荧光原位检测人EGFR基因21号外显子p.L858R突变的方法及试剂盒

摘要

本发明属于分子生物学和肿瘤学领域，具体涉及一种荧光原位检测人EGFR基因21号外显子p.L858R突变的方法及试剂盒。方法包括：使用蛋白酶处理体系通透细胞；使用二类限制性内切酶暴露平末端；使用核酸外切酶处理体系；使用探针结合处理体系结合单链DNA；使用连接酶处理体系形成环状DNA；使用乙醇脱水处理体系，固定单链基因组DNA和环状探针DNA；使用聚合酶处理体系在聚合酶的作用下进行大量自我复制，产生60‑70kb左右的含重复序列的单链DNA；使用荧光探针结合处理体系，大量的荧光探针结合在含重复序列的单链DNA上；本发明提供的试剂盒可以通过特异性的探针，用少量的细胞或者临床组织样本检测突变。