一种永生化湖羊瘤胃上皮细胞系的建立及应用方法

摘要

本发明涉及生物技术领域，旨在提供一种永生化湖羊瘤胃上皮细胞系的建立及应用方法。包括：取新生湖羊的瘤胃上皮组织，剪碎清洗，利用胰蛋白酶消化液进行消化；然后以差速贴壁法对细胞进行提纯，得到原代湖羊瘤胃上皮细胞；将携带SV40T抗原基因的病毒液转染至原代湖羊瘤胃上皮细胞，得到感染的湖羊瘤胃上皮细胞；将感染的湖羊瘤胃上皮细胞进一步传代培养，得到永生化的湖羊瘤胃上皮细胞系。本发明能够为湖羊瘤胃生理调控和营养吸收机制研究提供试验细胞模型。培养方法简单、生长速度快，可获得具有生理功能且能连续传代的湖羊瘤胃上皮细胞系。通过利用本发明细胞系，可减少对活体湖羊的采样，解决目前原代细胞培养时间长、成本高、过程繁琐的问题。