含有A/B型嵌合HA质粒的嵌合病毒株和嵌合减毒株拯救方法

摘要

本发明公开了一种含有A/B型嵌合HA质粒的嵌合病毒株和嵌合减毒株拯救方法，先对H5亚型流感2.3.4.4谱系的HA序列进行碱性裂解位点改造，使其由高致病性病毒变为低致病性病毒，然后合成H5亚型流感2.3.4.4谱系的HA基因，以合成的HA基因和构建好的pBD‑Ya1688‑HA转染质粒为模板，设计并合成构建A/B型嵌合HA质粒的扩增引物，其次采用无缝克隆方法将H5亚型流感病毒的HA基因定向克隆到pBD‑Ya1688‑HA转染质粒中，形成A/B型嵌合HA质粒，最后利用A/B型嵌合HA质粒拯救含有A/B型嵌合HA质粒的嵌合病毒株和嵌合减毒株。解决了流感减毒疫苗容易引起毒力返祖的问题。