改变葡萄糖脱氢酶的辅酶活性和偏好性的方法及其应用

摘要

本发明提供了一种改变葡萄糖脱氢酶的辅酶活性和偏好性的方法及其应用，涉及基因工程技术领域。本发明所述方法通过对葡萄糖脱氢酶保守序列GXXXGXG第四位氨基酸进行定点突变，无需通过大量筛选就可以简单直接获得改变辅酶活性和偏好性的突变蛋白，可以广泛应用酶催化辅酶再生反应。在本发明实施例中，通过对不同来源的葡萄糖脱氢酶中广泛存在的保守序列GXXXGXG中与烟酰胺辅酶核糖2’‑磷酸结合的第4位氨基酸进行定点突变，最终得到四种葡萄糖脱氢酶突变体T17G、T17K、T17R以及K17G，且经过验证，其酶活以及偏好性等都发生了变化。