/95-＞100/0)纯化残余物， 产生为无色油状物的标题化合物(0.27g，52％)，以及起始材料(0.14g，39％， 白色固体)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.12-1.16(m，18H)，1.51(s，9H)， 1.81-1.90(m，3H)，1.98-2.03(m，2H)，2.72-2.80(m，2H)，2.85(s，3H)， 2.97-3.08(m，2H)，4.25-4.57(br-m，1H)，7.12(d，1H)，7.48(d，1H)。

制备实施例29

步骤A

向市售可得的4-溴苯基肼(1.46g，6.5mmol)在乙醇(50mL)中的溶液加 入制备实施例28步骤C(1.6g，6.5mmol)的乙醇(15mL)溶液。将反应混合 物在室温搅拌2h。除去溶剂，得到为固体的标题化合物(2.9g，定量)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝7.85-7.86(m，4H)，7.31(d，8.4Hz，2H)， 7.00(d，2H)，4.32-4.38(m，1H)，3.12-3.15(m，1H)，2.36-2.51(m，2.19-2.28(m， 2H)，1.92-2.06(m，3H)。

步骤B

将来自步骤A的标题化合物(2.9g，7.0mmol)在二甘醇(45mL)中的溶液 密封在微波玻璃管(20mL)中。然后，将反应管使用微波在250℃加热 55min。将反应以三个批次进行。收集合并的反应混合物，将其溶解于乙 酸乙酯(250mL)中并用水和盐水洗涤。将有机相经Na₂SO₄干燥并在减压下 除去溶剂以得到粗产物，其通过硅胶柱(乙酸乙酯/正庚烷20％-40％)纯化， 得到标题化合物(2.1g，72％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝7.88-7.90(m，2H)，7.84(brs，1H)， 7.75-7.78(m，2H)，7.53(d，1H)；7.22(dd，1H)，7.17(d，1H)，4.64-4.71(m，1H)， 3.44-3.51(m，1H)，2.90-2.96(m，3H)，2.07(m，1H)，1.28(brs，1H)。

步骤C

向来自步骤B的化合物(2g，5.0mmol)在THF(50mL)中的搅拌溶液加 入NH₂NH₂.H₂O(500mg 10mmol)并将反应混合物搅拌过夜。将沉淀滤出并 浓缩滤液，其不经进一步纯化和表征即可用于下一步骤。

步骤D

向来自步骤C的化合物(2.01g)在THF(50ml)中的溶液加入(Boc)₂O(2g， 9.1mmol)和三乙胺(1g，10mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜。除去溶 剂并将粗产物从乙酸乙酯和庚烷混合物结晶，得到单-Boc衍生物(1.15g)。 将结晶的单-Boc衍生物溶解于THF(50mL)中并加入过量的(Boc)₂O(5g， 22.9mmol)和三乙胺(1.5ml)，将反应混合物搅拌2天。除去溶剂并通过硅 胶柱色谱法(乙酸乙酯/正庚烷10-20％)纯化粗产物，得到标题化合物 (1.35g)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝7.99(d，1H)，7.49(d，1H)，7.34(dd，1H)， 4.68(brs，1H)，4.09(brs，1H)，3.11(brs，2H)，2.99(dd，1H)，2.49(dd，1H)， 2.10-2.12(m，1H)，1.89-1.96(m，1H)，1.68(s，9H)，1.48(s，9H)。

步骤E

将来自步骤D的标题化合物(370mg，0.79mmmol)在DMA(7mL)中的 溶液冷却至冰浴温度，然后分批加入NaH(40mg，1.59mmol)。将反应混合 物在室温搅拌30min并冷却至冰浴温度，加入甲基碘(222mg，1.59mmol)。 将反应混合物升至室温并搅拌3h。将反应混合物溶解于二氯甲烷(250mL) 中并用水和盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥。除去溶剂并通过硅胶柱色谱法(0/100 至15/85；EtOAc/庚烷混合物)纯化残余物，得到标题化合物，为白色泡沫 状物(271mg，71％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝7.97(d，1H)，7.67(s，1H)，7.38(d，1H)， 4.18-4.32(m，1H)，3.1-3.22(m，1H)，2.98-3.02(m，1H)，2.78(s，3H)， 2.68-2.70(m，2H)，1.92-1.97(m，2H)，1.61(s，9H)，1.42(s，9H)。

制备实施例30

步骤A

将市售可得的4-氨基环己醇盐酸盐(25g，164mmol)溶解于水(350mL) 中。然后加入碳酸钾(72g，328mmol)，然后加入市售可得的N-乙氧甲酰基 邻苯二甲酰亚胺在四氢呋喃(300mL)中的溶液。将反应混合物然后在室温 剧烈搅拌3天。在减压下蒸发四氢呋喃并将剩余的水相用二氯甲烷萃取(2x 300mL)直至水相澄清。将合并的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下 蒸发溶剂，产生标题化合物，为白色固体(28g，69％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.32-1.43(m，2H)，1.70-1.75(m，2H)， 2.04-2.09(m，2H)，2.25-2.38(m，2H)，3.67-3.77(m，1H)，4.05-4.13(m，1H)， 7.63-7.7.68(m，2H)，7.76-7.80(m，2H)。

步骤B

将来自上述步骤A的标题化合物(28g，114mmol)溶解于二氯甲烷 (990mL)中并分批加入氯铬酸吡啶鎓(33.6g，157mmol)。将反应混合物在室 温搅拌8h。然后分批加入另一批次氯铬酸吡啶鎓(10.4g，48.6mmol)并在室 温继续搅拌18h。将反应混合物通过硅藻土衬垫过滤，将硅藻土衬垫用二 氯甲烷(400mL)洗涤。将合并的滤液在减压下浓缩，通过二氧化硅色谱法、 使用乙酸乙酯/正庚烷(60/40)作为流动相纯化残余物，产生标题化合物，为 白色固体(24.62g，88％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝2.17-2.24(m，2H)，2.60-2.71(m，4H)， 2.80-2.90(m，2H)，4.78(tt，1H)，7.84-7.88(m，2H)，7.97-8.02(m，2H)。

步骤C

来自制备实施例23步骤A的标题化合物(19g，101mmol)溶解于乙醇 (570mL)中并加入来自上述步骤B的标题化合物(24.6g，101mmol)。将混 合物在室温搅拌2h以形成悬液。除去溶剂，产生标题化合物，为类白色 固体(41.8g，定量)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝2.00-2.18(m，3H)，2.27-2.43(m，2H)， 2.50-2.63(m，2H)，3.30-3.38(m，1H)，4.46(tt，1H)，7.00(d，1H)，7.18(d，1H)， 7.62(t，1H)，7.93-8.00(m，4H)，10.1(s，1H)。

步骤D

将来自上述步骤C的标题化合物(1.3g，3.15mmol)悬浮于二甘醇(13mL) 中并使用Biotage Initiator微波在245℃加热35分钟。将反应混合物用水 (90mL)稀释，过滤收集沉淀并空气干燥。重复该反应顺序直至来自上述步 骤C的标题化合物(41.8g)被消耗，产生标题化合物，为灰色固体(34.2g， 85％)。粗材料直接用于下一步骤。

步骤E

将来自上述步骤D的标题化合物(34.2g，86.36mmol)悬浮于乙醇 (1080mL)中并用50-60％水合肼水溶液(185mL，1990mmol)处理。将混合 物在室温搅拌2天。将沉淀通过过滤分离并用乙醇(150mL)洗涤。将合并 的滤液浓缩至～150mL并用二氯甲烷萃取(2x 450mL)。将有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂，产生粗标题化合物，为深色固体(22.97g，定量)。

步骤F

来自上述步骤E的标题化合物(22.97g，90.1mmol)溶解于四氢呋喃 (1000mL)中并用三乙胺(64mL)和二碳酸二叔丁酯(79g，367mmol)处理。将 混合物在室温搅拌18h并在减压下除去溶剂。将残余物用乙醚(600mL)处 理并在室温搅拌30分钟。过滤收集沉淀，用乙醚(250mL)洗涤并空气干燥， 产生标题化合物，为白色固体(11g，33％)：

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.38(s，9H)，1.69-1.75(m，1h)， 1.93-2.00(m，1H)，2.41(dd，1H)，2.72-2.79(m，2H)，2.87(dd，1H)，3.66-3.72(m， 1H)，7.00(d，1H)，7.11(d，1H)，7.70(d，1H)，11.47(s，1H)。

制备实施例31

步骤A

将来自制备实施例30步骤F的标题化合物(11g，30mmol)溶解于N，N’- 二甲基乙酰胺(140mL)中并将混合物冷却至0℃。在0℃加入氢化钠(2.2g， 92mmol)并将混合物在0℃搅拌2h。然后加入甲基碘(9mL，145mmol)，将 混合物在0℃搅拌5分钟。除去冰浴并在～5分钟后观察到放热。将反应混 合物短暂地放置于水浴中并在室温搅拌过夜。将反应混合物用水(700mL) 稀释并通过过滤收集沉淀。通过二氧化硅色谱法、使用二氯甲烷/丙酮(98/2) 进一步纯化固体材料，产生标题化合物，为白色固体(10.6g，85％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.46(s，9H)，2.00-2.10(m，2H)， 2.70-2.90(m，7H)，3.70(s，3H)，4.21-4.50(br-m，1H)，7.12(d，1H)，7.54(d，1H)。

步骤B

将来自上述步骤A的标题化合物(0.1g，0.253mmol)溶解于二氯甲烷 (2mL)中并用2M氯化氢(0.5mL，1mmol)的乙醚溶液处理。将混合物在室 温搅拌过夜。然后将三乙胺(0.07mL，0.316mmol)和乙酰氯(0.316mL， 1.034mmol)加至反应混合物中。再继续搅拌2h，然后用二氯甲烷稀释混合 物并用碳酸钠饱和水溶液洗涤。将有机相分离，经Na₂SO₄干燥，过滤并 除去溶剂以得到残余物，其使用Biotage快速色谱法系统(甲醇/二氯甲烷： 0-＞5％)纯化，产生标题化合物，为白色固体(0.065g，2步收率为75％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.99-2.03(m，1H)，2.12-2.19(m，4H)， 2.67-2.73(m，1H)，2.81(dd，1H)，2.87-2.90(m，2H)，2.94-2.98(m，4H)，3.70(d， 3H)，7.14(dd，1H)，7.53(dd，1H)。

制备实施例32

步骤A

向市售可得的2，6-二溴吡啶(10g，42.2mmol)在乙醇(50mL)中的悬液加 入市售可得的甲基肼(11.11mL，211mmol)。将混合物在80℃(反应混合物 温度)加热48h。将反应混合物浓缩至干，通过二氧化硅色谱法、使用Biotage Isolera One纯化系统、采用乙酸乙酯/正庚烷梯度(15/75-＞35/65)纯化残余 物，产生为微红色油状物的标题化合物(7.6g，89％)，其通过在室温静置形 成固体。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝3.23(s，3H)，4.00(br-s，2H)，6.70(d，1H)， 6.82(d，1H)，7.27(t，1H)。

步骤B

将市售可得的4-(甲基氨基)环己酮-2，2-二甲基三亚甲基缩酮盐酸盐 (3.7g，14.8mmol)和来自上述步骤A的标题化合物(3g，14.8mmol)在二 噁烷(30mL)中的悬液置于冰浴中。向搅拌的悬液缓慢加入浓 H₂SO₄(3mL)。添加H₂SO₄结束后，使用沙浴(～140℃)将反应混合物在回 流温度加热5h。将反应混合物冷却至室温，弃去二噁烷层，并加入冰水 (20mL)。搅拌混合物直到树胶状材料溶解。然后使用NaOH水溶液将反 应混合物的pH调节至pH＝14。将水层用二氯甲烷(200mL)萃取并将有 机相用水和盐水洗涤。将有机相分离，经Na₂SO₄干燥并在减压下除去 溶剂，产生粗标题化合物，为类白色固体(4.7g，定量)。

步骤C

向来自上述步骤A的粗标题化合物(4.7g)在四氢呋喃(50ml)中的溶液 加入三乙胺(5mL)和二碳酸二叔丁酯(10g，45.8mmol)。将反应混合物在室 温搅拌过夜。然后，将反应混合物浓缩并将残余物溶解于二氯甲烷(200mL) 中。将有机相用水、盐水洗涤并经Na₂SO₄干燥。在减压下除去有机溶剂 并通过硅胶、使用Biotage Isolera One纯化系统、采用乙酸乙酯/正庚烷梯 度(20/80-＞50/50)纯化残余物，产生标题化合物，为白色固体(3.55g，2步 收率61％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.46(s，9H)，2.00-2.10(m，2H)， 2.70-2.90(m，7H)，3.70(s，3H)，4.21-4.50(br-m，1H)，7.12(d，1H)，7.54(d，1H)。

制备实施例33

步骤A

将市售可得的4-羟基-环己烷甲酸乙酯(10.32g，59.92mmol)溶解于 N，N’-二甲基甲酰胺(50mL)中并加入咪唑(8.16g，119.5mmol)。添加三异丙 基甲硅烷氯(14.1mL，65.9mmol)后，将反应混合物在室温搅拌过夜。将反 应混合物用乙醚(150mL)稀释并用1M盐酸溶液(150mL)洗涤。将有机相分 离并将水相用乙醚(150mL)萃取。将合并的有机相用1M盐酸溶液(150mL) 和盐水(150mL)洗涤。将有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂，产生粗 标题化合物，为无色液体(18.7g，95％)。

步骤B

将来自上述步骤A的粗标题化合物(18.7g，65.17mmol)溶解于四氢呋 喃(90mL)和甲醇(60mL)中。添加氢氧化锂水合物(5.47g，130.6mmol)后， 将反应混合物使用沙浴在～70℃加热2h并在室温过夜。除去溶剂并将残余 物溶解于水(100mL)中。使用1M盐酸将反应混合物的pH调节至pH～3-4， 将水相用乙酸乙酯萃取(2x 200mL)。将合并的有机相经Na₂SO₄干燥，过 滤并除去溶剂，产生粗标题化合物，为淡黄色油状物(16.65g，97％)。

步骤C

将二异丙胺(9mL，65mmol)溶解于四氢呋喃(100mL)中并将混合物冷 却至0℃。在0℃加入1.6M正丁基锂的正己烷溶液(38.5mL，61.6mmol) 并将反应混合物在0℃搅拌15分钟。将反应混合物然后冷却至-78℃并滴 加来自上述步骤B的粗标题化合物(8.3g，30.9mmol)在四氢呋喃(30mL)中 的溶液。添加结束后，移除冷却浴并将反应混合物在沙浴中在～60℃加热 2h。将反应混合物再冷却至-78℃并加入甲基碘(2.1mL，34mmol)。将反应 混合物在-78℃搅拌2h，然后升温至室温过夜。将反应混合物倒入乙醚 (500mL)和1M盐酸(500mL)的混合物。将有机相分离并将水相用乙醚萃取 (2x 200mL)。将合并的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂。通过二 氧化硅色谱法、使用乙酸乙酯/正庚烷/甲醇(15/84/1)作为流动相纯化残余 物，产生为淡黄色油状物的标题化合物(4.35g，50％)和为淡黄色油状物的 回收的起始材料(1.51g，18％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.03(s，18H)，1.17-1.24(m，7H)， 1.43-1.52(m，2H)，1.64-1.71(m，1H)，1.77-1.84(m，2H)，2.18-2.23(m，2H)， 3.65-3.73(m，1H)。

回收的起始材料：

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.03(s，18H)，1.20-1.80(m，7H)， 1.94-2.05(m，4H)，2.28-2.33(m，1H)，3.62-3.68(m，1H)。

步骤D

将来自上述步骤C的标题化合物(2.18g，6.92mmol)溶解于甲苯(25mL) 中并加入三乙胺(1.08mL，7.7mmol)。添加叠氮磷酸二苯酯(1.63mL， 7.54mmol)后，将反应混合物在沙浴中在～115℃加热1h直到氢气逸出结束。 将混合物冷却至0℃并用饱和碳酸氢钠(15mL)、水(15mL)和盐水(15mL) 洗涤。将有机相分离，经Na₂SO₄干燥，过滤并蒸发溶剂，产生粗异氰酸 酯中间体。将粗中间体溶解于N，N’-二甲基乙酰胺(10mL)中并分批加入叔 丁醇钾(0.8g，7.13mmol)。添加结束后，将反应混合物在室温搅拌过夜。 将反应混合物用乙酸乙酯(80mL)和水(30mL)稀释。将有机相分离并用水 (20mL)和盐水(20mL)洗涤。将有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂。 通过二氧化硅色谱法、使用乙酸乙酯/正庚烷(10/90)作为流动相纯化残余 物，产生标题化合物，为无色油状物(1.57g，59％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.16(s，18H)，1.37-1.45(m，3H)，1.43(s， 3H)，1.56(s，9H)，1.58-1.66(m，4H)，1.82-1.88(m，2H)，2.13-2.20(m，2H)， 3.76-3.81(m，1H)，4.48(br-s，1H)。

步骤E

将来自上述步骤D的标题化合物(1.45g，3.77mmol)溶解于乙腈(25mL) 中并加入1M四丁基氟化铵的四氢呋喃溶液(14.8mL，14.8mmol)。将反应 混合物在室温搅拌过夜并除去溶剂。通过二氧化硅色谱法、使用乙酸乙酯/ 正庚烷(80/20)纯化残余物，产生标题化合物，为无色油状物(0.86g，99％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.42(s，3H)，1.54(s，9H)，1.57-1.70(m， 3H)，1.85-1.93(m，3H)，2.19-2.24(m，2H)，3.70-3.73(m，1H)，4.45(br-s，1H)。

步骤F

将来自上述步骤E的标题化合物(0.86g，3.76mmol)溶解于二氯甲烷 (40mL)中并分批加入氯铬酸吡啶鎓(1.18g，5.48mmol)。将反应混合物在室 温搅拌18h，通过硅藻土衬垫过滤并将硅藻土用二氯甲烷(20mL)洗涤。将 合并的滤液在减压下浓缩，通过二氧化硅色谱法、使用乙酸乙酯/正庚烷 (60/40)作为流动相纯化残余物，产生标题化合物，为无色油状物(0.76g， 89％)

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.42(s，3H)，1.45(s，9H)，1.77(dt，2H)， 2.23-2.50(m，6H)，4.48(br-s，1H)。

步骤G

将来自制备实施例23步骤A的标题化合物(0.63g，3.35mmol)溶解于 乙醇(20mL)中并加入来自上述步骤F的标题化合物(0.76g，3.35mmol)。将 混合物在室温搅拌1h以形成澄清溶液。除去溶剂，产生标题化合物，为 深黄色油状物(1.33g，定量)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.40(s，3H)，1.47(s，9H)，1.52-1.67(m， 3H)，2.15-2.23(m，2H)，2.40-2.50(m，3H)，4.45(br-s，1H)，6.90(d，1H)，7.15(d， 1H)，7.40(t，1H)，7.85(br-s，1H)。

步骤H

将来自上述步骤G的标题化合物(0.7g，1.76mmol)溶解于二甘醇(10mL) 中并使用Biotage Initiator微波(压力：10-11bar)在245℃加热60分钟。将 反应混合物用水(15mL)和二氯甲烷(40mL)稀释。将有机相分离，经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂，产生粗标题化合物，为深色油状物。将该过程再 重复一次并将合并的粗材料直接用于下一步骤。

步骤I

将来自上述步骤H的粗标题化合物溶解于四氢呋喃(45mL)中并用三 乙胺(1.7mL)和二碳酸二叔丁酯(2g，9.3mmol)处理。将混合物在室温搅拌 18h并在减压下除去溶剂。通过二氧化硅色谱法、使用Biotage Isolera One 纯化系统、采用乙酸乙酯/正庚烷梯度(5/95-＞30/70)纯化残余物，产生3个 不同的级分。

级分I：二-Boc衍生物；黄色油状物(0.15g，9％)

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.39(s，9H)，1.45(s，3H)，1.64(s，9H)， 1.70-1.75(m，1H)，2.41-2.46(m，1H)，2.70(d，1H)，2.83(d，1H)，2.88-3.05(m， 2H)，4.45(br-s，1H)，7.27(d，1H)，7.48(d，1H)。

级分II：来自步骤G的回收的标题化合物；黄色油状物(0.13g，9％)

级分III：单-Boc标题化合物；类白色固体(0.26g，19％)

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.45(s，9H)，1.54(s，3H)，1.76-1.83(m， 1H)，2.60-2.65(m，1H)，2.80-2.90(m，4H)，4.55(s，1H)，7.18(d，1H)，7.59(d， 1H)，9.75(br-s，1H)。

步骤J

将来自上述步骤I的二-Boc衍生物(0.15g，0.32mmol)溶解于四氢呋喃 (2.6mL)和甲醇(2.6mL)中。添加1M氢氧化钠水溶液(2.6mL，2.6mmol)后， 将反应混合物在室温搅拌过夜并蒸发溶剂。将残余物用水(20mL)处理，过 滤收集沉淀，用水(5mL)洗涤并空气干燥，产生来自步骤I的单-Boc标题 化合物，为白色固体(0.09g，76％)。

