一种条件性诱导表达AsCpf1慢病毒载体及其构建方法和在猪小肠上皮细胞建系中的应用

摘要

本发明公开了一种条件性诱导表达AsCpf1慢病毒载体的构建方法，本发明还公开了用该种慢病毒载体包装所获得的Tet‑on‑3G‑pLVX‑AsCpf1慢病毒及其在猪小肠上皮细胞建系中的应用。猪小肠上皮细胞是研究肠道营养及其免疫等方面应用较广的一种细胞材料，本发明利用Tet‑on‑3G系统调控AsCpf1表达的慢病毒系统筛选出诱导表达的稳转猪小肠上皮细胞系，当添加Dox诱导时，24h内细胞就启动了大量AsCpf1表达，无Dox诱导时无AsCpf1表达；当停止添加Dox时，AsCpf1在12h后显著下降，在停止添加Dox 24h和48h时AsCpf1表达水平极低，72h后观察不到表达。