从人多能干细胞产生中脑特异性类器官

摘要

本公开内容提供了在培养中衍生和维持中脑样类器官的方法，包括：(a)培养多能干细胞以获得神经元谱系类胚体；(b)培养来自(a)的所述神经元谱系类胚体以获得中脑区域化组织；(c)在细胞外基质中包埋和培养来自(b)的所述中脑区域化组织以获得神经上皮组织；和(c)培养来自(c)的所述神经上皮组织以获得中脑样类器官。本文还公开了适用于衍生和维持神经元谱系类胚体的培养基，包含：(a)TGF‑β抑制剂和/或SMAD2/3抑制剂；和(b)WNT信号激活剂；适用于衍生和维持中脑区域化组织的培养基，包含：(a)TGF‑β抑制剂和/或SMAD2/3抑制剂；(b)WNT信号激活剂；(c)刺猬信号蛋白；和(d)成纤维细胞生长因子；适用于衍生和维持神经上皮组织的培养基，包含：(a)刺猬信号蛋白；和(b)成纤维细胞生长因子；以及适用于衍生和维持中脑样类器官的培养基，包含：(a)神经营养因子；(b)抗坏血酸；和(c)cAMP依赖性通路的激活剂。