步骤K

将来自上述步骤I的单-Boc标题化合物(0.35g，0.94mmol)溶解于N，N’- 二甲基乙酰胺(5mL)中并将混合物冷却至0℃。在0℃加入氢化钠(0.068g， 2.8mmol)并将混合物在0℃搅拌90分钟。然后在0℃加入甲基碘(0.27mL， 4.45mmol)，除去冰浴并将反应混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物用 乙酸乙酯(50mL)和水(20mL)稀释。将有机相分离并将水相用乙酸乙酯萃取 (20mL)。将合并的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂。通过二氧化 硅色谱法、使用Biotage Isolera One系统、采用乙酸乙酯/正庚烷梯度(5/95 -＞30/70)纯化残余物，产生标题化合物，为白色固体(0.31g，81％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.49(s，3H)，1.86-1.94(m，1H)， 2.68-2-74(m，3H)，2.72(s，3H)，3.07-3.18(m，2H)，3.72(s，3H)，7.15(d，1H)， 7.57(d，1H)。

制备实施例34

步骤A

将来自制备实施例28步骤A的标题化合物(12g，75.9mmol)溶解于二 氯甲烷(240mL)中并加入三乙胺(14.5mL)。添加苯甲酰氯(12.7g，91.2mmol) 后，将反应混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物用二氯甲烷(100mL)稀 释并用水(80mL)和10％柠檬酸水溶液(2x 80mL)洗涤。将有机相分离，经 Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下蒸发溶剂，产生为油状物的粗标题化合物。

步骤B

将来自上述步骤A的粗标题化合物溶解于四氢呋喃(85mL)和水 (250mL)中。然后加入对甲苯磺酸(1g，5.8mmol)并将混合物在沙浴中在 ～115℃加热4h。将混合物冷却至室温，用乙酸乙酯(250mL)稀释并分析有 机相。将有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂。通过二氧化硅色谱法、 使用乙酸乙酯/正庚烷(20/80)作为流动相纯化残余物，产生标题化合物，为 白色固体(10.7g，2步收率64％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝2.27-2.45(m，4H)，2.52-2.61(m，2H)， 2.74-2.84(m，2H)，5.55-5.60(m，1H)，7.60(t，2H)，7.73(t，1H)，8.21(d，2H)。

步骤C

将来自制备实施例23步骤A的标题化合物(3.69g，19.6mmol)溶解于 乙醇(85mL)中并加入来自上述步骤B的标题化合物(4.28g，19.6mmol)。将 混合物在室温搅拌1h并在减压下除去溶剂，产生标题化合物，为黄色泡 沫状物(7.6g，定量)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝2.12-2.26(M，4H)，2.53-2.61(m 2H)， 2.68-2.84(m，2H)，7.02(d，1H)，7.30(d，1H)，7.55(t，1H)，7.57-7.62(m 2H)， 7.71(t，1H)，8.17-8.22(m，2H)。

步骤D

将来自上述步骤C的标题化合物(0.95g，2.45mmol)溶解于二甘醇 (9.5mL)中并使用Biotage Initiator微波在245℃加热35分钟。将反应混合 物用水(25mL)和乙酸乙酯(100mL)稀释。将有机相分离，用盐水(25mL)洗 涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂。将该过程再重复七次，通过二氧 化硅色谱法、使用二氯甲烷/丙酮(98/2)作为流动相纯化合并的粗材料，产 生标题化合物，为类白色固体(3.4g，46％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝2.23-2.38(m 2H)，2.95-3.27(m，4H)， 5.60(5.57-5.61(m，1H)，7.22(d，1H)，7.44-7.47(m，2H)，7.58(t.1H)，7.65(d， 1H)，8.06(d，2H)，9.88(br-s，1H)。

步骤E

将来自上述步骤D的标题化合物(3.4g，9.19mmol)溶解于N，N’-二甲基 乙酰胺(40mL)中并将溶液冷却至0℃。在0℃分批加入氢化钠(0.29g， 11.95mmol)。将混合物在0℃搅拌1h并加入甲基碘(1.19mL，19.14mmol)。 将混合物在0℃搅拌5分钟，然后在室温搅拌16h。将反应混合物用乙酸 乙酯(250mL)、10％柠檬酸水溶液(80mL)和盐水(50mL)稀释。将有机相分 离，用盐水(50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂。通过二氧化 硅色谱法、使用Biotage Isolera One纯化系统、采用乙酸乙酯/正庚烷梯度 (5/95-＞30/70)纯化残余物，产生标题化合物，为类白色固体(2.42g，68％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝2.25-2.34(m，2H)，2.85-3.00(m，3H)， 3.18(dd，1H)，3.75(s，3H)，5.52-5.57(m，1H)，7.15(d，1H)，7.42(t，2H)， 7.53-7.57(m，2H)，8.00-8.04(m，2H)。

步骤F

将来自上述步骤E的标题化合物(0.33g，0.86mmol)溶解于四氢呋喃 (8mL)和水(8mL)中。添加氢氧化钾(0.75g，13.4mmol)后，使用Biotage Initiator微波将混合物在140℃加热30分钟。将反应混合物用乙酸乙酯 (30mL)和水(10mL)稀释。将有机相分离，用盐水(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂。将该过程再重复六次，产生标题化合物，为类白 色固体(1.74g，98％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝2.00-2.16(m，2H)，2.68(dd，1H)， 2.75-2.80(m，1H)，2.88-2.93(m，1H)，3.06(dd，1H)，3.71(s，3H)，4.25-4.30(m， 1H)，7.13(d，1H)，7.56(d，1H)。

步骤G

将来自上述步骤F的标题化合物(0.2g，0.71mmol)溶解于N，N’-二甲基 乙酰胺(3mL)并将溶液冷却至0℃。在0℃加入氢化钠(0.023g，0.92mmol)。 将混合物在0℃搅拌1h并加入甲基碘(0.09mL，1.47mmol)。将混合物在室 温搅拌16h。将反应混合物用乙酸乙酯(30mL)、10％柠檬酸水溶液(8mL) 和盐水(5mL)稀释。将有机相分离，用盐水(5mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥， 过滤并除去溶剂。通过二氧化硅色谱法、使用Biotage Isolera One纯化系 统、采用乙酸乙酯/正庚烷梯度(5/95-＞40/60-＞100/0)纯化残余物，产生标 题化合物，为浅橙色油状物(0.13g，63％)，其通过在室温静置形成固体。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝2.05-2.19(m，2H)，2.70-2.78(m，2H)， 2.86-2.93(m，1H)，3.30(dd，1H)，3.47(s，3H)，3.71(s，3H)，3.75-3.78(m，1H)， 7.14(d，1H)，7.56(d，1H)。

制备实施例35

步骤A

向市售可得的4-溴苯基肼(2.6g，11.6mmol)在乙醇(50mL)中的溶液加 入酮衍生物(2.54g，11.6mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h。除去溶剂以 得到为固体的标题化合物(4.5g，定量)。将化合物不经任何纯化即用于下一 步骤。

步骤B

将来自上述步骤的标题化合物(4.4g，11.3mmol)在二甘醇(45mL)中的 溶液密封于三个不同的微波玻璃管(20mL)中。然后，使用微波将反应管在 250℃加热55min。收集合并的反应混合物并溶解于DCM(200mL)中，用 水和盐水洗涤。将有机相经Na₂SO₄干燥并在减压下除去溶剂，得到粗产 物，其通过硅胶柱纯化(乙酸乙酯/正庚烷20％-30％)，得到标题化合物(1.77g， 42％)。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ7.95(d，1H)，7.65(t，1H)，7.52(dd，1H)， 7.24(d，1H)，7.12(d，1H)，5.46(s，1H)，3.34(s，3H)，3.13(dd，1H)，2.98- 2.78(m，1H)，2.51(s，2H)，2.18(d，1H)。

步骤C

向来自上述步骤B的化合物(200mg，0.54mmol)在THF(50mL)中的搅 拌溶液加入NaH(25mg，1.0mmol)。将悬液搅拌10min。然后加入甲基碘 溶液(75mg，0.5mmol)并将反应混合物搅拌1h。将反应混合物用水淬灭并 用乙酸乙酯萃取(100mL)。将有机相用盐水洗涤并经Na₂SO₄干燥。除去溶 剂，通过硅胶柱(洗脱剂10∶90EtOAc∶庚烷)纯化粗材料，得到标题化合物 (200mg，96％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝8.10-8.00(m，2H)，7.59-7.55(m，2H)， 7.46-7.42(m，2H)，7.26-7.28(m，1H)，7.16(d，1H)，5.59-5.56(m，1H)，3.66(s， 3H)，3.21(dd，1H)，3.01-2.92(m，3H)，2.33-2.27(m，2H)。

步骤D

向来自步骤C的化合物(200mg，0.52mmol)在THF∶H₂O(1∶1，8mL)中 的溶液加入KOH(450mg，7.8mmol)。使用微波将反应混合物在140℃加热 30min。将反应混合物用乙酸乙酯(150mL)萃取并用水和盐水洗涤，经 Na₂SO₄干燥。蒸发溶剂并通过硅胶柱(洗脱剂10∶90EtOAc∶庚烷)纯化粗 材料，得到标题化合物(137mg，69％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝7.56(d，1H)，7.23(dd 1H)，7.10(d，1H)， 4.48-4.07(m，1H)，3.60(s，3H)，3.05(dd，1H)，2.89(dt，1H)，2.83-2.61(m，3H)， 2.20-1.96(m，2H)。

步骤E

向来自上述步骤D的化合物(130mg，0.46mmol)在THF(10mL)中的溶 液加入NaH(22mg，0.92mmol)。将悬液在室温搅拌10min。然后加入甲基 碘溶液(129mg，0.92mmol)并将反应混合物搅拌1h。然后将反应混合物小 心地用水淬灭并用乙酸乙酯(150mL)萃取。将有机相用盐水洗涤并经 Na₂SO₄干燥。除去溶剂并通过硅胶柱(洗脱剂10∶90EtOAc∶庚烷)纯化， 得到标题化合物(115mg，85.8％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.57(d，1H)，7.21(dd，1H)，7.09(d，1H)， 3.87-3.72(m，1H)，3.59(s，3H)，3.46(s，3H)，3.03(dd，1H)，2.90-2.83(m，1H)， 2.77-2.68(m，2H)，2.19-2.12(m，1H)，2.19-1.98(m，1H)。

制备实施例36

步骤A

向市售可得的3-溴苯基肼(2g，9.1mmol)在乙醇(50mL)中的溶液加入酮 衍生物(2g，9.1mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h。除去溶剂以得到为 固体的标题化合物(3.52g，定量)。产物不经任何进一步纯化即用于下一步 骤。

步骤B

将标题化合物(3.5g，9.1mmol)在二甘醇(12mL)中的溶液密封于微波玻 璃管(20mL)中。然后，使用微波将反应混合物在245℃加热50min。将反 应混合物溶解于乙酸乙酯(250mL)中并用水和盐水洗涤。将有机相经 Na₂SO₄干燥并在减压下除去溶剂，并通过硅胶柱(乙酸乙酯/正庚烷 10％-40％)纯化粗产物，得到两种区域异构体(1.17，32％)。

区域异构体A(苯甲酸7-溴-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基酯)(670mg)

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝8.05(d，1H)，7.83(s，1H)，7.57(m，1H)， 7.47-7.42(m，2H)，7.32(d，1H)，7.21(dd，1H)，5.62-5.59(m，1H)，3.22(dd， 1H)，3.10-2.76(m，3H)，2.56-2.07(m，2H)。

区域异构体B(苯甲酸5-溴-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基酯)(500mg)

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝8.08(d，1H)，7.92(s，1H)，7.57(m，1H)， 7.45(t，1H)，7.24(t，1H)，6.97(t，1H)，5.61(m，1H)，3.65(dd，1H)，3.38(dd，1H)， 3.17-2.66(m，2H)，2.45-2.07(m，2H)。

步骤C

向来自步骤2的化合物区域异构体A(450mg，1.2mmol)在THF(15mL) 中的搅拌溶液加入NaH(58mg，2.4mmol)。将悬液搅拌10min。然后加入 甲基碘溶液(338mg，2.4mmol)并将反应混合物搅拌2h。将反应混合物用水 淬灭并用乙酸乙酯萃取(200mL)。将有机相用盐水洗涤并经Na₂SO₄干燥。 除去溶剂并通过硅胶柱(乙酸乙酯/正庚烷10％-30％)纯化粗材料，得到标 题化合物(357mg，77.6％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝8.06-8.03(m，1H)，7.62-7.52(m，1H)， 7.49-7.39(m，2H)，7.33(d，1H)，7.20(dd，1H)，5.76-5.41(m，1H)，3.65(s， 3H)，3.23(dd，1H)，3.13-2.73(m，3H)，2.56-2.11(m，2H)。

步骤D

向来自步骤3的化合物(357mg，0.92mmol)在THF∶H₂O(1∶1，8mL)中 的溶液加入KOH(450mg，7.8mmol)。使用微波将反应混合物在140℃加热 30min。将反应混合物用乙酸乙酯(150mL)萃取并用水和盐水洗涤，经 Na₂SO₄干燥。蒸发溶剂并通过硅胶柱(乙酸乙酯/正庚烷10％-40％)纯化粗 材料，得到标题化合物(160mg，62％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ＝7.42(d，1H)，7.32(d，1H)，7.19(dd，1H)， 4.38-4.21(m，1H)，3.61(s，3H)，3.09(dd，1H)，2.82-2.70(m，3H)，2.16- 1.96(m，2H)。

步骤E

向来自步骤4的化合物(160mg，0.57mmol)在THF(5mL)中的溶液加 入NaH(122mg，5.0mmol)。将悬液在室温搅拌10min。然后加入甲基碘溶 液(400mg，2.83mmol)并将反应混合物搅拌4h。然后，将反应混合物小心 地用水淬灭并用乙酸乙酯(150mL)萃取。将有机相用盐水洗涤并经Na₂SO₄干燥。除去溶剂并通过硅胶柱(乙酸乙酯/正庚烷10％-40％)纯化，得到标 题化合物(120mg，71.8％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝7.40(d，1H)，7.32(d，1H)，7.18(dd，1H)， 3.84-3.71(m，1H)，3.60(s，3H)，3.48(s，3H)，3.08(dd，1H)，2.87(dt，1H)， 2.74-2.70(m 2H)，2.20-2.03(m，2H)。

制备实施例37

步骤A

向标题化合物(5g，31.6mmol)在THF(100mL)中的溶液加入NaH(1.2g， 50mmol)。将悬液在室温搅拌10min。缓慢加入甲基碘溶液(5.5g，39mmol) 并将反应混合物搅拌3h。然后，将反应混合物小心地用水淬灭，并浓缩反 应混合物。将残余物溶解于EtOAc(200mL)中并用水和盐水洗涤，经 Na₂SO₄干燥。在减压下除去溶剂，通过硅胶柱、使用Biotage Isolera One 纯化系统、采用EtOAc/正庚烷梯度(15/85-＞50/50)纯化残余物，产生标题 化合物(4.3g，80％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ：3.95(s，3H)，3.35-3.29(m，5H)， 1.87-1.80(m，4H)，1.75-1.68(m，2H)，1.60-1.52(m，2H)。

步骤B

向标题化合物(6.4g，37.2mmol)在THF∶H₂O(1∶1；50mL)中的溶液加入 对甲苯磺酸(640mg，3.86mmol)。将反应混合物在100℃加热过夜。将反应 混合物用乙酸乙酯(200mL)萃取。将有机相用水、盐水洗涤并经Na₂SO₄干 燥。在减压下除去溶剂，通过硅胶柱、使用Biotage Isolera One纯化系统、 采用EtOAc/正庚烷梯度(20/80-＞50/50)纯化残余物，产生标题化合物(4.2g， 89％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ：3.64-3.62(m，1H)，3.42(s，3H)， 2.62-2.54(m，2H)，2.31-2.26(m，2H)，2.14-2.06(m，2H)，1.99-1.92(m，2H)。

步骤C

向来自步骤B的4-甲氧基环己酮(1.4g，10.8mmol)的溶液加入(3-溴苯 基)肼盐酸盐(2.4g，10.8mmol)在乙醇(50mL)中的溶液。然后将反应混合物 在室温搅拌4h。然后在减压下蒸发溶剂，得到标题化合物(3.1g，定量)。 产物不经任何纯化即用于下一步骤。

步骤D

将来自步骤D的标题化合物(3.1g，10.4mmol)在二甘醇(12mL)中的溶 液密封于微波玻璃管(20mL)中。然后，使用微波将反应混合物在250℃加 热50min。将反应混合物溶解于乙酸乙酯(250mL)中并用水和盐水洗涤。 将有机相经Na₂SO₄干燥并在减压下除去溶剂，通过硅胶柱、使用Biotage Isolera One纯化系统、采用EtOAc/正庚烷梯度(20/80-＞30/70)纯化粗产 物，产生两种区域异构体的混合物(1.6g，53％)。

步骤E

向来自上述步骤D的标题化合物(1.4g，4.99mmol)在THF(30mL)中的 溶液加入二碳酸二叔丁酯(1.3g，5.9mmol)和催化量的二甲基氨基吡啶(5 mg)。然后，将反应混合物搅拌1h。除去溶剂，通过硅胶柱使用Biotage Isolera One纯化系统、采用EtOAc/正庚烷梯度(5/95-＞25/75)纯化粗产物， 产生两种区域异构体。快速洗脱的化合物为区域异构体A(700mg，37％)， 而缓慢洗脱的化合物为区域异构体B(1.1g，58％)。

区域异构体A：5-溴-3-甲氧基-3，4-二氢-1H-咔唑-9(2H)-甲酸叔丁酯：

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ：8.15(d，1H)，7.34(d，1H)，7.06(t，1H)， 3.77-3.71(m，1H)，3.48(s，3H)，3.47-3.42(m，1H)，3.18-3.11(m，2H)， 3.05-2.97(m，1H)，2.10-1.95(m，2H)，1.67(s，9H)。

区域异构体B：7-溴-3-甲氧基-3，4-二氢-1H-咔唑-9(2H)-甲酸叔丁酯：

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ＝8.35(d，1H)，7.34(dd，1H)，7.23(d，1H)， 3.78-3.73(m，1H)，3.47(s，3H)，3.19-3.12(m，1H)3.00-2.95(m，2H)， 2.69-2.63(m，1H)，2.15-2.09(m，1H)，2.05-1.96(m，1H)1.68(s，9H)。

制备实施例38

步骤A

将标题化合物(11g，70mmol)在THF∶H₂O(100mL，1∶1)中的溶液在 110℃加热过夜。将反应混合物用乙酸乙酯(250mL)萃取。将有机相用水和 盐水洗涤并经Na₂SO₄干燥。在减压下除去溶剂，得到标题化合物(5.2g， 65％)。

步骤B

向2-溴-6-(1-甲基肼基)吡啶(5.2g，25.7mmol)在THF(50mL)中的溶液 加入4-羟基环己酮(3.1g，27.1mmol)。将反应混合物搅拌1h。在减压下除去 溶剂，得到油状物化合物(7.6g，定量)。化合物不经任何纯化即用于下一步 骤。

步骤C

将来自步骤B的标题化合物(7.65g，25.7mmol)在二甘醇(45mL)中的溶 液密封于微波玻璃管(20mL)中。使用微波将反应管在250℃加热55min。 分3个批次进行反应。收集合并的反应混合物并溶解于乙酸乙酯(250mL)， 用水和盐水洗涤。将有机相经Na₂SO₄干燥并在减压下除去溶剂，得到粗 产物，其通过硅胶柱(乙酸乙酯/正庚烷20％-40％)纯化，得到标题化合物(3.6， 50％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.58(d，J＝8.0Hz，1H)，7.16(d，J＝8.0Hz， 1H)，4.29-4.28(m，1H)，3.69(s，3H)，3.08(dd，J＝15.4，4.2Hz，1H)， 2.93-2.85(m，1H)，2.80-2.66(m，2H)，2.17-1.99(m，3H)。

制备实施例39

步骤A

在0℃向2-氟乙醇(0.32mL，5mmol)在吡啶和甲苯(5mL，1∶1)混合物 中的溶液加入对甲苯磺酰氯。将反应混合物搅拌过夜。将反应混合物溶解 于EtOAc(150mL)中并用水和盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥。在减压下除去溶 剂，并通过硅胶柱、使用Biotage Isolera One纯化系统、采用EtOAc/正庚 烷(5/95＝＞30/70)纯化粗产物，得到标题化合物，为无色液体(1.54g，67％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ＝7.85(m，2H)，7.40(m，2H)，4.65(m，1H)， 4.55(m，1H)，4.35(m，1H)，4.25(m，1H)，2.48(s，3H)。

制备实施例40

步骤A

向来自制备实施例38步骤C的标题化合物(150mg，0.53mmol)在 THF(15mL)中的溶液加入NaH(25mg，1.06mmol)并将悬液搅拌5min。然 后，加入来自步骤A的化合物(116mg，0.53mmol)的溶液。将反应混合物 在100℃加热过夜。将反应混合物溶解于EtOAc(100ml)中，并用水和盐水 洗涤，经Na₂SO₄干燥。通过硅胶柱、使用Biotage Isolera One纯化系统、 采用EtOAc/正庚烷梯度(10/90＝＞20/80)纯化产物，产生标题化合物(78mg， 45％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.57(d，1H)，7.15(d，1H)，4.72-4.61(m， 1H)，4.67(t，1H)，4.55(t，1H)，3.97-3.91(m，1H)，3.90(t，1H)，3.83(t，H) 3.71(s，3H)，3.07(dd，1H)，2.93-2.88(m，1H)，2.80-2.72(m，2H)，2.22- 2.20(m，1H)，2.14-2.05(m，1H)。

