一种地衣芽孢杆菌凝乳酶的制备方法

摘要

本发明提供了一种地衣芽孢杆菌凝乳酶的制备方法，采用地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)BL312进行制备，地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)BL312已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.15009，地衣芽孢杆菌凝乳酶的制备方法包括以下步骤：步骤1，将地衣芽孢杆菌BL312涂布、划线培养后接种于改良培养基中，培养后得到种子液；步骤2，将种子液接种于麸皮培养基中，培养后得发酵液，将发酵液冷冻离心后取上清液；步骤3，将上清液与硫酸铵的混合液沉析后冷冻离心，并收集沉淀物，将沉淀物溶解于Tris‑HCl缓冲液中，透析后冻干，得到粗酶；步骤4，将粗酶用Tris‑HCl缓冲液溶解后透过滤膜，再经DEAE‑Sepharose Fast Flow离子交换柱分离纯化并透析、冻干后得到地衣芽孢杆菌凝乳酶。