一种在毕赤酵母系统中表达重组人源脯氨酰-4-羟化酶的方法及应用

摘要

本发明公开了一种在毕赤酵母系统中表达重组人源脯氨酰‑4‑羟化酶(rhP4H)的方法，具体包括重组质粒pPICZαA‑P4Hα2和pHIL‑PDI的构建，P4Hα2和PDI共表达毕赤酵母工程菌GS115的转化和阳性表达菌的筛选，并对表达条件进行优化。所得到的rhP4H酶，无论是在酵母体系内还是分离提纯后均能特异性催化人源胶原蛋白结构单元‑Gly‑X‑Y‑中脯氨酸的羟基化。