制备实施例41

步骤A

向标题化合物(5.6g，35.4mmol)在2-碘丙烷(28mL)中的溶液加入 Ag₂O(16g，69.2mmol)并将反应混合物搅拌4天。然后将反应混合物用乙醚 稀释并滤出，将滤液在减压下浓缩，通过硅胶柱、使用Biotage Isolera One 纯化系统、采用EtOAc/正庚烷梯度(5/95＝＞20/80)纯化粗产物，产生标题 化合物(2.6g，57％基于起始材料回收率)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ3.95(s，4H)，3.80-3.59(m，1H)，3.48(s， 1H)，1.81(d，4H)，1.76-1.61(m，3H)，1.56(d，2H)，1.15(d，6H)。

步骤B

向来自步骤A的标题化合物(3g，15.0mmol)在THF∶H₂O(20mL，1∶1) 中的溶液加入对甲苯磺酸(0.5g，3mmol)并将反应混合物在100℃加热过夜。 将反应混合物用EtOAc(200mL)萃取。将有机相用水和盐水洗涤并经 Na₂SO₄干燥。除去溶剂，通过硅胶柱、使用Biotage Isolera One纯化系统、 采用EtOAc/正庚烷梯度(20/80＝＞50/50)纯化粗产物，产生标题化合物(2.1g， 91％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ3.78(d，1H)，2.61(s，1H)，2.29(s，1H)，2.18 -1.80(m，2H)，1.35-1.07(m，4H)。

步骤C

向市售可得的2-溴-6-(1-甲基肼基)吡啶(620，3.06mmol)在THF(5mL) 中的溶液加入来自步骤B的酮衍生物(0.62g，3.06mmol)。将反应混合物在 室温搅拌2h。除去溶剂，得到标题化合物，为油状物物(1g，定量)。产物 不经任何进一步纯化即用于下一步骤。

步骤D

将来自步骤C的标题化合物(1g，3.9mmol)在二甘醇(12mL)中的溶液密 封于微波玻璃管(20mL)中。然后，使用微波将反应混合物在245℃加热 50min。将反应混合物溶解于乙酸乙酯(250mL)中并用水和盐水洗涤。将有 机相经Na₂SO₄干燥并在减压下除去溶剂，通过硅胶柱、使用Biotage Isolera One纯化系统、采用EtOAc/正庚烷梯度(10/90＝＞50/50)纯化粗产物，产生 标题化合物(258mg，26％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.57(d，1H)，7.14(d，1H)，3.99-3.79(m， 2H)，3.71(s，3H)，3.11-2.98(m，1H)，2.90(dt，1H)，2.79-2.72(m，1H)，2.69- 2.62(m，1H)，2.20-2.11(m，1H)，2.08-1.93(m，1H)，1.23(d，3H)，1.22(d，3H)。

制备实施例42

步骤A

向市售可得的3-溴苯基肼(2.74g，12.2mmol)在乙醇(100mL)中的溶液 加入酮衍生物(3g，12.2mmol)在乙醇(50mL)的溶液。将反应混合物在室温搅 拌5h。除去溶剂，得到为固体的标题化合物(5g，定量)。产物不经任何纯 化即用于下一步骤。

步骤B

将来自步骤A的标题化合物(5g，12.1mmol)在二甘醇(12mL)中的溶液 密封于微波玻璃管(20mL)中。然后，使用微波将反应混合物在245℃加热 50min。分3个批次进行反应。将合并的反应混合物溶解于乙酸乙酯(250mL) 并用水和盐水洗涤。将有机相经Na₂SO₄干燥并在减压下除去溶剂，并通 过硅胶柱、使用Biotage Isolera One纯化系统、采用EtOAc/正庚烷梯度 (10/90＝＞55/45)纯化粗产物，产生为两种区域异构体的标题化合物(3.3g， 70％)。

区域异构体A(1.9g)(2-(7-溴-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基)异二氢吲哚 -1，3-二酮)

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.89(m，2H)，7.82-7.65(m，2H)，7.46(s， 1H)，7.2-7.26(m，1H)，7.19(d，1H)，4.71-4.66(m，1H)，3.52-3.46(m，1H)，3.00 -2.91(m，4H)，2.11-2.07(m，1H)。

区域异构体B(1.4g)(2-(5-溴-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基)异二氢吲哚 -1，3-二酮)

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.82(dd，2H)，7.70(dd，2H)，7.18(d，1H)， 7.10(d，1H)，6.86(t，1H)，4.57(m，1H)，3.63-3.57(m，1H)，3.53-3.25(m，1H)， 3.08-2.69(m，3H)，1.99(d，1H)。

步骤C

向来自上述步骤B的化合物区域异构体A(980mg，2.48mmol)在 THF(25mL)中的搅拌溶液加入NH₂NH₂(2mL)。将反应混合物搅拌2天。 将固体滤出。将滤液在减压下浓缩，并将粗产物溶解于DCM(200mL)中。 将有机相用水和盐水洗涤并经Na₂SO₄干燥。在减压下除去溶剂，粗产物 不经任何进一步纯化即用于下一步骤。

步骤D

向来自上述步骤的粗产物(1.1g)在THF(25ml)中的溶液加入(Boc)₂O (4.5g，20.6mmol)和三乙胺(2.5mL)。将反应混合物在室温搅拌过夜。除去溶 剂，通过硅胶柱、使用Biotage Isolera One纯化系统、采用EtOAc/正庚烷 梯度(20/80＝＞50/50)纯化粗产物，产生快速洗脱的化合物(为二-Boc-保护的 化合物)(650mg)和缓慢洗脱的化合物(为单-Boc-保护的化合物)(830mg)。

二-Boc：(650mg)

7-溴-3-(叔丁氧基羰基氨基)-3，4-二氢-1H-咔唑-9(2H)-甲酸叔丁酯

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.35(d，1H)，7.35(dd，1H)，7.23(d，1H)， 4.68(s，1H)，4.10(s，1H)，3.09-3.01(m，3H)，2.53(dd，1H)，2.13-2.00(m，1H)， 2.03-1.75(m，1H)，1.69(s，9H)，1.48(s，9H)。

单-Boc：(830mg)

7-溴-2，3，4，9-四氢-1H-咔唑-3-基氨基甲酸叔丁酯

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.45(d，1H)，7.30(d，3H)，7.20(dd，1H)， 4.70(s，1H)，4.12(s，1H)，3.08(dd，1H)，2.85-2.81m，3H)，2.57(dd，2H)，2.15- 2.12(m，1H)，2.01-1.93(m，1H)，1.48(s，9H)。

步骤E

将来自上述步骤的二-Boc保护的化合物(630mg，1.35mmol)在 DMA(5mL)中的溶液冷却至冰浴温度并分批加入NaH(65mg，2.7mmol)。 将悬液在室温搅拌5min并加入甲基碘溶液(380mg，2.7mmol)。将反应混 合物在室温搅拌2h。将反应混合物溶解于二氯甲烷(250mL)中并用水和盐 水洗涤，经Na₂SO₄干燥。除去溶剂并通过硅胶柱、使用Biotage Isolera One 纯化系统、采用EtOAc/正庚烷梯度(20/80＝＞50/50)纯化粗产物，产生标题 化合物(435mg，67％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.34(s，1H)，7.35(d，1H)，7.23(d，1H)， 4.50(m，1H)，3.28-3.24(m，1H)，3.08-3.0(m，1H)，2.87(s，3H)，2.75(m，2H)， 1.98(dd，3H)，1.68(s，9H)，1.50(s，9H)。

制备实施例43

步骤A

向来自制备实施例41步骤D的单保护的化合物(750mg，2.05mmmol) 在DMA(5mL)中的溶液分批加入NaH(65mg，2.7mmol)。将悬液在室温搅 拌5min并加入甲基碘溶液(380mg，2.7mmol)。将反应混合物在室温搅拌 1h。将反应混合物溶解于二氯甲烷(150mL)中并用水和盐水洗涤，经 Na₂SO₄干燥。除去溶剂，通过硅胶柱、使用Biotage Isolera One纯化系统、 采用EtOAc/正庚烷梯度(20/80＝＞50/50)纯化粗产物，产生标题化合物 (455mg，56％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ＝7.40(d，1H)，7.31(d，1H)，7.18(d，1H)， 4.50-4.33(m，1H)，3.59(s，3H)，2.88-2.74(m，7H)，2.08(brs，2H)，1.50(s，9H)。

制备实施例44

步骤A

向2，5-二溴吡啶(15g，64mmol)的溶液加入NH₂NH₂H₂O(20mL)。将反 应混合物回流2天。在减压下除去溶剂，并将粗产物溶解于DCM(200mL)， 用水和盐水洗涤并经Na₂SO₄干燥。除去溶剂，通过硅胶柱、使用Biotage Isolera One纯化系统、采用EtOAc/正庚烷梯度(20/80＝＞50/50)纯化粗产 物，产生标题化合物(5.1g，59％基于起始材料回收率)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.16(s，1H)，7.56(d，1H)，6.69(d，1H)， 6.04(brs，1H)，3.7(brs，2H)。

步骤B

向来自上述步骤A的标题化合物(1.5g，6.7mmol)在乙醇(100mL)中的 溶液加入酮衍生物(1.6g，6.7mmol)在乙醇(50mL)中的溶液。将反应混合物 在室温搅拌5h。除去溶剂，得到为固体的标题化合物(3.1，定量)。产物不 经任何纯化即用于下一步骤。

步骤C

将来自上述步骤B的标题化合物(3.7g，8.9mmol)在二甘醇(12mL)中的 溶液密封于微波玻璃管(20mL)中。然后，使用微波将反应混合物在245℃ 加热50min。分3个批次进行反应。将合并的反应混合物溶解于乙酸乙酯 (250mL)中并用水和盐水洗涤。将有机相经Na₂SO₄干燥并在减压下除去溶 剂，并通过硅胶柱、使用Biotage Isolera One纯化系统、采用EtOAc/正庚 烷梯度(20/80＝＞70/30)纯化粗产物，产生为两种区域异构体的标题化合物 (1g，28.5％)。产物不经任何表征即用于下一步骤。

步骤D

向来自上述步骤C的化合物(1.2mg，3.0mmol)在THF(50mL)中的搅 拌溶液加入NH₂NH₂(5mL)。将反应混合物搅拌2天。将固体滤出。将滤 液在减压下浓缩，并将粗产物溶解于DCM(200mL)中。将有机相用水和盐 水洗涤并经Na₂SO₄干燥。在减压下除去溶剂，粗产物(890mg)不经任何进 一步纯化即用于下一步骤。

步骤E

向来自上述步骤D的粗产物(0.89g)在THF(20mL)中的溶液加入 (Boc)₂O(2g，9.1mmol)和三乙胺(5mL)。将反应混合物在室温搅拌过夜。除 去溶剂，通过硅胶柱、使用Biotage Isolera One纯化系统、采用EtOAc/ 正庚烷梯度(20/80＝＞60/40)纯化粗产物，产生标题化合物(0.77g，3步总收 率为24％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ11.50(s，1H)，8.12(d 1H)，7.98(d 1H)， 7.01(d，1H)，3.78-3.69(m，1H)，3.32(s，3H)，2.91-2.86(m，1H)，2.77-2.70(m， 2H)，2.47-2.41(m，1H)，2.01-1.97(m，1H)，1.79-1.69(m，1H)，1.41(s，9H)。

步骤F

向来自上述步骤E的Boc-保护的化合物(700mg，1.9mmmol)在 DMA(10mL)中的溶液分批加入NaH(180mg，7.5mmol)。将悬液在室温搅 拌10min并加入甲基碘溶液(1.2g，8mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h。 将反应混合物溶解于乙酸乙酯(250mL)中并用水和盐水洗涤，经Na₂SO₄干 燥。除去溶剂，通过硅胶柱、使用Biotage Isolera One纯化系统、采用EtOAc/ 正庚烷梯度(25/75＝＞80/20)纯化粗产物，产生标题化合物(435mg，67％)。

¹H NMR(400MHz，DMSO)δ8.20(d，1H)，8.06(d，1H)，4.26(m，1H)， 3.65(s，3H)，3.00-2.88(m，2H)，2.79(s，3H)，2.73-2.70(m，2H)，2.04-1.99(m， 2H)，1.42(s，9H)。

制备实施例45

步骤A

向标题化合物(0.25g，0.88mmol)在DMA(5mL)中的溶液加入 NaH(60mg，2.5mmol)并将悬液搅拌5min。然后，加入1-溴-2-甲氧基乙 烷(245mg，1.77mmol)的溶液。将反应混合物于沙浴中在50℃搅拌3h。将 反应混合物溶解于EtOAc(150mL)中，并用水和盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥。 通过硅胶柱、使用Biotage Isolera One纯化系统、采用EtOAc/正庚烷梯度 (20/80＝＞80/20)纯化产物，产生标题化合物(0.255g，85％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.56(d，1H)，7.14(d，1H)，3.91-3.85(m， 1H)，3.77-3.74(m，2H)，3.70(s，3H)，3.59(t，2H)，3.42(s，3H)，3.07(dd，1H)， 2.93-2.86(m，1H)，2.78-2.69(m，2H)，2.24-2.21(m，1H)，2.10-2.01(m， 1H)。

制备实施例46

步骤A

向来自制备实施例28步骤G的标题化合物(400mg，0.858mmol)在 DMA(5mL)中的溶液加入NaH(31mg，1.29mmol)。将悬液在室温搅拌5min 并加入1-溴-2-甲氧基乙烷(120mg，0.869mmol)。将反应混合物在50℃加 热过夜。将反应混合物冷却，并溶解于乙酸乙酯(150mL)中，用水和盐水 洗涤并经Na₂SO₄干燥。在减压下除去溶剂，通过硅胶柱、使用Biotage Isolera One纯化系统、采用EtOAc/正庚烷梯度(1/99＝＞20/80)纯化粗产物， 产生标题化合物(150mg，41％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.50(d，1H)，7.10(d，1H)，4.69(d，1H)， 4.38-4.14(m，2H)，4.04(s，1H)，3.65(t，2H)，3.24(s，3H)，3.01(dd，1H)， 2.85-2.82(m，1H)，2.50(dd，1H)，2.19-2.06(m，1H)，1.95-1.86(m，1H)，1.42(s， 9H)。

步骤B

向来自上述步骤的单-Boc衍生物(80mg，0.188mmol)在DMA(2mL)中 的溶液加入NaH(7mg，0.28mmol)。向该悬液加入甲基碘(39mg，0.28mmol)。 将反应混合物搅拌2h。然后将反应混合物溶解于乙酸乙酯(150mL)中，用 水和盐水洗涤并经Na₂SO₄干燥。除去溶剂，通过硅胶柱、使用Biotage Isolera One纯化系统、采用EtOAc/正庚烷梯度(10/90＝＞60/40)纯化粗产 物，产生标题化合物(70mg，85％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.53(d 1H)，7.13(d 1H)，4.49-4.24(m，4H)， 3.70-3.67(m，2H)，3.27(s，3H)，3.27-2.70(m，6H)，2.04-2.03(m，2H)，1.48(s， 9H)。

制备实施例47

步骤A

在-75℃向1.8M LDA溶液(33.0mL，59.3mmol)在四氢呋喃(150mL)中 的溶液加入市售可得的2-氟吡啶(4.25mL，49.4mmol)。将混合物在该温度 搅拌4h。向所得悬液加入三氟乙酸乙酯(7.08mL，59.3mmol)，此期间内部 温度不应升至-45℃以上。将反应混合物升温至室温。加入硝基甲烷 (5.31mL，99mmol)并将反应混合物在室温搅拌过夜。将浆液用乙酸乙酯 (100mL)和50mL 1.2M HCl稀释。分离有机层，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓 缩至干。将残余物悬浮于二氯甲烷中并过滤，产生标题化合物，为白色晶 体(6.14g)。将母液浓缩至干并通过快速色谱法以乙酸乙酯/正庚烷(20/80至 35/65)纯化，获得额外的材料(4.45g)。总收率为10.59g(84％)。

步骤B

将来自上述步骤A的标题化合物(4.45g，17.51mmol)溶解于乙醇(50mL) 中并在氢气(0.141g，70.0mmol)下与氧化铂(IV)水合物(0.398g，1.751mmol) 搅拌。消耗理论量的氢后，将溶液过滤，并将滤液回流过夜。随后，在减 压下蒸发溶剂。使用二氯甲烷/甲醇(98/2至9/1)梯度的色谱分离纯化，产生 标题化合物，获得标题化合物(1.2g，34％)。

MS(ESI)；m/z＝204.86(MH⁺)

步骤C

在0℃向来自上述步骤B的标题化合物(1.2g，5.88mmol)在四氢呋喃 (15mL)和吡啶(0.951mL，11.76mmol)中的溶液加入亚硫酰氯(0.858mL， 11.76mmol)。将所得混合物在室温搅拌24h。将反应混合物倒入冰水。将 混合物用饱和碳酸钠溶液中和(pH 6)。将水层用二氯甲烷萃取。收集有机 层，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩至干。通过加入甲苯并浓缩至干3次除去 残余吡啶，产生标题化合物，为褐色固体(1.13g，100％)。

MS(ESI)；m/z＝186.88(MH⁺)

步骤D

在0℃向3-氯过苯甲酸(1.571g，9.11mmol)在四氢呋喃(50mL)中的溶液 分批加入来自上述步骤C的标题化合物(1.130g，6.07mmol)。将所得溶液在 室温搅拌4h。将反应混合物浓缩至干。将粗产物在乙醚中研磨，然后过滤 (这重复数次)。将母液浓缩至干，通过快速色谱法、使用二氯甲烷/甲醇纯 化，产生标题化合物(1.37g，67％)。

MS(ESI)；m/z＝202.84(MH⁺)

步骤E

向来自上述步骤D的标题化合物(0.513g，1.430mmol)在干燥甲苯 (30mL)中的溶液同时加入六甲基二甲硅烷胺(0.6mL，2.86mmol)在甲苯中 的溶液和苯甲酰溴(0.421mL，3.58mmol)在甲苯中的溶液。将所得混合物 在室温搅拌3h。将反应混合物浓缩至干。通过快速色谱法、使用乙酸乙酯 /正庚烷(15/85至35/65)纯化残余物，产生标题化合物，为白色固体(0.190g， 36％)。

步骤F

向来自上述步骤E的标题化合物(0.19g，0.515mmol)在甲醇(10ml)中的 溶液加入1M氢氧化钠水溶液(1.544mL，1.544mmol)。将所得溶液在室温 搅拌10h。然后在减压下除去甲醇。将残余物溶解于乙酸乙酯和饱和碳酸 氢钠中。将有机层分离，经Na₂SO₄干燥并浓缩至干，产生标题化合物，为 白色固体(0.122g，89％)。

步骤G

在0℃向来自上述步骤F的标题化合物(0.122g，0.460mmol)在干燥四氢 呋喃(10ml)中的溶液分批加入氢化钠60％(0.019g，0.483mmol)。将反应混 合物在室温搅拌20分钟，然后加入三异丙基甲硅烷基氯(0.099mL， 0.460mmol)。将所得混合物在室温搅拌2h。将反应混合物浓缩至干。将残 余物用乙酸乙酯稀释。用饱和碳酸氢盐和盐水进行萃取。收集有机层，经 Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩至干。通过快速色谱法、使用乙酸乙酯/正庚烷 (15/85至40/60)纯化粗产物，产生标题化合物，为白色固体(0.188g，99％)。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：1.12(d，18H)；1.82(h，3H)；3.91(s，3H)； 7.31(d，1H)；7.94(s，1H)；8.21(d，1H)。

¹³C NMR Dept135(400MHz，CDCl₃)：.11.89；17.99；51.31；121.62； 131.43；137.75

制备实施例48

步骤A

将0.6mL～70％氟化氢在吡啶中的溶液和二氯甲烷(10mL)的混合物冷 却至-10℃，并滴加市售可得的环氧化物(2g，9.38mmol)在二氯甲烷(10mL) 中的溶液。然后将混合物在室温搅拌4h，用二氯甲烷稀释并用碳酸钠饱和 水溶液洗涤。将有机相分离，经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂，得到残 余物，其通过二氧化硅色谱法、使用乙酸乙酯/正庚烷梯度(20/80-＞50/50) 纯化，产生标题化合物，为黄色油状物(1.44g，66％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.44(s，9H)，1.47-1.63(m，2H)，1.85(m， 2H)，3.08(m，2H)，3.56(s，1H)，3.61(s，1H)，3.92(brs，2H)。

MS(ESI)；m/z＝233.98(MH⁺)

步骤B

将来自上述步骤A的标题化合物(1.44g，6.17mmol)溶解于吡啶(6mL) 中并将溶液冷却至0℃。加入对甲苯磺酰氯(1.29g，6.79mmol)并将混合物 在室温搅拌4h。将反应混合物用二氯甲烷(250mL)稀释并用水(50mL)洗涤。 将有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂。将残余物使用Biotage快速色 谱法系统(乙酸乙酯/正庚烷：20/80-＞50/50)纯化，产生标题化合物，为黄 色油状物(2.2g，92％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.47(s，9H)，1.49-1.63(m，4H)，1.80(m， 2H)，2.46(s，3H)，3.03(m，2H)，3.96(brs，2H)，7.36(d，2H)，7.79(d，2H)。

步骤C

将来自上述步骤B的标题化合物(2.2g，5.68mmol)溶解于N，N’-二甲基 甲酰胺(22mL)中。加入邻苯二甲酰亚胺钾(1.052g，5.68mmol)并将混合物 在150℃加热12h。冷却至室温后，加入水(100mL)并将混合物用乙酸乙酯 萃取(3x 250mL)。将有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂，产生为白 色固体的标题化合物(2.45g)，其直接用于下一步骤。

MS(ESI)；m/z＝362.9(MH⁺)

步骤D

将来自上述步骤C的标题化合物(2.45g)悬浮于乙醇胺(6mL)中。将混 合物在60℃加热2.5h。冷却至室温后，加入水(50mL)并将混合物用乙酸乙 酯萃取(3x 250mL)。将有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂。使用 Biotage快速色谱法系统(甲醇/二氯甲烷：20/80-＞50/50)纯化残余物，产生 标题化合物，为黄色油状物(0.67g，3步收率为46％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.44(s，9H)，1.56(m，4H)，1.84(m，2H)， 3.06(m，2H)，3.94(brs，2H).

