一种新型腺病毒包装方法在CRISPR/Cas9基因编辑方法中的应用

摘要

本发明实施例涉及生物技术领域，具体涉及一种新型腺病毒包装方法在CRISPR/Cas9基因编辑方法中的应用。本发明提供的腺病毒包装方法采用在体外进行连接的方法得到重组载体，避免了传统pAdEasy系统使用电转法使pAdEasy和穿梭质粒在细菌内发生同源重组的步骤，步骤简单，成功率高，且节省了腺病毒包装的时间，包装效率高，省时高效。本发明针对CRISPR/Cas9技术，设计了可用于新型腺病毒包装方法的pBlue‑DsRed‑Cas9和pBlue‑EGFP‑sgRNA等载体。对不同基因进行编辑时，只需改变pBlue‑EGFP‑sgRNA载体中sgRNA序列，pBlue‑DsRed‑Cas9载体可作为通用载体用于不同基因的编辑。本发明提供的新型腺病毒包装方法包装得到的腺病毒，用于CRISPR/Cas9技术，基因编辑效率高。