一种鸡胚肝细胞体外分离培养及脂肪变性模型建立方法

摘要

本发明公开了细胞毒理技术领域的一种鸡胚肝细胞体外分离培养及脂肪变性模型建立方法。该方法包括如下步骤：(1)取SPF鸡胚；(2)剪碎；(3)消化；(4)离心：弃上清，留取沉淀物加入预热的Williams’E完全培养液重悬，得到细胞悬液B；(5)细胞分离：采用Percoll密度梯度离心；(6)取肝细胞：吸取界面处细胞加入D‑Hank’s液吹打混匀，置于离心机离心，弃上清，留取沉淀物加D‑Hank’s液冲洗重悬，重复离心2‑3次，弃上清，留取沉淀物并加入Williams’E完全培养液，得到细胞悬液C；(7)计数；(8)种板；(9)换液；(10)诱导脂肪变性：种板后30‑40h后，更换诱导剂进行培养，培养10‑15h，获得脂肪变性肝细胞。本发明能够快速获得原代培养细胞，纯度高，同时诱导时间短。