MS(ESI)：m/z＝177.04(M-t-Bu+H⁺)，217.96(M-Me+H⁺)， 233.01(M+H⁺)。

制备实施例49

步骤A

在0℃向来自制备实施例14步骤D的标题化合物(1g，2.63mmol)在干 燥四氢呋喃(25ml)中的溶液分批加入氢化钠(0.111g，2.89mmol，60％于矿 物油中)。将混合物在室温搅拌30分钟，然后加入甲基碘(0.491mL， 7.89mmol)。将溶液浓缩至干。通过快速色谱法在乙酸乙酯/正庚烷(15％至 40％)纯化残余物，产生标题化合物，为白色固体(0.98g，95％)。

MS ESI：394.48/396.48(M+H)

制备实施例50

步骤A

将1，2-二甲氧基乙烷(3mL)加至来自制备实施例3的标题化合物 (0.021g，0.156mmol)、来自制备实施例1步骤D的标题化合物(0.050g， 0.141mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯氯仿络合物(0.013g，0.014mmol)、4，5- 双(二苯基膦基)-9，9-二甲基呫吨(Xantphos，0.008g，0.014mmol)和碳酸铯 (0.09g，0.283mmol)的混合物。在氩气下将反应混合物在室温脱气3分钟并 进行超声处理。然后将小瓶升温至100℃，持续1h。将反应混合物用乙酸 乙酯和盐水萃取。收集有机层，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩至干。通过快 速色谱法、使用乙酸乙酯/正庚烷混合物纯化残余物，产生标题化合物，为 白色固体(0.07g，12％)。

MS ESI：406.06(M+H)

制备实施例51

步骤A

向市售可得的5-硝基-吲哚(3.4g，20.9mmol)和1-Boc-4-哌啶酮(6g， 31.3mmol)在甲醇(50mL)中的溶液加入(28％)甲醇钠的甲醇溶液(10mL)并 将反应混合物在80℃加热2天。将沉淀的产物滤出并干燥，产生标题化合 物，为黄色固体(5.1g，72％)

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.42(s，9H)，3.2(m，2H)，3.56(t，2H)， 4.0(m，2H)，6.17(s，1H)，7.54(d，1H)，7.69(s，1H)，8.00(d，1H)，8.69(s，1H)。

步骤B

向来自上述步骤A的标题化合物(4g，11.6mmol)在四氢呋喃(150mL) 中的溶液分批加入氢化钠(0.42g，17.4mmol)。将深红色悬液在室温搅拌10 分钟。然后加入三异丙基甲硅烷基氯(2.23g，11.6mmol)并将反应混合物在 室温搅拌过夜。将反应混合物用水淬灭并除去溶剂。将残余物悬浮于乙酸 乙酯(200mL)中并通过过滤除去起始材料。浓缩滤液，通过硅胶柱(乙酸乙 酯/正庚烷(20/80)-＞(60/40))纯化残余物，产生标题化合物(2g，66％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.14(d，18H)，1.51(s，9H)， 1.67-1.71(m，3H)，3.69-3.75(m，4H)，4.17(s，2H)，6.18(s，1H)，7.30(s，1H)， 7.49(d，1H)，8.06(d，1H)，8.78(s，1H)。

步骤C

向来自上述步骤B的标题化合物(2g，4mmol)在乙酸乙酯(150mL)中的 溶液加入10％Pd/C(0.5g)。将烧瓶抽成真空并用氢气回填充。然后，将反 应混合物在氢气气氛下搅拌过夜。将反应混合物滤出并干燥，产生粗产物， 其通过硅胶柱、使用乙酸乙酯/正庚烷(20/80-＞50/50)纯化，产生标题化合 物(1.31g，69％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.14(d，18H)，1.51(s，9H)，1.61-1.69(m， 5H)，2.02-2.05(m，2H)，2.89-2.91(m，3H)，4.23-4.24(m，2H)，6.68-6.70(m，1H)， 6.92(s，1H)，6.99(d，1H)，7.30(d，1H)。

制备实施例52

步骤A

向来自制备实施例33步骤F的标题化合物(0.150g，0.534mmol)在干燥 四氢呋喃(体积：10ml)中的溶液分批加入氢化钠60％(0.022g，0.560mmol)。 在室温30min后，滴加d3-碘甲烷(0.040mL，0.640mmol)。将所得混合物在 室温搅拌12h。将反应混合物浓缩至干。通过快速色谱法以乙酸乙酯/正庚 烷(15％至50％)纯化残余物，产生期望化合物，为微黄色固体(0.95g，60％)。

MS(ESI)；m/z＝298.65/300.68(MH⁺)

制备实施例53

步骤A

向搅拌的乙醇(45mL)加入乙基乙氧甲酰基-4-哌啶酮(8.81mL， 58.4mmol)和4-溴苯基肼盐酸盐(13.06g，58.4mmol)。将所得混合物升温至 140℃，持续2h，然后在室温搅拌过夜。将浆液过滤并用EtOH/水1∶1漂洗。 将滤饼在120℃干燥1h，产生标题化合物，为类白色固体(12.75g，67％)。

MS(ESI)；m/z＝323.54/325.54(MH⁺)

步骤B

在0℃向来自步骤A的标题化合物(2.5g，7.74mmol)在四氢呋喃(75mL) 中的溶液分批加入氢化钠60％(0.311g，8.12mmol)。在室温30min后，滴加 碘甲烷(0.532mL，8.51mmol)并将所得混合物在室温搅拌4h。将反应混合 物浓缩至干。通过快速色谱法以乙酸乙酯/正庚烷(15至35％)纯化残余物， 产生标题化合物，为白色固体(2.52g，97％)。

MS(ESI)；m/z＝337.66/339.61(MH⁺)

制备实施例54

步骤A

向搅拌的乙醇(45mL)加入乙基乙氧甲酰基-4-哌啶酮(4.41mL， 29.2mmol)和3-溴苯基肼盐酸盐(6.53g，29.2mmol)。将所得混合物升温至 140℃，持续12h，然后在室温搅拌过夜。将浆液过滤并用EtOH/水1∶1漂洗， 产生标题产物，为2种异构体的混合物(2.98g，32％)。

步骤B

向来自步骤A的标题化合物(2.979g，9.22mmol)在二氯甲烷(150mL)中 的溶液加入DMAP(0.056g，0.461mmol)，然后加入Boc₂O(2.68mL， 11.52mmol)。将所得溶液在室温搅拌2h。将反应混合物浓缩至干。通过快 速色谱法(2x)、使用乙酸乙酯/正庚烷(10％至20％)纯化残余物，产生标题 化合物，为白色固体(1.82g，47％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.30(t，J＝8.0Hz，3H)；1.66(s，9H)； 3.08(sl，2H)；3.79(sl，2H)；4.20(q，J＝8.0Hz，2H)；4.59(s，2H)；7.23(d，J＝8.0Hz， 1H)；7.34(dd，J1＝1.6Hz，J2＝8.0Hz，1H)；8.36(sl，1H)。

步骤C

向来自步骤B的标题化合物(1g，2.362mmol)在甲醇(25mL)中的悬液加 入碳酸钾(0.979g，7.09mmol)。将所得混合物回流3h。将反应混合物浓缩 至干。将残余物用乙酸乙酯和盐水萃取。收集有机层，经Na₂SO₄干燥，过 滤并浓缩至干。通过快速色谱法以乙酸乙酯/正庚烷混合物纯化粗产物，产 生标题化合物，为白色固体(0.746g，98％)。

MS(ESI)；m/z＝323.60/325.61(MH⁺)

步骤D

在0℃向来自步骤C的标题化合物(0.746g，2.308mmol)在干燥四氢呋喃 (25mL)中的溶液分批加入氢化钠60％(0.101g，2.424mmol)。在室温搅拌 30min后，滴加碘甲烷(0.166mL，2.65mmol)。将所得混合物在室温搅拌4h。 将所得混合物浓缩至干并通过快速色谱法以乙酸乙酯/正庚烷混合物纯化 粗产物，产生期望化合物，为白色固体(0.657g，84％)。

MS(ESI)；m/z＝337.66/339.56(MH⁺)

制备实施例55

步骤A

向(4-溴苯基)肼、HCl(1g，4.47mmol)和二氢-2H-噻喃-4(3H)-酮(0.520g， 4.47mmol)的混合物加入无水乙醇(体积：20mL)。将所得浆液在室温搅拌 2h。将所得浆液浓缩至干，产生相应的腙。将固体在微波小瓶中分配并悬 浮于乙醇(体积：15mL)中。将所得浆液通过微波加热至125℃，持续25min。 在剧烈搅拌下将反应混合物滴入水中。将所得米色悬液过滤，然后在空气 下干燥过夜。将粗产物在乙醇中结晶。将母液中的剩余产物通过快速色谱 法以DCM/MeOH 2％至5％回收，其产生为白色固体的标题化合物(4.16g， 87％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝3.02(s，4H)；3.82(s，2H)；7.16(d， J＝8.4Hz，1H)；7.24(dd，J1＝1.6Hz，J2＝8.4hz，1H)；7.58(d，J＝2.0hz，1H)； 7.82(sl，1H)。

¹³C-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝22.53；25.17；25.57；111.89；120.28； 124.42。

步骤B

在0℃向来自步骤A的标题化合物(0.809g，3.02mmol)在干燥四氢呋喃 (体积：50ml)中的溶液加入氢化钠60％(0.139g，3.32mmol)。将所得混合物 在室温搅拌30min，然后加入碘甲烷(0.283mL，4.53mmol)。将所得溶液在 室温搅拌12h。将混合物浓缩至干，通过快速色谱法以乙酸乙酯/正庚烷 10-30％纯化粗产物，产生标题化合物，为黄色固体(0.811g，95％)。

步骤C

在0℃向来自步骤B的标题化合物(0.5g，1.772mmol)在乙酸乙酯(体积： 4ml)中的溶液滴加过乙酸(0.706mL，3.72mmol)。将浅黄色浆液在室温搅 拌4h。将反应混合物浓缩至干。通过快速色谱法以乙酸乙酯/正庚烷40％至 65％纯化粗产物，产生期望化合物，为微黄色固体(0.320g，57％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝3.31(t，J＝6.4Hz，2H)；3.52(t， J＝6.4Hz，2H)；3.66(s，3H)；4.46(s，2H)；7.26(dd，J1＝2.0Hz，J2＝8.8Hz，1H)； 7.43(d，J＝8.8hz，1H)；7.68(d，J＝2.0Hz，1H)。

制备实施例56

步骤A

向(3-溴苯基)肼、HCl(1g，4.47mmol)和二氢-2H-噻喃-4(3H)-酮(0.520g， 4.47mmol)的混合物加入无水乙醇(体积：20mL)。将所得浆液在室温搅拌 2h。将所得浆液浓缩至干，产生相应的腙。将固体在微波小瓶中分配并悬 浮于乙醇(体积：15mL)中。将所得浆液通过微波加热至125℃，持续25min。 在剧烈搅拌下将混合物滴入水中。用1M HCl和水进行DCM中的萃取。收 集有机层，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩至干。通过快速色谱法以 DCM/MeOH 95∶5纯化粗产物，产生标题化合物，为米色固体(0.328g， 27％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝3.02(s，4H)；3.84(s，2H)；7.13-7.38(m， 2H)；7.43(s，1H)；7.78(sl，1H)。

步骤B

在0℃向来自步骤A的标题化合物(0.298g，1.111mmol)在干燥四氢呋喃 (体积：20ml)中的溶液加入氢化钠60％(0.0488g，1.167mmol)。将所得混合 物在室温搅拌30min，然后加入碘甲烷(0.076mL，1.222mmol)。将所得溶 液在室温搅拌12h。将混合物浓缩至干，通过快速色谱法以乙酸乙酯/正庚 烷10-30％纯化粗产物，产生标题化合物，为白色固体(0.310g，99％)。

步骤C

在室温向来自步骤B的标题化合物(0.3g，1.063mmol)在乙酸乙酯(比 率：1.000，体积：20ml)中的溶液滴加过乙酸(0.403mL，2.126mmol)在乙 酸乙酯(比率：1.000，体积：20.00ml)中的溶液。将所得混合物在室温搅拌 12h。将反应混合物用水和Na₂CO₃饱和水溶液萃取。收集有机层，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩至干。通过快速色谱法以乙酸乙酯/正庚烷40％至65％纯 化残余物，产生期望化合物，为白色固体(0.160g，48％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝3.35(sl，4H)；3.62(s，3H)；4.33(sl，2H)； 7.21(sl，2H)；7.42(s，1H)。

制备实施例57

步骤A

向4-(甲基硫基)丁-1-醇(2.5g，20.80mmol)在干燥二氯甲烷(体积：250ml) 中的冷却溶液分批加入间氯过氧苯甲酸(mCPBA；9.32g，41.6mmol)。将 所得混合物在室温搅拌20h。将溶液浓缩至干。将残余物溶解于乙醚和水 的混合物中。在乙醚中萃取苯甲酸。将水层浓缩至干。将残余物用DCM稀 释并将浓缩溶液装载在样品上。通过快速色谱法以DCM/MeOH 3至10％纯 化粗产物，产生标题化合物，为无色油状物(2.95g，93％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.59-1.75(m，2H)；1.85-2.01(m，2H)； 2.67(sl，1H)；2.90(s，3H)；3.06(dd，J1＝J2＝8.0Hz，2H)；3.64(q，J＝5.6Hz，2H)。

¹³C-NMR Dept135(400MHz，CDCl₃)：δ＝22.17；33.89；43.46；57.39； 64.50。

步骤B

向来自步骤A的标题化合物(2.95g，19.38mmol)、三苯基膦(7.62g， 29.1mmol)和咪唑(1.979g，29.1mmol)在二氯甲烷(体积：250ml)中的混合物 滴加碘(7.38g，29.1mmol)溶液。将所得溶液在室温搅拌24h。将反应混合 物浓缩至半数，然后加入水。将浆液过滤并用Na₂SO₃溶液进行萃取。收集 有机层，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩至干。通过快速色谱法以乙酸乙酯/ 正庚烷40％至60％纯化残余物，产生期望化合物，为白色固体(1.2g，24％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.93-2.10(m，4H)；2.94(s，3H)；3.05(t， J＝7.6Hz，2H)；3.23(t，J＝6.2Hz，2H)。

¹³C-NMR Dept135(400MHz，CDCl₃)：δ＝4.84；23.47；31.56； 40.66(CH3)；53.45。

制备实施例58

根据制备实施例54中所述的方法，除了使用下面流程中所示的丙基- 衍生物之外，制备下列化合物。

收率：72％

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝2.26-2.40(m，2H)；2.91(s，3H)；3.12(t， J＝7.6Hz，2H)；3.28(t，J＝6.8Hz，2H)。

¹³C-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝3.11；26.00；41.11(CH3)；55.21。

制备实施例59

步骤A

向二氢-2H-噻喃-4(3H)-酮(5g，43.0mmol)在丙酮(体积：100ml)中的混 合物加入OXONE(52.9g，86mmol)。将所得混合物在室温剧烈搅拌12h。 将浆液过滤并将固体用丙酮漂洗。将有机层浓缩至干，产生标题化合物， 为白色固体(5.83g，91％)。

步骤B

在0℃向来自步骤A的标题化合物(2g，13.50mmol)在甲醇(体积：50ml) 中的混合物加入硼氢化钠(0.511g，13.50mmol)。将所得混合物在室温搅拌 1h。将溶液浓缩至干。通过快速色谱法以DCM/MeOH 0％至5％纯化残余 物，产生标题化合物，为白色固体(1.74g，86％)。

¹³C-NMR Dept135(400MHz，CDCl₃)：δ＝31.18；46.74；62.57。

步骤C

向来自步骤B的标题化合物(1.0g，6.66mmol)、三苯基膦(2.62g， 9.99mmol)和咪唑(0.680g，9.99mmol)在二氯甲烷(体积：50ml)中的混合物 滴加碘(2.53g，9.99mmol)溶液。将所得溶液在室温搅拌24h。将反应混合 物过滤，然后浓缩至干。通过快速色谱法在乙酸乙酯/正庚烷40％至75％纯 化残余物，产生期望化合物，为白色固体(0.684g，39％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝2.40-2.53(m，4H)；2.93-3.06(m，2H)； 3.25-3.42(m，2H)；4.56-4.70(m，1H)。

¹³C-NMR Dept135(400MHz，CDCl₃)：δ＝24.74；35.35；50.40。

制备实施例60

步骤A

将烘干的Schlenk烧瓶抽成真空并用氩气回填充。将该过程重复3-4 次。在室温通过注射器加入二噁烷(3mL)并通过将氩气通入混合物鼓泡进 行脱气。然后一起加入2-二环己基膦基-2′，4′，6′-三异丙基联苯(XPhos， 0.054g，0.112mmol)和醋酸钯(II)(0.009g，0.037mmol)。将混合物在110℃ 加热1分钟。反应混合物形成澄清红色溶液。然后在氩气气氛下一起添加 来自制备实施例3的标题化合物(0.050g，0.375mmol)、市售可得的6-溴 -1-(三异丙基甲硅烷基)-1H-吡咯并[3，2-b]吡啶(0.132g，0.375mmol)和叔丁 醇钠(0.12g，1.25mmol)。将反应混合物在110℃加热2h。将反应混合物用 乙酸乙酯(150mL)稀释。将有机相用水、盐水洗涤，并经Na₂SO₄干燥。除 去溶剂并通过二氧化硅色谱法、使用乙酸乙酯纯化残余物，产生标题化合 物(0.045g，30％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.13(d，18H)，1.61-1.68(m，3H)，6.35(dd， 1H)，6.60(d，1H)，6.80(d，1H)，6.94(dd，1H)，7.10(brs，1H)，7.39(d，1H)， 7.73(d，1H)，8.20(s，1H)，8.54(s，1H)，9.27(s，2H)。

制备实施例61至140

按照制备实施例57中所述的Pd-偶联方法，除了使用下中示出的溴代 -衍生物和胺之外，制备下列化合物。

表1：

制备实施例142

步骤A

向来自制备实施例75的标题化合物(0.120g，0.2mmol)在THF(1mL) 中的溶液加入四丁基铵(0.052g，0.2mmol)。将反应混合物搅拌1h。然后将 反应混合物浓缩。粗产物使用硅胶柱(1∶1，EtOAc∶庚烷)纯化，产生标题化 合物(0.08g，94％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.48(s，9H)，1.68-1.71(m，2H)， 2.01-2.17(m，2H)，2.89-2.95(m，3H)，4.23-4.25(m，2H)，6.65(m，1H)， 6.83-6.89(m，2H)，6.98-6.99(m，1H)，7.10(s，1H)，7.52(d，1H)，7.91(s，1H)。

步骤B

向来自上述步骤A的标题化合物(0.08g，0.187mmol)在THF(3mL)中 的溶液加入氢化钠(0.007g，0.28mmol)，然后加入甲基碘(0.026g， 0.187mmol)，并将所得反应混合物搅拌1h。然后，将反应混合物用水淬灭 并用乙酸乙酯萃取(3x 50mL)。将有机相用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥并在 减压下除去溶剂。通过硅胶柱纯化粗产物(EtOAc∶庚烷；40∶60)，产生标 题化合物(0.025g，30％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.51(s，9H)，1.66-1.72(m，2H)， 2.02-2.05(m，2H)，2.88-2.99(m，3H)，3.70(s，3H)，4.24-4.27(m，2H)，6.66(d， 1H)，6.77(s，1H)，6.81-6.88(m，2H)，6.99-7.06(m，2H)，7.54(d，1H)。

制备实施例143和144

步骤A

向来自制备实施例69的标题化合物(0.3g，0.323mmol)在THF(3mL) 中的溶液加入四丁基氟化铵(0.08g，0.323mmol)并将反应混合物在室温搅 拌1h。除去溶剂，将残余物通过硅胶柱(EtOAc至庚烷；20-100％)纯化， 产生标题化合物(0.127g，64％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.49(s，9H)，1.51(s，9H)，1.66(m，4H)， 2.06(m，4H)，2.90(m，4H)，4.23(m，4H)，6.80(d，1H)，6.83(dd，1H)，6.94(d， 1H)，6.96(d，1H)，7.07(dd，1H)，7.30(d，1H)，7.42(d，1H)，7.50(d，1H)，7.75(s， 1H)，7.99(s，1H)。

