U6/H1双启动子siRNA表达载体的构建及可诱导的随机siRNA编码质粒文库的建立

摘要

中文摘要RNA干扰(RNAi)是双链RNA介导的、序列特异的转录后基因沉默现象，RNAi能高效特异地阻断基因的表达，自1998年被发现以来已经成为研究基因功能的理想工具。siRNA是RNAi过程中的21nt～23nt的小干扰RNA，是RNAi产生效应的中介分子。本文构建了一种可用于哺乳动物细胞的siRNA表达载体，克服了发夹结构siRNA表达载体或含有同向并排两个启动子的siRNA表达载体所存在的局限性。利用这一载体可以更加经济方便地构建任何针对靶基因的siRNA表达质粒。另外，我们将这种载体改造为可诱导的形式，从而可以控制siRNA的产生，并利用这一可诱导的载体建立了一个完全随机的siRNA文库，将有助于在哺乳动物细胞中大规模的功能基因筛选。

目录

前言

实验材料

实验方法

实验结果

一、U6/H1双启动子siRNA表达载体的构建及其抑制效果的鉴定

二、可诱导的双启动子siRNA表达载体pBIUIH的构建及可诱导的siRNA随机文库的建立

讨论

小结

参考文献

综述 序列特异性抑制基因表达方法研究进展

附录

个人简历

致谢