法律状态公告日
法律状态信息
法律状态
2014-10-29
授权
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2013-03-06
实质审查的生效 IPC(主分类):A61K36/9066 申请日:20121105
实质审查的生效
2013-01-23
公开
公开
技术领域
本发明涉及一种鼻腔给药制剂，特别涉及一种将中药注射液醒脑静改变成鼻腔给药创新制剂，具体讲是一种清热解，凉血活血，开窍醒脑中药醒脑静鼻腔给药体系，该体系可以制备鼻喷剂和滴鼻剂，属于医药生产技术领域。
背景技术
中药注射液的安全性问题一直困扰着中医药行业，中医临床治疗的理论体系与西医理论体系不同，用药方法和临床治疗指导不同，造成对中药很难明确药效物质基础，中药用药君臣佐，形成中药出现药味多，成分复杂，有些成分溶解度小，或者经过灭菌后放置一段时间，药液出现变色，浑浊和沉淀。为了增加药物的溶解度，醒脑静注射液中加入了吐温-80,吐温-80是一种非离子表面活性剂，在用于血管给药时出现明显的溶血现象，肌肉注射时出现注射部位明显的胀痛。所以临床应用风险自然也就增加。
解决这些问题，除了加强中药注射液本身的物质成分的研究和标准制定，以及有关物质的限定检查外，还有值得鼓励的就是开发新型的给药制剂技术，有些中药注射剂可以通过改变给药途径，达到同样的治疗效果，而且避免注射液过敏性风险。醒脑静注射主要是开窍醒脑，可以考虑通过鼻途径脑靶向的给药方式来替代醒脑静注射液，同样达到治疗效果。
鼻腔给药系统，是指通过鼻粘膜吸收而发挥全身作用，鼻腔具有丰富的粘膜表面积，粘膜下丰富的毛细血管丛，鼻腔内含有大量的嗅窦和嗅神经，都是进入脑靶向的重要途径，因此，鼻腔给药是脑靶向治疗药物最佳选择和途径。鼻腔给药对药物和给药系统的要求必须到达1、药物对鼻粘膜无刺激性，2、药物给药系统对鼻粘膜具有生物黏附性，防止鼻粘膜纤毛往外排泄，3、一次给药体积不宜过大，4、起效的快速性，5、在体系中必须考虑促渗透剂和渗透压调节剂。
本发明选择的药物是已经上市的醒脑静注射液，原料药材组分和用量按照《中华人民共和国卫生部药品标准》，但是本发明将该组分按照鼻腔给药技术要求进行了提取分离浓缩，将有效成分大大提高，体积缩小，并且根据进行了有效成分的处方比例和制剂体系的研究发明， 使其适合鼻腔给药，达到同样醒脑静注射液的治疗效果。有关醒脑静制剂的相关专利许多，专利CN102526619A 涉及了醒脑静鼻腔给药制剂，该专利陈述了按照已公开的上市的注射液制造过程获得4味中药提取液，加入促渗透剂和防腐剂以及渗透压调节剂组成鼻腔喷剂，该制剂中的冰片和麝香酮成分如不经过适当包合处理会产生对鼻粘膜有刺激性，引起流鼻弟和打喷嚏，该制剂没有生物黏附性，鼻纤毛会将药物往外排出。同时，制剂的单次给药的有效剂量非常少，难以保证有效药量浓度。专利CN1785415A 涉及制备注射液时发明了三种新剂型，纳米微乳剂，亚纳米微乳剂，脂质体剂型，在此专利中所制备的乳剂不适合鼻腔给药微乳剂体系，不适合鼻腔给药体积要求。专利CN102526602A 涉及一种醒脑静自乳化软胶囊的制备，该乳化体系同样是适合口服给药而不是适合鼻腔强给药。