ESI MS(MH)：614。

步骤B

向来自上述步骤A的标题化合物(0.05g，0.081mmol)在THF(5mL)中 的溶液加入氢化钠(0.004g，0.16mmol)，然后加入甲基碘(0.022g， 0.15mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜。然后将反应混合物用一滴甲 醇淬灭，并除去溶剂。将粗混合物通过硅胶柱纯化，产生二甲基化标题化 合物(0.021g)和三甲基化标题化合物(0.010g)。

二甲基化化合物143，ESI MS(MH)：642(M+H)，643(M+2H)， 644(M+3H)。

三甲基化化合物144，ESI MS(MH)：656(M+H)657(M+2H)， 658(M+3H)。

制备实施例145

步骤A

通过超声处理将叔丁醇(2mL)脱气1min，同时使氩气流通过溶液。向 脱气的叔丁醇(1mL)加入醋酸钯(II)(0.003g，0.0127mmol)和2-二环己基膦 基-2′，4′，6′-三异丙基联苯(XPhos，0.018g，0.038mmol)。将混合物在沙浴中 在～100℃加热1min以产生催化剂。然后向淡红色催化剂溶液加入来自制 备实施例1步骤D的标题化合物(0.045g，0.127mmol)和市售可得的3，4-二 氟苯胺(0.019g，0.15mmol)在脱气的叔丁醇(1mL)中的溶液。添加碳酸钾 (0.039g，0.28mmol)后，将混合物在沙浴中在～110℃加热3h。将混合物用 乙酸乙酯(30mL)、水(10mL)和盐水(10mL)稀释。将有机相分离，经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂。通过二氧化硅色谱法使用乙酸乙酯/正庚烷(20/80) 纯化残余物，产生标题化合物，为类白色固体(0.045g，87％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.12-1.16(m，18H)，1.80-1.90(m，3H)， 6.22(br-s，1H)，6.47(d，1H)，6.53(d，1H)，6.90-6.94(m，1H)，7.06(t，1H)， 7.10(d，1H)，7.60-7.67(m，1H)，7.75(d，1H)。

制备实施例146至256

按照制备实施例145中所述的Pd-偶联方法，除了使用下表示出的溴 代-衍生物和胺之外，制备下列化合物。

表2：

制备实施例258

步骤A

向来自制备实施例66的标题化合物(0.056g，0.091mmol)在THF(1mL) 中的溶液加入四丁基氟化铵(0.024g，0.091mmol)并将反应混合物在室温搅 拌30分钟。将反应混合物浓缩，将残余物通过硅胶柱(25％-100％EtOAc/ 庚烷：等度混合物)纯化，产生标题化合物(0.026g，63％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.40(s，9H)，1.50(m，2H)，1.94(m，2H)， 2.89(m，2H)，4.1(m，2H)，6.76(d，1H)，6.96(d，1H)，7.16(dd，1H)，7.43(d，1H)， 7.94(d，1H)，8.96(s，1H)，10.5(s，1H)，12.2(s，1H)。

制备实施例259

步骤A

将来自制备实施例150的标题化合物(0.049g，0.08mmol)溶解于乙腈 (1mL)和二氯甲烷(1mL)中，用1M四丁基氟化铵(0.1mL，0.1mmol，1.25eq. 每TIPS-基团)的四氢呋喃溶液处理。将混合物在室温搅拌1h并除去溶剂。 通过二氧化硅色谱法使用二氯甲烷/丙酮(95/5)纯化残余物，产生标题化合 物，为浅黄色玻璃状物(0.029g，82％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.49(s，3H)，1.94-2.08(m，2H)， 2.70-2.95(m，7H)，4.25-4.56(br-m，1H)，6.33(br-s，1H)，6.56(d，1H)， 6.92-7.03(m，1H)，7.06(q，1H)，7.55-7.66(m，2H)，8.04(br-s，1H)。

制备实施例260

步骤A

向来自制备实施例82的标题化合物(0.150g，0.3mmol)在THF(5mL) 中的溶液加入聚合物支撑的氟化物(Aldrich 387789)(0.4g)。将混合物振摇 过夜，过滤并蒸发溶剂。将溶剂滤出并浓缩，将残余物通过硅胶柱(甲醇至 二氯甲烷；5至15％)纯化，产生标题化合物(0.075g，73％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.66-1.69(m，2H)，1.89-1.92(m，2H)， 1.99-2.04(m，2H)，2.20(s，3H)，2.63-2.69(m，1H)，2.84-2.87(m，2H)， 6.72-6.77(m，2H)，6.85-6.90(m，1H)，6.96(s，1H)，7.07(s，1H)，7.20(abq，1H)， 7.44(d，1H)，8.09(s，1H)，10.5(s，1H)。

制备实施例261至330

按照与制备实施例258(A)、259(B)、260(C)中所述类似的方法，除了 使用下表中示出的来自制备实施例的化合物之外，制备下列化合物。

表3：

制备实施例331

制备实施例332

步骤A

向来自制备实施例227的标题化合物(0.127g，0.330mmol)在无水乙醇 (体积：10ml)中的溶液加入氢氧化钠(0.132g，3.30mmol)。将所得混合物通 过微波升温至180℃持续20min。将溶液浓缩至干。将产物用乙酸乙酯和盐 水萃取。收集有机层，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩至干。通过快速色谱法 以DCM/MeOH纯化残余物，产生标题化合物，为微红色固体(0.070g，68％)。

MS(ESI)；m/z＝314.71(MH⁺)。

制备实施例333至335

按照制备实施例332中所述的脱保护方法，除了使用下表示出的氨基 甲酸酯-衍生物之外，制备下列化合物。

表4：

实施例1

步骤A

将来自制备实施例1的标题化合物(0.048g，0.125mmol)溶解/悬浮于乙 腈(1mL)中并用1M四丁基氟化铵(0.15mL，0.15mmol)的四氢呋喃溶液处 理。将混合物在室温搅拌1h并除去溶剂。通过PREP-TLC使用乙酸乙酯 纯化残余物，产生为橙色油状物的游离碱。该材料用1M氯化氢水溶液 (3mL)处理。使用冻干机除去溶剂，产生标题化合物，为淡黄色固体(0.028g， 73％)。

¹H-NMR(400MHz，D₂O)：δ＝3.32(t，2H)，3.78(t，2H)，6.41-6.44(m，2H)， 7.02(d，1H)，7.79(t，1H)，7.87(d，1H)，8.00(d，1H)，8.38(t，1H)，8.53(d，1H)。

MS(ESI)；m/z＝239.83(MH⁺)。

实施例2至23

按照与实施例1中所述类似的方法，除了使用下表示出的来自制备实 施例的化合物之外，制备下列化合物。对于没有TIPS-保护基的制备实施 例，仅进行含水氯化氢处理。对于实施例19至23，使用聚合物支撑的氟 用于断裂TIPS-保护基。

除另有指明外，所有下面实施例化合物均以其HCl盐获得。

表5：

实施例24

步骤A

将来自制备实施例259的标题化合物(0.03g，0.07mmol)溶解于二氯甲 烷(1mL)中，用2M氯化氢(1mL)的乙醚溶液处理。将混合物在室温搅拌过 夜并过滤收集沉淀。将固体用乙醚(5mL)洗涤，然后在减压下干燥，产生 标题化合物，为类白色固体(0.021g，75％)。

¹H-NMR(400MHz，D₂O)：δ＝1.93-2.05(m，1H)，2.20-2.59(m，1H)， 2.65-2.80(m，6H)，3.10(dd，1H)，3.48-3.55(m，1H)，6.64(d，1H)，6，94-7.02(m， 1H)，7.15-7.21(m，2H)，7.90(d，1H)。

MS(ESI)；m/z＝328.95(MH⁺)。

实施例25至203

按照与实施例24中所述类似的方法，除了使用下表示出的来自制备实 施例的化合物之外，制备下列化合物。在未形成沉淀的情况下，除去溶剂 并将残余物溶解于水(5mL)中。使用冻干机蒸发水溶液，产生标题化合物。 除另有指明外，所有下面实施例化合物均以其HCl盐获得。

表6：

实施例204

步骤A

将来自制备实施例203的标题化合物(0.032g，0.093mmol)溶解于甲醇 (2mL)中并加入浓氯化氢水溶液。将澄清溶液冷冻于液氮中并使用冻干机 蒸发溶剂，产生标题化合物，为类白色固体(0.029g，81％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆/D₂O)：δ＝1.79-1.87(m，1H)，2.02-2.08(m， 1H)，2.46-2.50(m，1H)，2.63-2.77(m，2H)，2.88(dd，1H)，3.26(s，3H)，3.55(s， 2H)，3.60-3.65(m，1H)，6.50(d，1H)，7.22-7.40(m，2H)，7.62(d，1H)，8.10(ddd， 1H)。

MS(ESI)；m/z＝344.77(MH⁺)。

实施例205

使用与对实施例204所述相同的方法，除了使用来自制备实施例204 的标题化合物之外。

收率：76％

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆/D₂O)：δ＝1.80-1.86(m，1H)，2.03-2.10(m， 1H)，2.45-2.51(m，1H)，2.65-2.76(m，2H)，2.88(dd，1H)，3.30(s，3H)，3.55(s， 3H)，3.61-3.66(m，1H)，5.90(s，2H)，6.46(d，1H)，6.81(d，1H)，7.04(dd，1h)， 7.57-7.61(m，2H)。

MS(ESI)；m/z＝352.69(MH⁺)。

实施例206

步骤A

向来自制备实施例332的标题化合物(0.070g，0.223mmol)在甲醇(体积： 4ml)中的溶液加入甲醛溶液(0.020mL，0.246mmol)。将反应混合物在室温 搅拌30min，然后分批加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.0568g，0.268mmol)。将 所得混合物在室温搅拌12h。加入1ml1.2M HCl的水溶液。在室温搅拌5min 后，将溶液倒入水、Na₂CO₃饱和水溶液和盐水的混合物。用乙酸乙酯进行 萃取3次。收集有机层，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩至干。粗产物通过快 速色谱法以DCM/MeOH 98∶2至90∶10纯化。将产物溶解于DCM中，缓慢加 入HCl的乙醚溶液以形成相应的HCl盐。将溶剂浓缩至干，将固体在真空 下干燥，产生期望化合物，为紫色固体(0.028g，34％)。

¹H-NMR(400MHz，MeOD)：δ＝3.07(s，3H)；3.14-3.23(m，2H)； 3.47-3.60(m，1H)；3.66(s，3H)；3.77-3.91(m，1H)；4.28(d，J＝14.0Hz，1H)； 4.63(d，J＝14.0Hz，1H)；6.70(sl，1H)；6.79(sl，1H)；6.94-7.10(m，2H)；7.23(sl， 1H)；7.35(d，J＝8.8Hz，1H)。

MS(ESI)；m/z＝328.71(MH⁺)。

实施例207

步骤A

向来自制备实施例334的标题化合物(0.036g，0.107mmol)、来自制备 实施例54的标题化合物(0.0281mg，0.107mmol)和碳酸钾(0.0297mg， 0.215mmol)的混合物加入四氢呋喃(比率：1.000，体积：2ml)，然后加入 乙腈(比率：1.000，体积：2.000mL)。将所得混合物在室温搅拌2h。将反 应混合物浓缩至干。通过快速色谱法以DCM/MeOH 0％至10％纯化残余 物。将产物溶解于DCM中并加入HCl的乙醚溶液。将浆液浓缩至干。将残 余物溶解于数滴MeOH中，加入乙酸乙酯以诱发沉淀。将浆液浓缩至干， 产生期望化合物，为米色固体(0.020g，37％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO)：δ＝1.73-1.87(m，2H)；1.88-2.02(m，2H)； 3.00(s，3H)；3.06-3.17(m，2H)；3.21(t，J＝7.6Hz，2H)；3.24-3.35(m，2H)； 3.38-3.51(m，1H)；3.56(s，3H)；3.69-3.84(m，1H)；4.12-4.30(m，5H)；4.56(d， J＝13.6Hz，1H)；6.52-6.62(m，2H)；6.68-6.83(m，2H)；7.01(sl，1H)； 7.26-7.36(m，1H)；10.62(sl，NH)。

MS(ESI)；m/z＝470.68(MH⁺)。

实施例208至210

根据实施例207中所述的方法、使用下表所示的碘-衍生物，制备标题 化合物。

表7：

实施例211至218：

如果用实施例207所述的碘-衍生物处理来自制备实施例的标题化合 物，则将获得下表所示的所需实施例。

表8：

实施例219至222：

如果根据参照WO2008/150799用乙烯基砜衍生物处理来自制备实施 例的标题化合物，则将获得下表所示的所需标题化合物。

表9

具有一个或多个旋光性碳的本发明化合物可以以外消旋物和外消旋混 合物、非对映体混合物和单个非对映体、对映体混合物和单一对映体、互 变异构体、阻转异构体和旋转异构体的形式存在，所有异构形式均包括在 本发明中。本发明中所述的含有烯属双键的化合物包括E和Z几何异构体。 还包括在本发明中的是所有盐形式、多晶型物、水合物和溶剂化物。所有 上述化合物均包括在本发明的范围之内。

对Aβ1-42积聚抑制作用的测定

通过采用如下所述的硫黄素(thioflavin)T荧光测定法(ThT-测定)，测 定本发明实施例化合物抑制Ab1-42肽积聚的能力。

Aβ肽膜的制备

将Aβ1-42冻干粉末(Bachem)在六氟异丙醇(HFIP)中重构至1mM。将 该肽溶液于室温超声15分钟，搅拌过夜，将等份试样置于非硅化微量离心 管中。然后在氩气气流中蒸发HFIP。获得的肽膜真空干燥10分钟，密封， 储存于-80℃待用。

Aβ1-42积聚抑制的测量

为了测定小分子-介导的Aβ1-42积聚的抑制，在每一次实验之前，将 来自实施例的小分子溶于无水二甲基亚砜(DMSO，Sigma-Aldrich)，使其 浓度达到7.4mM。将Aβ1-42肽膜溶于DMSO，使其浓度达到400μM。在 非硅化培养管中制备PBS中的测定溶液，使其达到下列浓度：330μM小 分子，33μM Aβ1-42，10μM硫黄素T(ThT)和12.8％DMSO。因此，小分 子与Aβ1-42的最终摩尔比为10∶1。制备不含小分子的阳性对照，测定最 大RFU。制备每一个小分子的不含Aβ1-42的阴性对照。在所有分析中， 将3-氨基吡唑三聚体(Trimer)(Rzepecki等人.Systhesis 2003，1815)作为参 照化合物测试，以确定独立实验之间的重现性。然后将溶液于37℃温育24 小时，采用Perkin-Elmer FluoroCount荧光色谱仪，在黑色384-孔测定板 (Perkin-Elmer)中一式六份读取荧光光谱(相对荧光单位；RFU)。根据下列 方程，将积聚抑制以平均％抑制或±1标准差(SD)表示：

测量下列实施例化合物：

表10

表10：

分子对预成型Aβ1-42纤维的Aβ1-42积聚的抑制。结果以两个独立实 验的平均+/-标准差表示。

实施例5和7的对预成型Aβ1-42纤维的Aβ1-42积聚的抑制由于非常 强的自荧光而未被测定。

实施例211：ACI-636对hAPPSL转基因小鼠的斑块形成的作用

该研究的目的是评估ACI636关于斑块形成抑制和已有斑块解聚的性 质。

211.1方法

过表达人淀粉状蛋白(hAPP)的转基因(Tg)小鼠是研究药物对淀粉状蛋 白生成、汇聚和沉积的影响的适合模型。对于此研究，使用在鼠Thy-1启 动子控制下过表达具有London(V717I)和Swedish(KM670/671NL)突变的 751氨基酸形式的hAPP的小鼠(hAPPSL小鼠)。hAPPSL小鼠显示β-淀粉 状蛋白肽(Aβ)的年龄依赖性增长并且在早期(于4-6月开始)形成由淀粉状 蛋白沉积组成的斑块。脑病变的严重度与递增的年龄和行为缺陷相关。于 13至14月龄开始，通过管饲10mg/kg ACI-636每天治疗雌性hAPPSL Tg 小鼠一次，如下表所述：

治疗期结束时，将动物处死并收集血液(血浆)和脑。用来自Mesoscale Discovery的Aβ-试剂盒测量ACI-636对四个不同脑匀浆部分(TBS、Triton X-100、SDS和FA)中的Aβ水平(Aβ38、Aβ40、Aβ42)的影响。而且，用 免疫组织化学法测定由6E10抗体检测的所取样的脑中的淀粉状蛋白沉积。 与肽标准品相比，以pg/mg湿脑重量评价Aβ水平。

211.2结果

总体而言，接受ACI-63614天的动物显示与PBS治疗的动物相比可溶 性Aβ水平增加(TBS和Triton X-100部分)但是不可溶性Aβ水平下降(SDS和 FA部分)的趋势。用ACI-636治疗动物与媒介物(PBS)相比的作用被称为“治 疗诱导的差异”。皮层(a和b)和海马(c和d)6E10免疫荧光的定量示于图1。 对治疗14天的雌性小鼠的治疗的作用影响斑块的数量和总面积(注释：最小 物体大小＞150μm²)。缩写：媒介物(A)；ACI-63610mg/kg/天(B)。

与媒介物相比，用ACI636的治疗在治疗14天后一贯地减少雌性Tg 小鼠中的斑块负荷。

211.3结论

接受ACI63614天的动物显示与媒介物治疗的动物相比可溶性Aβ水 平增加(TBS和Triton X-100部分)但是不可溶性Aβ水平下降(SDS和FA 部分)的趋势。如果施用14天，ACI636选择性降低雌性hAPP751SL转基 因小鼠的淀粉状蛋白负荷，胞外斑块负荷和总淀粉状蛋白负荷均降低，包 括胞内淀粉状蛋白。在皮层中的作用比海马中的作用更突出。

实施例212：ACI-636对APPV171I转基因小鼠行为的影响

该研究的目的是测定ACI-636在阿尔茨海默病小鼠模型中的功效。通 过空间识别试验(SRT)评估治疗对记忆容量的影响。

212.1方法

212.1.1空间识别试验(SRT)

新物体识别试验(ORT)是用于研究测试物质对啮齿类动物(小鼠、大鼠) 记忆的作用的体内试验。引入该试验，通过啮齿类动物于在其它方面熟悉 的环境中识别新物体的能力，来测量它们的非空间记忆(Ennaceur，A和 Delacour，J.Behav.Brain Res.1988，31，47-59)。试验给出关于短期或长期 记忆、测试物质的促遗忘或遗忘效应和探查行为(其与注意力有关)的信息。 在试验的学习期中，使动物面对置于开放场地中的两个相同物体，以便熟 悉这两物体。在保留(记忆)期中，使动物接触置于开放场地中的两个不同 的物体：一个是熟悉的物体，在学习期中用过，而另一个是新物体。在保 留期中，测量探查每个物体所花费的时间。对物体的探查被定义为头朝向 物体且在物体2厘米内所花费的时间。非遗忘性动物探查新物体所花费的 时间比探查熟悉物体所花费的时间更长。为了增加对动物的挑战，ORT试 验被改成包括使用两个相同物体的空间记忆分量(空间识别试验(SRT))。在 SRT-装置中，一个物体在保留期时保持与之前学习期中相同的位置，而另 一个物体被放置在不同位置。通过每天管饲一次(12只小鼠用ACI-636治 疗；10mg/kg))和用PBS(治疗12只小鼠)治疗总共24只雌性APPV171I 转基因小鼠(10月龄)。治疗21天后在灰色聚丙烯迷宫(环形开放场地，直 径40cm，高度32.4cm)中使用两个不同的物体(1个乐高(2.9cm x 5.8cm)立 方体和黑色玻璃瓶(5.3cm x 5.3cm))进行SRT试验。如下设计实验：

第1天：

-在没有物体下使每只动物适应装置(10分钟)。

第2天：

-学习阶段：在迷宫的一侧展示(10分钟)两个相同物体(乐高立方体或黑 色玻璃瓶)。

-保留试验(学习后3小时)：将一个相同的物体移至迷宫的相反侧并展示 (10分钟)。

212.2结果

在图2A和2B中，已经对已用PBS和ACI-636治疗的APPV171I转 基因小鼠进行分析。使用成对t-检验分析对持续时间和频率(图2A和2B) 的识别指数(RI)进行统计分析，显示已用PBS和ACI-636治疗的APPV171I 转基因小鼠之间的显著差异(p＜0.05)。

212.3结论

在空间识别试验(SRT)中，与用媒介物(PBS)治疗的APPV171I转基因 小鼠相比，用ACI-636治疗的APPV171I转基因小鼠探查被移动过的物体 所花费的时间比探查熟悉物体所花费的时间更长，这表明在空间识别试验 下ACI-636对短期记忆保留的作用。

实施例213：制备化合物213a和213b(化合物26的对映体)：手性分 离

213.1研究的目的和设计

该研究的目的是分离且表征化合物26的两种对映体。

213.2方法

通过使用手性相的HPLC，分离化合物26(N²-(3，4-二氟苯基)-N^6，9-二甲 基-6，7，8，9-四氢-5H-吡啶并[2，3-b]吲哚-2，6-二胺盐酸盐；外消旋物)的Boc- 保护的前体

分离出化合物26(0.110g，外消旋物)的Boc-保护的前体的对映体。获 得总计0.040g早期对映体和0.033g晚期对映体。如由手性HPLC鉴定， 每种对映体含有＜1％另一对映体。

