新型siRNA表达载体、随机siRNA文库的构建及基于随机siRNA文库的细胞增殖相关基因筛选

摘要

本文构建了一种新型的相向双启动子siRNA表达载体。这种载体中siRNA编码序列是一段普通的双链DNA，用这种新载体构建了一种随机siRNA文库，并用此文库进行细胞增殖相关基因筛选研究，以期为哺乳动物大规模的基因功能研究探索新技术平台。文章构建的基于H1/U6相向双启动子表达框的质粒pBUH、pCUH、pEG-UH具有优于现有短发夹型siRNA表达载体的特性，如，连接效率高、稳定、测序无障碍等，最重要的，用这类siRNA表达载体可以很简便地构建各种siRNA文库。用这一文库进行的增殖基因筛选工作已初步显示了这种文库在基因功能研究中的良好应用潜能。

目录

第一章相向双启动子siRNA表达载体的构建及验证

前言

材料与方法

实验结果

讨论

第二章随机siRNA文库及其在细胞增殖相关基因筛选中的应用

前言

实验方法

实验结果

讨论

小结

参考文献

RNA干扰：机制及应用

1RNA干扰（RNA interference,RN Ai）的机制

2哺乳动物的RNA干扰技术

3RNA干扰在高通量基因功能研究中的应用

4总结与展望

参考文献

致谢

附录

个人简历