中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第43 卷 第3 期 2012 年3 月《醒脑静中环烯醚萜苷类有效成分鼻腔吸收研究》，该文章主要研究醒脑静处方中栀子中的二个分离纯化物质栀子苷和京尼平龙胆双糖苷成分的鼻粘膜的释放行为。对于通过鼻腔给药的一些技术研究还是鲜有报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种用于开窍醒脑中药醒脑静鼻腔给药制剂，该鼻腔给药制剂能够将有效成分的效力大大提高，体积缩小，适合鼻腔给药。
该醒脑静鼻腔给药体系组成为：⑴ 药物组合物由麝香酮提取液80-90mL，天然冰片0.33g ，栀子苷提取物0.6-0.8g,郁金姜黄素提取物0.24-0.26g ，郁金挥发油0.01-0.02mL；⑵ 助溶剂：吐温-80或1.2丙二醇，含量为1.6-2.0%（L/L）；⑶促渗透剂：α-环糊精（α-CD），γ-环糊精（γ-CD）及其衍生物羟丙基α环糊精（HP-ａ-CD）,羟丙基β环糊精（HP-β-CD）, 羟丙基γ环糊精（HP-γ-CD），其用量为3.5-5%（W/L）；⑷防腐剂：尼泊金乙酯或山梨酸钾，用量0.01（W/L）；⑸溶剂：蒸馏水或注射用水，含量为余量；磷酸缓冲液：其加入量为将液体pH调节至6.0-7.0；
麝香酮提取液采用二次蒸馏法，第1次蒸馏：7.5g 加蒸馏水1000mL，收集蒸馏液300mL后停止蒸馏；第2次蒸馏：第1次蒸馏液300mL中，加蒸馏水100mL，再进水蒸气蒸馏，收集蒸馏液250mL；
栀子苷提取物：30g 栀子粉碎成40目，加药材重量8倍的乙醇，70%乙醇回流提取二次，每次2小时，收集提取液，回收乙醇，流浸膏的相对密度为1.05 ，加5倍水进行水沉，上清液进行浓缩，干燥，最后得栀子醇提物2-3g；
郁金挥发油提取制备：30g 郁金粉碎成40目，加8倍蒸馏水按照水蒸馏法蒸馏10小时，最后收集蒸馏液1-2mL，备用，郁金姜黄素提取物制备：经过蒸馏后的郁金药渣烘干后，加药渣干重10倍量的70%乙醇，回流提取6小时，回收乙醇，流浸膏干燥，干燥物再加10倍90%乙醇，回流提取2小时，回收乙醇后干燥，得郁金姜黄素提物0.5-1g。
该体系可以制成鼻喷剂和滴鼻剂。
所述的促渗透剂为羟丙基β环糊精HP-β-CD。
本发明的另一个目的是提供一种制备用于开窍醒脑中药醒脑静鼻腔给药制剂的方法，包括如下步骤：
称取天然冰片0.33g，用1,2-丙二醇或吐温-80 1.6mL溶解，加入山梨酸钾或尼泊金乙酯0.01g进行溶解，过滤，滤液加入麝香2次蒸馏液80mL，依次加入郁金挥发油1mL，促渗透剂3.5g ,进行搅拌，搅拌速度1000转/小时，搅拌0.5小时后，加入栀子提取物0.6g, 郁金姜黄素提取物0.20g，搅拌2小时，过滤，用磷酸缓冲液调节pH至6.0-7.0，最后蒸馏水或注射用水制备成100mL制剂。
本发明醒脑静鼻腔给药体系所涉及药物浓度100mL中：麝香酮0.080-0.1200mg.mL-1 天然右旋龙脑0.80-1.00mg.mL-1栀子苷 0.80-1.50mg.mL-1郁金姜黄素0.080-0.120mg.mL-1 。