手性HPLC条件

·Chiralpak IA，4.6x 250mm，5μm

·流动相：正庚烷/异丙醇(95∶5)

·流速：1mL/min

·波长：254nm

图3示出通过手性HPLC分离化合物26的Boc-保护的前体

R_t(早期对映体)：22.7Min

R_t(晚期对映体)：31.6Min

图4示出分离后的早期对映体，而图5示出分离后的晚期对映体。

213.3制备最终化合物

所有试剂和溶剂均获自商业来源且不经进一步纯化即可使用。经400 MHz NMR光谱仪在氘化溶剂中记录质子(¹H)光谱。经Finnigan MAT TSQ 7000光谱仪记录质谱(MS)。经JASCO旋光计在25℃使用589nm波长在 甲醇中记录对映体的旋光度。

213.3.1制备化合物213a

将HPLC分离后的早期对映体(0.039g，0.088mmol)溶解于二氯甲烷 (1.2mL)中并用2M氯化氢(1.2mL)的乙醚溶液处理。将混合物在室温搅拌 过夜并过滤收集沉淀。将固体用乙醚(5mL)洗涤并在减压下干燥，产生标 题化合物，为类白色固体(0.029g，88％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆/D₂O)：δ＝1.90-2.02(m，1H)，2.27-2.36(m， 1H)，2.65-2.73(m，4H)，2.75-2.94(m，2H)，3.10-3.18(m，1H)，3.42-3.48(m，1H)， 3.63(s，3H)，6.60(d，1H)，7.25-7.33(m，1H)，7.36-7.42(m，1H)，7.70(d，1H)， 8.14-8.20(m，1H)。

MS(ESI)；m/z＝343.70(MH⁺)。

[α]^25＝+45.4°(c 0.066，MeOH)。

213.3.2制备化合物213b

将HPLC分离后的晚期对映体(0.022g，0.05mmol)溶解于二氯甲烷 (1mL)中并用2M氯化氢(1mL)的乙醚溶液处理。将混合物在室温搅拌过夜 并过滤收集沉淀。将固体用乙醚(5mL)洗涤并在减压下干燥，产生标题化 合物，为类白色固体(0.013g，71％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆/D₂O)：δ＝1.90-1.98(m，1H)，2.26-2.33(m， 1H)，2.62-2.72(m，4H)，2.77-2.93(m，2H)，3.10-3.16(m，1H)，3.40-3.47(m，1H)， 3.62(s，3H)，6.58(d，1H)，7.25-7.33(m，1H)，7.36-7.41(m，1H)，7.70(d，1H)， 8.11-8.18(m，1H)。

MS(E SI)；m/z＝343.68(MH⁺)。

[α]^25＝-37.5°(c 0.064，MeOH)。

213.4结论

将化合物26的外消旋Boc-保护的前体成功地分离成其两种对映体。 早期洗脱对映体的保护基的断裂获得(+)-对映体化合物213a，而晚期洗脱 对映体获得(-)-对映体化合物213b。

制备实施例336：通过分离非对映体制备(2-溴-9-甲基-6，7，8，9-四氢-5H- 吡啶并[2，3-b]吲哚-6-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯的单一对映体

336.1研究的目的和设计

该研究目的是开发一种通过分离非对映体制备(2-溴-9-甲基-6，7，8，9-四 氢-5H-吡啶并[2，3-b]吲哚-6-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯的单一对映体的方法。

342.2方法

336.2.1对映体分离的原理

将外消旋化合物与旋光性试剂L(氨基酸-衍生物)反应，以获得非对映 体(RL和SL)的混合物，其通过色谱法分离。随后通过酸性处理除去手性 试剂，产生对映体富集的构建单元。

用于制备对映体富集的((2-溴-9-甲基-6，7，8，9-四氢-5H-吡啶并[2，3-b]吲 哚-6-基)-甲基)氨基甲酸叔丁酯的合成流程

制备手性助剂(S)-2-((2，4-二硝基苯基)氨基)-3-苯基丙酸

向L-苯基苯胺(8.88g，53.7mmol)和1-氟-2，4-二硝基苯(3.24mL， 26.9mmol)的混合物加入三乙胺(7.86mL，56.4mmol)。使用Biotage Initiator 微波将所得混合物升温至100℃，持续4min。将固体用MeOH稀释，将浆 液滴入蒸馏水中。将二氯甲烷加至浆液中并分析有机相。将有机相进一步 用1.2M氯化氢溶液和盐水萃取。将有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并蒸发溶剂。 将残余物用二氯甲烷稀释并过滤浆液。然后将沉淀用少量二氯甲烷洗涤。 将合并的滤液蒸发，通过快速色谱法使用二氯甲烷/甲醇梯度(0％至5％)纯 化残余物，产生标题化合物。

MS ESI MeOH(Neg)：329.96(M-H)/375.99(M+FA-H)/661.13(2M-H) /992.32(3M-H)。

步骤A

向外消旋(2-溴-9-甲基-6，7，8，9-四氢-5H-吡啶并[2，3-b]吲哚-6-基)甲基) 氨基甲酸叔丁酯(0.9g，2.28mmol)在20ml二氯甲烷中的溶液加入11.34 ml(22.8mmol)2M氯化氢的乙醚溶液，将反应混合物在室温搅拌12h。用 二氯甲烷稀释后，将溶液用氢氧化钠水溶液碱化直至pH 13-14。将有机相 分离，将水相用二氯甲烷萃取(4x 100mL)。将合并的有机相经Na₂SO₄干 燥，过滤并除去溶剂，产生为褐色油状物的标题化合物。

步骤B

将来自上述步骤A的粗标题化合物(2.28mmol)溶解于N，N’-二甲基甲 酰胺(14mL)中。加入(S)-2-((2，4-二硝基苯基)氨基)-3-苯基丙酸(0.944g， 2.85mmol)，然后加入HBTU(1.08g，2.85mmol)和三乙胺(0.68mL， 5.01mmol)。将溶液在室温搅拌12h。将反应混合物用二氯甲烷(500mL)稀 释，用水(100mL)洗涤。将有机相分离，将水相用二氯甲烷萃取(4x 100mL)。 将合并的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂，产生为橙色固体的粗 产物。

步骤C

通过二氧化硅快速色谱法的非对映体分离

使用Biotage Isolera One快速色谱法系统分离来自上述步骤B的非对 映体的混合物，获得0.64g早期非对映体和0.7g晚期非对映体。

采用下列条件：

柱载荷：施加于100g HP-Sil SNAP柱的250mg-500mg混合物

溶剂梯度：EtOAc/正庚烷：30-50％

经硅胶(流速：50ml/min)使用乙酸乙酯/正庚烷梯度(30/70→60/40)进行 非对映体混合物的色谱分离。

早期非对映体的¹H-NMR数据(仅芳族区域，杂质存在于区域7.1-7.3 ppm中)示于图11中。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝7.07(d，1H)，7.35(d，1H)，7.51(d，1H)， 7.71-7.76(dd，2H)，8.21-8.25(m，2H)，8.87-8.88(m，1H)，9.25-9.33(dd，2H)。

晚期非对映体的¹H-NMR数据(仅芳族区域，杂质存在于区域7.1-7.3 ppm中)示于图12中。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝7.17(d，1H)，7.36(d，1H)，7.48(d，1H)， 7.43(d，1H)，7.80(d，1H)，8.14(dd，1H)，8.23(dd，1H)，8.87(dd，1H)，9.32(t， 2H)。

步骤D

将来自上述步骤C的晚期非对映体(0.7g，1.15mmol)溶解于18mL冰 乙酸中，然后加入18mL浓盐酸(36-38％)。将混合物在沙浴中在120℃加 热5天。将反应混合物在室温冷却，然后用400mL二氯甲烷稀释，用1M 氢氧化钠水溶液碱化直至pH 13-14。将有机相分离，将水相用二氯甲烷萃 取(4x 100mL)。将合并的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂，产生 为褐色油状物的粗产物。

步骤E

将来自上述步骤D的粗化合物(1.15mmol)溶解于四氢呋喃(16mL)，用 三乙胺(0.176mL)和二碳酸二叔丁酯(0.95g，12.4mmol)处理。将混合物在室 温过夜。除去溶剂，使用Biotage纯化系统(EtOAc/正庚烷：10-40％)纯化 残余物，产生由晚期非对映体衍生的Boc-保护的三环构建单元，为类白色 固体(0.22g，4步收率为24％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.41(s，9H)，1.91-2.06(m，2H)， 2.71(m，2H)，2.78(s，3H)，2.96-2.83(m，2H)，3.62(s，3H)，4.25(br-m，1H)， 7.17(d，1H)，7.78(d，1H)。

如上所述(步骤D和步骤E)对早期非对映体进行处理，获得相应的早 期对映体三环构建单元。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.41(s，9H)，1.91-2.06(m，2H)， 2.71(m，2H)，2.78(s，3H)，2.96-2.83(m，2H)，3.62(s，3H)，4.25(br-m，1H)， 7.17(d，1H)，7.78(d，1H)。

制备实施例337：通过分离非对映体盐制备(2-溴-9-甲基-6，7，8，9-四氢 -5H-吡啶并[2，3-b]吲哚-6-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯的单一对映体

337.1研究的目的和设计

该研究目的是开发一种通过非对映体盐分离外消旋(2-溴-9-甲基 -6，7，8，9-四氢-5H-吡啶并[2，3-b]吲哚-6-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯的方法。

337.2方法

337.2.1对映体分离的原理

将游离碱形式的外消旋化合物与旋光性酸反应，获得非对映体盐的混 合物(R⁺L₁^-+S⁺L₁^-)。用适合的溶剂结晶非对映体盐并除去手性助剂，获得 单个对映体。

用于制备(2-溴-9-甲基-6，7，8，9-四氢-5H-吡啶并[2，3-b]吲哚-6-基)甲基) 氨基甲酸叔丁酯的单个对映体的合成流程

步骤A

将外消旋(2-溴-9-甲基-6，7，8，9-四氢-5H-吡啶并[2，3-b]吲哚-6-基)甲基) 氨基甲酸叔丁酯(12.48g，31.87mmol)在300ml二氯甲烷中的溶液冷却至 0℃。然后在0℃加入150ml(300mmol)2M氯化氢的乙醚溶液。添加结 束后，移除冰浴并将反应混合物在室温搅拌16h。过滤收集沉淀，用乙 醚(100mL)洗涤并空气干燥，产生二-盐酸盐，为类白色固体(11.5g，定量)。 向配备有磁力搅拌器的250mL烧瓶(含有水(37mL)中的悬液形式的二- 盐酸盐(3.65g，10mmol))加入氢氧化钠水溶液(1.27g，32mmol NaOH于 22mL水中)(添加时间1min)。然后将含有氢氧化钠溶液的烧瓶用额外的 水漂洗(2x 3mL)。将所得白色悬液剧烈搅拌5min，然后加入二氯甲烷 (65mL)。将所得混合物剧烈搅拌5min。回收有机相并将水相用3x 65mL 二氯甲烷萃取。将合并的有机相经MgSO₄干燥，在室温、真空下蒸发至 干，得到2.63g(90％)为黄色固体的标题化合物。

通过非对映体盐的对映体分离：

步骤B(与(S)-(+)-扁桃酸反应以获得对映体B，R_t＝26.1Min)

在35℃向配备有磁力搅拌器的250mL烧瓶(含有溶解于甲醇(30mL) 中的来自上述步骤A的标题化合物(5.46g，18.6mmol))加入溶解于甲醇 (50mL)中的(S)-(+)-扁桃酸(1.35g，8.9mmol)。将所得混合物在35℃(内部 温度)搅拌24h，然后通过烧结玻璃漏斗过滤。分离出母液，将所得白色 固体用甲醇在室温洗涤(3x 20mL)。将盐在真空下干燥，产生2.55g(31％) 标题化合物(对映体B和(S)-(+)-扁桃酸，HPLC 97％ee)，为白色固体。 将母液蒸发至干，然后加入0.5M氢氧化钠水溶液(20mL)。将水溶液用 二氯甲烷萃取(3x 10mL)，将合并的有机相经MgSO₄干燥并在真空下室 温蒸发，产生黄褐色糊剂，对应于对映体的7∶3(对映体A：对映体B)混 合物(3.24g，59％)。(母液与(R)-(-)-扁桃酸反应以获得对映体A，R_t＝24.3 Min)。

在35℃向配备有磁力搅拌器的100mL烧瓶(含有对映体的7∶3(对映 体A：对映体B)混合物(3.24g，11mmol)在甲醇(30mL)中的溶液)加入溶 解于甲醇(35mL)中的(R)-(-)-扁桃酸(1.09g，7.2mmol)。将所得混合物在 35℃的内部温度搅拌24h。然后通过烧结玻璃漏斗过滤结晶的固体，在 室温用甲醇洗涤(3x 16mL)并真空下干燥，产生3.08g(63％)为白色固体 的标题化合物(对映体A和(R)-(-)-扁桃酸，HPLC 97％ee)。

步骤C

由相应的扁桃酸盐形成对映体A的二盐酸盐

向配备有磁力搅拌器的250mL烧瓶(含有对映体A的扁桃酸盐 (3.08g，6.9mmol))加入1M氢氧化钠溶液(30mL)和二氯甲烷(60mL)。剧 烈搅拌5min后，将有机相回收，将水相用二氯甲烷萃取(2x 60mL)。将 合并的有机相用盐水(30mL)洗涤，经MgSO₄干燥并在室温蒸发至干。 将所得黄褐色的糊剂溶解于1M氯化氢水溶液(50mL)并将溶剂蒸发至 干，产生白色固体。当该固体在高真空下在25℃干燥直至恒重时，其熔 化并重结晶，产生标题化合物，为黄色固体(1.97g，78％，HPLC 97.8％ ee)。

由相应的扁桃酸盐形成对映体B的二盐酸盐

向配备有磁力搅拌器的100mL烧瓶(含有对映体B的扁桃酸盐 (2.1g，4.7mmol))加入1M氢氧化钠溶液(20mL)和二氯甲烷(40mL)。剧 烈搅拌5min后，将有机相回收并将水相用二氯甲烷萃取(2x 40mL)。将 合并的有机相用盐水(20mL)洗涤，经MgSO₄干燥并在室温蒸发至干。 将所得黄褐色的糊剂溶解于1M氯化氢水溶液(30mL)并将溶剂蒸发至 干，产生白色固体。当该固体在高真空下在25℃干燥直至恒重时，将其 熔化并重结晶，产生标题化合物，为黄色固体(1.57g，91％，HPLC 97.7％ ee).

手性HPLC条件：

样品：2mg含水碱/mL于正庚烷中/(乙醇-0.2％DEA)(90∶10)

柱：Chiracel AD-H

溶剂：正庚烷/(乙醇-0.2％DEA)(90∶10)

注射体积：5μL

图6示出结晶前的外消旋混合物(二盐酸盐)

R_t(早期洗脱对映体A)：24.3Min

R_t(晚期洗脱对映体B)：26.1Min

图7示出结晶后的早期洗脱对映体A(二盐酸盐)

图8示出结晶后的晚期洗脱对映体B(二盐酸盐)

步骤D

早期洗脱对映体A的Boc-保护

将2-溴-N⁶，9-二甲基-6，7，8，9-四氢-5H-吡啶并[2，3-b]吲哚-6-胺二-盐酸 盐(0.94g 2.56mmol；对映体A)溶解于四氢呋喃(50mL)中并用三乙胺 (1.95mL，13.9mmol)和二碳酸二叔丁酯(1.8g，8.55mmol)处理。将混合 物在室温搅拌过夜。除去溶剂，使用Biotage Isolera One纯化系统、采 用乙酸乙酯/正庚烷梯度(5/95至30/70)纯化残余物，产生标题化合物(对 映体A)，为类白色固体(0.969g，96％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.41(s，9H)，1.91-2.06(m，2H)， 2.71(m，2H)，2.78(s，3H)，2.96-2.83(m，2H)，3.62(s，3H)，4.25(br-m，1H)， 7.17(d，1H)，7.78(d，1H)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.60(s，9H)，2.10-2.23(m，2H)， 2.82-3.01(m，7H)，3.81(s，3H)，4.38-4.64(br-m，1H)，7.25(d，1H)，7.67(d， 1H)。

晚期洗脱对映体B的Boc-保护

如上所述(步骤C和步骤D)处理晚期洗脱对映体B以获得相应的Boc- 保护的三环构建单元。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.41(s，9H)，1.91-2.06(m，2H)， 2.71(m，2H)，2.78(s，3H)，2.96-2.83(m，2H)，3.62(s，3H)，4.25(br-m，1H)， 7.17(d，1H)，7.78(d，1H)。

337.3结论

通过非对映体盐的结晶，经由外消旋混合物的分离制备了对映体纯的 构建单元。单个对映体构建单元的纯度为97.8％ee(对映体A)和97.7％ ee(对映体B)。

实施例214：使用来自制备实施例336的标题化合物制备化合物214a 和214b(化合物26的对映体)(非对映体分离)

214.1研究的目的和设计

该研究的目的是使用通过非对映体分离制备的对映体富集的构建单元 合成化合物214a和214b-化合物26的两种对映体。

214.2对映体富集的化合物214b的合成流程

步骤A

将叔丁醇(2mL)加至2-二环己基膦基-2′，4′，6′-三异丙基联苯(Xphos， 0.036g，0.075mmol)和醋酸钯(II)(0.0056g，0.025mmol)的混合物。将混合物 通过超声处理1min进行脱气，同时使氩气流通过溶液。将混合物在沙浴 中在～100℃加热1min以产生催化剂。然后向淡红色催化剂溶液加入由晚 期非对映体(0.1g，0.25mmol)获得的制备实施例336的标题化合物、市售 可得的3，4-二氟苯胺(0.041g，0.31mmol)和碳酸钾(0.086g，0.625mmol)。将 混合物在沙浴中在～110℃加热3h。将混合物用乙酸乙酯(100mL)和水 (10mL)稀释。将有机相分离，经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂。使用Biotage Isolera快速纯化(MeOH/DCM：0-1％，之后EtOAc/正庚烷：10-30％)系统 纯化残余物两次，产生标题化合物，为类白色固体(0.087g，97％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.49(s，9H)，2.04(m，2H)，2.69-2.85(m， 7H)，3.70(s，3H)，4.29-4.50(br-m，1H)，6.51(d，1H)，7.00-7.02(m，1H)， 7.05-7.12(m，1H)，7.61(m，2H)。

MS(ESI)；m/z＝443.64(MH⁺)

图8示出由晚期非对映体衍生的化合物214b的Boc-保护的前体。

步骤B

将上述步骤A的标题化合物(0.08g，0.045mmol)溶解于二氯甲烷 (2.0mL)中并用2M氯化氢(2mL)的乙醚溶液处理。将混合物在室温搅拌过 夜并过滤收集沉淀。将固体用乙醚(5mL)洗涤并在减压下干燥，产生标题 化合物，为类白色固体(0.068g，97％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆/D₂O)：δ＝1.90(m，1H)，2.25-2.28(m，1H)， 2.50-2.64(m，1H)，2.64(s，3H)，2.75-2.88(m，2H)，3.10(dd，1H)，3.40(m，1H)， 3.57(s，3H)，6.54(d，1H)，7.20-7.27(m，1H)，7.31(m，1H)，7.65(d，1H)， 8.10-8.05(m，1H)。

214.3对映体富集的化合物214a的合成流程

与步骤A中对于合成化合物214b所述相同的方法适用于由制备实施 例336的早期非对映体衍生的对映体富集的构建单元，获得化合物214a 的Boc-保护的前体。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.49(s，9H)，2.04(m，2H)，2.69-2.85(m， 7H)，3.70(s，3H)，4.29-4.50(br-m，1H)，6.51(d，1H)，7.00-7.02(m，1H)， 7.05-7.12(m，1H)，7.61(m，2H)。MS(ESI)；m/z＝443.64(MH⁺)。

图9示出由早期非对映体衍生的214a的Boc-保护的前体。

与步骤B中对于合成化合物214b所述相同的方法适用于由早期非对 映体衍生的对映体富集的构建单元，获得化合物214a。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆/D₂O)：δ＝1.90(m，1H)，2.25-2.28(m，1H)， 2.50-2.64(m，1H)，2.64(s，3H)，2.75-2.88(m，2H)，3.10(dd，1H)，3.40(m，1H)， 3.57(s，3H)，6.54(d，1H)，7.20-7.27(m，1H)，7.31(m，1H)，7.65(d，1H)， 8.10-8.05(m，1H)。

214.4结论

使用由分离非对映体而获得的构建单元制备了对映体富集的化合物 214a和214b。由早期非对映体衍生的构建单元获得含有89％早期对映体 和10.6％晚期对映体的对映体富集的化合物(Boc-保护的化合物214a)。由 晚期非对映体衍生的构建单元获得含有28.5％早期对映体和69.4％晚期对 映体的对映体富集的化合物(Boc-保护的化合物214b)。

实施例215：使用制备实施例337的标题化合物制备化合物215a和 215b(化合物26的对映体)(通过结晶分离)

