包括使用H1启动子对CRISPR指导RNA的改进的组合物和方法

摘要

本文公开的主题提供包含CRISPR系统(例如CRISPR相关(Cas)9(CRISPR‑Cas9)、非Cas9 CRISPR系统)的改进的组合物和方法。这类组合物可包含对H1启动子区的修饰、5’UTR修饰的添加、H1启动子的不同直向同源序列、具有pol II和pol III活性二者的新型紧凑双向启动子序列、Kozak共有序列的添加、终止序列、条件性pol II/pol III双向启动子表达的添加、用于校正突变的供体模板序列的添加或其组合。本发明的其他方面涉及通过转录后细胞周期调节融合物对Cas9的修饰，工程化部分靶位点使得核酸酶可以在没有DNA切割的情况下结合，自动调节位点和N末端修饰以调节半衰期。