本发明本发明所涉及醒脑静鼻腔给药制剂包含有鼻喷剂和滴鼻剂，具体包括：每喷100-200uL，或每滴，含有药物包括：麝香酮0.0080-0.0120mg, 右旋龙脑0.080-0.100mg, 栀子苷0.080-0.150mg，郁金姜黄素0.008-0.012mg。
本发明的有益效果： 通过对醉酒神智不清所致的20例观察，对照组10人采取常规的醒酒治疗（葡萄糖+纳洛酮）+鼻喷生理盐水；试验组10人在常规醒酒治疗的同时，增加本发明“醒脑静鼻喷剂”每隔1小时喷一次，一共喷3次，结果试验组的醒酒时间比对照组醒酒时间平均缩短3±0.5小时，证明本发明醒脑鼻喷剂能够将有效成分的效力大大提高，体积缩小，达到快速醒脑的作用，适合鼻腔给药。
具体实施方式
下面通过实例对本发明做进一步详细说明，这些实例仅用来说明本发明，并不限制本发明的范围。
实施例1
本发明所涉及醒脑静鼻腔给药制剂中药提取物制备方法
1、 麝香酮二蒸馏液制备
第1次蒸馏：7.5g 加蒸馏水1000mL，收集蒸馏液300mL后停止蒸馏；第2次蒸馏：第1次蒸馏液300mL中，加蒸馏水100mL，再进水蒸气蒸馏，收集蒸馏液250mL（其中含有麝香酮浓度0.080-0.1200mg.mL-1）
2、郁金挥发油提取制备
30g 郁金粉碎成40目，加8倍蒸馏水浸泡24小时， 按照水蒸馏法蒸馏10小时，最后收集蒸馏液1-2mL，备用
3、郁金姜黄素提取物制备
经过蒸馏后的郁金药渣烘干后，加药渣干重10倍量的70%乙醇，回流提取6小时，回收乙醇，流浸膏干燥，干燥物再加10倍90%乙醇，回流提取2小时，回收乙醇后干燥，得郁金醇提物约0.5-1g（含有姜黄素0.800-0.120mg.mL-1）。
4、栀子苷提取物的制备
30g 栀子粉碎，40目，加药材重量8倍，70%乙醇回流提取二次，每次2小时，收集提取液，回收乙醇，流浸膏的相对密度1.05 加5水进行水沉，上清液进行浓缩，干燥，最后的栀子醇提物2-3g(含栀子苷0.80-1.50mg.mL-1)。
实施例2
100mL制剂处方组成1
制剂处方组成2
制剂处方组成3
实施3 鼻腔给药制剂制备方法
称取天然冰片0.33g，用1,2-丙二醇1.6mL溶解，加入尼泊金甲酯0.01g进行溶解，过滤，滤液加入麝香2次蒸馏液80mL，依次加入郁金蒸馏液1mL，HP-β-CD 3.5g ,进行搅拌，搅拌速度1000转/小时，搅拌2小时后，加入栀子醇提物0.6g,郁金醇提物0.20g，搅拌2小时，过滤，用磷酸缓冲液调节pH至6.0-7.0，最后蒸馏水制备100mL制剂。
实施例4
醒脑静的组方具有清热泻火，凉血解毒，开窍醒脑功能，本发明的醒脑静鼻腔给药制剂对戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间的影响试验：
取筛选合格的小鼠24只，雌雄各半，随机分成阴性对照组（生理盐水组)、阳性对照组(安钠咖生理盐水组2mg.mL-1)、醒脑静鼻腔制剂(自制) ，醒脑静注射液组(市售制剂45mg.kg-1)。
除鼻腔给药制剂外，其他几组分别按折算小鼠剂量的药液量，鼻腔组特殊给药器喷入鼻腔（剂量达到注射液的给药有效剂量，喷3次），同时注射3mg.mL-1巴比妥钠生理盐水。记录反射消失至恢复时间，结果见表 。从表中可以看出，阳性对照组合醒脑静注射液和鼻腔给药组与生理盐水组比较明显缩短唤醒时间，醒脑静鼻腔给药组优于醒脑静注射液组.