215.1研究的目的和设计

该研究的目的是使用通过非对映体盐的结晶制备的对映体纯的构建单 元来合成化合物215a和215b—化合物26的两种对映体。

215.2对映体纯的化合物215b的合成流程

步骤A

将叔丁醇(13mL)加至2-二环己基膦基-2′，4′，6′-三异丙基联苯(Xphos， 0.119g，0.25mmol)和醋酸钯(II)(0.0198g，0.084mmol)的混合物。将混合 物通过超声处理1min进行脱气，同时使氩气流通过溶液。将混合物在沙 浴中在～100℃加热1min以产生催化剂。然后向淡红色催化剂溶液加入由 早期洗脱对映体A(0.33g，0.84mmol)获得的制备实施例337的标题化合 物、溶解于1mL叔丁醇中的市售可得的3，4-二氟苯胺(0.125g，0.99mmol) 和碳酸钾(0.257g，1.85mmol)。将混合物在沙浴中在～110℃加热3h。将混 合物用乙酸乙酯(250mL)和水(25mL)稀释。将有机相分离，经Na₂SO₄干 燥，过滤并除去溶剂。使用Biotage Isolera One纯化系统、采用乙酸乙 酯/正庚烷梯度(5/95至30/70)纯化残余物，产生标题化合物，为类白色固 体(0.35g，95％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.42(s，9H)，1.92-2.04(m，2H)， 2.67(m，2H)，2.78-2.92(m，7H)，3.61(s，3H)，4.08-4.34(br-m，1H)，6.53(d， 1H)，7.25-7.33(m，1H)，7.35-7.38(m，1H)，7.65(d，1H)，8.17(dd，1H)，9.16(s， 1H)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.58(s，9H)，2.10-2.18(m，2H)， 2.82-3.00(m，7H)，3.77(s，3H)，4.34-4.63(br-m，1H)，6.48(br-s，1H)，6.60(d， 1H)，7.09-7.12(m，1H)，7.13-7.22(m，1H)，7.67(d，1H)，7.85(ddd，1H)。 MS(ESI)；m/z＝443.64(MH⁺)

步骤B

将上述步骤A的标题化合物(0.35g，0.79mmol)溶解于二氯甲烷(8mL) 中。将溶液冷却至0℃，然后用2M氯化氢(8mL)的乙醚溶液处理。将混 合物在室温搅拌过夜并过滤收集沉淀。将固体用乙醚(5mL)洗涤并干燥， 产生标题化合物，为类白色固体(0.32g，95％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆/D₂O)：δ＝1.85-1.95(m，1H)， 2.25-2.28(m，1H)，2.59-2.64(m，1H)，2.64(s，3H)，2.73-2.88(m，2H)，3.10(dd， 1H)，3.40(m，1H)，3.57(s，3H)，6.54(d，1H)，7.20-7.27(m，1H)，7.32-7.34(m， 1H)，7.65(d，1H)，8.10-8.05(m，1H)。

[α]²⁵_D^＝-54.0°(c 0.1，MeOH)。

215.3对映体纯的化合物215a的合成流程

步骤A

将叔丁醇(4mL)加至2-二环己基膦基-2′，4′，6′-三异丙基联苯(XPhos， 0.031g，0.065mmol)和醋酸钯(II)(0.0049g，0.022mmol)的混合物。将混 合物通过超声处理1min进行脱气，同时使氩气流通过溶液。将混合物在 沙浴中在～100℃加热1min以产生催化剂。然后向淡红色催化剂溶液加入 由晚期洗脱对映体B(0.086g，0.218mmol)获得的制备实施例337的标题 化合物、溶解于1mL叔丁醇中的市售可得的3，4-二氟苯胺(0.024mL， 0.240mmol)和碳酸钾(0.060g，0.436mmol)。将混合物在沙浴中在～110℃ 加热3h。将混合物用乙酸乙酯(250mL)和水(25mL)稀释。将有机相分离， 经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶剂。使用Biotage Isolera One纯化系统、 采用乙酸乙酯/正庚烷梯度(10/90至30/70)纯化残余物，产生标题化合物， 为类白色固体(0.095g，98％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.49(s，9H)，2.04(m，2H)，2.69-2.85(m， 7H)，3.70(s，3H)，4.29-4.50(br-m，1H)，6.51(d，1H)，7.00-7.02(m，1H)， 7.05-7.12(m，1H)，7.61(m，2H)。

MS(ESI)；m/z＝443.68(MH⁺)。

步骤B

将上述步骤A的标题化合物(0.095g，0.21mmol)溶解于二氯甲烷(4mL) 中。将溶液冷却至0℃，然后用2M氯化氢(2mL)的乙醚溶液处理。将混 合物在室温搅拌过夜并过滤收集沉淀。将固体用乙醚(10mL)洗涤并干燥， 产生标题化合物，为类白色固体(0.078g，87％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆/D₂O)：δ＝1.82-2.00(m，1H)； 2.21-2.35(m，1H)；2.57-2.70(m，4H)；2.72-2.93(m，2H)；3.10(dd，1H)； 3.34-3.48(m，1H)；3.58(s，3H)；6.56(d，1H)；7.25(q，1H)；7.31-7.40(m， 1H)；7.66(d，1H)；8.10(dd，1H)。

MS(ESI)；m/z＝343.78(M+H)

[α]²⁵_D^＝+20.0°(c 0.1，MeOH)

215.4结论

使用通过非对映体盐的结晶获得的对映体构建单元制备了对映体纯的 化合物215a和215b。

实施例216：使用来自制备实施例336的标题化合物制备化合物216a 和216b(化合物42的对映体)(非对映体分离)

216.1研究的目的和设计

该研究的目的是使用通过非对映体分离制备的对映体富集的构建单元 来合成化合物216a和216b-化合物42的两种对映体。

216.2对映体富集的化合物216b的合成流程

步骤A

将叔丁醇(2mL)加至2-二环己基膦基-2′，4′，6′-三异丙基联苯(XPhos， 0.0108g，0.022mmol)和醋酸钯(II)(0.0017g，0.0076mmol)的混合物。将混 合物通过超声处理1min进行脱气，同时使氩气流通过溶液。将混合物在 沙浴中在～100℃加热1min以产生催化剂。然后向淡红色催化剂溶液加入 由晚期非对映体(0.03g，0.076mmol)获得的制备实施例336的标题化合物、 市售可得的4-吗啉代苯胺(0.0169g，0.095mmol)和碳酸钾(0.0262g， 0.19mmol)。将混合物在沙浴中在～110℃加热3h。将混合物用乙酸乙酯 (100mL)和水(10mL)稀释。将有机相分离，经Na₂SO₄干燥，过滤并除去溶 剂。使用Biotage Isolera快速纯化(MeOH/DCM：0-1％，之后EtOAc/正庚 烷：10-30％)系统纯化残余物两次，产生标题化合物，为类白色固体(0.024g， 64％)。

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.49(s，9H)，2.02(m，2H)，2.76-2.86(m， 6H)，3.02-3.32(m，2H)，3.63(s，3H)，3.88(m，4H)，4.31-4.52(br-m，1H)， 6.93(brs，1H)，7.17-7.19(m，1H)，7.24-7.27(m，1H)，7.52(brs，1H)。

MS(ESI)；m/z＝492.72(MH⁺)。

步骤B

将上述步骤A的标题化合物(0.02g，0.040mmol)溶解于二氯甲烷 (2.0mL)中并用2M氯化氢(0.5mL)的乙醚溶液处理。将混合物在室温搅拌 过夜并过滤收集沉淀。将固体用乙醚(5mL)洗涤并在减压下干燥，产生标 题化合物，为白色固体(0.016g，99％)。

¹H-NMR(400MHz，D₂O)：δ＝2.11(m，1H)，2.36(m，1H)，2.71-2.79(m， 6H)，3.06-3.13(m，1H)，3.53(m，8H)，4.0(m，4H)，6.59(s，1H)，7.4(m，2H)， 7.55(m，2H)，7.77(s，1H)。

216.2对映体富集的化合物216a的合成流程

与步骤A和B中对于合成化合物216b所述相同的方法适用于由制备 实施例336的早期非对映体衍生的对映体富集的构建单元，获得化合物 216a。

MS(ESI)；m/z＝391.99(M+H)

216.4结论

使用由分离非对映体获得的构建单元制备了对映体富集的化合物 216a和216b。

实施例217：使用来自制备实施例336的标题化合物制备化合物217a 和217b(化合物156的对映体)(非对映体分离)

217.1研究的目的和设计

该研究的目的是使用通过非对映体分离制备的对映体富集的构建单元 来合成化合物217a和217b-化合物156的两种对映体。

217.2对映体富集的化合物217b的合成流程

步骤A

向XPhos(0.0108mg，0.023mmol)和醋酸钯(II)(0.0017g，0.008mmol) 的混合物加入4mL脱气的叔丁醇(在氩气流下超声处理)。将所得溶液升温 至80℃持续90秒(直到能够观察到深红色)。将活化的催化剂转移到第二小 瓶中，其含有由上述晚期非对映体(0.030g，0.076mmol)获得的制备实施例 336的标题化合物、2，3-二氢苯并[b][1，4]二氧杂环己烯-6-胺(0.0115g， 0.076mmol)和碳酸钾(0.021g，0.152mmol)。将所得混合物升温至110℃，持 续3h。将反应混合物浓缩至干。通过Biotage快速色谱法以EtOAc/正庚烷 15％至30％系统纯化残余物，产生标题化合物，为米色泡沫状物(0.036g， 100％)。

MS(ESI)；m/z＝465.70(M+H)。

步骤B

向来自上述步骤A的标题化合物(0.034g，0.073mmol)在4ml二氯甲烷 中的溶液加入2M氯化氢的乙醚溶液(0.183mL，0.366mmol)和0.050ml甲 醇。将所得混合物在室温搅拌12h。结束后，将混合物浓缩至干并加入数 滴MeOH以便溶解残余物。最终，加入EtOAc以使产物沉淀。将浆液过 夜并真空下干燥2h，得到为黄色固体的标题化合物(0.016g，50％)。

¹H-NMR(400MHz，MeOD)：δ＝2.03-2.17(m，1H)；2.36-2.48(m，1H)； 2.70-3.03(m，6H)；3.18-3.30(m，1H)；3.51-3.63(m，1H)；3.74(s，3H)；4.27(s， 4H)；6.64(d，J＝8.0Hz，1H)；6.78-7.05(m，3H)；8.05(d，J＝8.0Hz，1H)。

MS(ESI)；m/z＝365.75(M+H)/406.79(M+ACN+H)。

217.3对映体富集的化合物217a的合成流程

与步骤A中对于合成化合物217b所述相同的方法适用于由制备实施 例336的早期非对映体衍生的对映体富集的构建单元，获得化合物217a 的Boc-保护的前体。

MS(ESI)；m/z＝465.70(M+H)。

步骤B

与步骤B中对于合成化合物217b所述相同的方法适用于由早期非对 映体衍生的对映体富集的构建单元，获得化合物217a(0.015g，42％)。

¹H-NMR(400MHz，MeOD)：δ＝2.03-2.19(m，1H)；2.34-2.49(m，1H)； 2.70-3.06(m，6H)；3.18-3.36(m，1H)；3.50-3.65(m，1H)；3.74(s，3H)；4.26(s， 4H)；6.64(d，J＝8.0Hz，1H)；6.77-7.05(m，3H)；8.05(d，J＝8.0Hz，1H)。

MS(ESI)；m/z＝365.74(M+H)/406.77(M+ACN+H)。

217.4结论

使用由分离非对映体获得的构建单元制备了对映体富集的化合物 217a和217b。

实施例218：使用来自制备实施例337的标题化合物制备化合物218a 和218b(化合物156的对映体)(通过结晶分离)

218.1研究的目的和设计

该研究的目的是使用通过非对映体盐的结晶制备的对映体纯的构建单 元来合成化合物218a和218b—化合物156的两种对映体。

218.2对映体纯的化合物218b的合成流程

步骤A

向XPhos(0.0272mg，0.057mmol)和醋酸钯(II)(0.0042g，0.019mmol) 的混合物加入4mL脱气的叔丁醇(在氩气流下超声处理)。将所得溶液升温 至80℃持续90秒(直到能够观察到深红色)。将活化的催化剂转移到第二小 瓶中，其含有由早期洗脱对映体A(0.075g，0.190mmol)获得的制备实施例 337的标题化合物、2，3-二氢苯并[b][1，4]二氧杂环己烯-6-胺(0.0288mg， 0.190mmol)和碳酸钾(0.0526mg，0.380mmol)。将所得混合物升温至110℃， 持续3h。将反应混合物浓缩至干。通过Biotage快速色谱法以EtOAc/正庚烷 15％至35％系统纯化残余物，产生标题化合物，为白色固体(0.083g，94％)。

MS(ESI)；m/z＝465.70(M+H)。

步骤B

向来自上述步骤A的标题化合物(0.082g，0.177mmol)在4ml二氯甲烷 中的溶液加入2M氯化氢的乙醚溶液(0.183mL，0.366mmol)和0.050ml甲 醇。将所得混合物在室温搅拌12h。结束后，将混合物浓缩至干并加入数 滴MeOH以便溶解残余物。最终，加入EtOAc以使产物沉淀。将浆液过 夜并真空下干燥2h，得到为微黄色固体的标题化合物(0.074g，96％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝1.88-2.07(m，1H)；2.27-2.40(m， 1H)；2.62(t，J＝5.2Hz，3H)；2.67-2.95(m，3H)；3.10(dd，J1＝5.2hz，J2＝15.2Hz， 1H)；3.33-3.48(m，1H)；3.60(s，3H)；4.15-4.27(m，4H)；6.53(d，J＝8.4Hz，1H)； 6.75(d，J＝8.8Hz，1H)；7.06(dd，J1＝2.4Hz，8.4Hz，1H)；7.61(s，1H)；7.62(d， J＝10.0Hz，1H)；7.60(d，J＝2.4Hz，1H)；7.62(d，J＝8.4Hz，1H)；9.23(sl，2H)。

MS(ESI)；m/z＝365.75(M+H)/406.79(M+ACN+H)。

218.3对映体富集的化合物218a的合成流程

与步骤A中对于合成化合物218b所述相同的方法适用于由制备实施 例337的晚期洗脱对映体B衍生的对映体富集的构建单元，获得化合物 218a的Boc-保护的前体。

MS(ESI)；m/z＝465.70(M+H)。

步骤B

与步骤B中对于合成化合物218b所述相同的方法适用于由晚期洗脱 对映体B衍生的对映体纯的构建单元，获得为淡黄色固体的化合物 218a(0.069g，85％)。

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝1.89-2.05(m，1H)；2.26-2.40(m， 1H)；2.64(t，J＝5.2Hz，3H)；2.67-2.95(m，3H)；3.10(dd，J1＝4.4hz，J2＝14.4Hz， 1H)；3.33-3.48(m，1H)；3.60(s，3H)；4.13-4.27(m，4H，在水峰下方)；6.53(d， J＝8.4Hz，1H)；6.76(d，J＝8.8Hz，1H)；7.05(dd，J1＝2.4Hz，8.4Hz，1H)；7.61(s， 1H)；7.62(d，J＝10.0Hz，1H)；9.18(sl，2H)。

MS(ESI)；m/z＝365.74(M+H)/406.77(M+ACN+H)。

实施例219：对淀粉状蛋白β(Aβ)_1-42肽积聚的抑制(ThT测定)

使用ThT测定法测试外消旋化合物及其对映体抑制淀粉状蛋白肽积 聚的能力。为了测定IC₅₀，在上述ThT测定法中使用化合物的下列稀释液：

330μM、82.50μM、20.63μM、5.16μM、1.29μM、0.32μM和0.08μM。

本发明的条款总结于下文中：

1.式(I)化合物：

A-L₁-B    (I)

及其所有立体异构体、外消旋混合物、可药用的盐、水合物、溶剂化物和 多晶型物；

其中

A选自下组：

L₁定向地选自下组：

B选自下组：

其中

R¹、R²、R³和R⁴各自独立地选自下组：氢、卤素、CN、CF₃、CONR³⁰R³¹、 烷基、-O-烷基、-C(O)O-烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷 基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷 基，其中烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、 链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基可被任选地取代， 或如果任意基团R¹/R²/R³/R⁴毗邻，则它们可任选地合在一起并且可形成含 有碳原子和任选的一个或多个选自O、S或N的杂原子或任选的一个或多 个含杂原子(例如N、O和/或S)部分的5-至8-元环，并且其中所述5-至8- 元环可被NR²⁰R²¹取代；

在每次出现时，R^a独立地选自下组：氢、烷基、卤代烷基、S(O)_tNR³⁰R³¹、 S(O)_tR³⁰、C(O)OR³⁰、C(O)R³⁰和C(O)NR³⁰R³¹；

在每次出现时，R^b独立地选自下组：氢、卤素、CN、CF₃、CONR³⁰R³¹、 烷基、-O-烷基、-C(O)O-烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷 基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷 基，其中烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、 链烯基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基和氨基烷 基可被任选地取代；

在每次出现时，R³⁰、R³¹、R²⁰和R²¹各自独立地选自下组：氢、烷基、 环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、 芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基和氨基烷基，其中烷基、环烷基、 环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、 杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基和氨基烷基可被任选地取代，或其中R²⁰和R²¹当与它们所连接的氮合在一起时可形成含有碳原子和任选的一个或 多个其它选自O、S或N的杂原子或任选的一个或多个含杂原子(例如N、 O和/或S)部分的3-至8-元环，并且其中所述3-至8-元环可被任选地取代；

X和Y各自独立地选自下组：CR^b和N；

t是1或2；且

p是0、1或2

前提条件是排除下列化合物：

2.条款1的化合物，其中

A选自下组：

L₁是

B选自下组：

其中：

R¹、R²、R³、R⁴、R^a、R²⁰、X和Y具有与条款1相同的含义；

V缺失或是NR²⁰R²¹且

z是1或2。

3.条款1或2的化合物，其中A具有式(i)。

4.前述条款中任一项的化合物，其中L₁具有式(a)且优选p是0。

5.前述条款中任一项的化合物，其中R¹、R²、R³和R⁴各自独立地选 自：氢、卤素(例如F)、CN、CF₃、CONR³⁰R³¹、-O-烷基、杂环烷基(例 如

6.条款1的化合物，其中A中的式(vii)选自：

7.前述条款中任一项的化合物，其中R^a是氢或C_1-4烷基。

8.条款1的化合物，其中A具有式(i)

9.条款1的化合物，其中A具有式(ii)

10.条款1的化合物，其中A具有式(iii)

11.条款1的化合物，其中A具有式(iv)

12.条款1的化合物，其中A具有式(v)

13.条款1的化合物，其中A具有式(vi)

14.条款1的化合物，其中A具有式(vii)

15.条款1的化合物，其中L₁具有式(a)

16.条款1的化合物，其中B具有式(ix)

17.条款1的化合物，其中B具有式(x)

18.条款1的化合物，其中B具有式(xi)

19.条款1的化合物，其中B具有式(xii)

20.条款1的化合物，其中B具有式(xiii)

21.条款1的化合物，其具有式(I)：

A-L₁-B    (I)

及其所有立体异构体、外消旋混合物、可药用的盐、水合物、溶剂化物和 多晶型物；

其中A是：

L₁是：

B是：

其中

R¹和R²各自独立地选自下组：氢、卤素、CN、CF³、CONR³⁰R³¹、 烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、 炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基，其中烷基、环烷基、环烷 基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳 基、芳基烷基和杂芳基烷基可被任选地取代，或如果R¹和R²毗邻，则它 们可任选地合在一起并且可形成含有碳原子和任选的一个或两个选自O、 S或N的杂原子或含杂原子部分NR⁵⁰的5-或6-元环；

R³是氢或卤素；

R^a是氢或烷基；

在每次出现时，R^b独立地选自下组：氢、卤素、CN、CF₃、CONR³⁰R³¹、 烷基、-O-烷基、-C(O)O-烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷 基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷 基，其中烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、 链烯基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基和氨基烷 基可被任选地取代；

在每次出现时，R³⁰、R³¹、R²⁰和R²¹各自独立地选自下组：氢、烷基、 环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、 芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基和氨基烷基，其中烷基、环烷基、 环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、 杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基和氨基烷基可被任选地取代；

R⁵⁰在每次出现时为R²⁰、S(O)_tNR²⁰R²¹、S(O)_tR²⁰、C(O)OR²⁰、 C(O)R²⁰C(＝NR^a)NR²⁰R²¹、C(＝NR²⁰)NR²¹R^a、C(＝NOR²⁰)R²¹或 C(O)NR²⁰R²¹；

Y各自独立地是CH或N，

t是1或2；且

z是1或2。

22.条款1的化合物，其具有式(I)：

A-L₁-B    (I)

及其所有立体异构体、外消旋混合物、可药用的盐、水合物、溶剂化物和 多晶型物；

其中A是：

L₁是：

B是：

其中

R¹和R²各自独立地选自下组：氢、卤素、CN、CF₃、CONR³⁰R³¹、 烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、 炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基，其中烷基、环烷基、环烷 基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳 基、芳基烷基和杂芳基烷基可被任选地取代，或如果R¹和R²毗邻，则它 们可任选地合在一起并且可形成含有碳原子和任选的一个或两个选自O、 S或N的杂原子或含杂原子部分NR⁵⁰的5-或6-元环；

R³是氢或卤素；

R^a是氢或烷基；

在每次出现时，R^b独立地选自下组：氢、卤素、CN、CF₃、CONR³⁰R³¹、 烷基、-O-烷基、-C(O)O-烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷 基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷 基，其中烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、 链烯基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基和氨基烷 基可被任选地取代；

