基于静电亲和纳米转运载体及细胞成像的胞内microRNA非酶扩增检测方法

摘要

本发明公开一种基于静电亲和纳米转运载体和细胞成像的胞内microRNA非酶扩增检测方法。本发明采用非酶扩增体系，针对检测目标microRNA序列设计特异性带荧光标签的DNA发卡探针H1、H2序列；将H1、H2与纳米金颗粒组装成复合体，转运至肿瘤细胞，当扩增体系中含有待测microRNA，其可与H1结合，导致H1茎部打开，由此产生的部分单链结构与H2相作用，导致H2茎部打开，由此荧光基团FAM与淬灭基团BHQ‑1距离增大，荧光强度增加。用荧光分光光度计检测荧光强度，并用激光扫描共聚焦显微镜记录胞内成像情况。该方法原理简单且检测成本低；具有恒温无酶扩增、灵敏度高、操作简单、易于普及等优点。