**＜0.01，与生理盐水组比较，★＜0.05，鼻腔给药组与注射液组比较。
实施例5
对小鼠扭体的影响 18-20 g ICR 小鼠40 只，雌雄各半，随机分成空白对照组（生理盐水）、阳性对照组（赖氨匹林生理盐水溶）、鼻腔给药组（本发明组），注射液组（市售45mg.kg-1）, 每组10 只。按照折算小鼠的剂量，给药注射液（1次）、阳性药（1次）、鼻腔给药（折算每天给药3次），连续给药2天，于末次给药后15 min, 每只腹腔注射0.6% 冰醋酸溶液0.3ml, 记录注射致痛剂后15 min 内各组小鼠扭体次数,计算各组小鼠扭体次数平均值及标准差, 进行校正t 检验, 与空白对照组比较差异显著性, 结果见表 。
* P ＜0.01
以上结果表明：醒脑静鼻喷剂具有明显缓解小鼠疼痛。效果与注射液比较虽然没有显著性，但是具有优于注射剂的趋势。
实施列6
（1） 栀子苷HPLC含量
测定波长的确定： 称取桅子苷适量，用流动相溶解，在200-400nm波长范围扫描样品，其最大吸收值在237nm，因此选用237nm作为检测波长。色谱条件的确定：参照中华人民共和国药典的方法，以乙睛-水(15:85)为流动相，流速： 1.0mL. min-1，检测波长:237nm；色谱柱：Kromasmil C18ODS柱，150 X 4.6mm，5um；柱温：室温；进样量：20ul。该条件下桅子苷分离良好，出峰快，曾试用甲醇-水(25:75)为流动相，桅子苷分离亦良好，但出峰时间慢，峰形对称性较差，故采用乙睛一水(15:85)为流动相。溶液的制备：对照品和供试液用流动相进行溶解制备标准曲线的绘制：分别精密吸取1mg.mL-1的桅子苷标准品溶液0.30、 0.50、0.70、0.90、1.10、1.30、1.50mL，置l0mL量瓶中，加入流动相稀释至刻度，混匀，进行HPLC测定，以标准品峰面积对浓度(ug.mL-1)绘制标准曲线。结果桅子苷在30ug. mL-l-150ug. mL-1，范围内线性关系良好。回归方程为:Y=16470X+4980.3, r=0.9997。测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，在上述拟定色谱条件下进行测定，以外标法计算含量。
本品含栀子以栀子苷计，含量范围：0.80-1.50mg.mL-1。
（2）姜黄素HPLC含量测定
测定波长：421 nm作为检测波长， 色谱条件的确定：色谱柱:Kromasmil C18 ODS柱，150 x 4.6mm， 5uL；流动相：乙睛-水 (45:55)；流速：1.0mL. min-1，检测波长：421 nm；柱温：室温；进样量20uL。溶液的制备：标准品溶液的制备精密称取姜黄素对照品适量，加甲醇溶解并稀释成0.1 mg.mL-1 的标准品溶液。供试品溶液的制备精密吸取滴鼻剂1.00mL，置水浴蒸干，残渣加甲醇振摇溶解5次，每次2.00m1, 供试品溶液用甲醇振摇提取四次，合并甲醇液，0.45 um滤膜滤过，并用甲醇定容至10.00mL。测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品含郁金以姜黄素计，含量范围0.080-0.120mg.mL-1。
（3）麝香酮和冰片右旋龙脑GC含量测定
对照品溶液：取麝香酮、右旋龙脑对照品适量，精密称定加乙醇溶解制成每毫升含麝香酮0.100mg，右旋龙脑1.000mg储备溶液。取储备溶液稀释制成每毫升含麝香酮50ug、右旋龙脑512ug溶液。
供试品溶液：精密取样5mL，至50mL容量瓶中，加入乙醇稀释至刻度。
色谱条件：DB-FFAP(0.1umx0.53mmx30m)气相色谱柱；氢火焰离子化检测器；氮气流量2.5mL??min-1，氢气流量30 mL??min-1 ，空气流量300 mL??min-1。分流比15:1 ；升温程序（起始温度85℃；以5 ℃?? min-1升温至185℃ ，以20 ℃?? min-1 升值215 ℃，以1℃?? min-1升至230℃，保持5min ）；进样量1μL，外标法定量。
本法测得麝香以麝香酮计算，麝香酮含量范围0.080-0.1200mg.mL-1；
本法测得冰片以右旋龙脑计算， 天然右旋龙脑含量范围0.80-1.00mg.mL-1。
实施例7
每喷剂量根据选择的定量阀规定，本发明设定为100或200uL或每滴（200uL），采用实施例6的方法，测定100uL和200 uL分别含：麝香酮：0.0080和0.0120mg, 右旋龙脑0.080和0.100mg, 栀子苷0.080和0.150mg，郁金姜黄素0.008和0.012mg。
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