在每次出现时，R³⁰、R³¹、R²⁰和R²¹各自独立地选自下组：氢、烷基、 环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、 芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基和氨基烷基，其中烷基、环烷基、 环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、 杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基和氨基烷基可被任选地取代；

R⁵⁰在每次出现时为R²⁰、S(O)_tNR²⁰R²¹、S(O)_tR²⁰、C(O)OR²⁰、 C(O)R²⁰C(＝NR^a)NR²⁰R²¹、C(＝NR²⁰)NR²¹R^a、C(＝NOR²⁰)R²¹或 C(O)NR²⁰R²¹；

Y各自独立地是CH或N；

t是1或2；且

z是1或2。

23.条款1的化合物，其具有式(I)：

A-L₁-B    (I)

及其所有立体异构体、外消旋混合物、可药用的盐、水合物、溶剂化物和 多晶型物；

其中A是：

L₁是：

B是：

其中

R¹和R²各自独立地选自下组：氢、卤素、CN、CF₃、CONR³⁰R³¹、 烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、 炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基，其中烷基、环烷基、环烷 基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳 基、芳基烷基和杂芳基烷基可被任选地取代，或如果R¹和R²毗邻，则它 们可任选地合在一起并且可形成含有碳原子和任选的一个或两个选自O、 S或N的杂原子或含杂原子部分NR⁵⁰的5-或6-元环；

R³是氢或卤素；

R^a是氢或烷基；

在每次出现时，R^b独立地选自下组：氢、卤素、CN、CF₃、CONR³⁰R³¹、 烷基、-O-烷基、-C(O)O-烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷 基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷 基，其中烷基、环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、 链烯基、链烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基和氨基烷 基可被任选地取代；

在每次出现时，R³⁰、R³¹、R²⁰和R²¹各自独立地选自下组：氢、烷基、 环烷基、环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、 芳基、杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基和氨基烷基，其中烷基、环烷基、 环烷基烷基、杂环烷基、氟烷基、杂环烷基烷基、链烯基、炔基、芳基、 杂芳基、芳基烷基、杂芳基烷基和氨基烷基可被任选地取代；

R⁵⁰在每次出现时为R²⁰、S(O)_tNR²⁰R²¹、S(O)_tR²⁰、C(O)OR²⁰、 C(O)R²⁰C(＝NR^a)NR²⁰R²¹、C(＝NR²⁰)NR²¹R^a、C(＝NOR²⁰)R²¹或 C(O)NR²⁰R²¹；

Y各自独立地是CH或N；且

t是1或2。

24.条款1的化合物，其具有式(I)：

A-L₁-B  (I)

及其所有立体异构体、外消旋混合物、可药用的盐、水合物、溶剂化物和 多晶型物：

其中A是：

L₁是：

且

B是：

25.前述条款中任一项的化合物，其中所述化合物选自下组：

26.如条款1至25中任一项所定义的化合物，其包含放射性核素， 其中排除条款1中排除的化合物。

27.放射性药物制剂，其含有包含放射性核素的如条款1至25中任 一项所定义的化合物，其中排除或不排除条款1中排除的化合物。

28.药物组合物，其含有如条款1至25中任一项所定义的化合物， 其中排除条款1中排除的化合物。

29.条款28的药物组合物，其进一步包含可药用的载体或赋形剂。

30.其中排除或不排除条款1中排除的化合物的如条款1至25中任 何一项所定义的化合物在制备用于治疗或预防与淀粉状蛋白或淀粉状蛋白 样蛋白有关的疾病或病症的药物中的用途。

31.条款30的用途，其中所述疾病为神经病症。

32.条款31的用途，其中所述神经病症为阿尔茨海默病(AD)、路易 体痴呆(LBD)、唐氏综合征、遗传性脑出血伴淀粉样变(荷兰型)、关岛帕 金森痴呆综合征或轻度认知功能损害(MCI)。

33.条款32的用途，其中所述神经病症为阿尔茨海默病。

34.条款30的用途，其中所述疾病为进行性核上麻痹、多发性硬化 症、包涵体肌炎(IBM)、克-雅氏病、帕金森病、HIV-相关痴呆、肌萎缩 侧索硬化(ALS)、包涵体肌炎(IBM)、成人发作性糖尿病、老年性心脏淀 粉样变、内分泌肿瘤、青光眼、眼部淀粉样变、原发性视网膜变性、黄斑 变性(例如年龄相关黄斑变性(AMD))、视神经玻璃疣、视神经病变、视神 经炎或网格状营养不良。

35.治疗或预防与淀粉状蛋白和/或淀粉状蛋白样蛋白有关的疾病或 病症的方法，所述方法包括向需要此类治疗的个体施用有效量的如条款1 至25中任一项所定义的化合物，其中排除或不排除条款1中排除的化合 物。

36.条款35的方法，其中所述疾病为神经病症。

37.条款36的方法，其中所述神经病症为阿尔茨海默病(AD)、路易 体痴呆(LBD)、唐氏综合征、遗传性脑出血伴淀粉样变(荷兰型)、关岛帕 金森痴呆综合征或轻度认知功能损害(MCI)。

38.条款37的方法，其中所述神经病症为阿尔茨海默病。

39.条款35的方法，其中所述疾病为进行性核上麻痹、多发性硬化 症、包涵体肌炎(IBM)、克-雅氏病、帕金森病、HIV-相关痴呆、肌萎缩 侧索硬化(ALS)、包涵体肌炎(IBM)、成人发作性糖尿病、老年性心脏淀 粉样变、内分泌肿瘤、青光眼、眼部淀粉样变、原发性视网膜变性、黄斑 变性(例如年龄相关黄斑变性(AMD))、视神经玻璃疣、视神经病变、视神 经炎或网格状营养不良。

40.其中排除或不排除条款1中排除的化合物的如条款1至25中任 何一项所定义的化合物，其用于治疗或预防与淀粉状蛋白和/或淀粉状蛋白 样蛋白有关的疾病或病症。

41.条款40的化合物，其中所述疾病为神经病症。

42.条款41的化合物，其中所述神经病症为阿尔茨海默病(AD)、路 易体痴呆(LBD)、唐氏综合征、遗传性脑出血伴淀粉样变(荷兰型)、关岛 帕金森痴呆综合征或轻度认知功能损害(MCI)。

43.条款42的化合物，其中所述神经病症为阿尔茨海默病。

44.条款40的化合物，其中所述疾病为进行性核上麻痹、多发性硬 化症、包涵体肌炎(IBM)、克-雅氏病、帕金森病、HIV-相关痴呆、肌萎 缩侧索硬化(ALS)、包涵体肌炎(IBM)、成人发作性糖尿病、老年性心脏 淀粉样变、内分泌肿瘤、青光眼、眼部淀粉样变、原发性视网膜变性、黄 斑变性(例如年龄相关黄斑变性(AMD))、视神经玻璃疣、视神经病变、视 神经炎或网格状营养不良。

45.混合物，其含有其中排除或不排除条款1中排除的化合物的如条 款1至25中任一项所定义的化合物，和任选的至少一种其它生物学活性化 合物和/或可药用的载体和/或稀释剂和/或赋形剂。

46.根据条款45的混合物，其中所述其它生物学活性化合物为用于 治疗淀粉样变的化合物。

47.根据条款45或46的化合物，其中所述其它生物学活性化合物选 自下组：抗体；疫苗；对抗氧化应激的化合物；抗凋亡化合物；金属螯合 剂；DNA修复抑制剂，例如哌仑西平和代谢产物；3-氨基-1-丙磺酸(3APS)； 1，3-丙二磺酸盐(1，3PDS)；α-分泌酶激活剂；β-和γ-分泌酶抑制剂；τ蛋白； 神经递质；β-折叠分裂剂；β-淀粉状蛋白清除/消耗细胞成分诱导剂；N-末 端截去β-淀粉状蛋白、包括焦谷氨酸盐化的β-淀粉状蛋白3-42的抑制剂； 抗炎分子或胆碱酯酶抑制剂(ChEI)，例如他克林、雷司替明、多奈哌齐和/ 或加兰他敏；M1激动剂；其他药物，包括任何淀粉状蛋白或τ调节药物 以及营养性补充剂。

48.根据条款47的混合物，其中所述其它生物学活性化合物为胆碱 酯酶抑制剂(ChEI)。

49.根据条款47的混合物，其中所述其它生物学活性化合物选自他 克林、雷司替明、多奈哌齐、加兰他敏、烟酸和美金刚胺。

50.根据条款45的混合物，其中所述其它生物学活性化合物为抗体， 特别是单克隆抗体，包括任何功能性等同的抗体或其功能部分。

51.根据条款50的混合物，其中所述抗体、特别是单克隆抗体、包 括任何功能性等同的抗体或其功能部分，为与β-淀粉状蛋白结合的抗体。

52.根据条款50或51的混合物，其中所述抗体、特别是单克隆抗体、 包括任何功能性等同的抗体或其功能部分，为下述抗体：当所述抗体与下 述物质共同培养时，抑制Aβ单体向高分子多聚原纤维或丝状体的积聚： 淀粉状蛋白单体和/或多聚可溶性淀粉状蛋白肽，特别是β-淀粉状蛋白单体 肽，例如Aβ单体肽1-39、1-40、1-41或1-42，和/或含有多个Aβ单体单 位的多聚可溶性β-淀粉状蛋白肽，特别是Aβ_1-42单体肽和/或含有多个Aβ_1-42 单体单位的Aβ多聚可溶性淀粉状蛋白肽；另外，当所述抗体与预成型高 分子多聚淀粉状蛋白原纤维或丝状体共同培养时，能够使得预成型多聚原 纤维或丝状体解聚，所述预成型高分子多聚淀粉状蛋白原纤维或丝状体通 过淀粉状蛋白单体肽的积聚形成，所述淀粉状蛋白单体肽特别是β-淀粉状 蛋白单体肽，例如Aβ单体肽1-39、1-40、1-41或1-42，尤其是Aβ_1-42单 体肽。

53.根据条款50的混合物，其中所述抗体为嵌合抗体或其功能部分， 或者为人源化抗体或其功能部分。

54.根据条款50的混合物，其中所述抗体为单克隆抗体，选自具有 由杂交瘤细胞系产生的抗体特性的抗体，所述细胞系为：

a)分别于2005年12月1日和2005年12月9日以DSM ACC2752 保藏的FP 12H3；

b)分别于2005年12月1日和2005年12月9日以DSM ACC2750 保藏的FP 12H3-C2；

c)分别于2005年12月1日和2005年12月9日以DSM ACC2751 保藏的FP 12H3-G2；

d)2005年12月8日以DSM ACC2755保藏的ET 7E3；和

e)2005年12月8日以DSM ACC2756保藏的EJ 7H3。

55.根据条款50的混合物，其中所述抗体为单克隆抗体，选自由杂 交瘤细胞系产生的抗体，所述细胞系为：

a)分别于2005年12月1日和2005年12月9日以DSM ACC2752 保藏的FP 12H3；

b)分别于2005年12月1日和2005年12月9日以DSM ACC2750 保藏的FP 12H3-C2；

c)分别于2005年12月1日和2005年12月9日以DSM ACC2751 保藏的FP 12H3-G2；

d)2005年12月8日以DSM ACC2755保藏的ET 7E3；和

e)2005年12月8日以DSM ACC2756保藏的EJ 7H3。

56.根据条款50的混合物，其中所述抗体为人源化抗体，所述抗体 具有国际申请No.PCT/US2007/073504的SEQ ID No.2和SEQ ID No.4中 所述的轻链和重链。

57.根据条款50的混合物，其中所述抗体为人源化抗体，所述抗体 具有国际申请No.PCT/US2007/073504的SEQ ID No.1和SEQ ID No.3中 所述的轻链可变区和重链可变区。

58.根据条款45的混合物，其中所述其它生物学活性化合物为Aβ 抗原肽片段，所述肽片段由源自Aβ肽的N-末端部分的多个相邻氨基酸残 基的单链或重复链组成，特别是13-15个相邻氨基酸残基的链。

59.根据条款58的化合物，其中所述Aβ抗原肽片段为Aβ_1-15肽抗原。

60.根据条款58的化合物，其中所述Aβ_1-15肽抗原为通过共价连接的 棕榈酰残基修饰的棕榈酰化的Aβ_1-15肽抗原，特别是在脂质体中重构的肽 的每一个末端的2-4个残基上修饰，更特别在4个残基上修饰。

61.根据条款45至60中任何一项的混合物，其中所述化合物和/或所 述其它生物学活性化合物以治疗有效量存在。

62.收集用于在样本或患者中诊断淀粉状蛋白-相关疾病或病症的数 据的方法，所述方法包括：

(a)使疑似含有淀粉状蛋白的样本或特定机体部分或机体区域与其 中排除或不排除权利要求1中排除的化合物的如权利要求1至25中任一项 所定义的化合物接触；

(b)使得所述化合物与所述淀粉状蛋白结合；

(c)检测与所述蛋白结合的所述化合物；以及

(d)任选将与所述淀粉状蛋白结合的化合物的存在或不存在与样本 或特定机体部分或区域中存在或不存在淀粉状蛋白相关联。

63.在组织和/或体液中测定淀粉状蛋白形成斑块的负荷程度的方法， 所述方法包括：

(a)提供代表待研究的所述组织和/或体液的样本；

(b)采用其中排除或不排除条款1中排除的化合物的如条款1至25 中任一项所定义的化合物测试所述样本中淀粉状蛋白的存在；

(c)测定与淀粉状蛋白结合的化合物的量；以及

(d)计算所述组织和/或体液中的斑块负荷。

64.根据条款63的方法，其中步骤(c)中的测定如下进行：使得与所 述淀粉状蛋白结合的所述化合物的存在与否与淀粉状蛋白的存在与否相关 联。

65.收集用于确定患者中淀粉状蛋白-相关疾病或病症的倾向的数据 的方法，包括在样本中或原位检测其中排除或不排除权利要求1中排除的 化合物的如权利要求1至25中任一项所定义的化合物与淀粉状蛋白的特异 性结合，所述方法包括下列步骤：

(a)使疑似含有淀粉状蛋白的样本或特定机体部分或机体区域与其 中排除或不排除条款1中排除的化合物的如条款1至25中任何一项所定义 的化合物接触，所述化合物与所述淀粉状蛋白特异性结合；

(b)使所述化合物与所述淀粉状蛋白结合以形成化合物/蛋白复合 物；

(c)检测所述化合物/蛋白复合物的形成；

(d)任选将存在或不存在的所述化合物/蛋白复合物与所述样本或特 定机体部分或机体部位中存在或不存在淀粉状蛋白相关联；以及

(e)任选将所述化合物/蛋白复合物的量与正常对照值比较。

66.收集用于监测患者中用抗体或疫苗组合物治疗后最小残留疾病 的数据的方法，其中所述方法包括：

(a)使疑似含有淀粉状蛋白的样本或特定机体部分或机体部位与其 中排除或不排除条款1中排除的化合物的如条款1至25中任何一项所定义 的化合物接触，所述化合物特异性地与所述淀粉状蛋白结合；

(b)使所述化合物与所述淀粉状蛋白结合以形成化合物/蛋白复合 物；

(c)检测所述化合物/蛋白复合物的形成；

(d)任选将存在或不存在的所述化合物/蛋白复合物与所述样本或特 定机体部分或部位中存在或不存在淀粉状蛋白相关联；以及

(e)任选将所述化合物/蛋白复合物的量与正常对照值比较。

67.收集用于预测用抗体或疫苗组合物治疗患者的响应性的数据的 方法，所述方法包括：

(a)使疑似含有淀粉状蛋白的样本或特定机体部分或机体部位与其 中排除或不排除条款1中排除的化合物的如条款1至25中任何一项所定义 的化合物接触，所述化合物特异性地与所述淀粉状蛋白结合；

(b)使所述化合物与所述淀粉状蛋白结合以形成化合物/蛋白复合 物；

(c)检测所述化合物/蛋白复合物的形成；

(d)任选将存在或不存在的所述化合物/蛋白复合物与所述样本或特 定机体部分或部位中存在或不存在淀粉状蛋白相关联；以及

(e)任选将所述化合物/蛋白复合物的量与正常对照值比较。

68.用于检测和/或诊断淀粉状蛋白相关疾病或病症的试剂盒，其含有 其中排除或不排除条款1中排除的化合物的如条款1至25中任一项所定义 的化合物。

69.根据条款68的试剂盒，其包括盛放其中排除或不排除条款1中 排除的化合物的一或多种如条款1至25中任一项所定义的化合物的容器和 说明书，用于使用所述化合物使之与淀粉状蛋白结合形成化合物/蛋白复合 物并检测所述化合物/蛋白复合物的形成，从而将所述化合物/蛋白复合物 的存在与否与所述淀粉状蛋白的存在与否相关联。

70.其中排除或不排除条款1中排除的化合物的如条款1至25中任 何一项所定义的化合物在制备用于治疗或预防眼部疾病或病症的药物中的 用途，所述疾病或疾症与视觉系统组织中病理学异常/改变有关，特别是 与视觉系统组织中β-淀粉状蛋白相关的病理学异常/改变有关。

71.条款70的用途，其中所述眼部疾病或病症选自神经元退化、皮 层视觉不足、青光眼、由于β-淀粉状蛋白沉积导致的白内障、眼部淀粉样 变、原发性视网膜变性、黄斑变性例如年龄相关黄斑变性、视神经玻璃 疣、视神经病变、视神经炎和网格状营养不良。

72.治疗或预防眼部疾病或病症的方法，所述疾病或病症与视觉系 统组织中病理学异常/改变有关，特别是与所述视觉系统组织中β-淀粉状 蛋白相关的病理学异常/改变有关，所述方法包括向需要此类治疗的个体 施用有效量的其中排除或不排除条款1中排除的化合物的如条款1至25 中任一项所定义的化合物。

73.条款72的方法，其中所述眼部疾病或病症选自神经元退化、皮 层视觉不足、青光眼、由于β-淀粉状蛋白沉积导致的白内障、眼部淀粉样 变、原发性视网膜变性、黄斑变性例如年龄相关黄斑变性、视神经玻璃 疣、视神经病变、视神经炎和网格状营养不良。

74.其中排除或不排除条款1中排除的化合物的如条款1至25中任 一项所定义的化合物，其用于治疗或预防眼部疾病或病症，所述疾病或病 症与视觉系统组织中病理学异常/改变有关，特别是与所述视觉系统组织 中β-淀粉状蛋白相关的病理学异常/改变有关。

75.条款74的化合物，其中所述眼部疾病或病症选自神经元退化、 皮层视觉不足、青光眼、由于β-淀粉状蛋白沉积导致的白内障、眼部淀粉 样变、原发性视网膜变性、黄斑变性例如年龄相关黄斑变性、视神经玻璃 疣、视神经病变、视神经炎和网格状营养不良。

76.其中排除或不排除条款1中排除的化合物的如条款1至25中任 一项所定义的化合物，其用于抑制蛋白质积聚，特别用于抑制Aβ1-42积 聚、τ积聚或α-突触核蛋白积聚。

77.其中排除或不排除条款1中排除的化合物的如条款1至25中任 何一项所定义的化合物在制备药物中的用途，所述药物用于(a)减少β-淀 粉状蛋白斑块负荷，和/或(b)抑制β-淀粉状蛋白斑块形成和/或(c)延缓患者 脑中淀粉状蛋白负荷的增加。

78.(a)减少β-淀粉状蛋白斑块负荷，和/或(b)抑制β-淀粉状蛋白斑块 形成和/或(c)延缓个体脑中淀粉状蛋白负荷增加的方法，包括向需要此类治 疗的个体施用有效量的其中排除或不排除条款1中排除的化合物的如条款 1至25中任一项所定义的化合物。

79.其中排除或不排除条款1中排除的化合物的如条款1至25中任 一项所定义的化合物，用于(a)减少β-淀粉状蛋白斑块负荷，和/或(b)抑制 β-淀粉状蛋白斑块形成和/或(c)延缓患者脑中淀粉状蛋白负荷的增加。

80.条款77的用途、条款78的方法或条款79的化合物，其中减少β- 淀粉状蛋白斑块负荷、抑制β-淀粉状蛋白斑块形成和/或延缓淀粉状蛋白负 荷的增加导致由脑中β-淀粉状蛋白斑块的形成和沉积引起或与其相关的疾 病或病症的作用减少和/或改善。

81.其中排除或不排除条款1中排除的化合物的如条款1至25中任 何一项所定义的化合物在制备用于在遭受记忆损害的个体中保留或增加认 知记忆能力的药物中的用途。

82.在遭受记忆损害的个体中保留或增加认知记忆能力的方法，包括 向需要此类治疗的个体施用有效量的其中排除或不排除条款1中排除的化 合物的如条款1至25中任一项所定义的化合物。

83.其中排除或不排除条款1中排除的化合物的如条款1至25中任 一项所定义的化合物，用于在遭受记忆损害的个体中保留或增加认知记忆 能力。

84.条款30的用途、条款35的方法或条款40的化合物，其中所述 淀粉状蛋白相关病症的特征在于认知记忆能力的损失。

85.条款84的用途、方法或化合物，其中对特征为认知记忆能力损 失的淀粉状蛋白相关病症的治疗导致认知记忆能力的保留的增加。

86.条款84的用途、方法或化合物，其中对特征为认知记忆能力损 失的淀粉状蛋白相关病症的治疗导致认知记忆能力的完全恢复。