单管巢式PCR反应体系和扩增方法

摘要

本发明涉及基因工程及分子生物学领域，提供了一种单管巢式PCR反应体系，其包括双链DNA模板、外引物对和内引物对，所述外引物从5’端到3’端包括互补序列和靶区结合序列，所述靶区结合序列远离互补序列的末端与所述互补序列的碱基互补，所述外引物用于在第一退火温度下对变性解链的DNA模板扩增并获得中间产物，所述内引物用于在第二退火温度下对变性解链的中间产物扩增并获得目标产物，所述外引物在第二退火温度下形成引物双链结构。本发明还提供一种单管巢式PCR扩增方法，本发明的单管巢式PCR反应体系和扩增方法，保证了单管扩增后目标产物的纯度较高。